Falsa broca aumenta disseminação de Beauveria bassiana em populações de campo da broca-do-rizoma da bananeira

Horizontal transmission of entomopathogenic fungi plays an important role in the epizootiology, because it is directly associated with the spread of causal agents of insect diseases. In hosts with restricted mobility, the presence of secondary pests in the agroecosystem can help in the formation of secondary disease outbreaks and increase the mortality of the target pest. For this purpose, the dissemination of Beauveria bassiana inoculated using tile-type baits was evaluated in a banana plantation infested with Cosmopolites sordidus (Piracicaba) and one with C. sordidus and Metamasius hemipterus (Botucatu). In Piracicaba, insects contaminated with the pathogen were not found in the control group, and infection rates in the plots that received B. bassiana ranged between 8 and 15%. In Botucatu, the infection rate of insects in the control reached 17%, whereas in the fungal treatment plots, it varied from 28 to 54%. The present results demonstrate the influence of M. hemipterus in the dissemination of B. bassiana in populations of C. sordidus, a target pest of this crop.

A transmissão horizontal de fungos entomopatogênicos tem papel importante na epizootiologia, pois está diretamente associada à disseminação do agente causal da doença de insetos. Em hospedeiros que apresentam restrita mobilidade, a presença de pragas secundárias no agroecossistema pode ajudar na formação de focos secundários da doença e, com isso, aumentar a mortalidade das pragas-chave. Para tanto, a disseminação de Beauveria bassiana, introduzida inoculativamente através de iscas tipo telha, foi avaliada em um bananal infestado por Cosmopolites sordidus (Piracicaba) e outro por C. sordidus e Metamasius hemipterus (Botucatu). Constatou-se que, em Piracicaba, não foram capturados insetos infectados na testemunha, sendo os índices de infecção nas parcelas que receberam B. bassiana de 8 e 15%. Em Botucatu, o índice de infecção dos insetos capturados na testemunha chegou a 17%, enquanto que, nas parcelas tratadas, variou de 28 a 54%. Os resultados obtidos neste trabalho demostram que a presença de M. hemipterus influenciou na disseminação de B. bassiana para a população de C. sordidus, praga-chave dessa cultura.

Falsa broca aumenta disseminação de Beauveria bassiana em populações de campo da broca-do-rizoma da bananeira

Horizontal transmission of entomopathogenic fungi plays an important role in the epizootiology, because it is directly associated with the spread of causal agents of insect diseases. In hosts with restricted mobility, the presence of secondary pests in the agroecosystem can help in the formation of secondary disease outbreaks and increase the mortality of the target pest. For this purpose, the dissemination of Beauveria bassiana inoculated using tile-type baits was evaluated in a banana plantation infested with Cosmopolites sordidus (Piracicaba) and one with C. sordidus and Metamasius hemipterus (Botucatu). In Piracicaba, insects contaminated with the pathogen were not found in the control group, and infection rates in the plots that received B. bassiana ranged between 8 and 15%. In Botucatu, the infection rate of insects in the control reached 17%, whereas in the fungal treatment plots, it varied from 28 to 54%. The present results demonstrate the influence of M. hemipterus in the dissemination of B. bassiana in populations of C. sordidus, a target pest of this crop.

A transmissão horizontal de fungos entomopatogênicos tem papel importante na epizootiologia, pois está diretamente associada à disseminação do agente causal da doença de insetos. Em hospedeiros que apresentam restrita mobilidade, a presença de pragas secundárias no agroecossistema pode ajudar na formação de focos secundários da doença e, com isso, aumentar a mortalidade das pragas-chave. Para tanto, a disseminação de Beauveria bassiana, introduzida inoculativamente através de iscas tipo telha, foi avaliada em um bananal infestado por Cosmopolites sordidus (Piracicaba) e outro por C. sordidus e Metamasius hemipterus (Botucatu). Constatou-se que, em Piracicaba, não foram capturados insetos infectados na testemunha, sendo os índices de infecção nas parcelas que receberam B. bassiana de 8 e 15%. Em Botucatu, o índice de infecção dos insetos capturados na testemunha chegou a 17%, enquanto que, nas parcelas tratadas, variou de 28 a 54%. Os resultados obtidos neste trabalho demostram que a presença de M. hemipterus influenciou na disseminação de B. bassiana para a população de C. sordidus, praga-chave dessa cultura.

Biological parameters of Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) assayed with Bacillus thuringiensis berliner

The bacterium Bacillus thuringiensis (Bt) is a promising control agent of Spodoptera frugiperda (J.E. Smith). Besides the lethal effect on hosts, the entomopathogen may cause physiological alterations that hinder insects' feeding intake and reproduction. Larval and female pupa weight, oviposition and egg fecundity were determined in second instar S. frugiperda larvae infected with 39 Bt isolates in four bioassays. Sublethal effects were observed in the follow isolates: ESALQ 1.1, ESALQ 1.4, ESALQ 1.6, ESALQ 3.7, ESALQ 4.2 and ESALQ 5.2 (larval and female pupae weight); ESALQ 5.1 (larval weight); ESALQ 1.2 and ESALQ 3.7 (egg fecundity); ESALQ 3.7 (oviposition and egg fecundity); ESALQ 3.7 and ESALQ 5.2 (oviposition). Significant correlations were observed when parameters were analyzed together, except in the second bioassay (female pupal weight ´ oviposition, female pupal weight ´ egg fecundity and oviposition ´ egg fecundity). Some Bt isolates affected the biological parameters of S. frugiperda, mainly larval and female pupae weight, and in some instances these effects were passed on to further life cycle stages affecting oviposition and egg fecundity. Although sublethal effects are difficult to evaluate, mainly under field conditions, they should be considered when the activity of an entomopathogen is measured.

