Purificação de imunoglobulinas de plasma humano empregando Cromatografia de troca iônica

Derivatives of human plasma are essential for use in public health in the prevention and treatment of different diseases. Worldwide, the blood products market is leading and competitive. IgG is the blood product of greatest interest and accounts for most of the world market, however IgM has also become a target of interest, due to the efficiency of the pentamer form contributing with more benefits compared to IgG. In this project, the main objective was to separate the fractions containing IgG and IgM immunoglobulins from human plasma using liquid chromatography. In the first stage, the ANX Sepharose FF anion exchange resin was used, in which 98 % of the proteins present in human plasma were collected in the FT, and this fraction was applied to the second anion column in Q Sepharose FF, using a gradient of pH and saline. It was possible to obtain IgG in the FT, albumin in pH 5.5 and IgM in pH 4.5. The 3 fractions obtained require additional purification steps to obtain the final product.

Os derivados do plasma humano são indispensáveis para utilização no âmbito da saúde pública na prevenção e tratamento de distintas doenças. Mundialmente o mercado de hemoderivados são liderados e competitivos. A IgG é o hemoderivado de maior interesse e corresponde a maior parte do mercado mundial, entretanto a IgM também se tornou alvo de interesse, devido a eficiência da forma pentâmera contribuir com mais benefícios em relação a IgG. Neste projeto, o objetivo principal foi separar as frações contendo as imunoglobulinas IgG e IgM de plasma humano empregando cromatografia líquida. Na primeira etapa utilizou-se a resina de troca aniônica ANX Sepharose FF em que 98 % das proteínas presentes no plasma humano foram recolhidas no FT, e esta fração foi aplicada na segunda coluna aniônica em Q Sepharose FF empregando um gradiente de pH e salina. Foi possível obter IgG no FT, albumina em pH 5,5 e IgM em pH 4,5. As 3 frações obtidas requerem etapas adicionais de purificação para se obter o produto final.

Purificação da imunoglobulina M a partir da utilização de frações do plasma humano empregando técnicas de cromatografia líquida

Immunoglobulin M (IgM) is a pentamer of approximately 950kDa, consisting of two heavy chains of 75kDa each, two light chains of 25kDa and a J chain of 15kDa. IgM is a promising therapeutic candidate due to increasing evidence suggesting its potential as a tumor marker, anti-inflammatory and immunomodulatory activities. In order to exploit its full potential, it is important that large amounts of IgM are available at low cost. In this work, two purification steps that were already being developed by the laboratory were explored. Purification by metal affinity chromatography (IMAC) and cation exchange of the pool from plasma purification on Sepharose 4FF followed by ANX Sepharose FF was evaluated. In IMAC, the purification was evaluated at pHs 5.0, 6.0 and 7.0 and the results indicate that with pH 6.0 in IMAC-Co2+ we obtained IgM with better recovery and greater purity. By varying the NaCl concentration in the equilibrium buffer between 250mM and 500mM, we found that IgM was obtained with greater purity in the purification in which 250mM NaCl was used in the equilibrium buffer. Using the cation exchange column, the results obtained were not satisfactory. The purity of IgM, calculated by the ImageJ program, was approximately 75%. To increase the purity of IgM, purification on the Superdex 200 gel filtration column will be evaluated.

A imunoglobulina M é um pentâmero de aproximadamente 950kDa, sendo composto por duas cadeias pesadas de 75kDa cada, duas cadeias leves de 25kDa e uma cadeia J de 15kDa. IgM é um candidato terapêutico promissor devido ao aumento de evidências que sugerem seu potencial de marcador tumoral, atividades anti-inflamatória e imunomoduladoras. Com o intuito de que todo seu potencial seja explorado, é importante que grandes quantidades de IgM estejam disponíveis a baixo custo. Nesse trabalho foram exploradas duas etapas de purificação que já estavam sendo desenvolvida pelo laboratório. Aplicou-se cromatografia de afinidade ao metal (IMAC) na fração 350mM proveniente da ANX Sepharose FF, com o intuito de obter IgM com alto grau de pureza. Foi observado que a melhor faixa de trabalho foi em pH 6,0 utilizando como metal imobilizado o cobalto e solução contendo NaCl 250mM. Como segunda estratégia, aplicou-se cromatografia de troca catiônica na fração 350mM diluído 10 vezes com água purificada e ao contrário da IMAC, não obtivemos resultados satisfatórios em relação a pureza de IgM. Apesar dos resultados alcançados, ainda é necessário o desenvolvimento de novas estratégias e estudos para o aumento de IgM, a fim de se obter uma imunoglobulina mais pura para possível uso terapêutico.

Research on the application of sport dance in colleges and universities in the healthy development of sports / Pesquisa sobre a aplicação da dança esportiva nas universidades no desenvolvimento saudável dos esportes / Estudio sobre la aplicación de la danza deportiva en las universidades en el desarrollo saludable de los deportes

ABSTRACT Introduction: Immunity is closely related to health. When the body's immunity is strong, it is healthy. On the contrary, various diseases appear. Sports dance is an entertainment and fitness sports project that integrates sports, music, aesthetics, and dance, the body movement dance as the necessary content and two-person or collective exercises as the primary form of exercise. Studies have shown that long-term adherence to Tai Chi exercise can significantly increase the serum immunoglobulin IgA, IgG, and IgM levels. Objective: The paper explores the effect of physical dance exercise on serum immunoglobulin and T lymphocyte subsets of college students. Methods: The thesis randomly selected 16 male and female students in the first-grade physical dance optional course of public physical education as the experimental group. They performed physical dance exercises three times a week, 40 minutes each time, and the training intensity was controlled at a heart rate of 135-150 beats/min. Ten weeks; besides, 16 male and female students in the first grade were selected as the control group, and no physical dance exercise was performed; all the subjects were drawn from the elbow venous blood on an empty stomach at the same time before and after the experiment to measure serum immunoglobulin and T lymph Cell subpopulation content. Results: After ten weeks of sports dance training, the serum immunoglobulin IgG of both men and women in the experimental group increased significantly (P<0.01), and the CD4+% and CD4+/CD8+ ratio of T lymphocyte subgroups showed extremely significant and significant increases (P <0.01, P<0.05), serum IgM tended to increase, IgA, CD8+% tended to decrease, but there was no significant change. Conclusions: Long-term physical dance exercise can improve the body's immune function. Level of evidence II; Therapeutic studies - investigation of treatment results.

RESUMO Introdução: la inmunidad está estrechamente relacionado con la salud. Cuando la inmunidad del cuerpo es fuerte éste está sano. En caso contrario, aparecen diversas enfermedades. La danza deportiva é um projeto de entretenimiento y fitness que integra el deporte, la música, la estética y la danza, el movimiento corporal como contenido necesario y los ejercicios de das personas ou colectivos como forma principal de ejercicio. Los estudios han demonstraram que a adesão a largo plazo al ejercicio de Tai Chi pode aumentar também os niveles séricos de imunoglobulina IgA, IgG e IgM. Objetivo: O artigo explora o efeito do exercício físico de danza em subconjuntos de imunoglobulina sérica e linfocitos T de estudiantes universitários. Métodos: Para que a tese seja selecionada aleatoriamente, 16 ex-alunos e ex-alunos do curso optativo de danza física de primer grado de educação física pública como grupo experimental. Realizaron ejercicios de danza física tres veces por semana, 40 minutes cada vez, y la intensidad del entrenamiento se controló a una frecuencia cardíaca de 135-150 latidos/min. durante as semanas; además, se selecionar 16 alumnos y alumnas de primer grado como group de control, el que no realizó ningún ejercicio físico de danza. A todos os sujetos se les extrajo sangre venosa del codo com o estómago vacío, durante, antes e depois do experimento para medir o conteúdo da subpoblación de células T y de imunoglobulina sérica. Resultados: Después de diez semanas de entrenamiento de danza deportiva, la imunoglobulina IgG sérica de hombres y mujeres en el grupo experimental aumentó complementar (P <0,01), y la proporción CD4 +% y CD4 +/CD8 + de los subgrupos de linfocitos T mostró incrementos extremadamente provados. (P <0,01,P <0,05), la IgM sérica tendió a aumentar, la IgA, CD8 +% tendió a disminuir, mas nenhum hubo cambio projetado. Conclusiones: El ejercicio de danza física a largo plazo puede mejorar la función inmunológica del cuerpo. Nivel de evidencia II; Estudios terapéuticos: investigación de los results del tratamiento.

