Validação interlaboratorial do teste de polarização fluorescente para o diagnóstico sorológico da brucelose bovina

The purpose of this research was the interlaboratorial validation of the polarization fluorescence assay (PFA) for the serodiagnosis of bovine brucellosis, verifying the relative sensitivity, the relative specificity and the reproducibility of the test in four Brazilian laboratories. Serum samples from 1,389 bovines were selected and submitted to the rose Bengal (RBT) and 2-mercaptoethanol tests in one of the laboratories. The same samples were tested by the complement fixation (CFT) test and by the PFA in the four laboratories participating of the research. The reference population (golden standard) used to evaluate the PFA was the combination of the results of RBT, CFT and 2-ME. TG-ROC analysis was used to obtain the cut-off that provided the best combination of sensitivity and specificity. The agreement between laboratories was obtained by the kappa statistic and Pearson correlation coefficient (r). The PFA cut-off values were from 85.2 to 93.6. The sensitivity of the PFA assay varied from 91.7% to 97.3%, and the specificity values varied from 82.6% to 98.3%. When comparing PFA results from the four laboratories, the kappa values was between 0.69 and 0.95, which indicates, in most situations, excellent reproducibility, and the correlation coefficient varied from 0.76 to 0.99. The results showed that the PFA had a good performance, with high sensitivity and specificity. Compared to the conventional tests, the PFA has the advantages of being easy and quick to perform, and it is not prone to the occurrence of prozone, as the CFT or the 2-ME, nor to the occurrence of anti-complementary effect, as the CFT.

Esta investigação teve por objetivo validar o teste de polarização fluorescente (TPF) para o diagnóstico sorológico da brucelose bovina, determinando a sensibilidade (SE) e a especificidade relativas (SP) e verificando a reprodutibilidade do teste em quatro laboratórios no Brasil. Foram selecionadas 1.389 amostras de soro sanguíneo, as quais foram inicialmente submetidas aos testes do antígeno acidificado tamponado (AAT) e mercaptoetanol (2-ME). As mesmas amostras foram submetidas à reação de fixação de complemento (RFC) e ao TPF. Para a avaliação do TPF, foi adotada a combinação dos resultados do AAT, da RFC e do 2-ME, utilizados como população de referência (padrão-ouro). Para a determinação do ponto de corte do TPF que proporciona a melhor combinação de sensibilidade e especificidade, foi usada a análise TG-ROC. A concordância entre os resultados dos quatro laboratórios foi determinada com base no indicador kappa e no coeficiente de correlação de Pearson. Os pontos de corte do TPF situaram-se entre 85,2 e 93,6 mP, conforme o laboratório. A sensibilidade variou de 91,7 a 97,3%, e a especificidade situou-se na faixa de 82,6 a 98,3%. Na comparação entre os resultados do TPF dos quatro laboratórios, o indicador kappa ficou entre 0,69 e 0,95, o que indica, na maioria das situações, reprodutibilidade excelente, e o coeficiente de correlação variou entre 0,76 e 0,99. Os resultados indicaram que o TPF apresentou bom desempenho, na maioria das situações, com sensibilidade e especificidade elevadas. Em comparação com os testes convencionais, o TPF apresenta as vantagens de ser de execução mais rápida e mais fácil e não estar sujeito à ocorrência de prozona, como a RFC e o 2-ME, nem de atividade anticomplementar, como a RFC.

Validação interlaboratorial do teste de polarização fluorescente para o diagnóstico sorológico da brucelose bovina

The purpose of this research was the interlaboratorial validation of the polarization fluorescence assay (PFA) for the serodiagnosis of bovine brucellosis, verifying the relative sensitivity, the relative specificity and the reproducibility of the test in four Brazilian laboratories. Serum samples from 1,389 bovines were selected and submitted to the rose Bengal (RBT) and 2-mercaptoethanol tests in one of the laboratories. The same samples were tested by the complement fixation (CFT) test and by the PFA in the four laboratories participating of the research. The reference population (golden standard) used to evaluate the PFA was the combination of the results of RBT, CFT and 2-ME. TG-ROC analysis was used to obtain the cut-off that provided the best combination of sensitivity and specificity. The agreement between laboratories was obtained by the kappa statistic and Pearson correlation coefficient (r). The PFA cut-off values were from 85.2 to 93.6. The sensitivity of the PFA assay varied from 91.7% to 97.3%, and the specificity values varied from 82.6% to 98.3%. When comparing PFA results from the four laboratories, the kappa values was between 0.69 and 0.95, which indicates, in most situations, excellent reproducibility, and the correlation coefficient varied from 0.76 to 0.99. The results showed that the PFA had a good performance, with high sensitivity and specificity. Compared to the conventional tests, the PFA has the advantages of being easy and quick to perform, and it is not prone to the occurrence of prozone, as the CFT or the 2-ME, nor to the occurrence of anti-complementary effect, as the CFT.

