Murine IL-17+ Vγ4 T lymphocytes accumulate in the lungs and play a protective role during severe sepsis.

BACKGROUND: Lung inflammation is a major consequence of the systemic inflammatory response caused by severe sepsis. Increased migration of γδ T lymphocytes into the lungs has been previously demonstrated during experimental sepsis; however, the involvement of the γδ T cell subtype Vγ4 has not been previously described. METHODS: Severe sepsis was induced by cecal ligation and puncture (CLP; 9 punctures, 21G needle) in male C57BL/6 mice. γδ and Vγ4 T lymphocyte depletion was performed by 3A10 and UC3-10A6 mAb i.p. administration, respectively. Lung infiltrating T lymphocytes, IL-17 production and mortality rate were evaluated. RESULTS: Severe sepsis induced by CLP in C57BL/6 mice led to an intense lung inflammatory response, marked by the accumulation of γδ T lymphocytes (comprising the Vγ4 subtype). γδ T lymphocytes present in the lungs of CLP mice were likely to be originated from peripheral lymphoid organs and migrated towards CCL2, CCL3 and CCL5, which were highly produced in response to CLP-induced sepsis. Increased expression of CD25 by Vγ4 T lymphocytes was observed in spleen earlier than that by αß T cells, suggesting the early activation of Vγ4 T cells. The Vγ4 T lymphocyte subset predominated among the IL-17(+) cell populations present in the lungs of CLP mice (unlike Vγ1 and αß T lymphocytes) and was strongly biased toward IL-17 rather than toward IFN-γ production. Accordingly, the in vivo administration of anti-Vγ4 mAb abrogated CLP-induced IL-17 production in mouse lungs. Furthermore, anti-Vγ4 mAb treatment accelerated mortality rate in severe septic mice, demonstrating that Vγ4 T lymphocyte play a beneficial role in host defense. CONCLUSIONS: Overall, our findings provide evidence that early-activated Vγ4 T lymphocytes are the main responsible cells for IL-17 production in inflamed lungs during the course of sepsis and delay mortality of septic mice.

Estudo dos linfócitos T (gama, delta) e (alfa, beta) na inflamação pulmonar no modelo experimental de sepse grave / Study of T lymphocytes (gamma, delta) and (alpha, beta) on airway inflammation in experimental model of severe sepsis

A sepse é uma das principais doenças causadoras de óbitos em unidades de tratamento intensivo. Ademais, a forma grave dessa síndrome induz uma imunossupressão prolongada que causa diversas complicações, a maior parte dessas relacionadas a infecções pulmonares. O conhecimento atual sobre a imunossupressão induzida por sepse grave é muito limitado; no entanto já foi demonstrado que esta condição induz disfunções em linfócitos T CD4 e células dendríticas devido a alterações epigenéticas. O objetivo do presente trabalho foi o de estudar os linfócitos T (gama,delta) no pulmão durante a sepse grave assim como possíveis dinfunções destas células durante a imunossupressão pós-sepse. Para isso, a sepse grave foi induzida em camundongos C57BL/6 através da ligação e perfuração do ceco (CLP; 9 perfurações com agulha de 21 gauge e tratamento com antibiótico por 3 dias), modelo experimental descrito por ser capaz de desencadear e manter um estado de imunossupressão. No primeiro dia após a CLP os números de linfócitos T (gama,delta) e (alfa,beta) se encontram elevados no pulmão. No terceiro dia, o número de linfócitos T (alfa,beta) retornou a níveis basais, no entanto, os números de linfócitos T (gama,delta) continuaram elevados. A análise por citometria de fluxo da expressão de anexina V, CD25, e c-Fos, sugere que este número aumentado de linfócitos T (gama,delta) no terceiro dia após CLP seja devido a uma rápida e duradoura proliferação destas células em órgãos linfóides secundários e não devido a uma diminuição da morte celular, evento característico da sepse. De modo interessante, o aumento da expressão de CD25 por linfócitos T (gama,delta) foi observada tanto no pulmão (terceiro e décimo dia após CLP) quanto no baço (primeiro, terceiro e décimo dia após CLP), em tempos anteriores aos observados para os linfócitos T (alfa,beta). No décimo dia após a CLP, os camundongos já se encontram recuperados da sepse, contudo, os linfócitos T (gama,delta) e (alfa,beta) apresentam uma incapacidade de migrar em direção ao pulmão inflamado, como foi observado em ensaio de transferência adotiva. Em contrapartida, no décimo dia, um maior número de linfócitos T (gama,delta) (mas não alfa,beta) recuperados do pulmão de animais pós-sépticos estão produzindo IL-17, enquanto há um menor número de linfócitos T (gama,delta) IL-10(positivo) ou IFN-(gama positivo). Este aumento na produção de IL-17 foi acompanhado de um aumento do número de neutrófilos. Em síntese, esses dados sugerem que, diferente dos linfócitos T (alfa,beta), os linfócitos T (gama,delta) apresentam um perfil pró-inflamatório durante a imunossupressão pós-sepse grave induzida por CLP.