RESUMEN Introducción: la inmunidad está estrechamente relacionada con la salud. Cuando la inmunidad del cuerpo es fuerte éste está sano. En caso contrario, aparecen diversas enfermedades. La danza deportiva es un proyecto de entretenimiento y fitness que integra el deporte, la música, la estética y la danza, el movimiento corporal como contenido necesario y los ejercicios de dos personas o colectivos como forma principal de ejercicio. Los estudios han demostrado que la adherencia a largo plazo al ejercicio de Tai Chi puede aumentar significativamente los niveles séricos de inmunoglobulina IgA, IgG e IgM. Objetivo: El artículo explora el efecto del ejercicio físico de danza en subconjuntos de inmunoglobulina sérica y linfocitos T de estudiantes universitarios. Métodos: Para la tesis se seleccionaron aleatoriamente a 16 alumnos y alumnas del curso optativo de danza física de primer grado de educación física pública como grupo experimental. Realizaron ejercicios de danza física tres veces por semana, 40 minutos cada vez, y la intensidad del entrenamiento se controló a una frecuencia cardíaca de 135-150 latidos/min. durante diez semanas; además, se seleccionaron 16 alumnos y alumnas de primer grado como grupo de control, el que no realizó ningún ejercicio físico de danza. A todos los sujetos se les extrajo sangre venosa del codo con el estómago vacío, durante, antes y después del experimento para medir el contenido de la subpoblación de células T y de inmunoglobulina sérica. Resultados: Después de diez semanas de entrenamiento de danza deportiva, la inmunoglobulina IgG sérica de hombres y mujeres en el grupo experimental aumentó significativamente (P <0.01), y la proporción CD4 +% y CD4 + / CD8 + de los subgrupos de linfocitos T mostró incrementos extremadamente significativos. (P <0.01, P <0.05), la IgM sérica tendió a aumentar, la IgA, CD8 +% tendió a disminuir, pero no hubo cambios significativos. Conclusiones: El ejercicio de danza física a largo plazo puede mejorar la función inmunológica del cuerpo. Nivel de evidencia II; Estudios terapéuticos: investigación de los resultados del tratamiento.

Caracterización del perfil de reordenamientos génicos de inmunoglobulinas y receptores de linfocitos T en leucemia linfoblástica aguda pediátrica / Pattern of immunoglobulins and T lymphocyte receptor gene rearrangements in childhood acute lymphoblastic leukemia / Caracterização do perfil de rearranjos gênicos de imunoglobulinas e receptores de linfócitos T na leucemia linfoide aguda pediátrica

Resumen Durante la ontogenia linfocitaria se produce el reordenamiento de los segmentos génicos V-(D)-J que codifican para la región variable de las cadenas de inmunoglobulinas (Ig) y receptores de linfocitos T (TCR). Durante este proceso, los segmentos se reordenan al azar y ocurren deleciones e inserciones de nucleótidos en la región de unión entre ellos. Los objetivos del presente trabajo fueron describir las incidencias de los reordenamientos Ig/TCR y de los segmentos V-(D)-J involucrados, en niños con leucemia linfoblástica aguda (LLA). Para ello se estudiaron 769 pacientes pediátricos con LLA, diagnosticados entre 1999 y 2018 por los centros de la Sociedad Argentina de Hemato-Oncología Pediátrica. Se caracterizaron reordenamientos de Ig/TCR mediante PCR-multiplex y secuenciación para la búsqueda de recombinaciones génicas IGH, IGK, TCRB, TCRG y TCRD, en muestras de ADN obtenidas de médula ósea o sangre periférica al diagnóstico. El 95% (n=730) de los casos presentaron reordenamientos Ig/TCR. En el 68% de los casos se caracterizaron recombinaciones génicas IGH, en 43% IGK, en 25% TCRB, en 49% TCRG y en el 55% TCRD. Se caracterizó un total de 2506 reordenamientos de Ig/TCR que correspondían 1161 a inmunoglobulinas y 1345 a TCR. En la mayoría de los casos los reordenamientos de IGH fueron completos, IGK involucró a IGKde, TRCB se reordenó frecuentemente con el segmento Jb2, TCRG involucró preferentemente a Vg9 y los TCRD fueron principalmente reordenamientos incompletos. Este trabajo constituye el primer estudio realizado en la Argentina sobre la caracterización de reordenamientos Ig/TCR en un número muy significativo de pacientes con LLA pediátrica.

Abstract During lymphocyte ontogeny, the variable region of immunoglobulin (Ig) and T-cell receptor (TCR) is generated by rearrangements of the V-(D)-J gene segments. In this random process, nucleotide deletions and insertions occur between V-(D)-J segments. The aims of this work were to describe the incidence of Ig/TCR rearrangements, and the V-(D)-J segments involved in acute lymphoblastic leukemia (ALL) patients. With this purpose, 769 pediatric ALL patients belonging to Sociedad Argentina de Hemato-Oncología Pediátrica, diagnosed between 1999 and 2018, were studied. Ig/TCR rearrangements were characterized by multiplex PCR and sequencing to evaluate IGH, IGK, TCRB, TCRG and TCRD rearrangements in DNA samples obtained at diagnosis from bone marrow or peripheral blood. In total, 95% (n=730) of patients disclosed Ig/TCR rearrangements. IGH rearrangements were detected in 68% of cases; in 43% IGK, in 25% TCRB, in 49% TCRG and in 55% of cases, TCRD. A total of 2506 Ig/TCR rearrangements were characterized, being 1161 immunoglobulins and 1345 TCR. In most cases, IGH rearrangements were complete, IGK involved IGKde, TRCB was frequently rearranged with the Jb2 segment, TCRG preferentially involved Vg9, and TCRDs were mostly incomplete rearrangements. This work is the first study of Ig/TCR rearrangements characterization in a very significant number of childhood ALL carried out in Argentina.

Resumo Durante a ontogenia dos linfócitos, ocorre um rearranjo dos segmentos gênicos V-(D)-J que codificam para a região variável das cadeias de imunoglobulinas (Ig) e receptores de linfócitos T (TCR). Durante esse processo, os segmentos reorganizam-se aleatoriamente e exclusões e inserções de nucleotídeos ocorrem na região da união entre eles. Os objetivos do presente trabalho foram descrever as incidências dos rearranjos Ig/TCR e dos segmentos V-(D)-J envolvidos, em crianças com leucemia linfoide aguda (LLA). Para tanto, foram estudados 769 pacientes pediátricos com LLA, diagnosticados entre 1999 e 2018 pelos centros da Sociedade Argentina de Hemato-Oncologia Pediátrica. Rearranjos de Ig/TCR foram caracterizados através de PCR-multiplex e sequenciação para procurar recombinações gênicas IGH, IGK, TCRB, TCRG e TCRD em amostras de DNA obtidas da medula óssea ou sangue periférico no diagnóstico. Do total de pacientes estudados, 95% (n=730) apresentaram rearranjos de Ig/TCR. Os rearranjos gênicos IGH foram caracterizados em 68% dos casos, em 43% de IGK, em 25% de TCRB, em 49% de TCRG e em 55% de TCRD. Foi caracterizado um total de 2506 rearranjos de Ig/TCR, correspondendo 1161 a imunoglobulinas e 1345 a TCR. Na maioria dos casos, os rearranjos de IGH foram concluídos, o IGK envolveu o IGKde, o TRCB foi frequentemente rearranjado com o segmento Jb2, o TCRG preferencialmente envolveu o Vg9 e os TCRDs foram principalmente os rearranjos incompletos. Este trabalho constitui o primeiro estudo realizado na Argentina sobre a caracterização de rearranjos de Ig/TCR em um número muito significativo de pacientes com LLA pediátrica.