Esta investigação teve por objetivo validar o teste de polarização fluorescente (TPF) para o diagnóstico sorológico da brucelose bovina, determinando a sensibilidade (SE) e a especificidade relativas (SP) e verificando a reprodutibilidade do teste em quatro laboratórios no Brasil. Foram selecionadas 1.389 amostras de soro sanguíneo, as quais foram inicialmente submetidas aos testes do antígeno acidificado tamponado (AAT) e mercaptoetanol (2-ME). As mesmas amostras foram submetidas à reação de fixação de complemento (RFC) e ao TPF. Para a avaliação do TPF, foi adotada a combinação dos resultados do AAT, da RFC e do 2-ME, utilizados como população de referência (padrão-ouro). Para a determinação do ponto de corte do TPF que proporciona a melhor combinação de sensibilidade e especificidade, foi usada a análise TG-ROC. A concordância entre os resultados dos quatro laboratórios foi determinada com base no indicador kappa e no coeficiente de correlação de Pearson. Os pontos de corte do TPF situaram-se entre 85,2 e 93,6 mP, conforme o laboratório. A sensibilidade variou de 91,7 a 97,3%, e a especificidade situou-se na faixa de 82,6 a 98,3%. Na comparação entre os resultados do TPF dos quatro laboratórios, o indicador kappa ficou entre 0,69 e 0,95, o que indica, na maioria das situações, reprodutibilidade excelente, e o coeficiente de correlação variou entre 0,76 e 0,99. Os resultados indicaram que o TPF apresentou bom desempenho, na maioria das situações, com sensibilidade e especificidade elevadas. Em comparação com os testes convencionais, o TPF apresenta as vantagens de ser de execução mais rápida e mais fácil e não estar sujeito à ocorrência de prozona, como a RFC e o 2-ME, nem de atividade anticomplementar, como a RFC.

Validação interlaboratorial do teste de polarização fluorescente para o diagnóstico sorológico da brucelose bovina

The purpose of this research was the interlaboratorial validation of the polarization fluorescence assay (PFA) for the serodiagnosis of bovine brucellosis, verifying the relative sensitivity, the relative specificity and the reproducibility of the test in four Brazilian laboratories. Serum samples from 1,389 bovines were selected and submitted to the rose Bengal (RBT) and 2-mercaptoethanol tests in one of the laboratories. The same samples were tested by the complement fixation (CFT) test and by the PFA in the four laboratories participating of the research. The reference population (golden standard) used to evaluate the PFA was the combination of the results of RBT, CFT and 2-ME. TG-ROC analysis was used to obtain the cut-off that provided the best combination of sensitivity and specificity. The agreement between laboratories was obtained by the kappa statistic and Pearson correlation coefficient (r). The PFA cut-off values were from 85.2 to 93.6. The sensitivity of the PFA assay varied from 91.7% to 97.3%, and the specificity values varied from 82.6% to 98.3%. When comparing PFA results from the four laboratories, the kappa values was between 0.69 and 0.95, which indicates, in most situations, excellent reproducibility, and the correlation coefficient varied from 0.76 to 0.99. The results showed that the PFA had a good performance, with high sensitivity and specificity. Compared to the conventional tests, the PFA has the advantages of being easy and quick to perform, and it is not prone to the occurrence of prozone, as the CFT or the 2-ME, nor to the occurrence of anti-complementary effect, as the CFT.

Esta investigação teve por objetivo validar o teste de polarização fluorescente (TPF) para o diagnóstico sorológico da brucelose bovina, determinando a sensibilidade (SE) e a especificidade relativas (SP) e verificando a reprodutibilidade do teste em quatro laboratórios no Brasil. Foram selecionadas 1.389 amostras de soro sanguíneo, as quais foram inicialmente submetidas aos testes do antígeno acidificado tamponado (AAT) e mercaptoetanol (2-ME). As mesmas amostras foram submetidas à reação de fixação de complemento (RFC) e ao TPF. Para a avaliação do TPF, foi adotada a combinação dos resultados do AAT, da RFC e do 2-ME, utilizados como população de referência (padrão-ouro). Para a determinação do ponto de corte do TPF que proporciona a melhor combinação de sensibilidade e especificidade, foi usada a análise TG-ROC. A concordância entre os resultados dos quatro laboratórios foi determinada com base no indicador kappa e no coeficiente de correlação de Pearson. Os pontos de corte do TPF situaram-se entre 85,2 e 93,6 mP, conforme o laboratório. A sensibilidade variou de 91,7 a 97,3%, e a especificidade situou-se na faixa de 82,6 a 98,3%. Na comparação entre os resultados do TPF dos quatro laboratórios, o indicador kappa ficou entre 0,69 e 0,95, o que indica, na maioria das situações, reprodutibilidade excelente, e o coeficiente de correlação variou entre 0,76 e 0,99. Os resultados indicaram que o TPF apresentou bom desempenho, na maioria das situações, com sensibilidade e especificidade elevadas. Em comparação com os testes convencionais, o TPF apresenta as vantagens de ser de execução mais rápida e mais fácil e não estar sujeito à ocorrência de prozona, como a RFC e o 2-ME, nem de atividade anticomplementar, como a RFC.

