Uso de la reacción en cadena de la polimerasa para Borrelia burgdorferi en lesiones de esclerodermia localizada (morfea), en pacientes venezolanos / Using the polymerase chain reaction to Borrelia burgdorferi infection in localized scleroderma injure (morphea), in venezuelan patients

Borrelia burgdorferi es el agente causal de Borreliosis de Lyme, una enfermedad infecciosa multisistémica transmitida al humano por la picadura de garrapatas del género Ixodes. En los últimos años se ha postulado una posible asociación entre ésta espiroqueta y esclerodermia localizada (morfea). Sin embargo, los datos publicados no han proporcionado pruebas inequívocas de tal asociación. En Suramérica, incluida Venezuela (estado Zulia) se han detectado pruebas serológicas positivas en pacientes con morfea. El objetivo de este estudio fue buscar evidencia definitiva de la infección por Borrelia burgdorferi en pacientes con morfea, mediante la detección del ADN bacteriano en muestras de piel. En los 21 pacientes la PCR resultó negativa. La ausencia de amplificación de la secuencia blanco seleccionada en las muestras estudiadas no apoyan una asociación entre la infección por Borrelia burgdorferi y las lesiones escleróticas de morfea, pero tampoco descartan la posibilidad de una relación entre morfea y una genoespecie desconocida del complejo Borrelia burgdorferi sensu lato, entre morfea y una especie diferente de Borrelia o entre morfea y otra espiroqueta, como agente etiológico de la lesión en la localidad.

Borrelia burgdorferi is the causative agent of Lyme Borreliosis, an infectious multisystemic disease transmitted to humans by the Ixodes ticks bite. A possible association of Borrelia burgdorferi with localized scleroderma has been postulated. However, published data do not provide unequivocal results. Previus serologic analysis of patients with localized scleroderma in South American countries (including Venezuela), have been reported as yielding some reactivity. The present study looked for evidence of Borrelia burgdorferi infection in venezuelan patients with localized scleroderma, using the polymerase chain reaction to analyze 21 skin samples of patients with this skin condition. The results were negative in all the samples studied. Our data do not support an association of Borrelia burgdorferi infection and the sclerotic lesions of localized scleroderma; but do not rule out the possibility of a relationship between localized scleroderma and an unknown geno-specie of Borrelia burgdorferi sensu lato complex, a different Borrelia specie or a different spirochetal organism, as the etiological agents of the skin lesions in this area.

[Using the polymerase chain reaction to Borrelia burgdorferi infection in localized scleroderma injure (morphea), in Venezuelan patients]. / Uso de la reacción en cadena de la polimerasa para Borrelia burgdorferi en lesiones de esclerodermia localizada (Morfea), en pacientes venezolanos.

Borrelia burgdorferi is the causative agent of Lyme Borreliosis, an infectious multisystemic disease transmitted to humans by the Ixodes ticks bite. A possible association of Borrelia burgdorferi with localized scleroderma has been postulated. However, published data do not provide unequivocal results. Previous serologic analysis of patients with localized scleroderma in South American countries (including Venezuela), have been reported as yielding some reactivity. The present study looked for evidence of Borrelia burgdorferi infection in venezuelan patients with localized scleroderma, using the polymerase chain reaction to analyze 21 skin samples of patients with this skin condition. The results were negative in all the samples studied. Our data do not support an association of Borrelia burgdorferi infection and the sclerotic lesions of localized scleroderma; but do not rule out the possibility of a relationship between localized scleroderma and an unknown geno-specie of Borrelia burgdorferi sensu lato complex, a different Borrelia specie or a different spirochetal organism, as the etiological agents of the skin lesions in this area.

