Neorickettsia sp. in coatis (Nasua nasua) in Brazil / Neorickettsia sp. em quatis (Nasua nasua) no Brasil

The genus Neorickettsia comprises trematode-associated bacteria that can cause diseases in animals and humans. Despite detection of Neorickettsia antigens in the intestine of coatis kept in captivity in southern Brazil through immunohistochemistry, the molecular identity of the bacteria in South American procyonids remains elusive. The aim of the present study was to investigate the occurrence of Neorickettsia sp. in blood samples from coatis in central-western Brazil. Between March 2018 and January 2019, animals were captured and recaptured in two areas of the Cerrado (Parque Estadual do Prosa, PEP; and Vila da Base Aérea, VBA) located in the city of Campo Grande, state of Mato Grosso do Sul, central-western Brazil. All captures were performed according to convenience. DNA from 97 blood samples was subjected to nested PCR (nPCR) targeting a fragment of the 16S rRNA gene of Neorickettsia sp. Six samples (3.6%; five from VBA and one from PEP) from different coatis were positive in nPCR based on the 16S rRNA. The sequences obtained (~500 bp) showed ˃ 99% similarity to N. risticii. Phylogenetic analysis clustered the sequences detected in the present study in a clade with N. risticii. This is the first molecular detection of Neorickettsia sp. in coatis in Brazil.(AU)

O gênero Neorickettsia compreende bactérias associadas a trematódeos que podem causar doenças em animais e humanos. Apesar da detecção de antígenos de Neorickettsia por imuno-histoquímica no intestino de quatis mantidos em cativeiro no sul do Brasil, a identidade molecular da bactéria em procionídeos da América do Sul permanece indefinida. O presente trabalho teve como objetivo investigar a ocorrência de Neorickettsia sp. em amostras de sangue de quatis do Centro-Oeste do Brasil. Entre março de 2018 e janeiro de 2019, os animais foram capturados em duas áreas de Cerrado (Parque Estadual do Prosa PEP e Vila da Base Aérea VBA) localizadas na cidade de Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Centro-Oeste do Brasil. Todas as capturas e recapturas foram realizadas por conveniência. O DNA de 97 amostras de sangue foi submetido a "nested" (nPCR), baseada em um fragmento do gene 16S rRNA de Neorickettsia sp. Seis (3,6% - 5 de VBA e 1 de PEP) amostras de quatis diferentes foram positivas na nPCR, baseada no rRNA 16S. As sequências obtidas (~500 pb) apresentaram ˃99% de identidade com N. risticii. A inferência filogenética agrupou as sequencias detectadas no presente estudo em um clado com N. risticii. Esta é a primeira detecção molecular de Neorickettsia sp. em quatis do Brasil.(AU)

Reactivity against Sarcocystis neurona and Sarcocystis falcatula-like in horses from Southeastern and Midwestern Brazil / Reatividade contra Sarcocystis neurona e Sarcocystis falcatula-like em equinos das regiões Sudeste e Centro-Oeste do Brasil

Equine protozoal myeloencephalitis (EPM) is a neurological disease caused by Sarcocystis neurona. Immunofluorescence antibody tests (IFATs) have been widely used to identify exposure of horses to S. neurona in Brazil. Here we used IFAT to search for IgG antibodies against Sarcocystis falcatula-like (Dal-CG23) and S. neurona (SN138) in sera from 342 horses sampled in Campo Grande, Mato Grosso do Sul state (Midwestern), and São Paulo, São Paulo state (Southeastern), Brazil. The 1:25 cutoff value was chosen to maximize sensitivity of the test. IgG antibodies against S. neurona were detected in 239 horses (69.88%), whereas IgG antibodies against S. falcatula-like were detected in 177 horses (51.75%). Sera from 132 horses (38.59%) reacted against both isolates. Absence of reactivity was evidenced in 58/342 horses (16.95%). The lower cutoff used, and the presence of opossums infected with S. falcatula-like and Sarcocystis spp. in the regions where the horses were sampled, might justify the high seroprevalence observed here. Owing to the similarity among antigens targeted in immunoassays, reports on S. neurona-seropositive horses in Brazil may also derive from the exposure of horses to other Sarcocystis species. The role of other Sarcocystis species in causing neurological diseases in horses in Brazil remains unclear.(AU)

Mieloencefalite protozoária equina (MPE) é uma doença neurológica causada por Sarcocystis neurona. Reação de imunofluorescência indireta (RIFI) tem sido utilizada para identificar a exposição de equinos à S. neurona no Brasil. Neste estudo, a RIFI foi utilizada para avaliar a presença de anticorpos IgG anti-Sarcocystis falcatula-like (Dal-CG23) e anti-S. neurona (SN138) no soro de 342 equinos de Campo Grande, Mato Grosso do Sul (Centro-oeste) e São Paulo, São Paulo (Sudeste), Brasil. O ponto de corte de 1:25 foi escolhido para maximizar a sensibilidade. Anticorpos IgG anti-S. neurona foram detectados em 239 cavalos (69,88%), enquanto anticorpos IgG anti-S. falcatula-like foram detectados em 177 cavalos (51,75%). O soro de 132 animais (38,59%) reagiu contra ambos os isolados. A ausência de reatividade foi evidenciada em 58/342 animais (16,95%). O baixo ponto de corte e a presença de gambás infectados com S. falcatula-like e Sarcocystis spp., nas regiões onde os equinos foram amostrados podem justificar a alta soroprevalência aqui observada. Devido à similaridade entre antígenos de superfície detectados nos imunoensaios, relatos de soropositividade contra S. neurona no Brasil podem resultar da exposição dos equinos a outras espécies de Sarcocystis. O papel de outras espécies de Sarcocystis como causa de doença neurológica em equinos no Brasil permanece incerto.(AU)

Molecular diversity of Sarcocystis spp. in opossums (Didelphis spp.) from Southeastern and Midwestern Brazil / Diversidade molecular de Sarcocystis spp. em gambás (Didelphis spp.) do Sudeste e Centro-oeste do Brasil

