Genetic variability of Streptococcus mutans isolated from low-income families, as shown by RAPD markers

The detection of Streptococcus mutans isolates with high genetic variability in different individuals indicates the occurrence of transmissibility. In this context, nine low-income families (40 individuals in total) with similar social conditions were assessed to identify the bioserotypes of S. mutans using both biochemical and RAPD markers and to establish the degree of similarity among the intra-familial isolates. The polymorphism analysis used the coefficient of Jaccard in both a Principal Coordinates Analysis (PCO) and in a UPGMA clustering method. A total of 157 isolates were obtained from salivary samples, using the morphology of colonies recovered using MSB agar as indicators. From those, 64 were characterized biochemically as S. mutans and 10 as S. sombrinus. Genetic variability among isolates based on RAPD markers was not consistent with their intra-familial distribution. In particular, some individuals might have experienced multiple infections given the high genetic variability among their isolates. The occurrence of 4 isolates with 100% genetic similarity is indicative of intra-familial transmission.

A detecção de isolados de S. mutans com alta similaridade genética em indivíduos diferentes, sugere a existência de transmissibilidade. Neste contexto, nove famílias (40 indivíduos) de baixo poder aquisitivo com condições sociais homogêneas foram avaliadas, visando identificar os biosorotipos de S. mutans por meio de bioquimismo e marcadores RAPD e estabelecer o grau de similaridade entre os isolados intra-familiar. Para a análise de polimorfismo utilizou-se coeficiente de Jaccard, análise de coordenadas principais (PCO) e método "UPGMA". Foram obtidos 157 isolados, a partir de amostras salivares, usando como indicador a morfologia das colônias recuperadas em ágar MSB. Destes, 64 foram caracterizados bioquimicamente como S. mutans e 10 como S. sobrinus. A partir dos marcadores RAPD verificou-se variabilidade genética entre isolados, sendo diferente a distribuição intra-familiar destes. Em determinados indivíduos podem ter ocorrido infecções múltiplas, devido a grande variabilidade dos isolados. A existência de quatro isolados apresentando 100% de similaridade, sugeriu transmissão intra-familiar.

Analysis of the in vitro adherence of Streptococcus mutans and Candida albicans

The objective of the present study was to investigate the in vitro adherence capacity of Streptococcus mutans and Candida albicans. Adherence assays were conducted on dental surfaces and analyzed by scanning electron microscopy (SEM). Extracted human teeth were inoculated with Streptococcus mutans or Candida albicans and with both species simultaneously, and incubated at 37ºC for 21 days. Bacterial inocula had been obtained from saliva samples of children that had been colonized by both organisms. ATCC reference strains were used as controls. SEM analyses showed that the biofilm that covered the entire analyzed dental surface was more homogeneous inoculated with the two microorganisms simultaneously than with each species separately. In a second experiment, carried out with isolates that had shown the highest adherence the isolates were tested for adherence to high-density polyethylene substrates. The potentialization of the adherence capacity of Streptococcus mutans and Candida albicans when in association was confirmed.

O objetivo deste trabalho foi investigar a capacidade de aderência in vitro de Streptococcus mutans e Candida albicans. Ensaios de aderência foram realizados in vitro na superfície dentária, com posterior análise por Microscopia Eletrônica de Varredura (M.E.V.). Dentes humanos extraídos foram inoculados com Streptococcus mutans e Candida albicans, além de ambas espécies em conjunto, e foram incubados a 37ºC por 21 dias. Os inóculos eram provenientes de amostras salivares de crianças colonizadas por ambos microrganismos. Como controles foram utilizadas linhagens de referência ATCC dos dois microrganismos. A análise por M.E.V. mostrou a formação de um biofilme que cobriu toda a superfície dentária analisada de forma mais homogênea quando incubados juntos do que separadamente. Um segundo experimento foi desenvolvido utilizando isolados mostrando maior aderência dos experimentos anteriores e cortes de polietileno de alta densidade como substrato. A potencialização da capacidade de aderência de Streptococcus mutans e Candida albicans em associação foi confirmada.

Isolation of herpotrichiellacious fungi from the environment

Herpotrichiellaceous fungi, common agents of chromoblastomycosis and phaeohyphomycosis, were searched in samples of rotten wood, leaf littler, bark and soil of the rhizosphere, collected in the Centro Nacional de Pesquisas de Florestas/EMBRAPA, Colombo, PR, Brazil. Morphological analyses of macro, optic and scanning electron microscopy, as well as the determination of the nutritional pattern of the isolated strains were carried out for a taxonomical study. In a total of 17 colonies, 3 isolates (17.6%) were identified as species of medical relevance: Cladophialophora bantiana (Sacc.) de Hoog et al., Fonsecaea pedrosoi (Brumpt) Negroni and Phialophora verrucosa Medlar. The identifications were based on the results of the analyses and on the comparison with CBS (Centraal Bureau voor Schimmelcultures) reference strains. This investigation revealed the saprophytic existence of species known as agents of chromoblastomycosis and phaeohyphomycosis. These diseases are considered autochthonous in the studied area.

Fungos da família Herpotrichiellaceae, agentes comuns de cromoblastomicose e feohifomicose, foram isolados de amostras de solo e de material vegetal em decomposição, durante duas coletas realizadas na propriedade do Centro Nacional de Pesquisa de Florestas/EMBRAPA, localizada em Colombo, PR, Brasil. Após o isolamento, os fungos foram submetidos às análises óticas macro e microscópicas e eletrônica de varredura, além do estudo de seus padrões nutricionais. Das 17 colônias de fungos isoladas, 3 (17,6%) foram identificadas como espécies de importância clínica, tais como: Cladophialophora bantiana (Sacc.) de Hoog et al, Fonsecaea pedrosoi (Brumpt) Negroni e Phialophora verrucosa Medlar. As identificações basearam-se nos resultados dos testes fisiológicos e na comparação da morfologia dos isolados com linhagens referência do CBS (Centraal Bureau voor Schimmelcultures). Esta investigação revelou a existência sapróbia de espécies de fungos conhecidas como agentes de cromoblastomicose e feohifomicose. Tais doenças são tidas como autóctones na região estudada.