A bactéria Bacillus thuringiensis (Bt) é um promissor agente de controle de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith). Além do efeito letal sobre os hospedeiros, os entomopatógenos podem causar alterações fisiológicas que comprometem o desenvolvimento dos insetos, podendo chegar a ponto de prejudicar a alimentação e/ou reprodução. No presente estudo, quatro bioensaios em laboratório foram realizados para verificar os efeitos subletais de isolados de Bt sobre os parâmetros biológicos de lagartas de segundo ínstar de S. frugiperda. A atividade de 39 isolados foi avaliada pelo peso de lagartas e de pupas fêmeas, oviposição e fecundidade de ovos de insetos sobreviventes. Foram observados efeitos subletais sobre as lagartas nos seguintes isolados: ESALQ 1.1, ESALQ 1.4, ESALQ 1.6, ESALQ 3.7, ESALQ 4.2 e ESALQ 5.2 (peso de lagartas e pupas fêmeas); ESALQ 5.1 (peso de lagartas); ESALQ 1.2 e ESALQ 3.7 (fecundidade dos ovos); ESALQ 3.7 (oviposição e fecundidade dos ovos) e ESALQ 3.7 e ESALQ 5.2 (oviposição). Quando os parâmetros foram analisados juntos, foram observadas correlações significativas entre eles, exceto no segundo bioensaio (peso de pupas fêmeas ´ oviposição, peso de pupas fêmeas ´ fecundidade dos ovos e oviposição ´ fecundidade dos ovos). Alguns isolados de Bt afetaram os parâmetros biológicos, principalmente peso de larvas e pupas fêmeas e, em alguns casos esses efeitos passaram para estágios posteriores do ciclo do inseto, afetando a oviposição e a viabilidade dos ovos. Embora, esses efeitos sejam difíceis de avaliar, especialmente em campo, eles deveriam ser considerados quando a atividade de um entomopatógeno é avaliada.

Biological parameters of Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) assayed with Bacillus thuringiensis berliner

The bacterium Bacillus thuringiensis (Bt) is a promising control agent of Spodoptera frugiperda (J.E. Smith). Besides the lethal effect on hosts, the entomopathogen may cause physiological alterations that hinder insects' feeding intake and reproduction. Larval and female pupa weight, oviposition and egg fecundity were determined in second instar S. frugiperda larvae infected with 39 Bt isolates in four bioassays. Sublethal effects were observed in the follow isolates: ESALQ 1.1, ESALQ 1.4, ESALQ 1.6, ESALQ 3.7, ESALQ 4.2 and ESALQ 5.2 (larval and female pupae weight); ESALQ 5.1 (larval weight); ESALQ 1.2 and ESALQ 3.7 (egg fecundity); ESALQ 3.7 (oviposition and egg fecundity); ESALQ 3.7 and ESALQ 5.2 (oviposition). Significant correlations were observed when parameters were analyzed together, except in the second bioassay (female pupal weight ´ oviposition, female pupal weight ´ egg fecundity and oviposition ´ egg fecundity). Some Bt isolates affected the biological parameters of S. frugiperda, mainly larval and female pupae weight, and in some instances these effects were passed on to further life cycle stages affecting oviposition and egg fecundity. Although sublethal effects are difficult to evaluate, mainly under field conditions, they should be considered when the activity of an entomopathogen is measured.

A bactéria Bacillus thuringiensis (Bt) é um promissor agente de controle de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith). Além do efeito letal sobre os hospedeiros, os entomopatógenos podem causar alterações fisiológicas que comprometem o desenvolvimento dos insetos, podendo chegar a ponto de prejudicar a alimentação e/ou reprodução. No presente estudo, quatro bioensaios em laboratório foram realizados para verificar os efeitos subletais de isolados de Bt sobre os parâmetros biológicos de lagartas de segundo ínstar de S. frugiperda. A atividade de 39 isolados foi avaliada pelo peso de lagartas e de pupas fêmeas, oviposição e fecundidade de ovos de insetos sobreviventes. Foram observados efeitos subletais sobre as lagartas nos seguintes isolados: ESALQ 1.1, ESALQ 1.4, ESALQ 1.6, ESALQ 3.7, ESALQ 4.2 e ESALQ 5.2 (peso de lagartas e pupas fêmeas); ESALQ 5.1 (peso de lagartas); ESALQ 1.2 e ESALQ 3.7 (fecundidade dos ovos); ESALQ 3.7 (oviposição e fecundidade dos ovos) e ESALQ 3.7 e ESALQ 5.2 (oviposição). Quando os parâmetros foram analisados juntos, foram observadas correlações significativas entre eles, exceto no segundo bioensaio (peso de pupas fêmeas ´ oviposição, peso de pupas fêmeas ´ fecundidade dos ovos e oviposição ´ fecundidade dos ovos). Alguns isolados de Bt afetaram os parâmetros biológicos, principalmente peso de larvas e pupas fêmeas e, em alguns casos esses efeitos passaram para estágios posteriores do ciclo do inseto, afetando a oviposição e a viabilidade dos ovos. Embora, esses efeitos sejam difíceis de avaliar, especialmente em campo, eles deveriam ser considerados quando a atividade de um entomopatógeno é avaliada.

Field persistence of Bacillus thuringiensis on maize leaves (Zea mays L.)

The persistence slope of Bacillus thuringiensis (Bt) based products in the field is an important parameter to evaluate their efficacy. The half-life, estimated based on persistence slope parameters, is one of the most effective tools to select microbial pesticides. The aim of this research was to study the relationship between viability loss of Bt spores on maize leaves and their concentration, comparing it with field persistence. The experimental design was split-plot on time, composed by maize plants, in which three concentrations (half, normal and double doses) of a Dipel commercial formulation were applied. In each plot three leaves in the upper part of three plants where randomly selected. Samples of these leaves were collected 3 to 72 hours after treatment, to count the number of viable spores in two foliar dishes with 1 cm in diameter. The field persistence was determined using an exponential model, linearized by a logarithmic transformation of viable spores number in time. Using the log linear method of confidence intervals, there were no significantly differences (P = 0.05) in half-lifes: 18.2 hours for half-dose, 16.5 hours for normal dose and 13.6 hours for double dose. Assuming a fictitious index of insect consumption equal to one, the effective doses according to concentrations were calculated. It was verified that 77%, 78% and 80.5% of the effective doses (viable spores) remained on the leaf surface after the first day of treatment, respectively.