South American opossums (Didelphis spp.) are definitive hosts of Sarcocystis neurona, Sarcocystis speeri, Sarcocystis lindsayi and Sarcocystis falcatula. In Brazil, diverse studies have demonstrated a high frequency of Sarcocystis falcatula-like in sporocysts derived from opossums, and high genetic diversity has been observed in surface antigen-encoding genes (SAGs). In this study, genetic diversity of Sarcocystis spp. derived from Didelphis albiventris and Didelphis aurita from the cities of Campo Grande and São Paulo, was accessed by sequencing SAG2, SAG3, SAG4, the first internal transcribed spacer (ITS-1) and cytochrome c oxidase subunit I (cox1). Molecular identification was performed for 16 DNA samples obtained from sporocyst or culture-derived merozoites. The ITS-1, cox1, and SAG3 fragments were cloned, whereas SAG2 and SAG4 were sequenced directly from PCR products. Four alleles variants were found for SAG2, 13 for SAG3 and seven for SAG4, from which four, 13 and four, respectively, were novel. Twenty-seven allele variants were found for ITS-1, all phylogenetically related to S. falcatula-like previously described in Brazil. Sarcocystis sp. phylogenetically related to Sarcocystis rileyi was evidenced by cox1 in three opossums. Further studies are needed to clarify the role of Didelphis spp. as definitive hosts of Sarcocystis spp. other than that previous described.(AU)

Gambás sul-americanos (Didelphis spp.) são hospedeiros definitivos de Sarcocystis neurona, Sarcocystis speeri, Sarcocystis lindsayi e Sarcocystis falcatula. No Brasil, diversos estudos têm demonstrado alta frequência de Sarcocystis falcatula-like em esporocistos derivados de gambás, com grande diversidade nos genes que codificam antígenos de superfície (SAGs). Neste estudo, a diversidade genética de Sarcocystis spp., oriundos de Didelphis albiventris e Didelphis aurita, dos municípios de Campo Grande e São Paulo, foi acessada por meio do sequenciamento de SAG2, SAG3 e SAG4, da primeira região espaçadora interna transcrita (ITS-1) e citocromo c oxidase subunidade I (cox1). Identificação molecular foi realizada em 16 amostras de DNA, obtidas de esporocistos ou merozoítos derivados de cultivo. Os fragmentos de ITS-1, cox1 e SAG3 foram clonados, enquanto SAG2 e SAG4 foram sequenciados diretamente dos produtos de PCR. Quatro alelos foram observados em SAG2, 13 em SAG3 e sete em SAG4, sendo novos quatro, 13 e quatro, respectivamente. Em ITS-1, 27 alelos foram observados, todos filogeneticamente relacionados à S. falcatula-like, previamente detectados no Brasil. Sarcocystis sp. filogeneticamente relacionado à Sarcocystis rileyi foi evidenciado por cox1 em três gambás. Mais estudos são necessários para entender o papel de Didelphis spp. como hospedeiro definitivo de Sarcocystis spp. diferentes daqueles previamente descritos.(AU)

Molecular detection of hemoplasmas in rescued blackeared opossums (Didelphis aurita Wied-Neuwied, 1826) from southeastern Brazil, with evidence of a novel genotype infecting marsupials / Detecção molecular de hemoplasmas em gambás-de-orelha-preta (Didelphis aurita Wied-Neuwied, 1826) resgatados do sudeste do Brasil, com evidência de um novo genótipo infectando marsupiais

There is a growing concern about the participation of wild hosts and reservoirs in the epidemiology of several pathogens, particularly within the context of environmental changes and the expansion of the One Health concept. The aim of this study was to investigate the presence of hemoplasmas in opossums rescued from the metropolitan region of Rio de Janeiro state, Brazil. Blood samples were collected from 15 Didelphis aurita and subjected to DNA extraction and PCR using primers for the 16S rRNA and 23S rRNA genes. Physical examination and hematological analysis were also performed. Three out of 15 opossums tested positive for hemotropic Mycoplasma spp. by PCR and showed hematological alterations such as anemia and leukocytosis. Clinical signs were non-specific and associated to traumatic lesions. The phylogenetic analysis indicated that the hemoplasma detected was positioned between 'Ca. Mycoplasma haemodidelphis' detected in D. virginiana from North American and hemoplasmas recently detected in D. aurita from the state of Minas Gerais, Brazil. This study indicates the existence of hemoplasma infections in D. aurita from the metropolitan region of Rio de Janeiro, and reinforce the need for new epidemiological inquiries to clarify the participation of these in the dynamics of circulation of tick-borne pathogens.(AU)

Há uma crescente preocupação com a participação de hospedeiros e reservatórios silvestres na epidemiologia de diversos patógenos, principalmente no contexto das mudanças ambientais e da expansão do conceito "One Health". O objetivo deste estudo foi investigar a presença de hemoplasmas em gambás resgatados da região metropolitana do estado do Rio de Janeiro, Brasil. Amostras de sangue foram coletadas de 15 Didelphis aurita e submetidas à extração de DNA e PCR utilizando-se "primers" para os genes 16S rRNA e 23S rRNA. O exame físico e a análise hematológica também foram realizados. Três dos 15 gambás testaram positivo para Mycoplasma spp. hemotrópico por PCR. Os sinais clínicos eram inespecíficos e associados a lesões traumáticas. Anemia e leucocitose foram detectadas em animais positivos. A análise filogenética indicou que o hemoplasma detectado estava posicionado entre 'Ca. Mycoplasma haemodidelphis' detectado em D. virginiana da América do Norte e hemoplasmas recentemente detectados em D. aurita do estado de Minas Gerais, Brasil. Este estudo indica a existência de infecções por hemoplasmas em D. aurita, da região metropolitana do Rio de Janeiro, e reforça a necessidade de novos inquéritos epidemiológicos, para esclarecer a participação destes na dinâmica de circulação de patógenos transmitidos por carrapatos.(AU)

Q fever and coxiellosis in Brazil: an underestimated disease? A brief review / Febre Q e coxielose no Brasil: uma doença subestimada? Uma breve revisão

Q fever, caused by the γ-proteobacterium Coxiella burnetii, is a zoonosis of great importance and global impact. This agent has high transmissibility and can spread over long distances via wind, in which a small number of aerosolized particles are needed to infect susceptible hosts. The clinical diagnosis of Q fever is difficult owing to the variety of clinical signs shared with other diseases. In Brazil, studies related to C. burnetii are constantly being conducted, and this review aims to increase the number of approaches already studied, leading to the following question: is Q fever an unknown, neglected disease, or does it have a focal occurrence in certain areas (exotic/rare) in the country?(AU)

