Krüppel-like factor 5 as potential molecular marker in cervical cancer and the KLF family profile expression.

Cervical cancer (CC) as other cancer types, presents molecular deregulations, such as the alterations of transcription factors. Krüppel-like factors (KLF) are a family of transcriptional regulators. They are involved in diverse cellular processes, such as proliferation, apoptosis, and angiogenesis among others. Here, we analyzed the expression of all 17 KLF members at messenger RNA (mRNA) level, and protein expression of the two most commonly altered KLF5 and KLF6 in cervical tissues. Fifty-nine cervical tissues ranging from normal tissue to CC were evaluated for KLF1-17 mRNA expression by end-point RT-PCR and KLF5 by qRT-PCR. For KLF5 and KLF6 protein analysis, a tissue microarray was constructed containing the 59 cases and subjected for immunohistochemistry assay and KLF6 IVS1-27G>A single nucleotide polymorphism by direct DNA sequencing. KLF2-16 expressions were present in normal tissue, whereas all 17 were present in Low-Grade Squamous Intraepithelial Lesion, High-Grade-SIL and CC, unrelated to presence of human papillomavirus (HPV). KLF5 mRNA expression gradually increased throughout the subgroups and overexpressed in CC (p=0.01). KLF5 and KLF6 proteins were immunodetected in all samples. For the KLF6 SNP analysis, 80% of the CC population analyzed presented GG genotype and the remaining 20% presented GA genotype (p=0.491). Our present data show that KLFs expression could not be related to HPV presence, at least at transcriptional level, and KLF5 mRNA overexpression could represent a potential molecular marker for CC; KLF6 SNP has no relation to increased risk of CC.

Citocinas en médula ósea de pacientes con linfoma no Hodgkin: estudio por RT-PCR y revisión de la literatura / Cytocines in patientïs Osseous marrow presenting Non-Hodgkin Lymphoma

El conocimiento de las interacciones que se llevan a cabo entre los precursores y progenitores sanguíneos con los componentes estromales y los factores solubles en la médula ósea (MO), ha sido la base para estudiar la existencia de anormalidades específicas en el microambiente hematopoyético. En neoplasias hematológicas como el linfoma no Hodgkin (LNH) se desconoce si existen anormalidades en cuanto a la producción de citocinas en la MO y si éstas pueden afectar el desarrollo de los progenitores linfoides predisponiéndolos a la neoplasia. Mediante el empleo de retrotranscripción y la reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) se estudió la expresión de citocinas supresoras de la hematopoyesis como interleucina-10 (IL-10), factor de necrosis tumoral a (TNF-a) e interferon g (IFN-g) en aspirados de MO de 20 pacientes con LNH sin tratamiento previo. El grupo testigo incluyó 19 individuos clínicamente sanos pertenecientes al programa de trasplante de MO. También se determinó la expresión de TGF-b en 15 pacientes y 15 testigos mediante la misma técnica. La extracción de ARN se realizó con el método de isotiocianato de guanidina y el ADNc fue obtenido por retrotranscripción. La amplificación por PCR se realizó con Taq ADN-polimerasa y oligonucleótidos específicos para cada citocina y b-actina empleada como testigo interno de la síntesis de ADNc. El análisis estadístico se realizó mediante la prueba exacta de Fisher. Se encontró una disminución en la expresión de TNF-a (p= 0.001) y TGF-b (p= 0.001) en LNH comparado con el grupo testigo. En cambio, no se observó una diferencia significativa en la presencia de IL-10 e IFN-g entre ambos grupos. Los resultados obtenidos sugieren una expresión anormal de citocinas inhibitorias en la MO, lo que podría conducir a: 1) defectos en la diferenciación y desarrollo anormal de las células progenitoras, 2) un desbalance de los mecanismos hematopoyéticos que regulan el crecimiento celular y 3) escape de las células anormales a la apoptosis, favoreciendo la transformación neoplásica de las células linfoides y sus progenitores en linfoma no Hodgkin.