Anticuerpos séricos antiglicolípido fenólico 1 en personal de centros de salud en contacto con pacientes con enfermedad de Hansen / Antiphenolic glycolipid-1 antibodies in personnel in health centers in contact with Hansen´s disease patients

La lepra es una enfermedad con diferentes formas clínicas, sin embargo, es poco el conocimiento que se tiene sobre portadores de Mycobacterium leprae (M. leprae), así como de su transmisión y los fenómenos inmunológicos que conllevan a la aparición de la enfermedad. El antígeno Glicolípido Fenólico 1 (PGL-1) es un factor de virulencia, específico del M. leprae que protege a la bacteria del ataque de los macrófago. El objetivo principal de la siguiente investigación fue detectar anticuerpos anti PGL-1 en el personal en contacto estrecho con pacientes con lepra, para conocer su grado de exposición al bacilo y su utilidad como factor de riesgo para sufrir la enfermedad. Se seleccionó un grupo de individuos (n: 52) en contacto frecuente con pacientes leprosos y un grupo control (n: 60) sin contacto demostrado. La presencia de anticuerpos séricos IgM anti PGL-1 se determinó por la técnica de ELISA. Del total analizado, se detectaron anticuerpos anti-PGL-1, en 22 muestras (42,3%) del grupo expuesto y 3 (5,0%) en el grupo control (p<0,05). No se observaron diferencas en relación al sexo (45,5% vs. 41,5%). Se encontró un predominio de la seropositividad en el personal entre 36 a 55 años, sin relación a los años de exposición. Se destaca una mayor frecuencia en el personal médico (73,3%) y un riesgo relativo de exposición al bacilo de la Lepra del 1.9 en la población expuesta. Estos resultados demuestran un mayor porcentaje de personas seropositivas al anti-PGL-1 en el personal de centros de salud, relacionado al grado de exposición al bacilo de Hansen, especialmente el personal médico. Hallazgos que sugieren riesgo incrementado de adquirir M. leprae con respecto a la población general. Se recomienda la toma de medidas de bioseguridad, así como realizar un seguimiento serológico de los casos positivos del presente estudio.

Absence of borrelia burgdorferi antibodies in the sera of Venezuelan patients with localized scleroderma (morphea)

En los últimos años se ha postulado una posible asociación entre Borrelia burgdorferi ( Bb ) y esclerodermia localizada (morfea). Sin embargo, los datos publicados no han proporcionado pruebas inequívocas de tal asociación. En Suramérica se han realizado estudios serológicos que han evidenciado resultados positivos. El objetivo de este estudio fue buscar evidencia de la infección por Bb en pacientes venezolanos con morfea, mediante la detección de anticuerpos antibacterianos, usando el protocolo de dos pasos recomendado por el Center for Disease Control and Prevention de Atlanta (Estados Unidos). Veintiún muestras de suero de pacientes con morfea y veintiún muestras de sujetos sanos (control) fueron analizadas. Cuatro muestras resultaron ELISA positivas: tres correspondieron a pacientes con morfea y una, a un sujeto control. Todas las muestras ELISA positivas fueron negativas en la prueba IgG Western Blot. Los resultados obtenidos no soportan una asociación entre la infección por Bb y las lesiones escleróticas de morfea, pero tampoco descartan la posibilidad de una relación entre morfea y una genoespecie desconocida del complejo Bb sensulato, entre morfea y una especie diferente de Borrelia o entre morfea y otra espiroqueta, como agente etiológico de la lesión en la localidad

Absence of Borrelia burgdorferi antibodies in the sera of Venezuelan patients with localized scleroderma (morphea).

A possible association of Borrelia burgdorferi (Bb) with localized scleroderma (LS) has been postulated. However, the published data do not provide unequivocal results. Previous serologic analysis in LS patients in South American countries yielded positive results. The present study in our laboratory looked for evidence of Bb in LS patients in Venezuela, by antibacterial antibodies detection using the two-tiered approach as recommended by the Center for Disease Control and Prevention of Atlanta (United States). Twenty one serum samples from LS patients and twenty one samples from healthy individuals were analyzed. Four serum samples were ELISA positive: three from patients with LS and one from a healthy control. All ELISA positive samples were negative by IgG Western Blot. Our data do not support an association of Bb infection and the sclerotic lesions of LS; but do not rule out the possibility of a relationship between LS and an unknown geno-specie of Bb sensu lato complex, a different Borrelia specie or a different spirochetal organism, as the etiological agents of the skin lesions in the area.

