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PERFIL GÊNICO DE MEDIADORES DE ESTRESSE TÉRMICO E OXIDATIVO DO ECOTIPO PELOCO E FRANGO DE LINHAGEM COMERCIAL
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-213474
Biblioteca responsável: BR68.1
RESUMO
A agricultura familiar possui grande importância para o desenvolvimento regional, sendo a base de subsistência de muitas famílias. Em algumas regiões no interior da Bahia, existe um ecotipo de frango que foi introduzida no Brasil, denominada Peloco, que se caracteriza pela resistência à alta temperatura, adaptabilidade e rusticidade. Esta ave encontra-se em número reduzido, havendo a necessidade de pesquisas para a conservação dessas características e de seu material genético. Existem genes que estão relacionados à resistência ao estresse por calor e genes relacionados ao estresse oxidativo que podem ser expressos em diferentes fases do desenvolvimento e tecidos do animal. A técnica de RT-qPCR verifica a expressão dos genes ligados ao estresse térmico e oxidativo, porém é necessário realizar a padronização e escolha de um gene de referência para normalização dos genes alvos. Tendo isso em vista, objetivou-se com esse trabalho identificar genes de referência estáveis para a normalização de genes alvos no tecido coração e fígado de ecotipos Peloco e frangos de linhagem comercial Cobb 500®, submetidos ao conforto térmico e estresse térmico agudo, bem como, avaliar e comparar os efeitos do calor elevado sobre os níveis de expressão de genes relacionados ao estresse térmico e oxidativo nesses tecidos nos dois grupos genéticos de frangos. Vinte e quatro aves (12 Peloco e 12 Cobb 500®) foram submetidas ao ambiente de conforto térmico (23°C) e de estresse térmico agudo (39,5°C, por 1 hora), posteriormente, foram abatidos e coletados fragmentos de fígado e coração para estudo de expressão gênica. Três algoritmos estatísticos foram utilizados para avaliar a estabilidade da expressão dos genes de referência no grupo de amostras (BestKeeper, GeNorm e NormFinder). Após as análises, o gene considerado mais estável foi o RPL5 em ambos tecidos estudados. Nas análises de expressão relativa, os genes HSP70 e HSF1 tiveram aumento de expressão estatisticamente significativo no tecido fígado dos frangos submetidos ao estresse térmico agudo. O HSP90 apresentou aumento de expressão estatisticamente significativo nos dois tecidos dos animais submetidos ao estresse por calor (p<0,05). O gene CAT revelou aumento de expressão significativo no fígado dos animais Cobb 500® submetidos à alta temperatura, já o SOD foi mais expresso apenas no tecido coração da Peloco e o GPX apresentou aumento de expressão significativa nos dois ii tecidos nos animais Peloco submetidos ao estresse térmico agudo. Diante disso, foi possível concluir que existe variação de expressão dos genes entre os frangos submetidos ao estresse térmico agudo, e que os genes relacionados ao estresse térmico e oxidativo revelaram aumento de expressão no ecotipo Peloco, conferindo maior resistência ao calor elevado.
ABSTRACT
Family farming has great importance for regional development, being the base of subsistence for many families. In some regions in the interior of Bahia, there is an ecotype of chicken that was introduced in Brazil, called Peloco, which is characterized by high temperature resistance, adaptability and rusticity. This bird is in small numbers, and there is a need for research for the conservation of these characteristics and their genetic material. There are genes that are related to resistance to heat stress and genes related to oxidative stress that can be expressed at different stages of development and tissues of the animal. The RT-qPCR technique verifies the expression of genes linked to thermal and oxidative stress, but it is necessary to standardize and select a reference gene for normalization of target genes. The objective of this work was to identify stable reference genes for the normalization of target genes in the heart and liver tissue of Peloco ecotypes and commercial Cobb 500® broilers subjected to thermal comfort and acute thermal stress, as well as , to evaluate and compare the effects of high heat on the expression levels of genes related to thermal and oxidative stress in these tissues in the two genetic groups of chickens. Twenty-four birds (12 Peloco and 12 Cobb 500®) were submitted to the thermal comfort environment (23 ° C) and acute thermal stress (39.5 ° C, for 1 hour), subsequently fragments of liver and heart to study gene expression. Three statistical algorithms were used to evaluate the expression stability of the reference genes in the sample group (BestKeeper, GeNorm and NormFinder). After the analysis, the gene considered more stable was RPL5 in both tissues studied. In the relative expression analyzes, the HSP70 and HSF1 genes had statistically significant expression increase in the liver tissue of chickens submitted to acute thermal stress. HSP90 presented a statistically significant increase in expression in the two tissues of the animals submitted to heat stress (p <0.05). The CAT gene revealed significant increase in liver expression of Cobb 500® animals subjected to high temperature, since SOD was more expressed only in the heart tissue of Peloco and GPX showed significant increase of expression in the two tissues in Peloco animals submitted to thermal stress acute. Therefore, it was possible to conclude that there is variation of gene expression among chickens iv submitted to acute thermal stress, and that the genes related to thermal and oxidative stress revealed an increase in expression in the Peloco ecotype, conferring greater resistance to high heat.

Texto completo: Disponível Base de dados: VETTESES Idioma: Português Ano de publicação: 2019 Tipo de documento: Tese

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