A curva de persistência de produtos à base de Bacillus thuringiensis (Bt) no campo é um importante parâmetro para avaliar a sua eficiência. A meia-vida, baseada em estimativas dos parâmetros desta curva, é um aspecto importante na seleção de pesticidas microbianos. O objetivo desta pesquisa foi estudar a relação entre a perda de viabilidade de esporos de Bt em folhas de milho, e sua concentração, comparando-as com a persistência em campo. O delineamento experimental utilizado foi o de parcelas subdivididas no tempo, composto por plantas de milho às quais foram aplicadas três concentrações (meia dose e dose normal e dobro da dose recomendada) de uma formulação comercial de Dipel. Em cada parcela foram escolhidas ao acaso 3 folhas na parte superior de 3 plantas. Nestas, foram feitas amostragens entre 3 e 72 horas após a aplicação dos tratamentos, para contar o número de esporos viáveis, utilizando-se dois discos com 1 cm de diâmetro. A persistência em campo foi medida com um modelo exponencial, linearizado por transformação logarítmica do número de esporos viáveis no tempo. Utilizando o método linear logarítmico dos intervalos de confiança, não foi verificada diferença significativa (P=0.05) nas meias-vidas em 18,2 horas para meia dose, 16,5 horas para dose normal e 13,6 horas para o dobro da dose. Considerando uma taxa fictícia de consumo de um inseto de, calculou-se as doses eficazes em cada concentração. Constatou-se que 77%, 78% e 80,5% das doses efetivas (esporos viáveis) permaneceram na superfície das folhas um dia após o tratamento, respectivamente.

EFEITO ANTAGÔNICO DE Trichoderma sp. NO DESENVOLVIMENTO DE Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. e Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok

The objective of this work was to evaluate the effect of Trichoderma sp. on the development of Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae. The fungus Trichoderma sp. was inoculated on PDA culture medium, 0, 48, 120 and 168 hours after inoculation of the same plates with either B. bassiana (isolate 634) or M. anisopliae (isolate E-9). The radial growth of fungal colonies was measured 48 and 120 hours after Trichoderma sp. inoculation. Trichoderma sp. affected the development of both entomopathogenic fungi when inoculated simultaneously or 48 hours later. B. bassiana and M. anisopliae had normal development when inoculated 168 hours before Trichoderma sp. The effect of a toxic extract from Trichoderma sp. on the entomopathogenic fungi was also evaluated. Aliquots of 0.1, 0.5, 1.0 and 5.0 ml of extract were added to 100 ml of PDA medium, used to grow the entomopathogens. The radial growth of B. bassiana and M. anisopliae colonies grown in the presence of the extract were measured and the number of conidia produced per colony was counted. With 5% of extract in the medium, mycelial growth and conidiogenesis of B. bassiana decreased. M. anisopliae growth was affected by culture medium containing 1% or more of the extract.

Este trabalho teve por objetivo avaliar o efeito de Trichoderma sp. no desenvolvimento de Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae. Trichoderma sp., B. bassiana (isolado 634) e M. anisopliae (isolado E-9) foram inoculados em meio BDA, com intervalos de 0, 48, 120 e 168 horas entre a inoculação de Trichoderma sp. e dos entomopatógenos. Avaliou-se o crescimento radial das colônias nos períodos de 48 e 120 horas após a inoculação de Trichoderma sp., sendo que este afetou o desenvolvimento dos entomopatógenos quando inoculado simultaneamente ou após 48 horas. B. bassiana e M. anisopliae desenvolveram-se normalmente quando inoculados 168 horas antes de Trichoderma sp.. Também foi avaliado o efeito de um extrato de Trichoderma sp. sobre os entomopatógenos, com a adição de 0,1; 0,5; 1,0 e 5,0 ml de extrato/100,0 ml de meio, onde foram inoculados os entomopatógenos. Foram medidos os diâmetros de colônias e o número de conídios produzidos por B. bassiana e M. anisopliae na presença do extrato. A concentração de 5,0 ml de extrato/100,0 ml de meio alterou o crescimento e a conidiogênese de B. bassiana. O fungo M. anisopliae foi afetado a partir da adição de 1,0 ml de extrato/100,0 ml de meio.

CONTROLE ASSOCIADO DE Cornitermes cumulans (KOLLAR, 1832) (ISOPTERA: TERMITIDAE) COM Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana E IMIDACLOPRID

The objective of this study was to investigate, under field conditions, the control efficiency against nests of Cornitermes cumulans using imidacoprid associated with entomopathogenic fungi (Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana). Field experiments were conducted to determine the minimal conidia and imidacloprid concentration jointly applied, necessary to control termite nest, but when applied separately was not efficient. This occurred when 500 mg of conidia of the pathogen (M. anisopliae or B. bassiana) were mixed with 1.9 mg of imidacloprid (Gaucho 70 PM) and 6 g of the inert calcene. It was possible to reduce the conidial concentration 4 times and the insecticide 157 times in relation to the concentrations usually recommended. These concentrations allowed high levels of control (> 80%) of big nests and a considerable reduction in control cost. In addition, it is important to consider the ecological benefits provided by this association using reduced quantities of the chemical insecticide. Thus, this strategy should be exploited as an important alternative in the control of C. cumulans big colonies.

