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Toxicol Lett ; 326: 23-30, 2020 Jun 15.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-32109534

RESUMO

Simultaneous detection of autophagy and apoptosis is important in drug discovery and signaling studies. Here we report, a real-time reporter cell line for the simultaneous detection of apoptosis and autophagy at single-cell level employing stable integration of two fluorescent protein reporters of apoptosis and autophagy. Cells stably expressing EGFP-LC3 fusion was developed initially as a marker for autophagy and subsequently stably expressed with inter-mitochondrial membrane protein SMAC with RFP fusion to detect mitochondrial permeabilization event of apoptosis. The cell lines faithfully reported the LC3 punctae formation and release of intermembrane proteins in response to diverse apoptotic and autophagic stimuli.


Assuntos
Apoptose/efeitos dos fármacos , Autofagia/efeitos dos fármacos , Linhagem Celular Tumoral/efeitos dos fármacos , Avaliação Pré-Clínica de Medicamentos/métodos , Genes Reporter/efeitos dos fármacos , Proteínas de Fluorescência Verde/efeitos dos fármacos , Células HeLa/efeitos dos fármacos , Apoptose/fisiologia , Autofagia/fisiologia , Linhagem Celular Tumoral/fisiologia , Genes Reporter/fisiologia , Proteínas de Fluorescência Verde/fisiologia , Células HeLa/fisiologia , Humanos
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