A febre Q, causada pela γ-proteobactéria Coxiella burnetii, é uma zoonose de grande importância e impacto global. Este agente tem alta transmissibilidade e pode se espalhar por longas distâncias via vento, em que um pequeno número de partículas aerossolizadas são necessárias para infectar hospedeiros suscetíveis. O diagnóstico clínico da febre Q é difícil devido à variedade de sinais clínicos compartilhados com outras doenças. No Brasil, estudos relacionados à C. burnetii são constantemente realizados. Esta revisão visa aumentar o número de abordagens já estudadas, levando ao seguinte questionamento: a febre Q é uma doença desconhecida, negligenciada ou tem ocorrência focal em certas áreas (exóticas/raras) no país?(AU)

Serological evidence of exposure to Bartonella sp. in dogs with suspected vector-borne diseases, toxoplasmosis and neosporosis / Evidência sorológica de exposição a Bartonella sp. em cães com suspeita de doenças transmitidas por vetores, toxoplasmose e neosporose

Bartonellosis is a vector-borne zoonotic disease with worldwide distribution that infect a broad spectrum of mammalian species. Despite the recent studies carried out in Brazil, information regarding Bartonella in dogs are scarce. Therefore, we performed a retrospective study to investigate the exposure to Bartonella sp. in dogs by indirect immunofluorescence assay (IFA). Three hundred and thirty-five archived serum samples from dogs previously tested for vector-borne pathogens, Toxoplasma gondii, and Neospora caninum were screened for the presence of IgG antibodies to Bartonella sp. All dogs originated from the Metropolitan region of Ribeirão Preto, northeast of the State of São Paulo. Twenty-eight samples (8.3%) were positive for Bartonella sp. at the cut-off of 64. Among the 28 seropositive samples for Bartonella sp., 16 (57.1%) were also seropositive for Ehrlichia canis, 12 (42.8%) for Babesia vogeli, five (17.8%) for T. gondii and three (10.7%) for L. infantum and N. caninum. Our results demonstrated that dogs sampled were exposed to Bartonella sp. Since all the animals sampled in the present study were from private owners, our findings demonstrate that these people may also be exposed to Bartonella sp. Further studies designed to assess whether the infection by other arthropod-borne pathogens such as B. vogeli and E. canis are risk factors for Bartonella infection are needed.(AU)

A bartonelose é uma zoonose transmitida por vetores, com distribuição mundial, que infecta várias espécies de mamíferos. Apesar dos estudos conduzidos no Brasil, informações sobre Bartonella em cães são escassas. Portanto, foi realizado um estudo retrospectivo para investigar a exposição a Bartonella sp. em cães cães, utilizando-se o ensaio de imunofluorescência indireta (IFA). Trezentas e trinta e cinco amostras de soro de cães, previamente testadas para patógenos transmitidos pelos vetores, Toxoplasma gondii e Neospora caninum foram avaliadas quanto à presença de anticorpos IgG contra Bartonella sp. Todos os cães eram oriundos da região metropolitana de Ribeirão Preto, Nordeste do Estado de São Paulo. Vinte e oito amostras (8,3%) foram positivas para Bartonella sp. no ponto de corte de 64. Entre as 28 amostras positivas, 16 (57,1%) também foram positivas para Ehrlichia canis, 12 (42,8%) para Babesia vogeli, cinco (17,8%) para T. gondii e três (10,7%) para L. infantum e N. caninum. Os resultados demonstraram que os cães amostrados foram expostos a Bartonella sp. Como os animais eram de proprietários particulares, nossos achados demonstram que as pessoas também podem ter sido expostas a Bartonella sp. São necessários estudos para avaliar se a infecção por B. canis ou E. canis constitui fator de risco para infecção por Bartonella em cães.(AU)

Occurrence of the mite Acanthonyssus proechimys (Mesostigmata: Macronyssidae) on a spiny rat in Brazil / Ocorrência do ácaro Acanthonyssus proechimys (Mesostigmata: Macronyssidae) em um echimídeo no Brasil

Macronyssid mites are ectoparasites of terrestrial vertebrates. We slide-mounted and re-examined mite material collected in a 1987-1989 expedition to Maracá Ecological Station, Roraima State, Brazil. The specimens were identified as Acanthonyssus proechimys Yunker and Saunders (Mesostigmata: Macronyssidae), which were collected parasitizing a South American spiny rat, Proechimys sp. This represents the first record of Acanthonyssus in Brazil.(AU)

Os ácaros macronissídeos são ectoparasitas de vertebrados terrestres. Nós montamos e reexaminamos material de ácaros coletado em uma expedição entre 1987-1989 à Estação Ecológica de Maracá, Estado de Roraima, Brasil. Os espécimes foram identificados como Acanthonyssus proechimys Yunker e Saunders (Mesostigmata: Macronyssidae), que haviam sido coletados parasitando um echimídeo sul-americano, Proechimys sp. Este é o primeiro registro de Acanthonyssus no Brasil.(AU)

Evaluation of techniques for diagnosis of Trypanosoma vivax infections in naturally infected cattle in the Zona da Mata Mineira / Avaliação de técnicas para diagnóstico de infecções por Trypanosoma vivax em bovinos naturalmente infectados na Zona da Mata Mineira

Abstract This study aimed to evaluate diagnostic techniques for trypanosomiasis, caused by Trypanosoma vivax, in naturally infected cattle in Minas Gerais, Zona da Mata. The deaths of six lactating cows with similar clinical conditions—characterized by hyporexia, hypogalactia, and recumbency—had been reported from one property. Initially, two animals were examined and diagnosed with trypanosomiasis through identification of the protozoan in a blood smear. After the initial diagnosis, all lactating cows (n=37) on the property were examined, and blood samples were collected for tests including whole blood smear, buffy coat smear, Woo's technique, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and polymerase chain reaction (PCR). Woo's test, buffy coat smears, and whole blood smears indicated that 4/37 (10.81%) animals were positive for trypanosomiasis, whereas ELISA and PCR indicated that 33/37 (89.19%) and 27/37 (72.97%) animals, respectively, were positive. The agreement obtained between parasitological techniques was classified as high, while between ELISA and PCR, no agreement. In conclusion, parasitological techniques have a low capacity to identify infected animals in the chronic stage of T. vivax infection. Therefore, techniques such as PCR and/or ELISA should be used to minimize the occurrence of false negatives.