Evaluación de la bacilospocia, cultivo y reacción en cadena de la polimerasa para el diagnóstico de tuberculosis pulmonar / Evaluation of baciloscopy, cultivation and polimerasa chain reaction for the diagnostic of lung tuberculosis

La utilidad de la baciloscopia, cultivo y la Reacción en Cadena de la Polimerasa (RCP) fue evaluada en 31 muestras de esputo, provenientes de pacientes de ambos sexos, sin distinción de grupo étnico y edades comprendidas entre los 17 y 80 años, con manifestaciones clínicas, hallazgos radiológicos y/o datos epidemiológicos sugestivos de tuberculosis pulmonar. A todas las muestras, se les practicó baciloscopia utilizando la técnica de coloración de Ziehl-Neelsen. Se utilizó el medio de cultivo Ogawa-Kudoh como estándar. Los objetivos para el ensayo de RCP fueron los genes que codifican la proteína de 32-KDa. y la secuencia de inserción IS6110. Luego de la amplificación, se obtuvo un fragmento de 984 pares de bases correspondiente a la secuencia de inserción IS6110 y otro de 506 pares, correspondiente al antígeno alfa 32-KDa. Del total de muestras examinadas por el método de Ziehl-Neelsen, 19 resultaron positivas y 12 resultaron negativas (61,29 y 38,71 por ciento respectivamente). De las 31 muestras sembradas 19 (61,29 por ciento) resultaron positivas y 12 (38,71 por ciento) fueron negativas al cultivo. De todas las muestras amplificadas, 22 (70,96 por ciento) mostraron la presencia de fragmentos de ADN correspondientes tanto a la secuencia de inserción IS6110, como al antígeno alfa 32 KDa., mientras que en 9 (29,04 por ciento) no se detectó la presencia de ADN micobacteriano por el método de RCP. La sensibilidad de la prueba RCP fue virtualmente de 100 por ciento y su especificidad fue del 75 por ciento. Se demostró que el RCP, basado en la amplificación simultánea del elemento de inserción IS6110 y del gen que codifica el antígeno alfa en un solo paso, puede identificar infecciones por micobacterias a partir de muestras de esputo. Se concluye que esta técnica es más sensible que los procedimientos bacteriológicos de rutina (examen directo y cultivo) y la convierten en una herramienta muy poderosa para el diagnóstico de tuberculosis pulmonar y otras enfermedad...

Candidiasis vaginal en primigestas / Vaginal candidiasis in primigravidas

Determinar evidencias de candidiasis vaginal en pacientes que acuden a la consulta prenatal de la Maternidad Castillo Plaza, utilizando como medio diagnóstico el test Intray Colotex Yeast. Se estudiaron embarazadas primigestas con sospecha clínica de candidiasis vaginal. Las muestras de secreción vaginal se inocularon en el medio Intray Colorex Yeast e incubaron a 37°C durante 48 a 72 horas. Maternidad Castillo Plaza de Maracaibo, Estado Zulia. Se demostró que un 38 por ciento (24 pacientes) presentaron candidiasis vaginal. Candida albicans fue la especie más frecuente (88 por ciento), seguida por glabrata (8 por ciento) y krusei (4 por ciento). El desarrollo de colonias verdes, rosado claro (albicans, glabrata y krusei respectivamente) sugiere la utilidad del medio Intray Colorex Yest para la identificación rápida de las principales especies productoras de candidiasis

HLA-B27 subtypes determination in patients with ankylosing spondylitis from Zulia, Venezuela.

To perform an investigation regarding the distribution of the human leukocyte antigen (HLA)-B27 subtypes in the Zulian population with ankylosing spondylitis (AS), 48 unrelated Mestizos, HLA-B27 positive by serology, were studied using the polymerase chain reaction-specific sequence oligonucleotides probe (PCR-SSOP) and specific sequence primers (SSP) to analyze the polymorphism in exons 2 and 3 of the HLA-B27 gene. Only two of eight HLA-B27 subtypes studied (B*2701-B*2708) were found. The distribution of these alleles in the population of patients was: B*2705, 68.8%, and B*2702, 31.2%. B*2705 subtype showed significant association with patients being male. In the healthy controls, the most common subtype was B*2708. These results were compared with frequencies reported in other Mestizo and Spanish populations and showed significant differences, such as a high frequency of B*2702. Such results show that HLA*B2705 and HLA*B2702 are the subtypes most frequently associated with AS in our Mestizo population and suggest a possible protector role for HLA*B2708, which was found only in the healthy population.

[Association of HLA class I and leukemia in mestizo patients of the state of Zulia, Venezuela]. / Asociación HLA clase I y leucemia en pacientes mestizos del estado Zulia, Venezuela.

