Resumo
A brucelose ovina causada por Brucella ovis é uma das principais enfermidades que causam falhas reprodutivas em ovinos. Este estudo teve como objetivos avaliar o potencial imunogênico e de proteção da cepa B. ovis abcBA encapsulada com alginato ou não em camundongos e em carneiros. Foram utilizados em um primeiro experimento doze carneiros com o objetivo de avaliar a cinética de infecção da cepa mutante. A não eliminação dessa cepa mutante no sêmen e na urina ao longo de seis meses de infecção e a soroconversão de carneiros infectados com esta cepa de forma semelhante aos infectados com a cepa virulenta de B. ovis, demonstram que B. ovis abcBA pode ser uma candidata à vacina contra infecção por B. ovis em carneiros. Para avaliar o potencial de proteção de B. ovis abcBA em camundongos BALB/c e C57BL6, estes foram imunizados com a cepa mutante encapsulada ou não com alginato e depois desafiados com B. ovis. A colonização bacteriana foi significativamente menor nos camundongos imunizados com a cepa mutante encapsulada, assim como as lesões macroscópicas e microscópicas no fígado e no baço. Para validar o potencial da cepa vacinal B. ovis abcBA no hospedeiro preferencial da B. ovis, 10 carneiros foram imunizados com a cepa mutante encapsulada, 10 imunizados com a cepa mutante não encapsulada e outros 10 carneiros não foram imunizados. Após 2 meses, os carneiros foram desfiados com B. ovis e após 2 meses de desafio foram eutanasiados. Somente os carneiros não imunizados eliminaram B. ovis na urina e no sêmen. Não houve detecção de DNA de B. ovis nem no sêmen nem na urina de carneiros imunizados com a cepa mutante encapsulada ou não por PCR. Houve proliferação de linfócitos em carneiros imunizados com a cepa mutante encapsulada ou não e não foram observadas lesões macroscópicas nem microscópicas significativas nestes mesmos carneiros. Houve eliminação de células inflamatórias no sêmen de todos os carneiros não imunizados, em todos os tempos avaliados após o desafio; em cinco carneiros imunizados com a cepa mutante não encapsulada, em diferentes tempos após o desafio e em apenas um carneiro, em um único tempo, vacinado com a cepa mutante encapsulada. Com base nesses resultados, pode-se inferir que a cepa B. ovis abcBA encapsulada confere proteção e tem resposta celular em carneiros experimentalmente infectados com B. ovis.
Ovine brucellosis caused by Brucella ovis is a major cause of reproductive failure in sheep. This study aimed to evaluate the immunogenic and protection potential of B. ovis abcBA encapsulated or not in mice and in rams. Twelve rams were used in the first experiment to evaluate kinetic of infection of the mutant strain. There was no elimination of this mutant strain in semen and urine throughout six month infection and B. ovis abcBA infected rams seroconversion similarly to virulent B. ovis infected rams demonstrates that this strain may be a vaccine candidate. To evaluate B. ovis abcBA potential protection in BALB/c and C57BL6 mice, they were immunized with alginate encapsulated mutant strain or not and then challenged with B. ovis. Bacterial colonization was significantly lower in mice immunized with encapsulated mutant strain as well as gross and microscopic lesions in liver and spleen. To validate vaccine potential B. ovis abcBA in the preferred host of B. ovis, 10 rams were immunized with encapsulated B. ovis abcBA, 10 were immunized with non encapsulated B. ovis abcBA and 10 rams were not immunized. Two months after immunization rams were challenged with B. ovis and 2 months after challenge they were euthanized. Rams that were not immunized eliminated B. ovis in urine and semen, whereas there was no detection of B. ovis in semen or urine of rams immunized with encapsulated mutant strain by PCR. There were lymphocyte proliferation in encapsulated and non encapsulated B. ovis abcBA immunized rams and there was no gross or microscopic lesions these rams. All non immunized rams eliminated inflammatory cell in semen, at all time points after challenge; five rams immunized with non encapsulated mutant eliminated inflammatory cells in semen, at different time points after challenge, and only one ram immunized with the encapsulated mutant strain, in one time point, eliminated inflammatory cells in semen. Based on these results, we can infer that alginate encapsulated B. ovis abcBA strain confers protection in rams experimentally infected with B. ovis.