Resumo Este estudo objetiva avaliar as técnicas de diagnóstico da tripanossomíase, causada pelo Trypanosoma vivax, em bovinos naturalmente infectados, em Minas Gerais, Zona da Mata. A morte de seis vacas em lactação com condições clínicas semelhantes - caracterizadas por hiporexia, hipogalaxia e decúbito - foi relatada em uma propriedade. Inicialmente, dois animais foram examinados e diagnosticados com tripanossomíase através da identificação do protozoário em esfregaço sanguíneo. Após o diagnóstico inicial, todas as vacas em lactação (n = 37) na propriedade foram examinadas, e amostras de sangue foram coletadas para testes, incluindo esfregaço de sangue total, esfregaço de capa leucocitária, técnica de Woo, ensaio imunoenzimático (ELISA) e reação em cadeia da polimerase (PCR). O teste de Woo, os esfregaços de capa leucocitária e de sangue total indicaram que 4/37 (10,81%) animais foram positivos para tripanossomíase, enquanto ELISA e PCR indicaram que 33/37 (89,19%) e 27/37 (72,97%) animais, respectivamente, foram positivos. A concordância entre técnicas parasitológicas foi classificada como alta, enquanto entre ELISA e PCR, sem concordância. As técnicas parasitológicas apresentam baixa capacidade para identificar animais infectados na fase crônica da infecção por T. vivax. Dessa forma, técnicas como PCR e/ou ELISA devem ser utilizadas para minimizar a ocorrência de falsos negativos.

Antibody frequency for Toxoplasma gondii and Neospora spp. in domiciliated and stray cats from Araguaína, Tocantins, Eastern Amazonia / Frequência de anticorpos para Toxoplasma gondii e Neospora spp. em gatos domiciliados e errantes de Araguaína, Tocantins, Amazônia Oriental

Toxoplasma gondii and Neospora spp. are protozoa that have a significant impact on animal health due to the diseases they cause in domestic and wild animals. The aim of the present study was to investigate the presence of antibodies against T. gondii and Neospora spp. in cats from northern Brazil. Serum samples were collected from 180 cats in the municipality of Araguaína, Tocantins and used to evaluate the presence of anti-T. gondii and anti-Neospora spp. antibodies using the indirect fluorescent antibody test, with a cutoff of 1:64 and 1:25, respectively. The association between infection and individual animal characteristics (age, sex, origin, breed, and clinical signs) was tested using univariate analysis, followed by multivariate logistic regression. We found that 48.3% (87/180) of the animals had anti-T. gondii (95% CI: 40.8%­55.90%) and 3.9% (7/180) had anti-Neospora spp. (95% CI: 1.6%­7.8%) antibodies. There was no association between age, sex, breed origin, clinical signs, and seropositivity for T. gondii. Cats of defined breeds were more likely to be infected by Neospora spp. (OR = 10.7). Therefore, we found a high rate of seropositivity for T. gondii and a high rate of occurrence of Neospora infections in cats from the Araguaína region. The exposure of the feline population to the studied coccidia indicates the need to monitor the feline population for these infections and underscores the importance of effective sanitary measures against such pathogens.(AU)

Toxoplasma gondii e Neospora spp. são protozoários com impacto relevante na saúde animal devido às doenças que causam em animais domésticos e silvestres. O objetivo do presente estudo foi investigar a presença de anticorpos contra T. gondii e Neospora spp. em gatos do norte do Brasil. Amostras de soro foram coletadas de 180 gatos no município de Araguaína, Tocantinse utilizadas para avaliar a presença de anticorpos anti-T. gondii e anti-Neospora spp. pela reação de imunofluorescência indireta, utilizando um ponto de corte de 1:64 e 1:25, respectivamente. Associação da infecção com as caracteristicas individuais dos animais (idade, sexo, origem, raça e sinais clínicos) foram testadas por meio de análise univariada, seguida de análise multivariada por regressão logistica. Como resultado, 48,3% (87/180) dos animais apresentaram anticorpos anti-T. gondii (IC 95%: 40,8% -55,90%) e 3,9% (7/180) anti-Neospora spp. (IC 95%: 1,6% -7,8%). Não foi encontrada associação entre idade, sexo, raça, origem e presença de sinais clínicos e a soropositividade para T. gondii. Gatos com raça definida apresentaram maior chance de infecção por Neospora spp. (OR=10,7). Portanto, registra-se elevada soropositividade de gatos para T. gondii e a ocorrência de infecção por Neospora em gatos da região de Araguaína, Tocantins. A exposição da população felina aos coccídios estudados indica a necessidade de monitoramento da população de felinos quanto a estas infecções e aplicação de medidas sanitárias eficazes contra tais patógenos.(AU)

Immunophenotypical and pathological changes in dogs experimentally infected with Ehrlichia canis / Alterações imunofenotípicas e patológicas em cães experimentalmente infectados por Ehrlichia canis

Canine monocytic ehrlichiosis (CME) is one of the most important tick-borne diseases worldwide, with multisystemic presentations. Immune dysregulation has been proposed as the primary mechanism involved in its pathogenesis and in tissue injury in dogs with CME. Experimental infection of German Shepherd dogs in the present study demonstrated that CME caused marked pathological changes in their lymph nodes and spleen, and also gave rise to mononuclear infiltration in organs and tissues. Immunophenotyping of cells in lymph nodes, spleen and injured tissues highlighted differences in lymphocyte subsets, local expression of immunoglobulin subclasses and MHCII molecules between infected and control dogs. These findings suggest that the immunophenotypic and immunopathological changes in dogs with acute experimental CME are related to Th1 bias and compartmentalized immune response.(AU)

A erliquiose monocítica canina (EMC) é uma das doenças veiculadas por carrapatos com apresentações multisistêmicas mais relevantes em todo o mundo. A desregulação do sistema imune vem sendo proposta como o principal mecanismo envolvido na patogênese e lesão de tecidos em cães com EMC. A infecção experimental de pastores alemães nesta pesquisa evidenciou marcadas alterações patológicas em linfonodos, baço e também infiltração mononuclear em órgãos e tecidos. A imunofenotipagem de células em linfonodos, baço e tecidos lesados destacou diferenças em subconjuntos de linfócitos, expressão local de subclasses de imunoglobulinas e de moléculas MHCII entre cães infectados e controle. Esses achados sugerem que um viés Th1 e uma resposta imune compartimentalizada estão relacionados às alterações imunofenotípicas e imunopatológicas em cães com EMC experimental aguda.(AU)

The outcomes of polyparasitism in stray cats from Brazilian Midwest assessed by epidemiological, hematological and pathological data / Poliparasitismo em gatos não domiciliados no Centro-Oeste brasileiro avaliado através dos aspectos epidemiológicos, hematológicos e patológicos