The Human Leukocyte Allele (HLA) Class I (A, B, C) and Acute Lymphoid Leukemia and Myeloid Leukemia association, was determined by polymerase chain reaction--sequence specific primers (PCR-SSP) in 60 patients and 30 healthy controls. The results were reported as allelic frequencies and haplotype. The Chi-square corrected, Fisher's Test, Relative risk and etiologic fraction were calculated. A significant positive association was showed between HLA-B*39 (RR = 16.184; p = 0.0237) and HLA C*03 (RR = 5.0; p = 0.0127) alleles and Mycloid Leukaemia. Positive associations between haplotypes 2 loci: HLA-A*02-C*03 (RR = 6.0; p = 0.0153), A*24-C*03 (RR = 16.184; p = 0.0237), B*40-C*03 (RR = 10.706; p = 0.0021) and haplotype 3 loci: HLA-A*02-B*40-C*03 (RR = 8.11; p = 0.0102) and Myeloid Leukemia were found. No association was evident in Acute Lymphoid Leukemia. No negative association with Leukemias were observed.

[Immune response and anergy. Study in tuberculosis patients from the Universitary Hospital, Maracaibo, Venezuela ]. / Respuesta inmunitaria y anergia. Estudio en pacientes tuberculosos del hospital universitario de Maracaibo, Venezuela.

With the aim of evaluate the anergy in Mycobacterium tuberculosis individuals infected we study 57 patients and 15 healthy controls, both sex and with different age, which to practice Sputum Bacteriology culture (BK) and the la reaction intradermic with PDD. The test of tuberculine on skin was achieve inoculate 0.1 ml de PPD intradérmic vía, the results were obtained at 72 h. 28 patient total result BK+ and 29 BK-. The Group BK+, 15 result PPD+ and 13 PPD-, the lastet were classify as anergic patients (BK+ PPD-). From the 29 patient residual (BK-), 20 was PPD+ and 9 PPD-. All the controls resulted BK- PPD-. Only the anergy in patient BK was evaluated + (28 individuals) patient. Was classified from the point of clinical view in three series: N series: 27 patient TBC+ BK-, P Series: 28 patient TBC+ BK+ and EP Series: 2 patient with extra pulmonary TBC. According to the grade of pulmonary complication, the patient separated in two groups, according to the extension and type of lesion found in the evaluation with X. rays The "group 1" with 9 patient (32.14%) it introduced lesions on one side with or without caverns and the "group 2" with 19 patient (67.85%) with bilateral lesions with or without caverns. Was carried out the Lymphoblastic Transformation Test (TTL) stimulating with PHA and PPD, for which patterns of outlying blood with heparina were gathered. The concentrations of IL-4, IL-6 and INF-gamma was gotten inmunoenzimatic in supernatants of cultivations for rehearsals and in plasm, hind to the stimulation with the PPD. The statistical analysis was carried out utilizing the Test T of Student in pair, Varianza Analysis and the square Chi. Only the controls and the patient BK-, they showed normal response to the PHA, in contrast, the patient BK+ PPD+ they introduced a suppression of the response opposite the PHA of aprox. 90%. The patient PPD+ they showed a superior response in cultivation that the patient PPD-. The concentration of IL-4 in the plasm of the anergic patient (PPD-) showed a significant difference (P < 0.05) with concerning the PPD group+. The concentration of INF-gamma was lower in the anergic patient significantly different to the of the patient PPD+. Similar result was gotten in the mensuration of IL-4 and INF-gamma in supernatants of cultivation. One could observe the presence of patient with IL-4+ INF-gamma, and INF-gamma or IL-4 only. In the patient classified clinical like series "P", the concentration of IL-4 was old in the "group 2" with concerning the "group 1." the opposite occurred with the concentrations of the INF-gamma which were old in the "group 1" (both differences were not significant statistical). The increase of IL-4 next to low concentrations of INF-gamma in anergic patient and committed clinical, it suggest a prevalence of the pattern Th2 (T2) in the immune response.