Diagnóstico de Covid-19 em gestante de 31 semanas e trasmissão de anticorpos para neonato / Covid-19 diagnosis in 31 weeks pregnant woman and antibodies transmission to newborn

As repercussões da infecção pelo SARS-CoV-2 - síndrome respiratória aguda grave coronavírus 2 em gestantes e recém-nascidos ainda não são bem conhecidas e as alterações fisiológicas e na imunidade mediada por células aumentam a suscetibilidade à infecção. É relatado caso de paciente de 27 anos, com idade gestacional de 31 semanas, teve quadro de irritação na garganta e contato indireto com indivíduo positivo para Covid-19. Negou odinofagia, febre, mal-estar e outros sintomas. Oroscopia sem anormalidades. Após cinco dias, evoluiu com tosse seca e ageusia, sem alteração na ausculta pulmonar e teste para Covid-19 positivo. Foi prescrito hidroxicloroquina, azitromicina e paracetamol. Evoluiu bem e a gestação se manteve saudável. O parto por cesárea ocorreu às 38 semanas e 4 dias gestação, sem intercorrências, apresentando o recém-nascido boa vitalidade e peso adequado. Coletou-se a sorologia (IgG e IgM) para Covid-19 no neonato, sendo o IgG reagente

The repercussions of SARS-CoV-2 infection - severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 in pregnant women and newborns are still not well known and the physiological changes and cell-mediated immunity increase susceptibility to infection. A case of a 27-year-old patient, with a gestational age of 31 weeks, who had irritation in the throat and indirect contact with a positive individual for Covid-19 is reported. She denied odynophagia, fever, malaise and other symptoms. Oroscopy without abnormalities. After five days, she developed a dry cough and ageusia, with no change in pulmonary auscultation and a positive Covid-19 test. Hydroxychloroquine, azithromycin and paracetamol were prescribed. She evolved well and the pregnancy remained healthy. Cesarean delivery took place at 38 weeks and 4 days of gestation, with no complications, with the newborn having good vitality and adequate weight. Serology (IgG and IgM) was collected for Covid-19 in the neonate, with IgG being reagent

Prednisolone associated with doxycycline on the hematological parameters and serum proteinogram of dogs with ehrlichiosis / Efeitos da influência da prednisolona associada à doxiciclina nos parâmetros hematológicos e proteinograma sérico de cães com erliquiose

ABSTRACT: The objective of the present study was to assess the treatment of dogs with ehrlichiosis (tropical canine pancytopenia (TCP)) with doxycycline hydrochloride associated or not with prednisolone on the hematological profile and serum proteins. Ten dogs with TCP were selected in the Small Animal Medical Clinic Veterinary Hospital, Federal University of Campina Grande-UFCG-PB, Brazil. The diagnosis was obtained by clinical examination, hemogram and immunochromatographic test (with anti Ehrlichia canis antibodies). Samples were distributed randomly in two experimental groups of five animals each (n = 5), named GD and GDP. The GD group was treated with doxycycline (5 mg/kg, VO, BID for 28 days) and the GDP group was treated with doxycycline at the same dose and duration and prednisolone (2 mg/kg, VO, BID, for five days). Four blood collections were made during the treatment period: a base collection (M0), one at 10 days (M10), a second at 21 days (M21) and another at the end of the treatment (M28). These samples were used for the tests erythrogram, leucogram, plateletgram and proteinogram (dose of total proteins, pre-albumin, albumin, albumin, α-1 globulin, α-2 globulin, ß-globulin, ɣ-globulin and C- reactive protein) in the Clinical Pathology Laboratory, Veterinary Hospital-UFCG-PB. Results, that presented normal distribution, was submitted to the Tukey test (P<0.05). Comparison of treatments GD and GDP showed that both promoted discreet and similar response in the hematological parameters at different times. Results obtained allowed the conclusion that both therapeutic protocols resulted in clinical, hematological parameter and proteinogram improvement, but the use of prednisolone at the dose administered during the first five days of treatment did not show more beneficial effects than isolated administration of doxycycline.

RESUMO: Objetivou-se com este estudo avaliar os efeitos do tratamento de cães com erliquiose monocítica canina (EMC) com cloridrato de doxiciclina associada ou não à prednisolona sobre o perfil hematológico e de proteínas séricas. Foram selecionados, na Clínica Médica de Pequenos Animais do Hospital Veterinário da Universidade Federal de Campina Grande (UFCG), 10 cães com EMC. O diagnóstico foi obtido através de exame clínico, hemograma e teste de imunoensaio imunocromatográfico (com anticorpos anti Ehrlichia canis). As amostras foram distribuídas aleatoriamente em dois grupos experimentais, com cinco animais cada (n=5), denominados GD e GDP. O grupo GD foi tratado com doxiciclina (5 mg/kg, VO, BID durante 28 dias) e o grupo GDP, tratado com doxiciclina na mesma dose e duração e prednisolona (2 mg/kg, VO, BID, durante 5 dias). Durante o período de tratamento, foram realizadas quatro coletas de sangue; uma coleta basal (M0), uma com 10 dias (M10), uma aos 21 dias (M21) e outra ao final do tratamento (M28). Dessas amostras foram realizados eritrograma, leucograma, plaquetograma e proteinograma (dosagem de proteínas totais, pré-albumina, albumina, α-1 globulina, α-2 globulina, ß-globulina, ɣ-globulina e proteína C-reativa) no Laboratório de Patologia Clínica do Hospital Veterinário da UFCG. Os resultados que apresentaram distribuição normal foram submetidos ao teste de Tukey (P<0,05). Ao comparar os tratamentos GD e GDP, observou-se que os dois promoveram resposta discreta e semelhante dos parâmetros hematológicos nos diferentes momentos. Os resultados obtidos permitem concluir que ambos os protocolos terapêuticos resultaram em melhora clínica e dos parâmetros hematológicos e do proteinograma. Porém, o uso da prednisolona na dose empregada durante os primeiros cinco dias de tratamento não demonstrou efeitos mais benéficos do que a administração isolada da doxiciclina.

Infecção por SARS-CoV-2 em paciente com agamaglobulinemia ligada ao X tratado com altas doses de imunoglobulina endovenosa e plasma de convalescente / SARS-CoV-2 infection in a patient with X-linked agammaglobulinemia treated with high doses of intravenous immunoglobulin and convalescent plasma

A pandemia pelo vírus SARS-CoV-2 atingiu adultos, crianças e penalizou indivíduos idosos e com comorbidades como diabetes, doença cardíaca, hipertensão e obesidade. A maioria dos infectados são assintomáticos ou têm sintomas leves, entretanto 15% podem apresentar pneumonia e 5% síndrome respiratória aguda grave. Apresentamos um caso de agamaglobulinemia ligada ao X (XLA) em paciente masculino de 27 anos que se infectou com SARS-CoV-2. Os pacientes com XLA não possuem linfócitos B e não produzem anticorpos devido a uma mutação no gene Bruton tirosino-quinase (BTK), responsável pela maturação dos linfócitos B. Ele infectou-se e foi internado em hospital de Ivoti/RS. A evolução da pneumonia foi rápida, necessitando transferência para o Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA) no 10° dia de evolução. Iniciou com infusão de imunoglobulinas, tendo utilizado o total de 400 gramas devido ao intenso catabolismo da IgG, mantendo-se sua concentração entre 700-900 mg/dL. Necessitou de ventilação mecânica, oxigenação por membrana extracorpórea (ECMO) e hemodiálise. Foi administrado plasma de convalescente (PC), 300 mL, por duas vezes, com melhora clínico-radiológica e retirada da ventilação mecânica. Piorou e repetiu outras 4 infusões de PC (total de 1717 mL), negativando o vírus na orofaringe (RT-PCR). Em 3 ocasiões teve sepse, debelada rapidamente. Apresentou anemia, com necessidade de transfusão frequente. Identificou-se linfopenia de CD3, CD4, CD8, NK e ausência de linfócitos B. A linfopenia foi revertida com a recuperação clínica e a alta hospitalar aconteceu no 70° dia de internação.

