Protein profile of purified plasma- and aqueous humor-derived extracellular vesicles from patients with ocular toxoplasmosis

ABSTRACT Purpose: To characterize the extracellular vesicle protein cargo in the aqueous humor and plasma of patients with ocular toxoplasmosis. Methods: Aqueous humor and plasma were collected from six patients with active ocular toxoplasmosis and six patients with cataract. Extracellular vesicles were isolated, and western blotting and mass spectrometry were performed for protein analysis. Results: All plasma samples from patients with ocular toxoplasmosis and cataract were positive for the tetraspanins CD63 and TSG101. However, the aqueous humor from patients with ocular toxoplasmosis was positive only for CD63. Sixty-seven new unreported proteins were identified in the aqueous humor and plasma of patients with the ocular toxoplasmosis and cataract. Of the 67 proteins, 10 and 7 were found only in the cataract and ocular toxoplasmosis groups, respectively. In general, these proteins were involved in immune system activation and retina homeostasis and were related to infections and retina-associated diseases. Conclusion: The distinct protein signatures between ocular toxoplasmosis and cataract may be helpful in the differential diagnosis of ocular toxoplasmosis. However, more studies are needed to better understand the role of these proteins in the pathogenesis of ocular toxoplasmosis.

Ocular surface findings in impression cytology after interferon a2b or mitomycin C in rabbits / Achados em citologia de impressão da superfície ocular após uso de interferon alfa-2b ou mitomicina C: estudo em coelho

ABSTRACT Objective: To describe ocular surface findings in impression cytology obtained from healthy rabbit conjunctiva treated with interferon alpha-2b eyedrop, and compare them to findings after use of mitomycin C 0.02%. Methods: An experimental study using a rabbit model was performed between September 2013 and October 2014 at the Faculdade de Medicina de Marília, Universidade Federal de São Paulo, Clínica de Olhos Moacir Cunha. Thirty New Zealand white rabbits were divided into 6 groups and received interferon alpha-2b or mitomycin C 0.02%. Impression cytology (IC) was performed prior to topical applications and at15, 30 and 60 days of use. The following variables were analyzed in impression cytology: goblet cells, cellularity, cell-to-cell adhesion, nucleus/cytoplasm ratio, nuclear chromatin, inflammatory cells keratinization, and cytomegaly. Results: The major findings in impression cytology after us of interferon alpha-2b included loss of goblet cells (50.8%), reduced cell-to-cell adhesion (26.2%), abnormal nucleus/cytoplasm ratio (20%) and reduced cellularity (15.4%). After use of mitomycin C 0.02%, the most common changes included loss of goblet cells (46.2%), abnormal nucleus/cytoplasm ratio (25.6%), less cell-to-cell adhesion (23.1%), and reduced cellularity (20.5%). There were no significant differences in any variable when comparing impression cytology after interferon alpha-2b and after mitomycin C 0.02%. Goblet cell loss was more pronounced at days 30 and 60, as compared to impression cytology at day 15 for both drugs. Conclusion: The loss of goblet cells, reduced cell-to-cell adhesion and cellularity, along with abnormal nucleus/cytoplasm ratio were the most common findings in impression cytology after use of interferon alpha-2b. These findings are similar to those described for use of mitomycin C 0.02%. ..

RESUMO Objetivo: Descrever os achados em citologia de impressão de conjuntiva sadia de coelho submetida ao uso de colírio de interferon alfa-2b e compará-los ao que foi encontrado após uso da mitomicina C 0,02%. Métodos: Estudo experimental realizado em modelo animal no período entre setembro de 2013 e outubro de 2014 nas dependências da Faculdade de Medicina de Marília, da Universidade Federal de São Paulo e da Clínica de Olhos Moacir Cunha. Trinta coelhos albinos da raça Nova Zelândia foram divididos em seis grupos e receberam interferon alfa-2b ou mitomicina C. A citologia de impressão foi realizada antes do início dos colírios e após 15, 30, 60 dias de seu uso. As seguintes variáveis foram analisadas na citologia de impressão: células caliciformes, celularidade, adesão intercelular, razão núcleo/citoplasma, cromatina, células inflamatórias, queratinização e citomegalia. Resultados: Os principais achados na citologia de impressão após o uso do interferon alfa-2b foram a redução de células caliciformes (50,8%), a diminuição da adesão intercelular (26,2%), a alteração da razão N/C (20%) e a redução da celularidade (15,4%). Após o uso da mitomicina C 0,02%, foram mais frequentes a redução das células caliciformes (46,2%), a alteração da razão N/C (25,6%), a adesão intercelular (23,1%) e a redução da celularidade (20,5%). Não houve diferença estatisticamente significante para nenhuma das variáveis estudas quando se compararam as citologias de impressão após interferon alfa-2b com as citologias de impressão após mitomicina C 0,02%. Independentemente da substância utilizada, as citologias colhidas 30 e 60 dias após início das drogas apresentaram maior redução de células caliciformes quando comparadas com as citologias de impressão colhidas após 15 dias. Conclusão: A redução das células caliciformes, a diminuição da adesão intercelular, a alteração da razão N/C e a diminuição da celularidade foram as alterações mais frequentes na citologia de impressão colhida após o uso de interferon alfa-2b. Os achados em citologias de impressão após o uso de interferon alfa-2b são semelhantes àqueles encontrados após o uso da mitomicina C 0,02%.