Detection of Leptospira spp. in the semen and urine of bulls serologically reactive to Leptospira interrogans serovar hardjo

This study evaluated PCR for the detection of leptospires in semen and urine of ten serologically reactive bulls, comparing these results with those obtained with other diagnosis techniques. Two collections of materials were done in alternate days. Semen and urine samples were separated in aliquots for: direct visualization in dark field microscopy; inoculation in hamsters (for semen only); isolation in culture media; and PCR. No hamster was positive by the microscopic agglutination test (MAT); kidney and liver fragments from the hamsters were used in an isolation attempt in culture media, with one positive isolation from the kidney of a hamster inoculated with semen of one bull, and from liver of hamsters inoculated with semen of three bulls. Isolation in culture was negative for all semen samples, but positive for five urine samples by direct inoculation. In PCR there was no positive result for semen samples, and only one urine sample was positive, which was coincident with one of the positive cultures. It was not possible to visualize leptospires in any of the samples by dark field microscopy.

O presente trabalho avaliou a PCR na detecção de leptospiras em sêmen e urina de dez touros sorologicamente reagentes, comparando seus resultados com aqueles obtidos por outras técnicas de diagnóstico. Foram realizadas duas colheitas de materiais em dias alternados. As amostras de sêmen e de urina foram separadas em alíquotas para visualização direta em microscopia de campo escuro, inoculação em hamsters (apenas para o sêmen), isolamento em meio de cultura e PCR. Nenhum hamster apresentou positividade na prova de soroaglutinação microscópica (SAM); fragmentos de rins e fígado desses animais foram utilizados para a tentativa de isolamento em meio de cultura, sendo positivo o cultivo a partir do rim de hamster inoculado com semen de um touro, e do fígado de hamsters inoculados com o semen de três touros. O isolamento em meio de cultura foi negativo para todas as amostras de sêmen, mas foi positivo para cinco amostras de urina. Na PCR não houve resultado positivo para as amostras de sêmen, e apenas uma amostra de urina apresentou resultado positivo, sendo coincidente com uma das culturas positivas. Não foi possível visualizar leptospiras em nenhuma das amostras por exame direto em microscopia de campo escuro.

Pesquisa de anticorpos contra Leptospira spp. em animais silvestres e em estado feral da região de Nhecolândia, Mato Grosso do Sul, Brasil: utilização da técnica de imuno-histoquímica para detecção do agente

Three hundred and fifteen serum samples of several animal species living in wild or in feral state in the area of Nhecolândia, Corumbá, MS, Brazil, were examined by the microscopic agglutination test. Of these samples, 67 were of feral bovine (Bos taurus indicus), 39 of feral pigs (Sus scrofa), 39 of buffaloes (Bubalus bubalis), nine of coatis (Nasua nasua), 41 of pampas deer (Ozotoceros bezoarticus), 10 of brocket deer (Mazama americana) and 110 of feral sheep (Ovis aries). In 12 dead animals (six feral pigs, four pampas deer and two feral sheep), isolation attempts and Leptospira identification through the immunohistochemistry were accomplished. Sixty-four (20.3%) of the samples reacted to at least one serovar of pathogenic Leptospira; 41.0% of the buffaloes, 40.3% of the feral bovine, 17.9% of the feral pigs, 9% of the feral sheep, and 9.7% of the pampas deer serum samples were reactors. All the serum samples of brocket deer and of coatis were not reactors. The most frequent serovars for the studied animal species were: pomona for buffaloes and feral sheep; icterohaemorrhagiae for feral sheep, pampas deer and feral pigs; and copenhageni for pampas deer and feral pigs. The attempts of Leptospira isolation resulted negative, and the immunohistochemistry analysis revealed Leptospira in the liver of one feral pig. Microscopic examination of the kidney revealed vascular congestion, hemorrhage and infiltration of mononuclear inflammatory cells in the interstice.

