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Biochem Biophys Res Commun ; 487(2): 247-254, 2017 05 27.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-28412360

RESUMO

Electroporation is the most widely employed method of gene transfer into macrophages which are hard to transfect. RAW 264.7 is a widely used cell line for studying macrophage responses. Electroporation of RAW 264.7 cells with commercial reagents although very efficient is expensive necessitating the development of cost effective alternatives. In this study, we have formulated an economical electroporation buffer for electroporation of RAW 264.7 cells compatible with commercial nucleofector apparatus. We observed that supplementation of membrane fusogenic agents such as Ficoll, PEG and membrane resealing agent, poloxamer P188, enhanced the transfection efficiency of macrophages to a level comparable to the commercially available solutions thereby providing us a cost effective solution for genetic manipulation of macrophages especially in large numbers.


Assuntos
Meios de Cultivo Condicionados/economia , Engenharia de Proteínas/economia , Células RAW 264.7/fisiologia , Proteínas Recombinantes/economia , Transfecção/economia , Transfecção/métodos , Animais , Técnicas de Cultura Celular por Lotes/economia , Técnicas de Cultura Celular por Lotes/métodos , Soluções Tampão , Análise Custo-Benefício/economia , Análise Custo-Benefício/métodos , Meios de Cultivo Condicionados/metabolismo , Índia , Camundongos , Engenharia de Proteínas/métodos , Células RAW 264.7/citologia , Proteínas Recombinantes/biossíntese
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