Intravitreal and posterior subtenon triamcinolone acetonide for severe acute posterior multifocal placoid pigment epitheliopathy / Triancinolona intravítrea e sub-tenoniana para epiteliopatia pigmentar placóide multifocal posterior aguda grave

ABSTRACT A 21-year-old man presented with visual acuity of 20/200 in both eyes. The fundus picture, fluorescein angiography, and optical coherence tomography revealed severe bilateral acute posterior multifocal placoid pigment epitheliopathy and serous macular detachments. We treated the patient with triamcinolone acetonide, an intravitreal injection (4 mg/0.1 mL) in one eye and a posterior subtenon injection (40 mg/1 mL) in the other eye. Within 2 weeks the visual acuity was 20/80 in both eyes. At the 8-week follow-up visit his vision was 20/63 bilaterally. One year later the vision remained 20/63 in both eyes. In this patient, the triamcinolone acetonide injections, whether administered intravitreally or via the posterior subtenon route, achieved similar anatomic and functional recovery results.

RESUMO Um homem de 21 anos apresentou acuidade visual de 20/200 em ambos os olhos. O quadro de fundo de olho, angiofluoresceinografia e a tomografia de coerência óptica revelaram epiteliopatia pigmentar placóide multifocal posterior aguda e descolamento macular seroso. Tratamos o paciente com triancinolona acetonida, uma injeção intravítrea (4 mg/0,1 ml) em um olho e uma injeção subtenoniana posterior (40 mg/1 ml) no outro olho. Após 2 semanas, a acuidade visual foi de 20/80 em ambos os olhos. Na visita de acompanhamento de 8 semanas, sua visão foi de 20/63 bilateralmente. Um ano depois, a visão permaneceu 20/63 em ambos os olhos. Neste paciente, as injeções de triancinolona, administradas por via intravítrea ou por via subtenoniana posterior, obtiveram resultados semelhantes na recuperação anatômica e funcional.

Effects of ranibizumab and amfenac on the functional abilities and radiosensitivity of uveal melanoma cells / Efeitos do ranibizumabe e do amfenac nas habilidades funcionais e na radiossensibilidade de células de melanoma uveal

ABSTRACT Purpose: To evaluate the effects of ranibizumab and amfenac in human uveal melanoma cell lines and to explore the ability of these compounds to sensitize uveal melanoma cells to radiation therapy. Methods: The 92.1 human uveal melanoma cell line was cultured and subjected to the proposed treatment (ranibizumab, amfenac, and a combination of both). Proliferation, migration, and invasion assays of the 92.1 uveal melanoma cell line were assessed after pretreatment with ranibizumab (125 mg/mL), amfenac (150 nM), or a combination of both. In addition, proliferation rates were assessed after treatment with ranibizumab and amfenac, and the cells were subsequently exposed to various radiation doses (0, 4, and 8 Gy). Results: Proliferation assay: cells treated with a combination of ranibizumab and amfenac had lower proliferation rates than controls (p=0.016) and than those treated with only ranibizumab (p=0.033). Migration assay: a significantly lower migration rate was observed in cells treated with amfenac than the control (p=0.014) and than those treated with ranibizumab (p=0.044). Invasion assay: there were no significant differences among the studied groups. Irradiation exposure: in the 4 Gy dose group, there were no significant differences among any groups. In the 8 Gy dose group, treatment with ranibizumab, amfenac, and their combination prior to application of the 8 Gy radiation led to a marked reduction in proliferation rates (p=0.009, p=0.01, and p=0.034, respectively) compared with controls. Conclusion: Combination of ranibizumab and amfenac reduced the proliferation rate of uveal melanoma cells; however, only amfenac monotherapy significantly decreased cell migration. The radiosensitivity of the 92.1 uveal melanoma cell line increased following the administration of ranibizumab, amfenac, and their combination. Further investigation is warranted to determine if this is a viable pretreatment strategy to render large tumors amenable to radiotherapy.