Foram examinadas 315 amostras de soros sangüíneos de diversas espécies de animais que vivem em estado feral ou silvestre na região de Nhecolândia, Corumbá, MS, por meio da prova de soroaglutinação microscópica para leptospirose. Dessas amostras, 67 foram de bois baguás (Bos taurus indicus), 39 de porcos-monteiros (Sus scrofa), 39 de búfalos (Bubalus bubalis), nove de quatis (Nasua nasua), 41 de veados-campeiros (Ozotoceros bezoarticus), 10 de veados-mateiros (Mazama americana) e 110 amostras de ovinos (Ovis aries). Em 12 animais que vieram a óbito, seis porcos-monteiros, quatro veados-campeiros e dois ovinos, foram realizadas tentativas de isolamento de Leptospira do fígado e dos rins por cultura em meio semi-sólido. Fragmentos desses órgãos foram submetidos a exame histopatológico e também a exame para detecção das Leptospiras pela técnica de imuno-histoquímica. Os resultados dos exames sorológicos mostraram que 64 (20,3%) das amostras foram reagentes para, pelo menos, um sorovar de Leptospira patogênica; foram reagentes 41,0% das amostras de búfalos, 40,3% das de bois baguás, 17,9% das de porcos-monteiros, 9% das de ovinos e 9,7% das amostras de veados-campeiros; nenhuma das amostras de veados-mateiros e de quatis foi reagente. Os sorovares mais freqüentes foram: pomona, para búfalos e ovinos; icterohaemorrhagiae, para ovinos, veados-campeiros e suínos; e copenhageni, para veados-campeiros e suínos. As tentativas de isolamento dos rins e fígados foram todas negativas, e pela técnica da imuno-histoquímica foi detectada Leptospira no fígado de um porco-monteiro. As principais alterações estruturais, encontradas nos rins de dois veados-campeiros e de um porco-monteiro, foram infiltrado inflamatório intersticial com congestão associada a hemorragias.

Pesquisa de anticorpos contra Leptospira spp. em animais silvestres e em estado feral da região de Nhecolândia, Mato Grosso do Sul, Brasil: utilização da técnica de imuno-histoquímica para detecção do agente

Three hundred and fifteen serum samples of several animal species living in wild or in feral state in the area of Nhecolândia, Corumbá, MS, Brazil, were examined by the microscopic agglutination test. Of these samples, 67 were of feral bovine (Bos taurus indicus), 39 of feral pigs (Sus scrofa), 39 of buffaloes (Bubalus bubalis), nine of coatis (Nasua nasua), 41 of pampas deer (Ozotoceros bezoarticus), 10 of brocket deer (Mazama americana) and 110 of feral sheep (Ovis aries). In 12 dead animals (six feral pigs, four pampas deer and two feral sheep), isolation attempts and Leptospira identification through the immunohistochemistry were accomplished. Sixty-four (20.3%) of the samples reacted to at least one serovar of pathogenic Leptospira; 41.0% of the buffaloes, 40.3% of the feral bovine, 17.9% of the feral pigs, 9% of the feral sheep, and 9.7% of the pampas deer serum samples were reactors. All the serum samples of brocket deer and of coatis were not reactors. The most frequent serovars for the studied animal species were: pomona for buffaloes and feral sheep; icterohaemorrhagiae for feral sheep, pampas deer and feral pigs; and copenhageni for pampas deer and feral pigs. The attempts of Leptospira isolation resulted negative, and the immunohistochemistry analysis revealed Leptospira in the liver of one feral pig. Microscopic examination of the kidney revealed vascular congestion, hemorrhage and infiltration of mononuclear inflammatory cells in the interstice.

Foram examinadas 315 amostras de soros sangüíneos de diversas espécies de animais que vivem em estado feral ou silvestre na região de Nhecolândia, Corumbá, MS, por meio da prova de soroaglutinação microscópica para leptospirose. Dessas amostras, 67 foram de bois baguás (Bos taurus indicus), 39 de porcos-monteiros (Sus scrofa), 39 de búfalos (Bubalus bubalis), nove de quatis (Nasua nasua), 41 de veados-campeiros (Ozotoceros bezoarticus), 10 de veados-mateiros (Mazama americana) e 110 amostras de ovinos (Ovis aries). Em 12 animais que vieram a óbito, seis porcos-monteiros, quatro veados-campeiros e dois ovinos, foram realizadas tentativas de isolamento de Leptospira do fígado e dos rins por cultura em meio semi-sólido. Fragmentos desses órgãos foram submetidos a exame histopatológico e também a exame para detecção das Leptospiras pela técnica de imuno-histoquímica. Os resultados dos exames sorológicos mostraram que 64 (20,3%) das amostras foram reagentes para, pelo menos, um sorovar de Leptospira patogênica; foram reagentes 41,0% das amostras de búfalos, 40,3% das de bois baguás, 17,9% das de porcos-monteiros, 9% das de ovinos e 9,7% das amostras de veados-campeiros; nenhuma das amostras de veados-mateiros e de quatis foi reagente. Os sorovares mais freqüentes foram: pomona, para búfalos e ovinos; icterohaemorrhagiae, para ovinos, veados-campeiros e suínos; e copenhageni, para veados-campeiros e suínos. As tentativas de isolamento dos rins e fígados foram todas negativas, e pela técnica da imuno-histoquímica foi detectada Leptospira no fígado de um porco-monteiro. As principais alterações estruturais, encontradas nos rins de dois veados-campeiros e de um porco-monteiro, foram infiltrado inflamatório intersticial com congestão associada a hemorragias.

