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Nat Methods ; 14(4): 391-394, 2017 Apr.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-28288123

RESUMO

To expand the range of experiments that are accessible with optogenetics, we developed a photocleavable protein (PhoCl) that spontaneously dissociates into two fragments after violet-light-induced cleavage of a specific bond in the protein backbone. We demonstrated that PhoCl can be used to engineer light-activatable Cre recombinase, Gal4 transcription factor, and a viral protease that in turn was used to activate opening of the large-pore ion channel Pannexin-1.


Assuntos
Optogenética/métodos , Engenharia de Proteínas/métodos , Proteínas Recombinantes/metabolismo , Conexinas/genética , Conexinas/metabolismo , Evolução Molecular Direcionada , Proteínas de Fluorescência Verde/genética , Proteínas de Fluorescência Verde/metabolismo , Células HEK293 , Proteínas de Choque Térmico HSP90/genética , Proteínas de Choque Térmico HSP90/metabolismo , Humanos , Proteínas Luminescentes/genética , Proteínas Luminescentes/metabolismo , Proteínas do Tecido Nervoso/genética , Proteínas do Tecido Nervoso/metabolismo , Sinais de Localização Nuclear/genética , Técnicas de Patch-Clamp , Fotoquímica/métodos , Proteínas Recombinantes/genética , Proteínas não Estruturais Virais/genética , Proteínas não Estruturais Virais/metabolismo , Proteína Vermelha Fluorescente
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