We evaluated the epidemiological, hematological, and pathological data of Leishmania spp., Toxoplasma gondii, Platynosomum illiciens, feline immunodeficiency virus (FIV), and feline leukemia virus (FeLV) infections and the coinfections in stray cats of an endemic area for leishmaniasis. The diagnosis was performed by serological tests and necropsy. We described gross lesions and histopathological findings. We used immunohistochemistry and chromogenic in situ hybridization for L. infantum detection. We found infection in 27 out of 50 sampled cats, among them, 14 presented coinfections. A strong correlation between splenomegaly and lymphadenomegaly with FeLV, and an association between hepatic lesions and cachexia with parasitism due to P. illiciens were observed. Moreover, we found a significant increase in the monocyte count in the FeLV-infected and a decrease in the red blood cell count in the FIV-infected animals. Amastigote forms of Leishmania spp. and tissue changes were detected in lymphoid organs of an animal coinfected with P. illiciens, T. gondii, and FIV. Polyparasitism recorded in stray cats of the Brazilian Midwest should be considered in effective control strategies for public health diseases. Moreover, stray cats of Campo Grande may be a source of infection of FIV, FeLV and P. illiciens for populations of domiciled cats.(AU)

Foi avaliada a epidemiologia, hematologia e patologia das infecções por Leishmania spp., Toxoplasma gondii, Platynosomum illiciens, vírus da imunodeficiência felina (FIV) e vírus da leucemia felina (FeLV) e das coinfecções em gatos não domiciliados em uma área endêmica para leishmaniose. O diagnóstico foi realizado por exames sorológicos e necropsia. Foram descritas lesões macroscópicas e achados histopatológicos. Usaram-se imuno-histoquímica e hibridização cromogênica in situ para detecção de L. infantum. Encontrou-se infecção em 27 dos 50 gatos amostrados, dentre eles, 14 apresentavam coinfecções. Foi observada forte correlação entre esplenomegalia e linfadenomegalia com FeLV, e associação entre lesões hepáticas e caquexia com parasitismo por P. illiciens. Além disso, foi encontrado um aumento significativo na contagem de monócitos nos animais infectados pelo FeLV e uma diminuição na contagem de hemácias nos animais infectados pelo FIV. Formas amastigotas de Leishmania spp. e alterações teciduais foram detectadas em órgãos linfoides de um animal coinfectado com P. illiciens, T. gondii e FIV. O poliparasitismo registrado em gatos errantes do Centro-Oeste brasileiro deve ser considerado nas estratégias de controle de zoonoses. Além disso, gatos errantes de Campo Grande podem ser fontes de infecção de FIV, FeLV e P. illiciens para populações de gatos domiciliados.(AU)

Molecular screening of Bartonella in free-ranging capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) from Paraná State, Southern Brazil / Avaliação molecular de Bartonella em capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) de vida livre do Estado do Paraná, Brasil

Bartonella is an emerging group of facultative intracellular bacteria causing circulatory and systemic disorders. Hosts for Bartonella are mostly mammals, specifically rodents, having a growing number of Bartonella species related to their infection. Capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) are abundant native rodents of Brazil, commonly found in urban parks. In the present study, we aimed to perform molecular screening of capybaras for Bartonella spp. Blood samples were collected from 17 free-ranging animals captured in Paraná State, Southern Brazil. None of the collected samples tested positive for the BartonellanuoG gene by quantitative polymerase chain reaction (qPCR), although all of them successfully amplified the mammal endogenous glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (gapdh) gene. Additionally, all animals were infested exclusively by Amblyomma dubitatum ticks at the time of sampling. This study was part of an active surveillance program, which is critical for monitoring animal health status, particularly in capybaras.(AU)

Bartonella é um grupo emergente de bactérias intracelulares facultativas que causam doenças circulatórias e sistêmicas. Mamíferos são os principais hospedeiros das bartonelas, especificamente roedores, com crescente número de espécies de Bartonella relacionadas a estes animais. Capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) são abundantes roedores do Brasil, comumente encontrados em parques urbanos. Nosso objetivo no presente estudo foi realizar uma triagem molecular das capivaras para Bartonella spp. Amostras de sangue foram coletadas de 17 animais de vida livre capturados no estado do Paraná, Sul do Brasil. Nenhuma das amostras coletadas apresentou resultado positivo para o gene nuoG de Bartonella pela reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR), apesar de todas elas amplificarem com sucesso o gene endógeno de mamíferos gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (gapdh). Adicionalmente, todos os animais estavam infestados exclusivamente por carrapatos Amblyomma dubitatum no momento da coleta. Este estudo foi parte do programa de vigilância ativa, que é importante para monitorar a condição de saúde dos animais, particularmente em capivaras.(AU)

Genetic diversity of Hepatozoon spp. in rodents from Chile / Diversidade genética de Hepatozoon spp. em roedores do Chile

Abstract This study aimed to investigate the genetic diversity of Hepatozoon spp. in rodents from Valdivia, Chile. A total of 74 rodents (synanthropic n=38; wild n=36) were trapped in Valdivia. We performed conventional PCR assays for Apicomplexa organisms targeting two overlapping 18S rDNA gene fragments (600 bp and 900 bp) followed by sequencing of selected amplicons. Hepatozoon spp. occurrence was 82.43% (61/74). Twelve sequences obtained from the 600 bp and ten from the 900 bp 18S rDNA fragments were identified as Hepatozoon sp. Six sequences obtained from 18S rDNA-based overlapping PCR protocols were used for concatenated (1,400 bp) phylogenetic, haplotype and distance analyses. Hepatozoon spp. 18S rDNA concatenated sequences from the present study were detected in Oligoryzomys longicaudatus, Rattus norvegicus, Mus musculus, and Abrothrix longipilis grouped with Hepatozoon species earlier described in rodents and reptiles from Chile and Brazil. Nucleotide polymorphism of the six 18S rDNA sequences (1,400 bp) from this study, and other Chilean sequences from rodents and rodent's ticks, showed high diversity with a total of nine Chilean haplotypes. Three haplotypes from Valdivia were identified for the first time in this study, suggesting the circulation of novel haplotypes in rodents from southern Chile.