O objetivo desta pesquisa foi o de verificar em condições de campo a eficiência do controle associado de colônias de Cornitermes cumulans utilizando imidacloprid juntamente com fungos entomopatogênicos (Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana). Foram realizados experimentos de campo para determinar quais as concentrações mínimas de conídios e de imidacloprid que quando aplicadas em associação controlaram os ninhos de cupins, mas quando aplicadas em separado não foram eficientes. Isto ocorreu quando 500 mg de conídios do patógeno (M. anisopliae ou B. bassiana) foram misturados a 1,9 mg do produto comercial Gaucho 70 PM (imidacloprid) e 6 gramas do inerte calcene. Foi possível diminuir a concentração de conídios em até 4 vezes e a do inseticida imidacloprid em até 157 vezes em relação às concentrações usualmente recomendadas. Estas concentrações possibilitaram elevados níveis de controle dos ninhos grandes (>80%), com uma diminuição considerável no custo do controle. Além disso, é importante considerar os benefícios ecológicos advindos deste controle associado pela diminuição na quantidade de inseticida a ser utilizada. Deste modo, esta estratégia deve ser explorada como uma alternativa importante na eliminação das colônias grandes de C. cumulans.

CONTROLE ASSOCIADO DE Cornitermes cumulans (KOLLAR, 1832) (ISOPTERA: TERMITIDAE) COM Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana E IMIDACLOPRID

The objective of this study was to investigate, under field conditions, the control efficiency against nests of Cornitermes cumulans using imidacoprid associated with entomopathogenic fungi (Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana). Field experiments were conducted to determine the minimal conidia and imidacloprid concentration jointly applied, necessary to control termite nest, but when applied separately was not efficient. This occurred when 500 mg of conidia of the pathogen (M. anisopliae or B. bassiana) were mixed with 1.9 mg of imidacloprid (Gaucho 70 PM) and 6 g of the inert calcene. It was possible to reduce the conidial concentration 4 times and the insecticide 157 times in relation to the concentrations usually recommended. These concentrations allowed high levels of control (> 80%) of big nests and a considerable reduction in control cost. In addition, it is important to consider the ecological benefits provided by this association using reduced quantities of the chemical insecticide. Thus, this strategy should be exploited as an important alternative in the control of C. cumulans big colonies.

O objetivo desta pesquisa foi o de verificar em condições de campo a eficiência do controle associado de colônias de Cornitermes cumulans utilizando imidacloprid juntamente com fungos entomopatogênicos (Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana). Foram realizados experimentos de campo para determinar quais as concentrações mínimas de conídios e de imidacloprid que quando aplicadas em associação controlaram os ninhos de cupins, mas quando aplicadas em separado não foram eficientes. Isto ocorreu quando 500 mg de conídios do patógeno (M. anisopliae ou B. bassiana) foram misturados a 1,9 mg do produto comercial Gaucho 70 PM (imidacloprid) e 6 gramas do inerte calcene. Foi possível diminuir a concentração de conídios em até 4 vezes e a do inseticida imidacloprid em até 157 vezes em relação às concentrações usualmente recomendadas. Estas concentrações possibilitaram elevados níveis de controle dos ninhos grandes (>80%), com uma diminuição considerável no custo do controle. Além disso, é importante considerar os benefícios ecológicos advindos deste controle associado pela diminuição na quantidade de inseticida a ser utilizada. Deste modo, esta estratégia deve ser explorada como uma alternativa importante na eliminação das colônias grandes de C. cumulans.

EFEITO ANTAGÔNICO DE Trichoderma sp. NO DESENVOLVIMENTO DE Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. e Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok

The objective of this work was to evaluate the effect of Trichoderma sp. on the development of Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae. The fungus Trichoderma sp. was inoculated on PDA culture medium, 0, 48, 120 and 168 hours after inoculation of the same plates with either B. bassiana (isolate 634) or M. anisopliae (isolate E-9). The radial growth of fungal colonies was measured 48 and 120 hours after Trichoderma sp. inoculation. Trichoderma sp. affected the development of both entomopathogenic fungi when inoculated simultaneously or 48 hours later. B. bassiana and M. anisopliae had normal development when inoculated 168 hours before Trichoderma sp. The effect of a toxic extract from Trichoderma sp. on the entomopathogenic fungi was also evaluated. Aliquots of 0.1, 0.5, 1.0 and 5.0 ml of extract were added to 100 ml of PDA medium, used to grow the entomopathogens. The radial growth of B. bassiana and M. anisopliae colonies grown in the presence of the extract were measured and the number of conidia produced per colony was counted. With 5% of extract in the medium, mycelial growth and conidiogenesis of B. bassiana decreased. M. anisopliae growth was affected by culture medium containing 1% or more of the extract.

Este trabalho teve por objetivo avaliar o efeito de Trichoderma sp. no desenvolvimento de Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae. Trichoderma sp., B. bassiana (isolado 634) e M. anisopliae (isolado E-9) foram inoculados em meio BDA, com intervalos de 0, 48, 120 e 168 horas entre a inoculação de Trichoderma sp. e dos entomopatógenos. Avaliou-se o crescimento radial das colônias nos períodos de 48 e 120 horas após a inoculação de Trichoderma sp., sendo que este afetou o desenvolvimento dos entomopatógenos quando inoculado simultaneamente ou após 48 horas. B. bassiana e M. anisopliae desenvolveram-se normalmente quando inoculados 168 horas antes de Trichoderma sp.. Também foi avaliado o efeito de um extrato de Trichoderma sp. sobre os entomopatógenos, com a adição de 0,1; 0,5; 1,0 e 5,0 ml de extrato/100,0 ml de meio, onde foram inoculados os entomopatógenos. Foram medidos os diâmetros de colônias e o número de conídios produzidos por B. bassiana e M. anisopliae na presença do extrato. A concentração de 5,0 ml de extrato/100,0 ml de meio alterou o crescimento e a conidiogênese de B. bassiana. O fungo M. anisopliae foi afetado a partir da adição de 1,0 ml de extrato/100,0 ml de meio.