The SARS-CoV-2 pandemic has affected adults and children and penalized older people and those with comorbidities such as diabetes, heart disease, hypertension and obesity. Most of those infected are asymptomatic or have mild symptoms, but 15% may have pneumonia and 5% acute respiratory distress syndrome. We report a case of X-linked agammaglobulinemia (XLA) in a 27-yearold man who was infected with SARS-CoV-2. XLA patients do not have B lymphocytes and do not produce antibodies because of mutations in the Bruton tyrosine-kinase gene, responsible for the maturation of B cells. This patient was infected and then admitted to a hospital in Ivoti, southern Brazil. Pneumonia progressed rapidly, requiring transfer to the Hospital de Clínicas de Porto Alegre on the 10th day. Intravenous immunoglobulin infusions were initiated, using a total of 400 grams because of an intense catabolism of IgG, and the concentration was kept around 700- 900 mg/dL. Mechanical ventilation, extracorporeal membrane oxygenation and hemodialysis were necessary. Convalescent plasma (CP) was administered (2x300 mL) and then followed by clinical and radiological improvement and interruption of mechanical ventilation. Then he got sicker and had to return to invasive support and received 4 extra CP infusions (total of 1717 mL), until a negative reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) for SARS-CoV-2 was obtained. On 3 occasions he had sepsis, promptly managed. He had anemia, requiring frequent transfusion, and lymphopenia (CD3, CD4, CD8, NK), with absence of B lymphocytes. Lymphopenia was reverted during recovery, and he was discharged from the hospital on the 70th day.

The occurrence of diseases and their relationship with passive immune transfer in Holstein dairy calves submitted to individual management in southern Brazil / Ocorrência de doenças e sua relação com a transferência de imunidade passiva em bezerras Holandês criadas em sistema individual no sul do Brasil

Calves are extremely dependent on colostrum intake for the acquisition of passive immunity. This study aimed to determine the occurrence of diarrhea and respiratory diseases and the impact of Failure of Passive Immune Transfer (FPIT) on the health and zootechnical performance of Holstein dairy calves in individual management. This study has been carried out in five commercial farms in Rio Grande do Sul State, Brazil, from March 2017 to January 2018. In this study, 131 calves were followed from birth to 60 days of age. Total Plasmatic Protein (TPP) has been performed to determine passive immune transfer quality in 53 calves (53/131). A daily clinical follow-up has been accomplished aiming at diagnosing diseases and their incidences, and zootechnical measures such as withers height, width of the croup and weight have been evaluated. FPIT rate was 32.07%, diarrhea occurrence and respiratory diseases were 77.9% and 49.6%, respectively. FPIT increased the chances of calves presenting diarrhea and developing respiratory diseases, but no differences on zootechnical performance were found. The frequency of FPIT is still high and is a factor that corroborated the increased risk for diarrhea and respiratory disease but did not influence the performance of calves in the preweaning phase.(AU)

Bezerras são extremamente dependentes da ingestão de colostro para adquirir imunidade passiva. Este estudo teve o objetivo de determinar os índices de ocorrência de diarreia e de doença respiratória, assim como o impacto da falha na transferência de imunidade passiva (FTIP) no desenvolvimento de doenças e no desempenho zootécnico de bezerras Holandês criadas em sistema individual. O estudo foi desenvolvido em cinco propriedades comerciais no Rio Grande do Sul, Brasil, entre março de 2017 e janeiro de 2018. Assim, 131 bezerras foram acompanhadas, do nascimento aos 60 dias de idade. Em 53 animais, foi realizada avaliação de proteínas plasmáticas totais para determinar a qualidade na transferência de imunidade passiva. Acompanhamento clínico diário foi realizado, a fim de diagnosticar doenças e suas incidências, assim como avaliações zootécnicas, como altura de cernelha, largura de garupa, perímetro torácico e peso. O percentual de FTIP foi 32,07%, a ocorrência de diarreias e de doenças respiratórias foi, respectivamente, 77,9% e 49,6%. A FTIP aumentou as chances de as bezerras apresentarem diarreia e doenças respiratórias, mas não alterou o desempenho zootécnico. Conclui-se que a frequência na FTIP ainda é elevada, fator que corroborou o aumento do risco para as diarreias e doença respiratória. Apesar disso, a FTIP não influenciou no desenvolvimento das bezerras na fase de aleitamento.(AU)

Secondary hemophagocytic syndrome after renal transplantation: two case-reports / Síndrome hemofagocítica secundária após transplante renal: a propósito de dois casos

ABSTRACT Hemophagocytic syndrome or hemophagocytic lymphohistiocytosis (HLH) is an infrequent and underdiagnosed condition caused by an overactive immune response, resulting in blood cells phagocytosis. After kidney transplantation (KTx), HLH is usually secondary (or reactive) to infectious and neoplastic processes and has a high mortality rate. No effective treatment is available for this condition. Usual procedures include detecting and treating the pathology triggering the immune system dysregulation, other than administration of intravenous human immunoglobulin (IVIG) and high doses of steroids, and plasmapheresis. The best protocol for maintenance immunosuppressive therapy is also unknown. This article presents two cases of post-KTx reactive HLH that underwent adjuvant IVIG treatment and obtained good clinical results. Despite the high morbidity and mortality associated with reactive HLH after KTx, the early and precise diagnosis and the administration of IVIG therapy along with the treatment of the triggering disease, was an effective strategy to control HLH.

RESUMO A síndrome hemofagocítica (SHF) ou linfo-histiocitose hemofagocítica é uma condição infrequente e subdiagnosticada que tem por base a ativação excessiva da resposta imune, resultando em fagocitose das células do sangue. Após o transplante renal (TxR), a SHF é habitualmente secundária (ou reativa) a processos infecciosos e neoplásicos, culminando em elevadas taxas de mortalidade. Não há evidências quanto ao tratamento ideal dessa condição. Além de investigação e tratamento da patologia desencadeante do processo de desregulação do sistema imune, há descrições do uso de imunoglobulina humana (IVIG), esteroides em altas doses e plasmaférese. Não há evidências quanto à melhor forma de delinear a imunossupressão de manutenção. Este artigo apresenta dois casos de SHF reativa pós-TxR que realizaram tratamento adjuvante com IVIG, obtendo bons resultados clínicos. Apesar da elevada morbimortalidade associada à SHF reativa após o TxR, o diagnóstico ágil e preciso, associado à instituição de terapia com IVIG adjuvante ao tratamento da doença desencadeante, foi uma estratégia eficaz em conter o processo.

Análise clínico-epidemiológica dos atendimentos em um centro de referência em imunobiológicos especiais na amazônia / Análisis clínico-epidemiológico de la atención en un centro de referencia em inmunobiológicos especiales em la amazonia / Clinical-epidemiological analysis of the care services at a special immunobiological reference center in the amazon

RESUMO Objetivo: descrever o perfil clínico-epidemiológico do atendimento no Centro de Referência em Imunobiológicos Especiais de Hospital na Amazônia. Método: descritivo de abordagem quantitativa e analisado por meio da estatística descritiva e inferencial. O Sistema de Informação do Centro de Referência para Imunobiológicos Especiais (antigo) e Sistema de Informação do Programa Nacional de Imunização (atual) foram as bases utilizadas, entre 2006 e 2016. Resultados: foram administradas 77.077 doses de imunobiológicos; 25,2% corresponderam à vacina influenza inativada; insuficiência renal crônica foi a principal indicação (19%). O sistema atual registrou 18.267 doses de imunobiológicos administrados entre os anos de 2014 a 2016; sendo 37,8% correspondente à vacina influenza inativada; não foram informadas 42,5% das indicações, sendo HIV/AIDS 18,2%. Infectologia foi a especialidade que mais encaminhou para vacinação (18,3%). Conclusão: a acurácia dos dados foi comprometida pela falta de completude nos sistemas de informação. Observou-se subutilização do serviço pela população local.