Resumo Este estudo teve como objetivo investigar a diversidade genética de Hepatozoon spp. em roedores de Valdivia, Chile. Um total de 74 roedores (sinantrópicos n=38; selvagens n=36) foram capturados. PCR convencional foi realizada para organismos Apicomplexa, visando dois fragmentos sobrepostos do gene 18S rDNA (600 bp e 900 bp), seguida pelo sequenciamento de amplicons selecionados. A ocorrência de Hepatozoon spp. foi de 82,43% (61/74). Doze sequências obtidas dos fragmentos de 18S rDNA de 600 pb e dez dos fragmentos de 18S rDNA de 900 pb foram identificadas como Hepatozoon sp. Seis sequências obtidas, a partir de protocolos de PCR sobrepostos, foram usadas para análises filogenéticas (1.400 bp), de haplótipos e de distância. Sequências concatenadas 18S rDNA do presente estudo foram detectadas em Oligoryzomys longicaudatus, Rattus norvegicus, Mus musculus e Abrothrix longipilis e agrupadas com Hepatozoon descrito em roedores e répteis do Chile e do Brasil. A análise de polimorfismos das seis sequências deste estudo, junto com outras sequências chilenas de roedores e carrapatos de roedores, mostrou alta diversidade com um total de nove haplótipos no Chile. Três haplótipos detectados em Valdivia foram identificados pela primeira vez neste estudo, sugerindo que novos haplótipos circulam em roedores do sul do Chile.

Analysis on the prokaryotic microbiome in females and embryonic cell cultures of Rhipicephalus sanguineus tropical and temperate lineages from two specific localities in Brazil / Análise do microbioma procarionte de fêmeas e cultura celular embrionária de Rhipicephalus sanguineus linhagens tropical e temperada de duas localidades no Brasil

Two lineages of Rhipicephalus sanguineus are known in Brazil: the temperate or southern and the tropical or northern populations. The distribution patterns of both lineages of R. sanguineus have epidemiological implications that can affect vectorial competence concerning Ehrlichia canis, the agent of canine monocytic ehrlichiosis. Intending to identify the microbiomes of both lineages and compare microorganisms in R. sanguineus, we used the 16S rRNA (V4-V5 region) gene-based metataxonomic approach, through NGS sequencing on the MiSeq Illumina platform. We selected specimens of females from the environment and samples of primary embryonic cell cultures, from both lineages, and this was the first study to investigate the prokaryotic microbiome in tick cell cultures. The results showed that many bacterial taxa detected in the samples were typical members of the host environment. A significant diversity of microorganisms in R. sanguineus females and in embryonic cell cultures from both lineages was found, with emphasis on the presence of Coxiella in all samples, albeit in different proportions. The Coxiella species present in the two lineages of ticks may be different and may have co-evolved with them, thus driving different patterns of interactions between ticks and the pathogens that they can harbor or transmit to vertebrate hosts.(AU)

Duas linhagens de Rhipicephalus sanguineus são conhecidas no Brasil: populações da linhagem temperada ou do sul, e tropical ou do norte. Os padrões de distribuição de ambas as linhagens de R. sanguineus têm implicações epidemiológicas, podendo afetar a competência vetorial de Ehrlichia canis, o agente etiológico da erliquiose monocítica canina. Com a intenção de identificar os microbiomas de ambas as linhagens e comparar microrganismos de R. sanguineus, foi utilizada a metataxonomia, baseada no gene 16S rRNA (região V4-V5), por meio do sequenciamento de nova geração na plataforma MiSeq Illumina. Foram selecionadas amostras de fêmeas do ambiente e cultivo primário de células embrionárias, considerando-se as duas linhagens conhecidas do Brasil. Este é o primeiro estudo que investiga o microbioma procariótico de células de cultura de carrapato. Os resultados mostram que muitos grupos de bactérias detectadas nas amostras são membros típicos do ambiente do hospedeiro. Uma diversidade significativa de microrganismos em fêmeas e cultura de células embrionárias nas duas linhagens de R. sanguineus foi encontrada, com ênfase na presença de Coxiella em todas as amostras, ainda que em diferentes proporções. Possivelmente, as espécies de Coxiella presentes nas duas linhagens de carrapatos são diferentes e co-evoluíram com essas linhagens, conduzindo a diferentes padrões de interação entre carrapatos e patógenos que podem abrigar ou transmitir aos hospedeiros vertebrados.(AU)

Follow-up of dairy cattle naturally infected by Trypanosoma vivax after treatment with isometamidium chloride / Acompanhamento de bovinos leiteiros naturalmente infectados com Trypanosoma vivax após tratamento com cloreto de isometamidium

Trypanosoma vivax infections cause nonspecific clinical signs in cattle associated with aparasitemic intervals, making disease diagnosis a challenge. In Brazil, diminazene aceturate and isometamidium chloride (ISM) are available to treat bovine trypanosomosis. The objective of this study was to follow-up, by molecular and serological techniques, dairy cattle naturally infected by T. vivax after ISM treatment. Thirty cattle naturally infected with T. vivax received two applications of ISM, at a dosage of 1.0 mg/kg intramuscularly, on days 0 and 150. For T. vivax diagnosis, EDTA-blood and serum samples were evaluated on 0, 7, 15, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, and 240 days after treatment PCR, Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) and ELISA. Animals with persistent detection of T. vivax DNA by both PCR and LAMP were found and continuous detection of anti-T. vivax IgG antibodies by ELISA, suggesting the presence of T. vivax resistance to ISM. The combination of LAMP and ELISA tests can prevent misdiagnosis of the parasite clearance in treated cattle, contributing to better disease control. This is the first experiment that demonstrates the persistence infection of T. vivax under ISM treatment in a natural infected herd and evidence of ISM chemotherapy-resistant T. vivax in Brazil.(AU)

Em bovinos, infecções por Trypanosoma vivax geram sinais clínicos inespecíficos que, associados a intervalos aparasitêmicos, faz com que o diagnóstico da enfermidade seja desafiador. No Brasil, somente aceturato de diaminazeno e cloridrato de isometamidum (ISM) estão disponíveis para o tratamento da tripanossomose bovina. Este trabalho teve como objetivo acompanhar bovinos leiteiros naturalmente infectados por T. vivax, após o tratamento com ISM por meio de técnicas moleculares e sorológica. Foram utilizados 30 bovinos naturalmente infectados com T. vivax, sendo estes tratados com duas aplicações de ISM, na dosagem de 1,0 mg/kg por via intramuscular profunda, nos dias 0 e 150. Foram avaliadas, para diagnóstico de T. vivax, amostras de sangue acrescido de EDTA e soro, colhidas nos 0, 7, 15, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210 e 240 dias após os tratamentos pela reação em cadeia da polimerase (PCR), amplificação circular isotérmica do DNA (LAMP) e ensaio de imunoabsorção enzimático (ELISA). Verificou-se a presença de animais com persistência na detecção de DNA de T. vivax pela PCR e LAMP, bem como detecção contínua de anticorpos IgG anti-T. vivax pelo método de ELISA, sugerindo a presença de resistência de T. vivax ao ISM. A combinação dos testes LAMP e ELISA pode evitar falsos diagnósticos da eliminação do parasita nos bovinos tratados, contribuindo para um melhor controle da doença. Este é o primeiro experimento que demonstra infecção persistente do T. vivax em rebanho naturalmente infectado, tratado com ISM, e evidencia possível resistência ao quimioterápico no Brasil.(AU)

