Estudo dos efeitos do Veneno da serpente Crotalus durissus terrificus quanto à produção de mediadores imunomodulatórios em pré-adipócitos / Study of the effects of the Venom of the snake Crotalus durissus terrificus on the production of immunomodulatory mediators in pre-adipocytes

ABSTRACT

Ophidic accidents are a major public health problem in tropical regions around the world and are included in the WHO list of neglected diseases. The envenomation caused by the Crotalus durissus terrificus is responsible for the highest mortality in Brazil[...]

RESUMO

Acidentes ofídicos constituem um importante problema de saúde pública em regiões tropicais do mundo e estão incluídas na lista de doenças negligenciadas da OMS. O envenenamento causado pela serpente Crotalus durissus terrificus é responsável pelo maior índice de letalidade do Brasil. O veneno desta serpente exerce efeito neurotóxico, miotóxico e imunomodulatório. Os efeitos imunomodulatórios ainda não foram esclarecidos e as ações deste veneno, em células produtoras de mediadores que regulam o processo inflamatório, foram pouco estudadas. Neste sentido, as células do tecido adiposo constituem uma fonte importante de mediadores inflamatórios e anti-inflamatórios, uma vez que o tecido adiposo é um órgão endócrino, que contribui para processos fisiológicos e fisiopatológicos. Em mamíferos, existem dois tipos de tecido adiposo, o Tecido adiposo branco e o Tecido adiposo marrom. O tecido adiposo branco contribui para a atividade metabólica do organismo e produz uma ampla variedade de mediadores, que participam de doenças metabólicas e de natureza inflamatória. Dentre esses mediadores estão a prostaglandina E2 (PGE2) e a IL-10. A PGE2 é um importante mediador pró-inflamatório e imunomodulatório, que também regula a diferenciação de pré-adipócitos em adipócitos maduros. A interleucina-10 (IL-10) é uma citocina envolvida em efeitos anti-inflamatórios e imunomodulatórios, que incluem a inibição de funções de macrófagos e de células T. Considerando essas informações, o presente estudo tem como objetivo avaliar os efeitos do veneno de Crotalus durissus terrificus (VCdt), na produção dos mediadores imunomodulatórios PGE2 e IL-10, em pré-adipócitos. Para tanto, pré-adipócitos da linhagem 3T3-L1 foram cultivados em meio de cultura DMEM, suplementado com soro fetal bovino 10%. Estas células foram incubadas com diferentes concentrações do VCdt (0,5, 1, 5 ou 10 μg / mL) ou DMEM (controle), por diferentes períodos de tempo (1 - 24 h). A viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio do MTT. As concentrações de PGE2 e IL-10 foram determinadas nos sobrenadantes das culturas, por ensaio imunoenzimático (EIA). Os resultados mostraram que o VCdt não alterou a viabilidade celular em nenhuma 9 das concentrações e períodos de tempo avaliados; a concentração de 10 μg / mL de VCdt foi então definida para os estudos subsequentes. O VCdt induziu uma liberação significativa de PGE2 nos períodos de 3 a 24 h de incubação, em comparação aos respectivos controles. Além disso, o VCdt induziu uma liberação significativa de IL- 10, após 48 h de incubação, mas não nos demais períodos de tempo estudados, em comparação aos controles. Em conclusão, os dados mostraram a capacidade do VCdt, em concentração não citotóxica, estimular pré-adipócitos em cultura e induzir a liberação dos mediadores PGE2 e IL-10 por estas células. Além disso, este estudo aponta o tecido adiposo como alvo importante do veneno crotálico, para a geração de mediadores imunomodulatórios.