PATOGENICIDADE DE BEAUVERIA BASSIANA (BALS.) VUILL. AO ÁCARO Tetranychus urticae KOCH

The pathogenicity of Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. for Tetranychus urticae Koch was studied at 25 ± 2oC, 70 ± 5% RH and 12 h photophase, using recently emerged females. Mites were maintained for 6 days on leaf disks of Canavalia ensiformis (L.) DC. inoculated with B. bassiana, isolate 447, at concentrations of 5x106, 1x107, 5x107, 1x108, 5x108 and 1x109 conidia/ml. Progressively higher values of accumulated mortality (total, corrected and confirmed) were observed with increasing concentrations of conidia. At all concentrations, corrected mortality was lower than 50% on the sixth day. Total mortality higher than 50% was observed only at concentration of 1x109 conidia/ml.

O estudo da patogenicidade de Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. ao ácaro Tetranychus urticae Koch foi desenvolvido a 25 ± 2°C, 70 ± 5% UR e 12 horas de fotofase, utilizando-se fêmeas recém-emergidas. Os ácaros foram mantidos durante seis dias em discos de folha de Canavalia ensiformis (L.) DC. inoculadas com B. bassiana, isolado 447, nas concentrações: 5x106, 1x107, 5x107, 1x108, 5x108 e 1x109 conídios/ml. Este isolado mostrou-se patogênico a T. urticae, apresentando aumento nos valores das mortalidades acumuladas (total, corrigida e confirmada) à medida que a suspensão de conídios se tornou mais concentrada. Nas seis concentrações testadas, os valores de mortalidade corrigida ao sexto dia, foram inferiores a 50%, sendo observada apenas na concentração de 1x109 conídios/ml, mortalidade total superior a 50%.

Fungo Metarhizium anisopliae e o controle de Frankliniella occidentalis em alface hidropônico

The thrips Frankliniella occidentalis causes significant losses in areas of lettuce production, damaging leaf tissue during feeding and vectoring pathogenic viruses. The development of new strategies for the control of thrips in greenhouses is essential to reduce problems caused by the constant use of chemical insecticides. The efficiency of applications of Metarhizium anisopliae (strain 1104), at the concentrations of 5x10(6) and 1x10(8) conidia ml-1, was evaluated for the control of thrips in areas of hidroponic lettuce production. The number of adults per plant was observed, in comparison to initial infestation. The application of the fungus, in both concentrations, caused a 60% reduction of the thrips population, 6 days after the first application. In areas that did not receive the treatment with the fungus, the thrips population increased by 46.5%. However, the number of adults captured in sticky traps was similar for treated and non-treated areas, suggesting a high mobility of thrips adults in the greenhouse. A high number of dead adults with fungal structures was also observed in the areas treated with M. anisopliae. The apparent health and environmental safety of this entomopathogenic fungus makes this microorganism a promising alternative for chemical insecticides in lettuce production. More detailed studies about the interaction of this thrips and the use of M. anisopliae under greenhouse conditions are necessary to make applications in large scale viable.

O tripes Frankliniella occidentalis (Pergande) provoca grandes prejuízos em cultivos comerciais de alface, através do dano direto, durante a alimentação no tecido vegetal, e pela transmissão de virose. O desenvolvimento de novas estratégias de controle da praga em cultivos protegidos vem se tornando necessária em função dos problemas acarretados pelo uso constante de inseticidas químicos. Foi avaliada a eficiência de pulverizações do fungo Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorokin (isolado 1104) nas concentrações 5x10(6) e 1x10(8) conídios ml-1, visando o controle da praga em cultivos de alface hidropônico. A eficiência de controle do fungo nas duas concentrações chegou a 60%, seis dias após a primeira pulverização. Nas parcelas que não receberam o tratamento com o patógeno, observou-se um aumento populacional de 46,5%. Contudo, o número de adultos capturados em armadilhas adesivas foi semelhante para áreas tratadas e não tratadas, devido à alta mobilidade da praga na cultura. Constatou-se também um número crescente de adultos mortos com estruturas do patógeno, nas parcelas pulverizadas com o fungo. A ausência de toxicidade e de período de carência dos fungos entomopatogênicos torna estes microrganismos importantes na substituição de alguns inseticidas químicos na cultura do alface. Estudos mais detalhados sobre a utilização de M. anisopliae em cultivos protegidos são necessários para aplicações em grande escala.

Fungo Metarhizium anisopliae e o controle de Frankliniella occidentalis em alface hidropônico

The thrips Frankliniella occidentalis causes significant losses in areas of lettuce production, damaging leaf tissue during feeding and vectoring pathogenic viruses. The development of new strategies for the control of thrips in greenhouses is essential to reduce problems caused by the constant use of chemical insecticides. The efficiency of applications of Metarhizium anisopliae (strain 1104), at the concentrations of 5x10(6) and 1x10(8) conidia ml-1, was evaluated for the control of thrips in areas of hidroponic lettuce production. The number of adults per plant was observed, in comparison to initial infestation. The application of the fungus, in both concentrations, caused a 60% reduction of the thrips population, 6 days after the first application. In areas that did not receive the treatment with the fungus, the thrips population increased by 46.5%. However, the number of adults captured in sticky traps was similar for treated and non-treated areas, suggesting a high mobility of thrips adults in the greenhouse. A high number of dead adults with fungal structures was also observed in the areas treated with M. anisopliae. The apparent health and environmental safety of this entomopathogenic fungus makes this microorganism a promising alternative for chemical insecticides in lettuce production. More detailed studies about the interaction of this thrips and the use of M. anisopliae under greenhouse conditions are necessary to make applications in large scale viable.