RESUMEN: Objetivo: describir el perfil clínico-epidemiológico de la atención brindada por el Centro de Referencia para Inmunobiológicos Especiales de un Hospital de la Amazonía. Método: descriptivo con enfoque cuantitativo y analizado mediante estadística descriptiva e inferencial. El Sistema de Información del Centro de Referencia para Inmunobiológicos Especiales (antiguo) y el Sistema de Información del Programa Nacional de Inmunización (actual) se utilizaron como base de datos entre 2006 y 2016. Resultados: se administraron 77,077 dosis de inmunobiológicos; el 25,2% correspondió a la vacuna inactivada contra la influenza; La insuficiencia renal crónica fue la indicación principal (19%). El sistema actual registró 18.267 dosis de inmunobiológicos administradas entre los años 2014 y 2016; siendo que el 37,8% correspondió a la vacuna inactivada contra la influenza; El 42,5% de las indicaciones no fueron informadas, y el porcentaje informado de VIH / SIDA fue de 18,2%. La especialidad que más derivaciones realizó para vacunación fue la de infectología (18,3%). Conclusión: la precisión de los datos se vio comprometida por la falta de integridad en los sistemas de información. Se observó la subutilización del servicio por la población local.

ABSTRACT Objective: to describe the clinical-epidemiological profile of the care service at the Reference Center for Special Immunobiologicals of Hospital in the Amazon. Method: a descriptive study, of a quantitative approach and analyzed by means of the descriptive and inferential statistics. The Information System of the Reference Center for Special Immunobiologicals (former) and the Information System of the National Immunization Program (current) were the databases used, between 2006 and 2016. Results: 77,077 doses of immunobiological vaccines were administered; 25.2% corresponded to the inactivated influenza vaccine; chronic renal failure was the main indication (19%). The current system recorded 18,267 doses of immunobiological vaccines administered between the years 2014 to 2016; 37.8% of which were inactivated influenza vaccines; 42.5% of the indications were not reported, with HIV/AIDS being 18.2%. Infectologia foi a especialidade que mais encaminhou para vacinação (18,3%). Conclusion: the data accuracy has been compromised by the incompleteness in the information systems. We observed underutilization of the service by the local population.

Transfusion-related acute lung injury associated to intravenous immunoglobulin infusion in a pediatric patient / Lesão pulmonar aguda relacionada à transfusão associada com infusão de imunoglobulina intravenosa em paciente pediátrico

ABSTRACT Case report of a patient with an immunodeficiency who demands regular replacement of intravenous immunoglobulin. She presented an episode of transfusion-related acute lung injury shortly after using an immunoglobulin product different than the one she usually received. The patient evolved with respiratory changes (hypoxia, dyspnea, change in pulmonary auscultation) minutes after the end of the infusion, and received non-invasive respiratory support. She was discharged after 36 hours with good outcome. The patient achieved full recovery, showing no further reactions in subsequent immunoglobulin infusions (no longer receiving the product that was used when she had the episode of transfusion-related acute lung injury). Although rare, this reaction is potentially serious and has no specific treatment other than supportive therapy. The literature is scarce regarding the risk of recurrence. The decision on whether to proceed with immunoglobulin therapy after this adverse effect should be analyzed individually, assessing the possible risks and benefits for the patient.

RESUMO Relato de caso de paciente com imunodeficiência que necessitava de reposição regular de imunoglobulina endovenosa. Ela apresentou um episódio de lesão pulmonar aguda relacionada à transfusão após uso de produto de imunoglobulina diferente daquele que recebia habitualmente. Evoluiu com alterações respiratórias (hipóxia, dispneia e alteração de ausculta pulmonar) minutos após o fim da infusão, necessitando de suporte respiratório não invasivo. A paciente recebeu alta hospitalar após 36 horas, com boa evolução. Obteve recuperação total dos sintomas, sem mais reações nas infusões subsequentes de imunoglobulina (sendo optado por não mais prescrever o produto que foi usado quando ocorreu o episódio de lesão pulmonar aguda relacionada à transfusão). Apesar de rara, essa reação é potencialmente grave, não possui tratamento específico além de terapia de suporte, e há pouca informação na literatura sobre o risco de recorrência. A decisão sobre o seguimento da terapia com imunoglobulina após esse efeito adverso deve ser analisada individualmente, avaliando os possíveis riscos e benefícios para o paciente.

Evaluation of the performance of three serological tests for diagnosis of Leishmania infantum infection in dogs using latent class analysis / Avaliação da realização de três testes sorológicos para diagnóstico de infecção por Leishmania infantum em cães utilizando análise de classe latente

Abstract Canine leishmaniasis (CanL) is a disease caused by Leishmania infantum. Serological methods are the most common diagnostic techniques used for the diagnosis of the CanL. The objective of our study was to estimate the sensitivity and specificity of one in-house ELISA kit (ELISA UNIZAR) and three commercially available serological tests (MEGACOR Diagnostik GmbH) including an immunochromatographic rapid test (FASTest LEISH®), an immunofluorescent antibody test (MegaFLUO LEISH®) and an enzyme-linked immunosorbent assay (MegaELISA LEISH®), using latent class models in a Bayesian analysis. Two hundred fifteen serum samples were included. The highest sensitivity was achieved for FASTest LEISH® (99.38%), ELISA UNIZAR (99.37%), MegaFLUO LEISH® (99.36%) followed by MegaELISA LEISH® (98.49%). The best specificity was obtained by FASTest LEISH® (98.43%), followed by ELISA UNIZAR (97.50%), whilst MegaFLUO LEISH® and MegaELISA LEISH® obtained the lower specificity (91.94% and 91.93%, respectively). The results of present study indicate that the immunochromatographic rapid test evaluated FASTest LEISH® show similar levels of sensitivity and specificity to the quantitative commercial tests. Among quantitative serological tests, sensitivity and specificity were similar considering ELISA or IFAT techniques.

Resumo A leishmaniose canina (Lcan) é uma causada pela Leishmania infantum. Os métodos sorológicos são as técnicas diagnósticas mais utilizadas para o diagnóstico da leishmaniose canina. O objetivo do nosso estudo foi estimar a sensibilidade e a especificidade de um kit ELISA interno (ELISA UNIZAR) e de três testes sorológicos disponíveis comercialmente, feitos pelo mesmo fabricante (MEGACOR Diagnostik GmbH), incluindo um teste rápido imunocromatográfico (FASTest LEISH®), um teste de anticorpos imunofluorescentes (Megafluo LEISH®) e um ensaio de imunoabsorção enzimática (Megaelisa LEISH®), utilizando-se modelos de classe latentes numa análise bayesiana. Foram incluídas duzentas e quinze amostras de soro. A maior sensibilidade foi alcançada para Fastest LEISH® (99,38%), ELISA UNIZAR (99,37%), Megafluo LEISH® (99,36%) seguida por Megaelisa LEISH® (98,49%). A melhor especificidade foi obtida por FASTest LEISH® (98,43%), seguida por ELISA UNIZAR (97,50%), enquanto Megafluo LEISH® e Megaelisa LEISH® obtiveram a menor especificidade (91,94% e 91,93%, respectivamente). Os resultados do presente estudo indicam que o teste rápido imunocromatográfico, avaliado por FASTest LEISH® mostra níveis similares de sensibilidade e especificidade aos testes comerciais quantitativos incluídos. Entre os testes sorológicos quantitativos, a sensibilidade e a especificidade foram semelhantes, considerando-se as técnicas de ELISA ou IFI.

