Resumo
Trypanosoma (Trypanozoon) evansi foi o primeiro tripanossoma patogênico de mamífero a ser descrito. É a espécie de Trypanosoma mais dispersa e a que infecta a maior variedade de hospedeiros no mundo. T. evansi é um parasito de grande importância médico-veterinária, exclusivo de sangue de mamíferos e sua transmissão se dá através de vetores mecânicos. Sua primeira descrição no Brasil foi feita em 1830 na Ilha de Marajó/PA e desde então não houve mais relatos da presença do parasito na Região Norte do país. No ano de 2014, um cão de Rio Branco/AC recebeu um diagnóstico sugestivo da infecção por T. evansi, dada a sintomatologia apresentada e a presença de parasitos flagelados, sem cinetoplasto evidente, em esfregaço sanguíneo. O objetivo do trabalho foi investigar a ocorrência de T. evansi em cães, morcegos e capivaras provenientes de Rio Branco/AC através de abordagens parasitológicas, sorológicas e moleculares. Nossa hipótese é que há neste local uma transmissão ainda não reportada deste parasito. Foi coletado sangue de 78 cães de áreas próximas ao Parque Zoobotânico (PZ), pertencente ao campus da Universidade Federal do Acre (UFAC). O diagnóstico parasitológico dos cães foi realizado por hemocultivo (buscando detectar infecção por T. cruzi como diagnóstico diferencial), exame à fresco de capa leucocitária e análise de esfregaço sanguíneo e todos foram negativos. O diagnóstico sorológico por Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) detectou a presença de anticorpos anti-T.evansi e anti-T.cruzi em 20,5% e 26,0% dos animais avaliados, respectivamente. Também foi possível detectar a presença de DNA de T. evansi em um cão através de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) utilizando um alvo específico de DNA nuclear satélite de Trypanosoma (Trypanozoon) sp. Para os morcegos foi realizado diagnóstico molecular utilizando o mesmo alvo em 182 amostras de baço coletadas em quatro expedições realizadas durante os anos de 2014 e 2015 no PZ, sendo detectados dois morcegos (um Carollia perspicillata e um Artibeus lituratus) positivos. As sequências de DNA obtidas nas reações de PCR do cão e do morcego C. perspicillata mostraram similaridade com DNA satélite de T. brucei (K00392.1), com cobertura de 90% e identidade de 89%. Esfregaços sanguíneos e/ou RIFI anti-T. evansi foram realizadas em 51 capivaras de áreas rurais e urbanas da região coletadas em 2015. Todos os esfregaços sanguíneos (n=43) foram negativos, mas a infecção por T. evansi foi sorologicamente confirmada em 17,4% dos 46 roedores avaliados utilizando-se um conjugado anti-Cavia sp. Com os resultados obtidos no presente estudo foi possível confirmar a hipótese de transmissão silenciosa de T. evansi em Rio Branco/AC e a participação de ao menos três espécies de mamíferos (cães, morcegos e capivaras) neste ciclo. Trata-se da primeira descrição de T. evansi na região norte do país desde sua detecção em 1830 e a primeira confirmada através de diagnóstico molecular e sequenciamento de produto amplificado.
Alessandra Filgueiras Gonzalez Araujo Santos Trypanosoma (Trypanozoon) evansi was the first pathogenic mammalian trypanosome ever described. It is the most dispersed Trypanosoma species and the one that infects the highest variety of hosts worldwide. T. evansi is a parasite of great medical-veterinary importance, exclusive of mammalian blood and its transmission occurs through mechanical vectors. The first description of this parasite in Brazil was performed in the Marajo Island/ PA and, since then, no reports of the parasites presence in the Northern Region of Brazil was done. In 2014, a dog from Rio Branco/AC was suspected of T. evansi infection, due to the its symptoms and the observation of flagellated parasites, without evident kinetoplast, in dogs blood smear. The aim of this work was to investigate the occurrence of T. evansi in dogs, bats and capybaras from Rio Branco/AC through parasitological, serological and molecular approaches. Our hypothesis was the existence of an unreported transmission of the parasite in the area. Blood was collected from 78 dogs from areas near the Zoobotanical Park (PZ), which belongs to the Federal University of Acre (UFAC). The parasitological diagnosis made in dogs consisted in blood cultures (searching for T. cruzi infection as differential diagnosis), fresh buffy coat examination and blood smear analysis, and all of them were negative. The serological diagnosis by Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) detected the presence of anti-T. evansi and anti-T. cruzi antibodies in 20.5% and 26% of the evaluated animals, respectively. It was also possible to detect the presence of T. evansi DNA in one dogs blood through Polymerase Chain Reaction (PCR) using a specific nuclear DNA target of Trypanosoma (Trypanozoon) sp. The molecular diagnosis in bats was performed using the same above-mentioned molecular target in 182 spleen samples collected in four expeditions during 2014 and 2015 in PZ. Two bats (one Carollia perspicillata and one Artibeus lituratus) were positive. The DNA sequences obtained in the PCR reactions from the dog and the C. persipicillata bat showed similarity with T. brucei satellite DNA (K00392.1), with 90% of coverage and 89% of identity. Blood smears and/or anti-T.evansi IFAT were carried out in 51 capybaras collected in 2015 in rural and urban areas of the region. All blood smears (n=43) were negative, but T. evansi infection was serologically confirmed in 17.4% of the 46 evaluated rodents using anti-Cavia sp. conjugate. We herein confirmed the hypothesis of silent transmission of T. evansi in Rio Branco/AC, which includes at least three mammal species (dogs, bats and capybaras) in its transmission cycle. This is the first description of T. evansi in the Northern Region of Brazil since 1830 and the first one that confirmed the infection using molecular diagnosis and analysis of the sequenced amplified products