Persistência de anticorpos aglutinantes e fixadores de complemento em bezerras vacinadas com Brucella Abortus amostra B19 / Persistência de anticorpos aglutinantes e fixadores de complemento em bezerras vacinadas com Brucella Abortus amostra B19

The results of an experiment to invetigate the presistence of agglutinanting and fixing complement antibodies in seventeen female calves, 3 to 18 months old, vaccinated with Brucella abortus strain 19 under field conditions, are reported. The animals were sampled for serum in the day of vaccination and thereafterup to 364 days. The sera were examined by the plate agglutination (PA T), complement fixation (CFT) and Rose Bengal plate tests (RBPT). Six days after vaccination all the 17 animals showed agglutination titre between 1 in 25 and 1 in 400 in the PAT and the higher average occurred at the 14tn day after vaccination. Theree hundred and sixty four days after vaccination a single animal, vaccinated at 11 months old, showed titre 1 in 50 in the PAT. Fourteem days after vaccination all animals revealed titres in the CFT and the highest average occurred at the 17tn day. One hundred and sixty days after vaccination a single animal showed fixing complement titre that persisted until the end of the experiment, this same animal maintained for more time the agglutination titre in the PA T. Six days after vaccination 14 out of 17 animals showed positive results to the RBPT. Fourteen days after vaccination all animals were positives to the RBPT but the antibody was no longer detdctable after 259 days. For the three serological tests there was a rapid decrease in the antibody levels bu

Vacinaram 17 bezerras, com idade entre três e 18 meses, com Uma dose padrão de vacina Bi9 contra brucelose, a fim de se verificar a persistência de anticorpos aglutinantes e de anticorpos fixadores de complemento. Colheu-se o sangue desses animais no dia da vacinação e, posteriormente, em intervalos até os 364 dias. Submeteu-se essas amostras às provas de soro-aglutinação rápida (SAR), antigeno acidificado tamponado (PAAT) e à reação de fixação do complemento (RFC). Seis dias após a vacinação todas as 17 bezerras já apresentavam título en tre 1:25 e 1:400 à SAR, e a mais alta média desses títulos ocor-ocorreu aos 14 dias de vacinação. Após 364 dias apenas uma bezerra, vacinada aos 11 meses de idade, apresentava título {1:50) à prova da SAR. Aos 14 dias de vacinação todas as bezerras apresentavam título à RFC e a mais alta média foi verificadas aos 17 dias. Aos 160 dias apenas uma das bezerras mantinha título fixador de complemento, fato este que persistiu até o final do estudo, sendo essa a mesma bezerra que manteve por mais tempo o título ã SAR. A PAAT, realizada após seis dias de vacinação, demonstrou resultado positivo para 14 das 17 bezerras. Aos 14 dias de vacinação todas as bezerras apresentavam resultado positivo à PAAT. Para três provas sorológicas realizadas houve uma rápida diminuição nos níveis de anticorpos, tendo havido uma bezerra na qual esses níveis persistiram

Persistência de anticorpos aglutinantes e fixadores de complemento em bezerras vacinadas com Brucella Abortus amostra B19. / Persistência de anticorpos aglutinantes e fixadores de complemento em bezerras vacinadas com Brucella Abortus amostra B19.

The results of an experiment to invetigate the presistence of agglutinanting and fixing complement antibodies in seventeen female calves, 3 to 18 months old, vaccinated with Brucella abortus strain 19 under field conditions, are reported. The animals were sampled for serum in the day of vaccination and thereafterup to 364 days. The sera were examined by the plate agglutination (PA T), complement fixation (CFT) and Rose Bengal plate tests (RBPT). Six days after vaccination all the 17 animals showed agglutination titre between 1 in 25 and 1 in 400 in the PAT and the higher average occurred at the 14tn day after vaccination. Theree hundred and sixty four days after vaccination a single animal, vaccinated at 11 months old, showed titre 1 in 50 in the PAT. Fourteem days after vaccination all animals revealed titres in the CFT and the highest average occurred at the 17tn day. One hundred and sixty days after vaccination a single animal showed fixing complement titre that persisted until the end of the experiment, this same animal maintained for more time the agglutination titre in the PA T. Six days after vaccination 14 out of 17 animals showed positive results to the RBPT. Fourteen days after vaccination all animals were positives to the RBPT but the antibody was no longer detdctable after 259 days. For the three serological tests there was a rapid decrease in the antibody levels bu

Vacinaram 17 bezerras, com idade entre três e 18 meses, com Uma dose padrão de vacina Bi9 contra brucelose, a fim de se verificar a persistência de anticorpos aglutinantes e de anticorpos fixadores de complemento. Colheu-se o sangue desses animais no dia da vacinação e, posteriormente, em intervalos até os 364 dias. Submeteu-se essas amostras às provas de soro-aglutinação rápida (SAR), antigeno acidificado tamponado (PAAT) e à reação de fixação do complemento (RFC). Seis dias após a vacinação todas as 17 bezerras já apresentavam título en tre 1:25 e 1:400 à SAR, e a mais alta média desses títulos ocor-ocorreu aos 14 dias de vacinação. Após 364 dias apenas uma bezerra, vacinada aos 11 meses de idade, apresentava título {1:50) à prova da SAR. Aos 14 dias de vacinação todas as bezerras apresentavam título à RFC e a mais alta média foi verificadas aos 17 dias. Aos 160 dias apenas uma das bezerras mantinha título fixador de complemento, fato este que persistiu até o final do estudo, sendo essa a mesma bezerra que manteve por mais tempo o título ã SAR. A PAAT, realizada após seis dias de vacinação, demonstrou resultado positivo para 14 das 17 bezerras. Aos 14 dias de vacinação todas as bezerras apresentavam resultado positivo à PAAT. Para três provas sorológicas realizadas houve uma rápida diminuição nos níveis de anticorpos, tendo havido uma bezerra na qual esses níveis persistiram