Purificação de IgM do plasma humano empregado cromatografia líquida

Immunoglobulin M (IgM) is a pentameter of approximately 950 kDa and Each subunit is composed of two heavy chains of about 65 kDa, two light chains of 25 kDa and one J or junction chain, with a molecular weight of about 15 kDa. IgM is a promising therapeutic candidate. In the world the first human IgM-enriched immunoglobulin is Pentaglobin ® , it is superior to normal IgG preparations in eliminating infectious pathogens and neutralizing their endoexotoxins. In this work we purified IgM from human plasma with a Sepharose 4FF size exclusion column and modified the cut defined in previous experiments of fraction 2 (IgM enriched fraction), aiming at higher purity and elimination of contaminating proteins, we applied the fraction in the anionic exchange column ANX Sepharose FF and in the affinity column IMAC Co2+. Objectives: To verify the IgM purification strategy using the filtration gel columns, followed by ion exchange and metal affinity chromatography after modifying the location of the cut of the filtration gel column fraction and analyze IgM yield after this modification. Materials and Methods: Plasma was applied directly to the Sepharose 4FF filtration gel column. The IgM rich fraction was subsequently applied to the ANX Sepharose FF anion exchange column, the fraction with the highest IgM recovery was applied to an IMAC Co2+ metal affinity column at pH 5.0 and pH 6.0 O collected from all fractions were analyzed by the Bradford test, polyacrylamide gel and turbidimetry. Results and discussion: The new cut of fraction 2 of Sepharose 4 FF was not higher than the IgM yield, but twice as much total immunoglobulins were recovered, in the ANX column Sepharose 4 FF was recovered 77% of IgM in the fraction 350mM-1, but in this fraction it contains only 60% of immunoglobulins (IgM and IgA), requiring a new purification step, and IgG and Albumin do not bind strongly to the column, eluted in the flowthrough, allowing a good separation of these proteins. The 350mM fraction was applied to the IMAC Co2+ affinity column to increase igM purity at pH 5.0 and 6.0, the IgM recovery in the flowthroug is similar, but in the polyacrylamide gel of pH 6.0 it is possible to analyze that the high mass proteins bind more strongly to the column than at pH 5.0, and in quantitative tests the purification factor of pH 6.0 is higher than pH 5.0.Conclusion: The new cut of fraction 2 of the Sepharose 4FF column was not efficient in reducing contaminant proteins and IgM yield, the ANX Sepharose FF column is efficient in separating IgG and albumin from IgM even with higher protein load, the metal affinity column IMAC Co2+ was not effective in separating total IgM from contaminant proteins even at different pH's employed, and new strategies and studies for increasing immunoglobulin purity need to be developed.

A imunoglobulina M (IgM) é um pentâmero de aproximadamente 950 kDa e cada subunidade é composta por duas cadeias pesadas de cerca de 65 kDa, duas cadeias leves de 25 kDa e uma cadeia J ou de junção, com um peso molecular de cerca de 15 kDa. IgM é como candidato terapêutico promissor. No mundo a primeira imunoglobulina humana enriquecida com IgM é Pentaglobin ® , ele é superior às preparações normais de IgG na eliminação de patógenos infecciosos e neutralização de suas endo-exotoxinas. Neste trabalho purificamos IgM do plasma humano com uma coluna de exclusão por tamanho Sepharose 4FF e modificamos o corte definido em experimentos anteriores da fração 2 (fração enriquecida com IgM), visando de maior pureza e eliminação de proteínas contaminantes, aplicamos a fração na coluna de troca aniônica ANX Sepharose FF e na coluna de afinidade IMAC Co2+. Objetivos: Verificar a estratégia de purificação de IgM empregando as colunas de gel filtração, seguida de troca iônica e cromatografia de afinidade a metal após a modificação da localização do corte da fração da coluna de gel filtração e analisar rendimento de IgM após esta modificação. Materiais e Métodos: O plasma foi aplicado diretamente na coluna de gel filtração Sepharose 4FF. A fração rica em IgM e foi posteriormente aplicado na coluna de troca aniônica ANX Sepharose FF, a fração com maior recuperação de IgM foi aplicada em uma coluna de afinidade a metal IMAC Co2+ em pH 5,0 e pH 6,0 O recolhido de todas as frações foram analisadas pelo ensaio de Bradford, gel de poliacrilamida e turbidimetria. Resultados e discussão: O novo corte da fração 2 da Sepharose 4 FF não se apresentou superior em relação ao rendimento de IgM, porem o dobro de imunoglobulinas totais foram recuperadas, na coluna ANX Sepharose 4 FF foi recuperada 77% da IgM na fração 350mM-1, porém nesta fração contém apenas 60% de imunoglobulinas (IgM e IgA), necessitando de uma nova etapa de purificação, e IgG e a Albumina não se ligam fortemente a coluna, eluiram no flowthrough, permitindo uma boa separação dessas proteínas. A fração 350mM foi aplicada na coluna de afinidade IMAC Co2+ para aumento da pureza de igM em pH 5,0 e 6,0, a recuperação de IgM no flowthroug são parecidos, porém no gel de poliacrilamida do pH 6,0 é possível analisar que as proteínas de alta massa se ligam mais fortemente a coluna que no pH 5,0, e em ensaios quantitativos o fator de purificação do pH 6,0 é superior ao pH 5,0.Conclusão: O novo corte da fração 2 da coluna Sepharose 4FF não foi eficiente para a diminuição de proteínas contaminantes e rendimento de IgM, a coluna ANX Sepharose FF é eficiente na separação de IgG e albumina da IgM mesmo com maior carga de proteínas, a coluna de afinidade a metal IMAC Co2+ não se mostrou efetiva na separação total de IgM de proteínas contaminantes mesmo em diferentes pH’s empregados, sendo necessário desenvolvimento de novas estratégias e estudos para o aumento de pureza das imunoglobulinas.

Purificação de fatores de coagulação e imunoglobulinas a partir de plasma humano por cromatografia líquida

In this work, we studied strategies for adsorption and desorption of FVII with NaCl gradient and with CaCl2 gradient in ANX Sepharose FF resin. The four-factor activated prothrombin complex concentrate contains factors II, VII, IX, and X and is indicated primarily for the treatment of type A or B haemophilia patients with inhibitors. We checked the possibility of producing it in the anion exchange column. The purification analysis was performed using chromogenic methods to determine the activity of coagulation factors, Bradford method for total protein dosage and 7.5% polyacrylamide gel. The results obtained indicate that the adsorption of FVII to the column and its desorption with NaCl gradient was possible, but it is still necessary to determine the experimental conditions for elution using CaCl2. We observed that the affinity of FVII to the anion exchange resin is lower than that of the FII and FIX factors, and can be purified separately from these proteins. This indicates that it is possible to obtain FVII alone, which is important, since activated FVII alone is also used in the treatment of hemophilia A and B with inhibitors. In order to obtain the 4-factor prothrombin complex, the obtained FVII can be added to the 3-factor prothrombin complex concentrate. We also studied the IgM separation of IgG and IgA by applying plasma directly to the Sepharose 4FF column. Purification of IgM is important because of its use in the treatment of autoimmune diseases, infections, neutralization of toxins, among other indications. IgG is separated from IgG and IgA, since IgG is also a biotechnological product and IgA, when present and preparations of other immuglobulins, can generate adverse reactions to the patient. Immunoglobulin dosing was performed by turbidimetry. The results of the purification indicate that the separation of the immunoglobulins was partial, as expected, but it will still be necessary to check the IgM elution profile in this purification.

Neste trabalho estudamos estratégias para adsorção e para dessorção do FVII com gradiente de NaCl e com gradiente de CaCl2 na resina ANX Sepharose FF. O concentrado de complexo protrombínico ativado de quatro fatores contém fatores II, VII, IX e X e é indicado principal- mente para o tratamento de pacientes hemofílicos tipos A ou B com inibidores. Verificamos a possibilidade de produzi-lo na coluna de troca aniônica. A análise das purificações foi realiza- da através dos métodos cromogênico para determinar a atividade dos fatores de coagulação, método de Bradford para dosagem de proteínas totais e gel de poliacrilamida 7,5%. Os resul- tados obtidos indicam que foi possível a adsorção do FVII à coluna e sua dessorção com gra- diente de NaCl, mas é necessário ainda determinar as condições experimentais para eluição empregando CaCl2. Observamos que a afinidade de FVII à resina de troca aniônica é menor que a dos fatores FII e FIX, podendo ser purificada separada destas proteínas. Isto indica que é possível a obtenção de FVII isoladamente, o que é importante, pois, o FVII ativado por si só é utilizado também no tratamento de hemofilias A e B com inibidores. Para a obtenção do complexo protrombínico de 4-fatores, o FVII obtido pode ser adicionado ao concentrado de complexo protrombínico de 3-fatores.Estudamos também a separação de IgM das IgG e IgA aplicando plasma diretamente à coluna Sepharose 4FF. A purificação de IgM é importante devido sua utilização no tratamento de doenças autoimune, infecções, neutralização de toxi- nas, entre outras indicações. É necessária a separação da IgM das IgG e IgA, pois a IgG é também um produto biotecnológico e a IgA, quando presente e preparações das outras imu- noglobulinas pode gerar reações adversas ao paciente. A dosagem de imunoglobulinas foi realizada por turbidimetria. Os resultados da purificação indica que a separação das imuno- globulinas foi parcial, como esperado, porém será necessário ainda verificar o perfil de elui- ção de IgM nessa purificação.