O tripes Frankliniella occidentalis (Pergande) provoca grandes prejuízos em cultivos comerciais de alface, através do dano direto, durante a alimentação no tecido vegetal, e pela transmissão de virose. O desenvolvimento de novas estratégias de controle da praga em cultivos protegidos vem se tornando necessária em função dos problemas acarretados pelo uso constante de inseticidas químicos. Foi avaliada a eficiência de pulverizações do fungo Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorokin (isolado 1104) nas concentrações 5x10(6) e 1x10(8) conídios ml-1, visando o controle da praga em cultivos de alface hidropônico. A eficiência de controle do fungo nas duas concentrações chegou a 60%, seis dias após a primeira pulverização. Nas parcelas que não receberam o tratamento com o patógeno, observou-se um aumento populacional de 46,5%. Contudo, o número de adultos capturados em armadilhas adesivas foi semelhante para áreas tratadas e não tratadas, devido à alta mobilidade da praga na cultura. Constatou-se também um número crescente de adultos mortos com estruturas do patógeno, nas parcelas pulverizadas com o fungo. A ausência de toxicidade e de período de carência dos fungos entomopatogênicos torna estes microrganismos importantes na substituição de alguns inseticidas químicos na cultura do alface. Estudos mais detalhados sobre a utilização de M. anisopliae em cultivos protegidos são necessários para aplicações em grande escala.

PATOGENICIDADE DE BEAUVERIA BASSIANA (BALS.) VUILL. AO ÁCARO Tetranychus urticae KOCH

The pathogenicity of Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. for Tetranychus urticae Koch was studied at 25 ± 2oC, 70 ± 5% RH and 12 h photophase, using recently emerged females. Mites were maintained for 6 days on leaf disks of Canavalia ensiformis (L.) DC. inoculated with B. bassiana, isolate 447, at concentrations of 5x106, 1x107, 5x107, 1x108, 5x108 and 1x109 conidia/ml. Progressively higher values of accumulated mortality (total, corrected and confirmed) were observed with increasing concentrations of conidia. At all concentrations, corrected mortality was lower than 50% on the sixth day. Total mortality higher than 50% was observed only at concentration of 1x109 conidia/ml.

O estudo da patogenicidade de Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. ao ácaro Tetranychus urticae Koch foi desenvolvido a 25 ± 2°C, 70 ± 5% UR e 12 horas de fotofase, utilizando-se fêmeas recém-emergidas. Os ácaros foram mantidos durante seis dias em discos de folha de Canavalia ensiformis (L.) DC. inoculadas com B. bassiana, isolado 447, nas concentrações: 5x106, 1x107, 5x107, 1x108, 5x108 e 1x109 conídios/ml. Este isolado mostrou-se patogênico a T. urticae, apresentando aumento nos valores das mortalidades acumuladas (total, corrigida e confirmada) à medida que a suspensão de conídios se tornou mais concentrada. Nas seis concentrações testadas, os valores de mortalidade corrigida ao sexto dia, foram inferiores a 50%, sendo observada apenas na concentração de 1x109 conídios/ml, mortalidade total superior a 50%.

TAMANHO DA ÁREA DE FORRAGEAMENTO DO CUPIM SUBTERRÂNEO Heterotermes tenuis (ISOPTERA; RHINOTERMITIDAE) EM CANA-DE-AÇÚCAR

The area of foraging of the termite species Heterotermes tenuis was evaluated using the Termitrap® bait marked with the radioisotope 32P. The experiment was conducted in an area with sugarcane, in Piracicaba,SP Brazil. Twenty infestion foci of H. tenuis were identified with baits. Each focus recieved baits labeled with 18.5 MBb (500 mCi) 32P in the form of sodium phosphate diluted in 15 ml of distilled water. Surrounding the marked baits were installed baits without marker in four points: North, South, East and West, halfway of 1, 5, 10 and 20 meters. Each treatment was represented previously by a focus settled and marked and one of the distances specified for the monitoring bait, being repeated of 4 to 6 times. After 15 days of the demarcation, the evaluation was proceeded by collecting 15 individuals of H. tenuis from each infested monitoring bait. These insects were transferred to glass flasks with distilled water, and analyzed in a liquid cintilador, by the test of Cerenkov. It was verified that in only 20% of the monitoring baits termites were collected and 11.3% were marked with the radioisotope, and that several colonies may by foraging in a same area. The foraging area for a colony of H. tenuis in sugarcane can vary from 3 to 1,250 m2.

Estudou-se a área de forrageamento do cupim Heterotermes tenuis utilizando-se a isca Termitrap® marcada com o radioisótopo 32P. O experimento foi conduzido numa área com cana-de-açúcar, em Piracicaba-SP. Foram localizados 20 focos de H. tenuis, com iscas. Em cada um desses focos aplicou-se uma isca Termitrap® impregnada com 18,5 MBb (500 mCi) 32P na forma de fosfato de sódio diluído em 15 ml de água destilada. Ao redor das iscas marcadas, foram instaladas iscas sem marcador em quatro pontos: Norte, Sul, Leste e Oeste, eqüidistantes de 1, 5, 10 e 20 metros. Cada tratamento foi representado por um foco previamente determinado e marcado e uma das distâncias estipuladas para a isca de monitoramento, sendo repetido de 4 a 6 vezes. Após 15 dias da marcação, procedeu-se a avaliação coletando-se 15 indivíduos de H. tenuis de cada isca de monitoramento infestada, acondicionando-os em frascos de vidro com água destilada, que foram analisados em cintilador líquido, pelo teste de Cerenkov. Verificou-se que em apenas 20% das iscas de monitoramento coletaram-se cupins e 11,3% estavam marcadas com o radioisótopo. Constatou-se que ocorrem diversas colônias forrageando numa mesma área. A área de forrageamento de H. tenuis em cana-de-açúcar pode variar de 3 a 1.250 m2.

