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Proc Natl Acad Sci U S A ; 102(28): 9796-801, 2005 Jul 12.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-15994229

RESUMO

We have performed single-molecule studies of GFP-LacI repressor proteins bound to bacteriophage lambda DNA containing a 256 tandem lac operator insertion confined in nanochannels. An integrated photon molecular counting method was developed to determine the number of proteins bound to DNA. By using this method, we determined the saturated mean occupancy of the 256 tandem lac operators to be 13, which constitutes only 2.5% of the available sites. This low occupancy level suggests that the repressors influence each other even when they are widely separated, at distances on the order of 200 nm, or several DNA persistence lengths.


Assuntos
Bacteriófago lambda/genética , DNA Viral/metabolismo , Proteínas de Ligação a DNA/isolamento & purificação , Regiões Operadoras Genéticas/genética , Proteínas Repressoras/metabolismo , Fenômenos Biofísicos , Biofísica , Carbocianinas , Eletroforese/métodos , Proteínas de Fluorescência Verde/metabolismo , Nanotecnologia/métodos
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