Avaliação da transferência passiva de imunoglobulinas específicas do gênero Bothrops de éguas hiperimunizadas para o neonato

The placenta epiteliocorial mare, prevents the passage of macromolecules such as IgG's immunoglobulins to the fetus, causing the newborn come to highly susceptible to exogenous microorganisms world, depending exclusively colostrum, rich in mother immunoglobulins, which will give you protection passively during the first hours of life. This work aimed to evaluate the transfer of specific immunoglobulins Bothrops of hipperimmunized mares during the sixth month of pregnancy to the newborn, using the ELISA test (enzyme-linked immuno sorbent) by checking the correlation of specific immunoglobulin concentration maternal serum for the newborn. Five mares and five neonates were used for this purpose. The first blood sample was collected from the mares seven days before they gave birth. The deliveries were followed and samples of newborns followed the following times: T0 before ingestion of colostrum, T1 after 24 hours of colostrum intake, T2 48 hours after ingestion of colostrum and T3 30 days after birth. They were processed by the Hyperimmune Plasma Processing Section- Instituto Butantan. It was observed that three mares obtained the transfer of specific immunoglobulins for newborn, keeping the constant level of immunoglobulins in 12h, 48h and 30 days after birth. A mare did not obtain the necessary value to be considered hyperimmunized, so there was no transfer to the neonate. And another mare obtained a titration considered for hyperimmunization however, its neonate had no specific immunoglobulin value found in the serum at all times.

A placenta da égua epiteliocorial, impede a passagem de macromoléculas como as imunoglobulinas IgG’s para o feto, fazendo com que o recém-nascido venha ao mundo extremamente susceptível aos microrganismos exógenos, dependendo exclusivamente do colostro, rico em imunoglobulinas da mãe, que lhe dará proteção passivamente durante as primeiras horas de vida. Esse trabalho objetivou a avaliação da transferência de imunoglobulinas especificas do gênero Bothrops de éguas hiperimunizadas durante o sexto mês de gestação para o neonato, mediante a utilização do teste de ELISA (enzyme-linked immuno sorbent), verificando a correlação da concentração de imunoglobulina específica do soro materno para o neonato. Para isso foram utilizadas cinco éguas e cinco neonatos. A primeira amostra de sangue foi coletada das éguas sete dias antes de parirem. Os partos foram acompanhados e as amostras dos neonatos seguiram os seguintes tempos: T0 antes da ingestão do colostro, T1 após 24 horas da ingestão do colostro, T2 48 horas após a ingestão do colostro e T3 30 dias após o nascimento. Foram processadas pela Seção de Processamento de Plasma Hiperimune-Instituto Butantan. Observou-se que três éguas obtiveram a transferência de imunoglobulinas específicas para o neonato, mantendo o nível de imunoglobulinas constante em 12h, 48h e 30 dias após nascimento. Uma égua não obteve o valor necessário para ser considerada hiperimunizada, por isso não houve transferência para o neonato. E outra égua obteve uma titulação considerada para a hiperimunização porém, o seu neonato não teve valor de imunoglobulinas específicas encontradas no soro em todos os momentos.

There is no benefit in the use of postnatal intravenous immunoglobulin for the prevention of relapses of multiple sclerosis: findings from a systematic review and meta-analysis / Não há benefício do uso de imunoglobulina endovenosa para prevenção de surtos na esclerose múltipla: achados de revisão sistemática e meta-análise

ABSTRACT Multiple sclerosis (MS) is a complex autoimmune and neurodegenerative disease of the central nervous system. Since MS affects mostly fertile women, pregnancy issues often arise in daily practice. The present study assessed the use of postpartum intravenous immunoglobulin (IVIG) in MS. Methods The authors individually searched for records using PubMed, Medline, EMBASE, Cochrane, SciELO, LILACS, and Google Scholar, using the terms "multiple sclerosis" OR "MS" AND "pregnancy" OR "gestation" OR "partum" OR "post-partum" OR "puerperium" AND "immunoglobulin". Results The initial search returned 321 papers. There were 11 eligible articles selected for the review. In total, 380 patients had received post-natal IVIG to reduce the number of postpartum relapses. The unadjusted number needed to treat was 6.3 for the quantitative and 5.8 for the qualitative analyses. Conclusion The therapeutic effect of IVIG for prevention of postnatal relapses in MS could not clearly be established in this meta-analysis.

RESUMO Esclerose múltipla (EM) é uma complexa doença autoimune e neurodegenerativa do sistema nervoso central. Uma vez que EM afeta principalmente mulheres em idade fértil, assuntos relacionados à gravidez frequentemente surgem na prática diária. O presente estudo avaliou o uso pós-parto de imunoglobulina (IVIG) na EM. Métodos Os autores individualmente pesquisaram as bases de dados PubMed, Medline, EMBASE, Cochrane, SciELO, LILACS, e Google Scholar usando os termos "multiple sclerosis" OR "MS" AND "pregnancy" OR "gestation" OR "partum" OR "post-partum" OR "puerperium" AND "immunoglobulin". Resultados A pesquisa inicial retornou 321 artigos. Havia 11 artigos elegíveis para a revisão. No total, havia relato de 380 pacientes que receberam IVIG após a gravidez visando reduzir o número de surtos. O número necessário para tratar não ajustado foi 6,3 para análise quantitativa e 5,8 para análise qualitativa. Conclusão O efeito terapêutico da IVIG para prevenção dos surtos pós-parto na EM não pôde ser claramente estabelecida nesta meta-análise.

Consenso Brasileiro sobre Alergia Alimentar: 2018 - Parte 2 - Diagnóstico, tratamento e prevenção. Documento conjunto elaborado pela Sociedade Brasileira de Pediatria e Associação Brasileira de Alergia e Imunologia / Brazilian Consensus on Food Allergy: 2018 - Part 2 - Diagnosis, treatment and prevention. Joint position paper of the Brazilian Society of Pediatrics and the Brazilian Association of Allergy and Immunology

Na última década o conhecimento sobre a etiopatogenia da alergia alimentar (AA) avançou muito. A identificação de novas formas clínicas de apresentação, aliada à aquisição de novos métodos laboratoriais, possibilitaram a realização do diagnóstico etiológico de modo mais preciso, sobretudo quanto à reatividade cruzada entre alimentos e mesmo na identificação de marcadores indicativos de formas clínicas transitórias, persistentes e quadros mais graves. A padronização dos testes de provocação oral permitiu a sua realização de forma mais segura e possibilitou a sua inclusão entre as ferramentas disponíveis para uso na confirmação etiológica da AA. Apesar disso, a exclusão do alimento responsável pelas manifestações clínicas continua sendo a principal conduta terapêutica a ser empregada. Entre os pacientes alérgicos às proteínas do leite de vaca, a disponibilidade de fórmulas especiais, por exemplo parcialmente hidrolisadas, extensamente hidrolisadas à base da proteína do leite de vaca e fórmulas de aminoácidos, tem facilitado o tratamento substitutivo do leite de vaca para esses pacientes. A abordagem atual da anafilaxia é revisada, uma vez que os alimentos são os principais agentes etiológicos em crianças. Avanços na conduta de algumas manifestações gastrintestinais também são abordados. Na atualidade, a imunoterapia oral tem sido cada vez mais utilizada. A aquisição de novos agentes, os imunobiológicos, também são apresentados à luz das evidências científicas e clínicas atuais. Considerações sobre história natural da AA, assim como sobre formas de prevenção da AA também são abordadas. Em conclusão, o Consenso Brasileiro sobre Alergia Alimentar de 2018 objetivou rever os métodos diagnósticos e esquemas de tratamento disponíveis e empregados no acompanhamento de pacientes com AA, visando a melhor abordagem terapêutica desses pacientes.