RESUMO Objetivo: Avaliar os efeitos do ranibizumabe em associação com o amfenac nas células de melanoma uveal humano e explorar a capacidade desses compostos em sensibilizar as células de melanoma uveal à radioterapia. Métodos: Células de melanoma uveal humano do tipo 92.1 foram cultivadas e submetidas ao tratamento proposto (ranibizumabe, amfenac e a combinação de ambos). Ensaios de proliferação, migração e invasão com as células de melanoma uveal do tipo 92.1 foram avaliados após tratamento com ranibizumabe (125 mg/ml), amfenac (150 nM) e a combinação de ambos. Além disso, as taxas de proliferação foram avaliadas após tratamento com ranibizumabe e amfenac com subsequente exposição das células a diferentes doses de radiação (0 Gy, 4 Gy e 8 Gy). Resultados: Ensaio de proliferação: células tratadas com ranibizumabe e amfenac combinados apresentaram taxas de proliferação inferiores em comparação ao grupo controle (p=0,016), do que as tratadas apenas com ranibizumabe (p=0,033). Ensaio de migração: foi observada uma taxa de migração significativamente mais baixa nas células tratadas com amfenac do que no grupo controle (p=0,014) e do que nas tratadas com ranibizumabe (p=0,044). Ensaio de invasão: não houve diferenças significativas entre os grupos estudados. Exposição à irradiação: no grupo da dose de 4 Gy, não houve diferença significante entre os grupos. No grupo da dose de 8 Gy, o tratamento com ranibizumabe, afenac e sua combinação antes da aplicação da radiação de 8 Gy levou a uma redução acentuada nas taxas de proliferação (p=0,009, p=0,01 e p=0,034, respectivamente) em comparação aos grupos controle. Conclusão: A combinação de ranibizumabe e amfenac reduziu a taxa de proliferação das células de melanoma uveal; no entanto, apenas o amfenac diminuiu significativamente a migração celular. A radiossensibilidade das células de melanoma uveal do tipo 92.1 aumentou após a administração de ranibizumabe, amfenac e sua combinação. Mais investigações são necessárias para determinar se esta é uma estratégia de pré-tratamento viável para tornar grandes tumores passíveis de radioterapia.

Clinical and histopathological features of orbital granular cell tumor: case report / Características clínicas e histopatológicas de tumor de células granulares da órbita: relato de caso

A 53 year-old woman presented with a slowly progressive, painless proptosis OS. Computed tomography disclosed a round, homogeneous, well-delimited lesion in the inferior-temporal orbit. The tumor was composed of round cells with eosinophilic granular cytoplasm. Some of the cells had larger eosinophilic granules surrounded by a clear halo; known as pustulo-ovoid bodies of Milian or Bangle bodies. The diagnosis of a granular cell tumor was then established and confirmed by immunohistochemistry. Granular cell tumors are uncommon benign soft tissue neoplasms that have a predilection for the head and neck region. Awareness of the typical histopathological features is crucial for the correct diagnosis.

Mulher de 53 anos apresentou proptose lentamente progressiva no olho esquerdo. Tomografia computadorizada mostrou uma lesão na região temporal inferior da órbita esquerda, bem delimitada, arredondada, homogênea. O tumor era composto de células com citoplasma granular eosinofilico. Algumas das células possuíam grandes grânulos eosinofílicos circundados por um halo claro, conhecidos como corpos ovoides-pustulares de Milian or corpos de Bangle. O diagnóstico de tumor de células granulares foi estabelecido, confirmado pela imuno-histoquímica. Tumor de células granulares são neoplasias incomuns com predileção da região da cabeça e pescoço. O conhecimento das características histopatológicas típicas são cruciais para o correto diagnóstico.