Respuesta inmunitaria y anergia. Estudio en pacientes tuberculosos del Hospital Universitario de Maracaibo, Venezuela / Immunitary response and anergy. Study in tuberculosis patients from the Universitary Hospital, Maracaibo, Venezuela

RESUMEN: Con el objeto de evaluar la anergia en individuos infectados con el Mycobacterium tuberculosis se estudiaron 57 pacientes y 15 controles sanos de ambos sexos y edades diferentes, a los cuales se les practicó cultivo bacteriológico de esputo (BK) y la intradermoreacción con el PDD. La prueba de tuberculina en piel fue realizada inoculando 0.1 ml de PPD vía intradérmica con resultados evaluados a las 72 horas. Un total de 28 pacientes resultaron BK+ y 29 BK-. Del grupo BK+, 15 resultaron PPD+ y 13 PPD-, estos últimos fueron clasificados como pacientes anérgicos (BK+PPD-). De los 29 pacientes restantes (BK-), 20 fueron PPD+ y 9 PPD-. Todos los controles resultaron BK- PPD-. Solamente se evaluó la anergia en pacientes BK+ (28 individuos).Los pacientes fueron clasificados desde el punto de vista clínico en tres series: Serie N: 27 pacientes TBC + BK-, Serie P: 28 pacientes TBC + BK+ y Serie EP: 2 pacientes con TBC extra pulmonar. Según el grado de complicación pulmonar, los pacientes se separaron en dos grupos, de acuerdo a la extensión y tipo de lesión encontrados en la evaluación con rayos X. El ôgrupo 1ö con 9 pacientes (32.14 %) presentó lesiones unilaterales con o sin cavernas y el ôgrupo 2ö con 19 pacientes (67.85 %) con lesiones bilaterales con o sin cavernas. Se realizó el Test de transformación linfoblástica (TTL) estimulando con PHA y/o PPD, para lo cual se recolectaron muestras de sangre periférica con heparina. Las concentraciones de IL-4, IL-6 INF-gama obtuvieron por ensayos inmunoenzimáticos en sobrenadante de cultivos y en plasma, posterior a la estimulación con el PPD. El análisis estadístico se realizó utilizando el Test T de Student pareado, Análisis de Varianza y el Chi cuadrado. Sólo los controles y los pacientes BK-, mostraron respuesta normal a la PHA, en contraste, los pacientes BK+ PPD+ presentaron una supresión de la respuesta frente a la PHA de aprox. 90 %. Los pacientes PPD+ mostraron una respuesta superior en cultivo que los pacientes PPD-. La concentración de IL-4 en el plasma de los pacientes anergicos (PPD-) mostró una diferencia significativa (P<0.05) con respecto al grupo PPD+. La concentración de INF-gama fue inferior en los pacientes anérgicos mas no significativamente diferente a la de los pacientes PPD+. Similar resultado se obtuvo en la medición de IL-4 INF- en sobrenadante de cultivo. Se pudo observar la presencia de pacientes con IL-4 + INF-gama, INF-gamao IL-4 solamente...

Estudio comparativo de las técnicas de inmunofluorecencia indirecta (IFI) y Elisa para la detección de parvovirus B19 / Comparative assay of indirect immunonofluorescence and Elisa techniques for the parvovirus B19 detection

Se evaluaron 53 sueros provenientes de pacientes con diversos desórdenes hematológicos y 15 sueros controles, para determinar la seroprevalencia de IgG e IgM específicos del Parvovirus B19 (P. B19) empleando las técnicas de Inmunofluorecencia indirecta (IFI) e Inmunoensayoenzimático (ELISA). La prevalencia de IgG específica del grupo control por ambos métodos fue de 46,6 por ciento, en los pacientes en crisis de 83,3 por ciento (IFI) y 66,7 por ciento (ELISA), y en los pacientes sin crisis de 68,9 por ciento (IFI) y 72,4 por ciento (ELISA); observandose IgM (+) sólo en los pacientes en crisis: 8,3 por ciento (IFI) y 29,1 por ciento (ELISA). La elevada seroprevalencia (IgG) observada frente al control, podría deberse a una mayor exposición al virus por parte de los pacientes. La concordancia entre ambas técnicas para IgG fue de 81 por ciento y para IgM de 93 por ciento, sin embargo, ELISA resultó ser más sensible para detectar IgM de P.B19. A pesar de la evidencia serológica y evaluando un sólo especimen sérico por paciente, se pudo establecer la asociación entre crisis aplástica e infección viral, para IgM ELISA pero no para IgG