Antibody prevalence of Leptospira spp. and Brucella abortus in domestic cats from Araguaína, Tocantins, North Region of Brazil / Prevalência de anticorpos para Leptospira spp. e Brucella Abortus em gatos domésticos de Araguaína, Tocantins, Região Norte do Brasil

Leptospira spp. and Brucella abortus are bacterial pathogens that can infect humans and animals. The present study aimed to detect anti-Leptospira and anti-B. abortus antibodies and verified the presence of factors associated with seropositivity in cats. One hundred and eighty serum samples were collected from domestic cats (Felis silvestris catus) from the urban area of the municipality of Araguaína-Tocantins by phlebocentesis of the cephalic and jugular veins. The samples were subjected to detection of anti-Leptospira and anti-B.abortus antibodies, respectively, by microscopic seroagglutination and buffered acidified antigen testing, followed by confirmation by the 2-mercaptoethanol test and slow seroagglutination in tubes. Data from the epidemiological questionnaire (the age, sex, origin, breed, and presence of clinical signs) were analyzed using Epi Info® software with seropositivity data found to search for associated factors using the chi-square test. In the present study, the prevalence of Leptospira spp. was 5.56% (10/180). However, no sample was reactive to B. abortus. None of the studied variables were associated with seropositivity for the pathogens evaluated. Therefore, there is contact between Leptospira spp. and the feline population of the municipality, indicating the possibility of the circulation of pathogenic serovars and that the presence of anti-Leptospira antibodies does not depend on the variables analyzed.

Leptospira spp. e Brucella abortus são patógenos bacterianos que podem infectar humanos e animais. O presente estudo teve como objetivo detectar anticorpos anti-Leptospira e anti-B.abortus e verificar a presença de fatores associados com a soropositividade em gatos. Foram coletadas 180 amostras de soro de gatos domésticos (Felis silvestris catus) da zona urbana do município de Araguaína-Tocantins por flebocentese das veias cefálica e jugular. As amostras foram submetidas à detecção de anticorpos anti-Leptospira e anti-B. abortus, respectivamente, por soroaglutinação microscópica e teste do antígeno acidificado tamponado, seguido de confirmação pelo teste de 2-mercaptoetanol e soroaglutinação lenta em tubos. Os dados do questionário epidemiológico (idade, sexo, procedência, raça e presença de sinais clínicos) foram analisados no software Epi Info® com os dados de soropositividade encontrados para pesquisa de fatores associados pelo teste do qui-quadrado. No presente estudo, a prevalência de Leptospira spp. foi de 5,56% (10/180). No entanto, nenhuma amostra foi reativa para B. abortus. Nenhuma das variáveis estudadas foi associada com a soropositividade para os patógenos avaliados. Portanto, há contato entre Leptospiraspp. e a população felina do município, indicando a possibilidade de circulação de sorovares patogênicos e que a presença de anticorpos anti-Leptospira independe das variáveis analisadas.

Antibody prevalence of Leptospira spp. and Brucella abortus in domestic cats from Araguaína, Tocantins, North Region of Brazil / Prevalência de anticorpos para Leptospira spp. e Brucella Abortus em gatos domésticos de Araguaína, Tocantins, Região Norte do Brasil

Leptospira spp. and Brucella abortus are bacterial pathogens that can infect humans and animals. The present study aimed to detect anti-Leptospira and anti-B. abortus antibodies and verified the presence of factors associated with seropositivity in cats. One hundred and eighty serum samples were collected from domestic cats (Felis silvestris catus) from the urban area of the municipality of Araguaína-Tocantins by phlebocentesis of the cephalic and jugular veins. The samples were subjected to detection of anti-Leptospira and anti-B.abortus antibodies, respectively, by microscopic seroagglutination and buffered acidified antigen testing, followed by confirmation by the 2-mercaptoethanol test and slow seroagglutination in tubes. Data from the epidemiological questionnaire (the age, sex, origin, breed, and presence of clinical signs) were analyzed using Epi Info® software with seropositivity data found to search for associated factors using the chi-square test. In the present study, the prevalence of Leptospira spp. was 5.56% (10/180). However, no sample was reactive to B. abortus. None of the studied variables were associated with seropositivity for the pathogens evaluated. Therefore, there is contact between Leptospira spp. and the feline population of the municipality, indicating the possibility of the circulation of pathogenic serovars and that the presence of anti-Leptospira antibodies does not depend on the variables analyzed.(AU)

Leptospira spp. e Brucella abortus são patógenos bacterianos que podem infectar humanos e animais. O presente estudo teve como objetivo detectar anticorpos anti-Leptospira e anti-B.abortus e verificar a presença de fatores associados com a soropositividade em gatos. Foram coletadas 180 amostras de soro de gatos domésticos (Felis silvestris catus) da zona urbana do município de Araguaína-Tocantins por flebocentese das veias cefálica e jugular. As amostras foram submetidas à detecção de anticorpos anti-Leptospira e anti-B. abortus, respectivamente, por soroaglutinação microscópica e teste do antígeno acidificado tamponado, seguido de confirmação pelo teste de 2-mercaptoetanol e soroaglutinação lenta em tubos. Os dados do questionário epidemiológico (idade, sexo, procedência, raça e presença de sinais clínicos) foram analisados no software Epi Info® com os dados de soropositividade encontrados para pesquisa de fatores associados pelo teste do qui-quadrado. No presente estudo, a prevalência de Leptospira spp. foi de 5,56% (10/180). No entanto, nenhuma amostra foi reativa para B. abortus. Nenhuma das variáveis estudadas foi associada com a soropositividade para os patógenos avaliados. Portanto, há contato entre Leptospiraspp. e a população felina do município, indicando a possibilidade de circulação de sorovares patogênicos e que a presença de anticorpos anti-Leptospira independe das variáveis analisadas.(AU)

High genetic diversity of Anaplasma marginale infecting dairy cattle in northeastern Brazil / Alta diversidade genética de Anaplasma marginale em bovinos de leite no nordeste do Brasil