TAMANHO DA ÁREA DE FORRAGEAMENTO DO CUPIM SUBTERRÂNEO Heterotermes tenuis (ISOPTERA; RHINOTERMITIDAE) EM CANA-DE-AÇÚCAR

The area of foraging of the termite species Heterotermes tenuis was evaluated using the Termitrap® bait marked with the radioisotope 32P. The experiment was conducted in an area with sugarcane, in Piracicaba,SP Brazil. Twenty infestion foci of H. tenuis were identified with baits. Each focus recieved baits labeled with 18.5 MBb (500 mCi) 32P in the form of sodium phosphate diluted in 15 ml of distilled water. Surrounding the marked baits were installed baits without marker in four points: North, South, East and West, halfway of 1, 5, 10 and 20 meters. Each treatment was represented previously by a focus settled and marked and one of the distances specified for the monitoring bait, being repeated of 4 to 6 times. After 15 days of the demarcation, the evaluation was proceeded by collecting 15 individuals of H. tenuis from each infested monitoring bait. These insects were transferred to glass flasks with distilled water, and analyzed in a liquid cintilador, by the test of Cerenkov. It was verified that in only 20% of the monitoring baits termites were collected and 11.3% were marked with the radioisotope, and that several colonies may by foraging in a same area. The foraging area for a colony of H. tenuis in sugarcane can vary from 3 to 1,250 m2.

Estudou-se a área de forrageamento do cupim Heterotermes tenuis utilizando-se a isca Termitrap® marcada com o radioisótopo 32P. O experimento foi conduzido numa área com cana-de-açúcar, em Piracicaba-SP. Foram localizados 20 focos de H. tenuis, com iscas. Em cada um desses focos aplicou-se uma isca Termitrap® impregnada com 18,5 MBb (500 mCi) 32P na forma de fosfato de sódio diluído em 15 ml de água destilada. Ao redor das iscas marcadas, foram instaladas iscas sem marcador em quatro pontos: Norte, Sul, Leste e Oeste, eqüidistantes de 1, 5, 10 e 20 metros. Cada tratamento foi representado por um foco previamente determinado e marcado e uma das distâncias estipuladas para a isca de monitoramento, sendo repetido de 4 a 6 vezes. Após 15 dias da marcação, procedeu-se a avaliação coletando-se 15 indivíduos de H. tenuis de cada isca de monitoramento infestada, acondicionando-os em frascos de vidro com água destilada, que foram analisados em cintilador líquido, pelo teste de Cerenkov. Verificou-se que em apenas 20% das iscas de monitoramento coletaram-se cupins e 11,3% estavam marcadas com o radioisótopo. Constatou-se que ocorrem diversas colônias forrageando numa mesma área. A área de forrageamento de H. tenuis em cana-de-açúcar pode variar de 3 a 1.250 m2.

Estabilidade de uma formulação de Bacillus sphaericus armazenada sob diferentes temperaturas

The stability of a Bacillus sphaericus formulation on granular corncob stored at two diferent temperatures (room temperature and 50°C) during 12 months was evaluated. A concentrated spore-cristal suspension was stored under the same conditions and used for comparison. The larvicidal activity of fresh corncobs and concentrated pathogen formulations were similar when inoculated onto artificial Culex quinquefasciatus breeding sites. Periodic analysis showed, however, higher spore viability in the corncob formulation under both conditions over a period of 12 months. The corncob formulation stored under high temperature (50°C) permitted a higher spore viability (30%) and larvicidal activity up to 60 days. Under the same conditions, the concentrated spore-cristal suspension showed total loss of both spore viability and larvicidal activity.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a estabilidade de uma formulação granulada de Bacillus sphaericus à base de sabugo de milho, armazenada em condições ambientais e a 50°C, tendo como comparação, uma suspensão concentrada de esporos e cristais da bactéria. A análise periódica dos materiais armazenados revelaram o efeito protetor da formulação sobre o microrganismo, de forma que ao longo de 12 meses de armazenamento, em condições ambiente, a viabilidade dos esporos foi maior que na suspensão concentrada. Além disso, a atividade inseticida para larvas de Culex quinquefasciatus, avaliada nos criadouros artificiais foi comparável ao patógeno não formulado. Quando mantidos a 50°C, a ação protetora da formulação mostrou-se mais eficiente, sendo que ao final de 60 dias não houve qualquer atividade do patógeno não formulado, enquanto que na formulação obteve-se cerca de 30% de atividade, determinada em condições de laboratório.

Estabilidade de uma formulação de Bacillus sphaericus armazenada sob diferentes temperaturas

The stability of a Bacillus sphaericus formulation on granular corncob stored at two diferent temperatures (room temperature and 50°C) during 12 months was evaluated. A concentrated spore-cristal suspension was stored under the same conditions and used for comparison. The larvicidal activity of fresh corncobs and concentrated pathogen formulations were similar when inoculated onto artificial Culex quinquefasciatus breeding sites. Periodic analysis showed, however, higher spore viability in the corncob formulation under both conditions over a period of 12 months. The corncob formulation stored under high temperature (50°C) permitted a higher spore viability (30%) and larvicidal activity up to 60 days. Under the same conditions, the concentrated spore-cristal suspension showed total loss of both spore viability and larvicidal activity.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a estabilidade de uma formulação granulada de Bacillus sphaericus à base de sabugo de milho, armazenada em condições ambientais e a 50°C, tendo como comparação, uma suspensão concentrada de esporos e cristais da bactéria. A análise periódica dos materiais armazenados revelaram o efeito protetor da formulação sobre o microrganismo, de forma que ao longo de 12 meses de armazenamento, em condições ambiente, a viabilidade dos esporos foi maior que na suspensão concentrada. Além disso, a atividade inseticida para larvas de Culex quinquefasciatus, avaliada nos criadouros artificiais foi comparável ao patógeno não formulado. Quando mantidos a 50°C, a ação protetora da formulação mostrou-se mais eficiente, sendo que ao final de 60 dias não houve qualquer atividade do patógeno não formulado, enquanto que na formulação obteve-se cerca de 30% de atividade, determinada em condições de laboratório.