Over the last decade, knowledge about the etiopathogenesis of food allergy (FA) has advanced a great deal. The identification of new clinical presentations, associated with the acquisition of new laboratory methods, have made the diagnostic process more accurate, especially with regard to cross-reactivity between foods and the identification of biomarkers suggestive of transitory, persistent clinical forms and/or more severe manifestations. The standardization of oral provocation tests has made their performance safer and has allowed their inclusion among the tools available for use in the etiological confirmation of FA. Despite this, exclusion of the food involved in the clinical manifestations remains as the main therapeutic strategy. Among patients allergic to cow's milk proteins, the availability of special formulas, e.g., partially hydrolyzed and extensively hydrolyzed cow's milk protein-based formulas, in addition to amino acid formulas, has facilitated the introduction of substitute formulas for these patients. The current approach to anaphylaxis is reviewed, since food is the major etiological agent in children. Advances in the management of some gastrointestinal manifestations are also addressed. Currently, oral immunotherapy has been increasingly used. The acquisition of new agents, namely, immunobiological agents, is also described in light of current scientific and clinical evidence. Considerations on the natural history of FA, as well as on ways how to prevent FA, are addressed. In conclusion, the 2018 Brazilian Consensus on Food Allergy aimed to review the diagnostic methods and treatment schemes available and used in the follow-up of patients with FA, with a view to adopting the best possible therapeutic approach to these patients.

Avaliação da transferência de imunidade passiva e de constituintes séricos de cordeiros Santa Inês nascidos de partos simples e gemelares no semiárido paraibano / Evaluation of passive immunity transfer and serum constituents of Santa Ines lambs born of single and twin pregnancies in the semiarid region of Paraiba, Brazil

O presente trabalho teve por objetivo avaliar a influência do tipo de parto sobre a transferência de imunidade passiva e de alguns constituintes séricos de cordeiros recém-nascidos, alimentados naturalmente com colostro materno, criados no semiárido paraibano em sistema extensivo. Foram utilizados 34 cordeiros clinicamente sadios, da raça Santa Inês, os quais foram identificados e pesados imediatamente após o nascimento e separados em dois grupos experimentais com 17 animais cada. O grupo PS (nove machos e oito fêmeas) formado por animais nascidos de partos simples e o grupo PG (seis machos e onze fêmeas) formado por cordeiros nascidos de partos gemelares. A ingestão de colostro se deu de forma natural e voluntária em suas respectivas mães. Foram coletados 10 mL de sangue de cada animal, mediante punção da veia jugular, em tubos siliconizados a vácuo, 48 horas após o nascimento. Após centrifugação, as alíquotas de soro foram separadas e permaneceram congeladas a -15°C até o momento das análises. Para o estudo comparativo dos constituintes séricos, foram constituídos dois grupos experimentais distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado, no esquema fatorial 2x2 (tipo de parto e sexo). Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância, cujas médias foram comparadas pelo teste de Tukey a 5%. Foram determinadas as atividades séricas das enzimas aspartato aminotransferase (AST) e gamaglutamiltransferase (GGT) e as concentrações séricas de proteína total, albumina, ureia, creatinina, cálcio, fósforo e magnésio, utilizando-se conjuntos de reagentes comerciais e as leituras das amostras em espectrofotômetro automático. As atividades séricas de AST, GGT e as concentrações séricas de proteína total, albumina e globulinas dos cordeiros dos grupos PS e PG não foram influenciadas pelo tipo de gestação e sexo. A partir da concentração sérica de proteína total, verificou-se falha de transferência de imunidade passiva (FTIP) nos cordeiros do grupo PG, utilizando-se o valor 5,0g/dL como ponto de corte. Com exceção do cálcio, as concentrações séricas da ureia, creatinina, fósforo e magnésio apresentaram o mesmo padrão de comportamento. Embora esses constituintes não tenham apresentado diferença significativa entre os grupos estudados e o sexo, pôde-se observar valores mais elevados nos animais nascidos de partos simples, sugerindo que a ausência de concorrência pela ingestão voluntária de colostro materno pode ter sido o fator determinante. Pode-se concluir que cordeiros Santa Inês nascidos de partos gemelares e criados extensivamente no semiárido paraibano apresentam falha na transferência de imunidade passiva e alterações/diminuições marcantes nos teores séricos de alguns constituintes bioquímicos, suscitando a necessidade de interferência humana nestes casos.(AU)

This study is concerned with an evaluation of the influence of mode of birth on the transfer of passive immunity and some serum constituents to newborn lambs, naturally fed with colostrum, breed in the semiarid region of the State of Paraiba (Brazil) on an extensive system. Thirty-four clinically healthy Santa Ines lambs were employed, identified and weighted immediately after birth, and divided into two experimental groups of seventeen animals each. The PS group (nine males and eight females) included lambs born of single pregnancies and the PG group (six males and eleven females) comprised of lambs born of twin pregnancies. The colostrum intake occurred naturally and voluntarily at their mothers. Forty-eight hours after birth, 10 mL of blood were collected in siliconized tubes from each animal by puncture of the jugular vein, and maintained under vacuum. After centrifugation, aliquots of sera were separated and kept frozen at -15°C until analyzed. For the comparative study of serum constituents, two experimental groups were formed, distributed in a completely randomized lineation, 2x2 factorial (type of birth and sex). The data were subjected to analysis of variance, whose means were compared by Tukey test at 5%. The serum activities of AST and GGT, and the total protein serum, albumin, urea, creatinine, calcium, phosphorus and magnesium concentrations were determined by using sets of commercial reagents; the samples were read by an automatic spectrophotometer. The serum activities of AST, GGT and serum concentrations of total protein, albumin and globulins of the PS and PG lambs groups were not influenced by the type of pregnancy and sex. From the serum concentration of total protein, FTIP was found in the lambs of PG group, using the value of 5.0g/dL as the cutoff point. With the exception of calcium, serum concentrations of urea, creatinine, phosphorus and magnesium showed the same pattern. Although these constituents did not showed significant differences between groups and sex, higher values were observed in animals born of single pregnancies, suggesting that the absence of competition for the voluntary ingestion of colostrum may have been the determining factor. It can be concluded that lambs born twin deliveries and breed extensively in the semiarid region of the State of Paraiba failed to transfer passive immunity and showed significant reduction in serum levels of some biochemical constituents, indicating the need for human interference in these cases.(AU)

Autoimmune encephalitis: a review of diagnosis and treatment / Encefalites autoimunes: uma revisão sobre diagnóstico e tratamento

ABSTRACT Autoimmune encephalitis (AIE) is one of the most common causes of noninfectious encephalitis. It can be triggered by tumors, infections, or it may be cryptogenic. The neurological manifestations can be either acute or subacute and usually develop within six weeks. There are a variety of clinical manifestations including behavioral and psychiatric symptoms, autonomic disturbances, movement disorders, and seizures. We reviewed common forms of AIE and discuss their diagnostic approach and treatment.

RESUMO As encefalites autoimunes (EAI) são a principal causa de encefalite não-infecciosa. As manifestações neurológicas são variadas, incluindo alterações comportamentais ou psiquiátricas, disautonomia, transtornos do movimento e epilepsia. Habitualmente a instalação dos sintomas ocorre em até 6 semanas, de forma aguda ou subaguda. As EAI podem ser desencadeadas por tumores, quadros infecciosos virais ou ainda apresentar etiologia criptogênica. Este artigo revisa as principais EAI, estratégias de diagnóstico e tratamento.