RESUMO
A method for detection of Salmonella Typhimurium in meat samples that uses in-house monoclonal antibody (MAb) coated magnetic beads for immunomagnetic separation (IMS) associated with PCR amplification of the gene fimA was developed. An internal amplification control (IAC) of the PCR reaction was constructed. The fimA PCR has shown 100% sensitivity and specificity when tested with various bacteria. The detection limit of the IMS-PCR method, using a post-enrichment in BHI broth for 6 h between IMS and PCR, was 1-10 CFU/mL. The method proved to be rapid (27 hrs), highly sensitive (1-10 CFU/25 g), and specific for detection of S. Typhimurium from experimentally contaminated pork and chicken meat samples.
Assuntos
Microbiologia de Alimentos , Separação Imunomagnética/métodos , Carne/microbiologia , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Salmonella typhimurium/isolamento & purificação , Animais , Anticorpos Antibacterianos/imunologia , Anticorpos Monoclonais/imunologia , Antígenos de Bactérias/genética , DNA Bacteriano/análise , Óxido Ferroso-Férrico/química , Proteínas de Fímbrias/genética , Microesferas , Salmonella typhimurium/genética , Salmonella typhimurium/imunologia , Sensibilidade e EspecificidadeRESUMO
A manipulação inadequada e a exposição ao meio ambiente aumentam o risco de contaminação do doce de leite oferecido ao consumidor. O objetivo do trabalho foi avaliar a qualidade microbiológica do docede leite fracionado para venda a varejo. Foram realizadas pesquisa de Salmonella e contagens de Staphylococcus coagulase positiva, de coliformes termotolerantes e de bolores e leveduras em 28 amostras de doce de leite. Uma amostra apresentou Salmonella enterica subsp. enterica sorotipo Typhimuriumem 25 g do produto. Essa cepa foi resistente aos antimicrobianos cloranfenicol e sulfametoxazol/trimetoprim, apresentou resistência parcial à tetraciclina e foi sensível aos demais. Todas as amostras analisadas apresentaram contagens de Staphylococcus coagulase positiva < 10 UFC/g. As contagens de coliformes termotolerantes apresentaram resultados < 3 NMP/g, com exceção de duas amostras coletadas de dois supermercados, que apresentaram 0,4 e 2,1 NMP/g. Apenas uma amostra apresentou contagem de bolores e leveduras com valores aceitáveis pelas normas brasileiras. Todas as demais apresentaram contagens acima de 1,0 x 102 UFC/g. O doce de leite pastoso fracionado nos estabelecimentos comerciais pode ser fonte de microrganismos patogênicos para humanos, o que justifica a adoção de rigoroso controle na inspeção e fiscalização do comércio deste alimento.