External development of the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae in the subterranean termite Heterotermes tenuis

The subterranean termite Heterotermes tenuis is one of the main pests of sugarcane and eucalyptus in Brazil, and the use of entomopathogenic fungi, alone or associated to chemicals, is an efficient and environmentally favorable method for its control. Studies related to the fungal development on these insects are important due to the effect of insect behavior on entomopathogens. The objective of this work was to describe the external development of Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae on H. tenuis using Scanning Electron Microscopy (SEM), determining the duration of the different phases of fungal infection. Two fixation techniques for preparing SEM samples were also evaluated. Worker specimens of H. tenuis were inoculated with a 1 x 10(9) conidia mL-1 suspension of the fungi and maintained at 25±1ºC and 70±10% relative humidity. Insects were collected from 0 to 144 hours after inoculation and prepared on SEM stubs for each of the two fixation techniques. The results obtained with the two techniques were compared and duration of the different phases of the infection process were estimated from SEM observations and compared for three fungal isolates. B. bassiana and M. anisopliae have similar development cycles on the termite, but some important differences exist. The penetration, colonization and conidiogenesis phases are relatively faster for M. anisopliae than for B. bassiana, which results in a faster rate of insect mortality. The fixation technique with OsO4 vapor is suitable for preparation of insects to be used in SEM observation of the developmental stages of entomopathogenic fungi.

O cupim subterrâneo Heterotermes tenuis , uma das principais pragas da cana-de-açúcar e eucalipto no Brasil, e o uso de fungos entomopatogênicos, isoladamente ou associados a produtos químicos, é um método eficiente e ambientalmente seguro para seu controle. Estudos relacionados ao desenvolvimento fúngico nestes insetos são importantes devido ao efeito do comportamento dos insetos sobre entomopatógenos. O objetivo deste trabalho foi descrever o desenvolvimento de Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae sobre H. tenuis por meio da Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), determinando a duração das fases de infecção fúngica. Também foram avaliadas duas técnicas de fixação para o preparo de amostras para MEV. Operários de H. tenuis foram inoculados com suspensões fúngicas de 1 x 10(9) conídios mL-1 e mantidos a 25 ± 1ºC e umidade relativa de 70 ± 10%. Foram coletados insetos de 0 a 144 horas após a inoculação e preparados pelas duas técnicas de fixação. Foram comparados os resultados obtidos com as duas técnicas e estimadas e comparadas as durações das fases do processo de infecção para três isolados fúngicos por meio de observações em MEV. B. bassiana e M. anisopliae têm ciclos de desenvolvimento semelhantes sobre H. tenuis, mas algumas diferenças importantes existem. As fases de penetração, colonização e conidiogênese são relativamente mais rápidas para M. anisopliae que para B. bassiana, o que resulta em uma taxa mais rápida de mortalidade do inseto. A técnica de fixação com vapor de OsO4 é satisfatória para preparação de insetos para observação do desenvolvimento de fungos entomopatogênicos em MEV.

External development of the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae in the subterranean termite Heterotermes tenuis

The subterranean termite Heterotermes tenuis is one of the main pests of sugarcane and eucalyptus in Brazil, and the use of entomopathogenic fungi, alone or associated to chemicals, is an efficient and environmentally favorable method for its control. Studies related to the fungal development on these insects are important due to the effect of insect behavior on entomopathogens. The objective of this work was to describe the external development of Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae on H. tenuis using Scanning Electron Microscopy (SEM), determining the duration of the different phases of fungal infection. Two fixation techniques for preparing SEM samples were also evaluated. Worker specimens of H. tenuis were inoculated with a 1 x 10(9) conidia mL-1 suspension of the fungi and maintained at 25±1ºC and 70±10% relative humidity. Insects were collected from 0 to 144 hours after inoculation and prepared on SEM stubs for each of the two fixation techniques. The results obtained with the two techniques were compared and duration of the different phases of the infection process were estimated from SEM observations and compared for three fungal isolates. B. bassiana and M. anisopliae have similar development cycles on the termite, but some important differences exist. The penetration, colonization and conidiogenesis phases are relatively faster for M. anisopliae than for B. bassiana, which results in a faster rate of insect mortality. The fixation technique with OsO4 vapor is suitable for preparation of insects to be used in SEM observation of the developmental stages of entomopathogenic fungi.

O cupim subterrâneo Heterotermes tenuis , uma das principais pragas da cana-de-açúcar e eucalipto no Brasil, e o uso de fungos entomopatogênicos, isoladamente ou associados a produtos químicos, é um método eficiente e ambientalmente seguro para seu controle. Estudos relacionados ao desenvolvimento fúngico nestes insetos são importantes devido ao efeito do comportamento dos insetos sobre entomopatógenos. O objetivo deste trabalho foi descrever o desenvolvimento de Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae sobre H. tenuis por meio da Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), determinando a duração das fases de infecção fúngica. Também foram avaliadas duas técnicas de fixação para o preparo de amostras para MEV. Operários de H. tenuis foram inoculados com suspensões fúngicas de 1 x 10(9) conídios mL-1 e mantidos a 25 ± 1ºC e umidade relativa de 70 ± 10%. Foram coletados insetos de 0 a 144 horas após a inoculação e preparados pelas duas técnicas de fixação. Foram comparados os resultados obtidos com as duas técnicas e estimadas e comparadas as durações das fases do processo de infecção para três isolados fúngicos por meio de observações em MEV. B. bassiana e M. anisopliae têm ciclos de desenvolvimento semelhantes sobre H. tenuis, mas algumas diferenças importantes existem. As fases de penetração, colonização e conidiogênese são relativamente mais rápidas para M. anisopliae que para B. bassiana, o que resulta em uma taxa mais rápida de mortalidade do inseto. A técnica de fixação com vapor de OsO4 é satisfatória para preparação de insetos para observação do desenvolvimento de fungos entomopatogênicos em MEV.