Abstract Anaplasma marginale is an obligate intracellular Gram-negative bacterium found in ruminants' erythrocytes and is the etiological agent of bovine anaplasmosis. The bacterium's genetic diversity has been characterized based on sequences of major surface proteins (MSPs), such as MSP1α. The aim of the present study was to investigate the genetic diversity of A. marginale in cattle in the state of Maranhão, northeastern Brazil. To this end, 343 blood samples were harvested and subjected to iELISA assays using the recombinant surface protein MSP5. Out of 343 blood samples, 235 (68.5%) were randomly chosen and submitted to DNA extraction, qPCR and conventional PCR targeting the msp1α gene to determine amino acid sequences and classify the genotypes. The iELISA results showed 81.34% seropositivity (279/343), whereas qPCR revealed 224 positive samples (95.32%). Among these qPCR-positive samples, 67.4% (151/224) were also positive in the cPCR. Among the 50 obtained sequences, 21 strains had not been previously reported. Regarding the genotypes, H (26/50) and E (18/50) were identified most often, while genotypes F and C were only identified twice each and B and G once each. In conclusion, high prevalence and genetic diversity for A. marginale were observed in dairy cattle herds in the state of Maranhão.

Resumo Anaplasma marginale é uma bactéria Gram-negativa intracelular obrigatória de eritrócitos de ruminantes e responsável pela anaplasmose bovina. A diversidade genética de A. marginale tem sido caracterizada com base nas sequências das principais proteínas de superfície (MSPs), como a MSP1α. O objetivo deste estudo foi investigar a diversidade genética de A. marginale em bovinos no estado do Maranhão, Nordeste do Brasil. Dessa forma, 343 amostras de sangue foram submetidas ao ensaio iELISA, utilizando-se a proteína recombinante MSP5. Das 343 amostras de sangue, 235 (68,5%) foram escolhidas aleatoriamente e submetidas à extração de DNA, qPCR e PCR convencional para gene msp1α, para determinação das sequências de aminoácidos e classificação dos genótipos. Os resultados do iELISA mostraram 81,34% de soropositividade (279/343), enquanto qPCR revelou 224 amostras positivas (95,32%). Dentre estas na qPCR, 67,4% (151/224) mostraram-se positivas no PCR convencional. Das 50 sequências obtidas, 21 cepas não haviam sido relatadas anteriormente. Em relação aos genótipos, H (26/50) e E (18/50) foram os mais frequentes, enquanto os genótipos F e C foram identificados apenas duas vezes cada, e B e G uma vez cada. Em conclusão, alta prevalência e marcante diversidade genética de A. marginale foram observadas em rebanhos leiteiros no estado do Maranhão.

New record of Cheyletiella parasitivorax (Mégnin, 1878) (Trombidiformes: Cheyletidae) from Brazil with an illustrated key to species for the genus / Novo registro de Cheyletiella parasitivorax (Mégnin, 1878) (Trombidiformes: Cheyletidae) para o Brasil, com uma chave ilustrada das espécies deste gênero

The cheyletid mites that parasitize mammals have been neglected for a long time in Brazil, although they can be common on pets and cause injury to their hosts. Recently, Cheyletiella parasitivorax was found parasitizing a rabbit in Brazil which represents a new host and distribution record for the mite species. An illustrated dichotomous key for the identification of the species in this genus and data from the literature are provided.(AU)

Os ácaros da família Cheyletidae que parasitam mamíferos são negligenciados há muito tempo no Brasil, embora eles sejam comuns em animais domésticos. Considerando as dificuldades morfológicas para diagnosticar as espécies dessa família que infestam mamíferos, este estudo refere-se a uma nova ocorrência de Cheyletiella parasitivorax incluindo os poucos registros de literatura. Além disso, também está sendo apresentada uma chave dicotômica ilustrada para identificação de espécies desse gênero.(AU)

Genetic diversity of Babesia bovis studied longitudinally under natural transmission conditions in calves in the state of Rio de Janeiro, Brazil / Diversidade genética de Babesia bovis estudada longitudinalmente em condições de transmissão natural entre bezerros no estado do Rio de Janeiro, Brasil

Serum and DNA samples from 15 naturally infected calves in Seropédica, Brazil, were obtained quarterly from birth to 12 months of age, in order to longitudinally evaluate their humoral immune response against Babesia bovis and the merozoite surface antigen diversity of B. bovis. Anti-B. bovis IgG antibodies were detected by an indirect fluorescent antibody test (IFAT) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Using DNA amplification, sequencing and phylogenetic analysis, the genetic diversity of B. bovis was assessed based on the genes that encode merozoite surface antigens (MSA-1, MSA-2b and MSA-2c). The serological results demonstrated that up to six months of age, all the calves developed active immunity against B. bovis. Among the 75 DNA samples evaluated, 0, 3 and 5 sequences of the msa-1, msa-2b and msa-2c genes were obtained, respectively. The present study demonstrated that the msa-2b and msa-2c gene sequences amplified from blood DNA of B. bovis-positive calves were genetically diversified. These data emphasize the importance of conducting deeper studies on the genetic diversity of B. bovis in Brazil, in order to design diagnostic antigens and vaccines in the future.(AU)

Para avaliar longitudinalmente a resposta imune humoral anti-B. bovis e a diversidade genética de antígenos de superfície de merozoítos de B. bovis, entre bezerros naturalmente infectados em Seropédica, Brasil, amostras de soro e DNA de 15 bezerros foram obtidas trimestralmente, desde o nascimento até 12 meses de idade. Anticorpos IgG para B. bovis foram detectados pelos testes de Imunofluorescência Indireta e Ensaio de Imunoadsorção Enzimático Indireto. Usando-se amplificação de DNA, sequenciamento e análises filogenéticas, a diversidade genética de B. bovis, com base nos genes que codificam antígenos de superfície de merozoítos (MSA-1, MSA-2b e MSA-2c) foi investigada. Os resultados da sorologia demonstraram que, até os seis meses de idade, todos os bezerros desenvolveram imunidade ativa contra B. bovis. Entre as 75 amostras de DNA avaliadas, foram obtidas 0, 3 e 5 sequências dos genes msa-1, msa-2b e msa-2c. O presente estudo demonstrou que sequências dos genes msa-2b e msa-2c amplificadas a partir de amostras de sangue positivas para B. bovis de bezerros de Seropédica, foram geneticamente distintas. O presente trabalho realça a importância de se realizar estudos aprofundados sobre a diversidade genética de B. bovis no Brasil, objetivando o desenvolvimento de antígenos para o diagnóstico e vacinas no futuro.(AU)