Disfunción edoltelial inducida por hipercolesterolemia: esudio in vitroen un modelo animal / Endothelial dysfunction induced by hypercholesterolemia: in vitro study ina animal model

Los factores de riesgo tradicionales como hipercolesterolemia afectan la producción endotelial o acción de sustancias vasoactivas fundamentales como el óxido nítrico (NO). Este fenómeno tiene efectos proa terogénicos y protombóricos. El objetivo del presente estudio fue evaluar los efectos in vitro de la hipercolesterolemia sobre la función endotelial y la formación de placa ateroesclerótica en tejido aórtico proveniente de conejos hipercolesterolémicos.Los resultados encontrados sugieren que los niveles elevados de colesterol sérico producen una alteración en la vasodilatación arterial dependiente de endotelio funcional, la cual se presenta sin cambios morfológicos de las células endoteliales. Se corrobora que la hipercolesterolemia es un factor de riesgo independiente de ateroesclerosis el cual contribuye a la disfunción como evento inicial en la génesis del proceso

Estudo das vias de co-estimulaçäo envolvidas na proliferaçäo linfocitária por células endoteliais humanas, na presença de fitohemaglutinina / Study the costimulatory pathways involved in the activation of CD4+T cells human in the presence of phytohemmagglutin

A ativação de linfócitos T envolve a ligação do receptor dos linfócitos T (TCR) ao complexo CMH/peptídeo antigênico, denominado de primeiro sinal, e a interação de moléculas de superfície presente nas células endoteliais e seus ligantes linfocitários, o segundo sinal, Ou simplesmente co-sinal. Ausência do sinal induz As células endoteliaís são capazes de capturar, processar e apresentar antígenos aos linfócitos T, com capacidade de co-estimulação superior aos fibroblastos, células musculares lisas e epiteliais. Classicamente, as células endotelais ativam células T de memória e induzem anergia em células T naives. Estudamos as vias de co-estimuiação envolvidas na proliferação linfocitária induzida por células endoteliais humanas. Linfócitos T CD4+ e CD8+ de adultos e linfócitos T CD4+ e T CD4+/CD45RA+ de cordão umbilical foram utilizados como células respondedoras na cultura mista (CMEL). Células endoteliais imortalizadas, ECV-304, e as derivadas da veia do cordão umbilical, HUVEC, foram usadas COMO células estimuladoras. Linfócitos T CD4+ naives foram obtidos por seleção positiva com anticorpos anti-CD45RA e posterior depleção com anti-CD45RO. A pureza desta subPopulação foi de 98 por cento. PHA na concentração de 5OnglmL foi acrescentada na CMEL. A Proliferação foi medida por incorporação de timidina triciada. Anticorpos monoclonais foram utilizados contra as moléculas de co-estimulação presentes nas células endoteliais e linfocitárias. Foi calculada a porcentagem de inibição da Proliferação linfocitária dê cada anticorpo em comparação ao seu controle isotípico. Células endoteliais induziram Proliferação das células respondedoras somente na presença de PHA. Nas CMEL com ECV-304 e linfócitos T CD4+ de adulto, obtivemos as porcentagens de inibição com os seguintes anticorpos: anti-CD2 (clone T11; 98.2+12.4), anti-CD58 (clone BRlC5; 57.6+-11), anti-CD59 (MEM43; 50+11), anti-CD11a (AFOL-1; 70.7+15), anti-CDl8 (7E4; 58.9+16.6), anti-CD54 (BBIG-1L; 68.8+15.6), anti-CD102 (BT-1; 30.9-+11.9) and anti-CDl54 (24-31; 26.7-+11.9). Não obtivemos inibição nesta proliferação, com os AcMo dirigidos contra: CD27, CD3O, CD7O, CD28, CDl37, CDlO6, CD29, CDlO6, CD49d e com a proteína de fusão CTLA4-ig. Nas CMEL com HUVEC e linfócitos T CD4+ de sangue de cordão, obtivemos as seguintes porcentagens de inibição: anti-CD2 (clone T11, 64.8+16.1), anti-CD58 (clone TS2/9; 63.6ñ13.6), anti-CD59 (MEM43; 36ñ10.9), anti-Cd11a (AFOL-1; 33.4ñ12, anti-CD18 (7E4; 25ñ11.4...(au)

Decreased biological activity is related to abnormal multimeric structure of von Willebrand factor in pulmonary hypertension

We evaluated the correlation between decreased biological activity and abnormalities in the multimeric structure of plasma von Willebrand factor (vWF) in 27 pulmonary hypertensive patients (median age, 21 years). The biological activity of vWF was measured by the ristocetin cofactor assay and its multimeric structure was assessed by Western immunoblotting after SDS-agarose gel electrophoresis. In spite of high antigenic activity of vWF in plasma (139 ñ 65 vs 91 ñ 27 per cent in controls, P=0.003), the biological activity expressed as a percent of the control value was decreased in pulmonary hypertensive patients (60-88 per cent activity, 95 per cent CI for the mean). High molecular weight multimers (biologically active forms) were absent in patients and there was a significant increase in the concentration of low molecular weight polymers in comparison with normals (56 ñ 12 and 35 ñ 12 per cent of total multimer density, respectively, P<0.001). Multimeric abnormalities were positively correlated with plasma vWF levels (r=0.51, P=0.0007) and negatively correlated with vWF biological activity (r=-0.54, P=0.004). Thus, decreased biological function is related to abnormalities in the multimeric structure of vWF, possibility reflecting extensive endothelial dysfunction in pulmonary hypertension.