Sensitivity and specificity of a competitive enzyme immunoassay in the serodiagnosis of bovine brucellosis / Sensibilidade e especificidade de um teste imunoenzimático competitivo no diagnóstico sorológico da brucelose bovina

The purpose of this work was to evaluate the sensitivity and the specificity of a competitive enzyme immunoassay, using as conjugate the monoclonal antibodies BM-38 and BM-40, in the serodiagnosis of bovine brucellosis. Seventy-four sera from culture-positive cattle and 2,118 cattle sera from herds free from brucellosis and negative to the Rose Bengal plate test were examined. The competitive enzyme immunoassay, using any of the two conjugates, was able to reveal the presence of antibodies to Brucella lipopolysaccharide in all of the 74 sera of the infected cattle, resulting in a sensitivity of 100%. The specificity of the test using the conjugate BM-38 was 98.82% and using the conjugate BM-40 was 99.95%. These results indicated that the competitive enzyme immunoassay, mainly when using the conjugate BM-40, consists in a technique very useful in the confirmation of the serological diagnosis of bovine brucellosis.

O trabalho teve por objetivo avaliar a sensibilidade e a especificidade de um teste imunoenzimático competitivo, empregando como conjugado os anticorpos monoclonais BM-38 e BM-40, no diagnóstico sorológico da brucelose bovina. Foram examinados 74 soros de bovinos dos quais havia sido isolada Brucella abortus e 2.118 soros de bovinos procedentes de rebanhos livres de brucelose e que apresentaram resultado negativo quando submetidos ao teste Rosa Bengala. O teste imunoenzimático competitivo, usando qualquer dos dois conjugados, foi capaz de revelar a presença de anticorpos contra o lipopolissacáride bacteriano em todos os soros de bovinos infectados, o que resulta em uma sensibilidade de 100%. A especificidade do teste usando o conjugado BM-38 foi de 98.82% e usando o conjugado BM-40 foi de 99,95%. Estes resultados indicam que o teste imunoenzimático competitivo, principalmente ao se empregar o conjugado BM-40, consiste em um método bastante útil para ser usado como teste confirmatório no diagnóstico sorológico da brucelose bovina.

Pesquisa de anticorpos contra Brucella sp. em soros de eqüinos com e sem abscesso de cernelha

Com o objetivo de verificar a relação entre a presença de anticorpos contra Brucel/a sp. e de sintomas compatíveis combrucelose, foram examinados soros de 50 eqüinos com abscesso de cernelha e de 50 eqüinos sem esse sintoma. Ossoros foram submetidos às provas de soroaglutinação em placa, fixação de complemento e rosa Bengala. Analisandose,pelo teste de X2 , a relação entre a presença ou não de abscesso de cernelha e os resultados obtidos nos testessorológicos, observou-se uma dependência entre a distribuição das freqüências (P > 0,005), com o X2 apresentandovalores de 12,39 para a prova de soroaglutinação, adotando-se como ponto de corte o título 1/1 00; 16,06, mas adotandoseo título 1/50 como ponto de corte; de 16,53 para o teste rosa Bengala; e de 18,04 para a reação de fixação decomplemento. Os resultados deste trabalho mostram que, embora a presença de abscesso de cernelha em eqüinosnem sempre esteja associada à brucelose, existe uma forte relação entre aquele sintoma e a presença deanticorpos contra Brucella sp., e que a reação de fixação de complemento foi a prova que apresentou maior proporçãode resultados negativos entre os animais sem o sintoma.

Pesquisa de anticorpos contra Brucella sp. em soros de eqüinos com e sem abscesso de cernelha

Com o objetivo de verificar a relação entre a presença de anticorpos contra Brucel/a sp. e de sintomas compatíveis combrucelose, foram examinados soros de 50 eqüinos com abscesso de cernelha e de 50 eqüinos sem esse sintoma. Ossoros foram submetidos às provas de soroaglutinação em placa, fixação de complemento e rosa Bengala. Analisandose,pelo teste de X2 , a relação entre a presença ou não de abscesso de cernelha e os resultados obtidos nos testessorológicos, observou-se uma dependência entre a distribuição das freqüências (P > 0,005), com o X2 apresentandovalores de 12,39 para a prova de soroaglutinação, adotando-se como ponto de corte o título 1/1 00; 16,06, mas adotandoseo título 1/50 como ponto de corte; de 16,53 para o teste rosa Bengala; e de 18,04 para a reação de fixação decomplemento. Os resultados deste trabalho mostram que, embora a presença de abscesso de cernelha em eqüinosnem sempre esteja associada à brucelose, existe uma forte relação entre aquele sintoma e a presença deanticorpos contra Brucella sp., e que a reação de fixação de complemento foi a prova que apresentou maior proporçãode resultados negativos entre os animais sem o sintoma.

Alterações reprodutivas, hematológicas e anatomopatológicas em fêmeas suínas com títulos de anticorpos contra Leptospira interrogans sorotipo icterohaemorrhagiae

Foi realizada uma investigação em quatro rebanhos de suínos que apresentavam transtornos reprodutivos, com osobjetivos de verificar a importância do sorotipo icterohaemorrhagiae como agente etiológico da leptospirose suína eidentificar as alterações reprodutivas, hematológicas e anatomopatológicas provocadas pela infecção. De 158 fêmeas. descartadas por apresentarem insuficiência reprodutiva e manifestações clínicas diversas, foram escolhidas 112, quereagiram contra Leptospira interrogans. Das 112 fêmeas reagentes, 106 apresentaram trtulos contra o sorotipoicterohaemorrhagiae, cinco contra o sorotipo pomona e uma contra o sorotipo bratislava. Nas fêmeas com títulos deanticorpos contra o sorotipo icterohaemorrhagiaeforam observadas alterações reprodutivas de abortamento; reabsorçãoembrionária, anestro, repetição irregular de cio, nascimento de crias fracas, natimorto, prolificidade 5 e descargasvulvares, além de alterações nos leucogramas e nos exames histopatológicos. Os leucogramas revelaram como maisimportante alteração a leucocitose com neutrofilia e monocitose. Dos 106 suínos reagentes, 88 apresentaram alteraçõesanatomopatológicas no aparelho geniturinário e 18 não apresentaram qualquer tipo de lesão. As principais lesõeshistopatológicas encontradas foram nefrite, nefrose, endometrite e salpingite.

Alterações reprodutivas, hematológicas e anatomopatológicas em fêmeas suínas com títulos de anticorpos contra Leptospira interrogans sorotipo icterohaemorrhagiae

Foi realizada uma investigação em quatro rebanhos de suínos que apresentavam transtornos reprodutivos, com osobjetivos de verificar a importância do sorotipo icterohaemorrhagiae como agente etiológico da leptospirose suína eidentificar as alterações reprodutivas, hematológicas e anatomopatológicas provocadas pela infecção. De 158 fêmeas. descartadas por apresentarem insuficiência reprodutiva e manifestações clínicas diversas, foram escolhidas 112, quereagiram contra Leptospira interrogans. Das 112 fêmeas reagentes, 106 apresentaram trtulos contra o sorotipoicterohaemorrhagiae, cinco contra o sorotipo pomona e uma contra o sorotipo bratislava. Nas fêmeas com títulos deanticorpos contra o sorotipo icterohaemorrhagiaeforam observadas alterações reprodutivas de abortamento; reabsorçãoembrionária, anestro, repetição irregular de cio, nascimento de crias fracas, natimorto, prolificidade 5 e descargasvulvares, além de alterações nos leucogramas e nos exames histopatológicos. Os leucogramas revelaram como maisimportante alteração a leucocitose com neutrofilia e monocitose. Dos 106 suínos reagentes, 88 apresentaram alteraçõesanatomopatológicas no aparelho geniturinário e 18 não apresentaram qualquer tipo de lesão. As principais lesõeshistopatológicas encontradas foram nefrite, nefrose, endometrite e salpingite.

Fatores de risco e presença de anticorpos contra Brucella canis e amostras lisas de Brucella em cães do município de Araguaína, Tocantins, Brasil / Risk factors and presence of antibodies to Brucella canis and smooth Brucella in dogs from the municipality of Araguaína, Tocantins, Brazil

The aim of this survey was to verify the occurrence of anti-Leptospira spp. antibodies in captive animals in the Parque Zoobotânico Arruda Câmara, João Pessoa, Paraíba State, Northeastern Brazil. Blood samples were collected from 49 animals: 26 mammals of the species Sapajus libidinosus, Cebus flavius, Saimiri sciureu, Coendu sp., Pseudalopex vetulus, Leopardus pardalis, Leopardus tigrinus, Galactitis vitata, Eira barbara, Nasua nasua, Tayassu tajacu and Ratus norvegicus; 10 birds of the species Penelope jacucaca, Pavo cristatus, Anodorhynchus hyacinthinus, Ara chlorothpterus, Pionites leucogaster, Polyborus plancus, Geranoaetus melanoleucus and Urubitinga urubitinga; and 13 reptiles of the species Caiman latirostris, Paleosuchus trigonatus, Caiman crocodilus, Tupinabis merinae, Tupinambis teguixin, Boa constrictor, Corallus hortulanus, Python molurus, Bufocephala vanderhaegei, Geochelone denticulata and Geochelone carboraria. Sera were examined by the microscopic agglutination teste (MAT) using 24 serovars as antigens and cut-off point of 1:100. One ocelot (Leopardo pardalis) presented positive reaction for the Icterohaemorrhagiae serovar with titer of 100, however, it did not show any clinical sign of the infection. Sinantropic rodents are the main reservoirs of this serovar, which suggests the need of maintenance and continuous evaluation of rodent control programs.

Canine brucellosis is an infectious disease of worldwide distribution that can affect dogs, wild canids and man. It is caused by Brucella canis, but dogs can also be infected by smooth Brucella such as B. abortus and B. suis. Due to the increasing importance of dogs in our society, to the scarcity of information about canine brucellosis in the country and its zoonotic character, the aims of the present study were (i) to conduct a survey on the infection by B. canis and smooth Brucella in dogs from the municipality of Araguaína, Tocantins, Brazil, and (ii) to evaluate the risk factors associated with these infections. Sera from 241 dogs were analyzed by agar gel immunodiffusion (AGID) to detect B. canisantibodies, and Buffered Acidified Plate Antigen test (BAPA) and fluorescence polarization assay (FPA) to detect antibodies to smooth Brucella. From the 241 tested dogs, 132 reacted in the AGID and 128 reacted in the BAPA, but only two were positive in FPA. The seroprevalences of B. canis and smooth Brucella infections in dogs in Araguaína were 54.77% (95% CI: 48.25 to 61.17%) and 0.83% (95% CI: 0.10 to 2.97%), respectively. The analysis of risk factors showed associations between B. canis infection and vaccination against leptospirosis, and between B. canis infection and use of manufactured food. In conclusion, data from the present study showed a low prevalence of infection by s

Fatores de risco e presença de anticorpos contra Brucella canis e amostras lisas de Brucella em cães do município de Araguaína, Tocantins, Brasil / Risk factors and presence of antibodies to Brucella canis and smooth Brucella in dogs from the municipality of Araguaína, Tocantins, Brazil

The aim of this survey was to verify the occurrence of anti-Leptospira spp. antibodies in captive animals in the Parque Zoobotânico Arruda Câmara, João Pessoa, Paraíba State, Northeastern Brazil. Blood samples were collected from 49 animals: 26 mammals of the species Sapajus libidinosus, Cebus flavius, Saimiri sciureu, Coendu sp., Pseudalopex vetulus, Leopardus pardalis, Leopardus tigrinus, Galactitis vitata, Eira barbara, Nasua nasua, Tayassu tajacu and Ratus norvegicus; 10 birds of the species Penelope jacucaca, Pavo cristatus, Anodorhynchus hyacinthinus, Ara chlorothpterus, Pionites leucogaster, Polyborus plancus, Geranoaetus melanoleucus and Urubitinga urubitinga; and 13 reptiles of the species Caiman latirostris, Paleosuchus trigonatus, Caiman crocodilus, Tupinabis merinae, Tupinambis teguixin, Boa constrictor, Corallus hortulanus, Python molurus, Bufocephala vanderhaegei, Geochelone denticulata and Geochelone carboraria. Sera were examined by the microscopic agglutination teste (MAT) using 24 serovars as antigens and cut-off point of 1:100. One ocelot (Leopardo pardalis) presented positive reaction for the Icterohaemorrhagiae serovar with titer of 100, however, it did not show any clinical sign of the infection. Sinantropic rodents are the main reservoirs of this serovar, which suggests the need of maintenance and continuous evaluation of rodent control programs.

Canine brucellosis is an infectious disease of worldwide distribution that can affect dogs, wild canids and man. It is caused by Brucella canis, but dogs can also be infected by smooth Brucella such as B. abortus and B. suis. Due to the increasing importance of dogs in our society, to the scarcity of information about canine brucellosis in the country and its zoonotic character, the aims of the present study were (i) to conduct a survey on the infection by B. canis and smooth Brucella in dogs from the municipality of Araguaína, Tocantins, Brazil, and (ii) to evaluate the risk factors associated with these infections. Sera from 241 dogs were analyzed by agar gel immunodiffusion (AGID) to detect B. canisantibodies, and Buffered Acidified Plate Antigen test (BAPA) and fluorescence polarization assay (FPA) to detect antibodies to smooth Brucella. From the 241 tested dogs, 132 reacted in the AGID and 128 reacted in the BAPA, but only two were positive in FPA. The seroprevalences of B. canis and smooth Brucella infections in dogs in Araguaína were 54.77% (95% CI: 48.25 to 61.17%) and 0.83% (95% CI: 0.10 to 2.97%), respectively. The analysis of risk factors showed associations between B. canis infection and vaccination against leptospirosis, and between B. canis infection and use of manufactured food. In conclusion, data from the present study showed a low prevalence of infection by s