Cyclosporine A increases the intensity of Toxocara canis infection in swiss mice / Ciclosporina A aumenta a intensidade da infecção por Toxocara canis em camundongos suíços

Toxocariasis is a zoonotic disease of worldwide distribution. The connection between parasitic diseases and conditions that depress the immune system, such as the use of immunosuppressive drugs, has been studied. The purpose of this study was to evaluate the effect of Cyclosporine A (CsA) on the intensity of infection, humoral response and gene transcription of interleukins IL-4, IL-10 and IL-12 in mice experimentally infected with Toxocara canis. To this end, mice were divided into two groups treated with CsA (G1: 10 mg/Kg and G2: 50 mg/kg), the G3 and G4 group received PBS. After the last administration of the drug or PBS (orally every 48 hours for 15 days), groups G1, G2 and G3 were inoculated with 1200 eggs of T. canis. Was collected blood samples on days zero, 15 and 30 days post-inoculation (PI), for ELISA test and the mice were euthanized 30 days PI. The organs and striated muscle tissue were collected for the recovery of larvae. The splenocytes were analyzed by RT-PCR. The intensity of infection in the mice treated with 50 mg/kg of CsA was 65.5% higher than in the control group (p=0.001). An analysis of the kinetics of anti-Toxocara antibody revealed that the groups treated with CsA showed significantly higher mean levels of antibodies on day 15 PI. The transcription of the three tested interleukins showed no statistical difference between G2 and G3 (control). It was concluded that the immunosuppression triggered by CsA (50 mg/Kg) favored the establishment of a larger number of T. canis larvae without, however, altering immunoglobulin production and IL-4, IL-10 and IL-12 transcription on day 30 PI.

A toxocaríase é uma zoonose de distribuição mundial. A conexão entre doenças parasitárias e condições que deprimem o sistema imunológico, como o uso de drogas imunossupressoras, tem sido estudada. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da Ciclosporina A (CsA) na intensidade da infecção, resposta humoral e transcrição gênica das interleucinas IL-4, IL-10 e IL-12 em camundongos experimentalmente infectados com Toxocara canis. Para tanto, os camundongos foram divididos em dois grupos tratados com CsA (G1: 10 mg/Kg e G2: 50 mg/kg), os grupos G3 e G4 receberam PBS. Após a última administração da droga ou PBS (via oral a cada 48 horas por 15 dias), os grupos G1, G2 e G3 foram inoculados com 1200 ovos de T. canis. Foram coletadas amostras de sangue nos dias zero, 15 e 30 dias pós-inoculação (PI), para teste de ELISA e os camundongos foram eutanasiados 30 dias PI. Os órgãos e tecido muscular estriado foram coletados para a recuperação das larvas. Os esplenócitos foram analisados ​​por RT-PCR. A intensidade da infecção nos camundongos tratados com 50 mg/kg de CsA foi 65,5% maior do que no grupo controle (p=0,001). Uma análise da cinética do anticorpo anti-Toxocara revelou que os grupos tratados com CsA apresentaram níveis médios de anticorpos significativamente maiores no dia 15 PI. A transcrição das três interleucinas testadas não apresentou diferença estatística entre G2 e G3 (controle). Concluiu-se que a imunossupressão desencadeada pela CsA (50 mg/Kg) favoreceu o estabelecimento de um maior número de larvas de T. canis sem, no entanto, alterar a produção de imunoglobulinas e a transcrição de IL-4, IL-10 e IL-12 no dia 30 PI.

Antihelminthic action of the Anethum graveolens essential oil on Haemonchus contortus eggs and larvae / Ação anti-helmítica do óleo essencial de Anethum graveolens sobre ovos e larvas de Haemonchus contortus

Gastrointestinal nematodes are responsible for great economic losses in sheep raising, and their control has long been carried out almost exclusively by the administration of anthelmintics, which have led to serious resistance problems. In the search for alternative control measures, phytotherapic research is highlighted. The aim of this study was to evaluate the action of Anethum graveolens (dill) essential oil on different stages of Haemonchus contortus life cycle, as well its cytotoxicity MDBK (Madin-Darby bovine kidney) cells. H. contortus larvae and eggs were obtained from infected sheep feces, and essential oil extracted from plant seeds through the Clevenger apparatus. 9.4, 4.7, 2.35, 1.17. 0.58 and 0.29 mg/mL concentrations were evaluated. The Egg Hatch Inhibition (HI), Larval Development Inhibition (LDI) and Larval Migration Inhibition (LMI) techniques were used. Thybendazole 0.025 mg/mL in HI and Levamisole 0.02 mg/mL in the LDI and LMI tests were used as positive controls, while distilled water and a Tween 80 solution were used as positive negative controls. The inhibition results obtained for the highest oil concentration were: HI 100%, LDI 98.58% and LMI 63.7%, differing ( 0.05) from negative controls. Main A. graveolens oil components present in 95.93% of the total oil were Dihydrocarvone (39.1%), Carvone (22.24%), D-Limonene (16.84%), Apiol (10.49%) and Trans-dihydrocarvone (7.26%). Minimum A. graveolens essential oil concentrations required to inhibit 50% (IC50) of egg hatching, larval development and larval migration were 0.006 mg/mL, 2.536 mg/mL and 3.963 mg/mL, respectively. Cell viability in MDBK (Madin-Darby bovine kidney) cells, when incubated with A. graveolens essential oil, was 86% for the highest (9.4 mg/mL) and 99% for the lowest concentration (0.29 mg/mL). A. graveolens essential oil, according to the results obtained in this study, is a promising alternative in sheep gastrointestinal nematode control.(AU)

Os nematoides gastrintestinais são responsáveis por grandes perdas econômicas na ovinocultura, e seu controle tem sido realizado quase exclusivamente pela administração de anti-helmínticos, que levaram a sérios problemas de resistência. Na busca de medidas alternativas de controle, destaca-se a pesquisa fitoterápica. O objetivo deste trabalho foi avaliar a ação do óleo essencial de Anethum graveolens (endro) em diferentes estágios de Haemonchus contortus, bem como testar a viabilidade celular para o óleo. Larvas e ovos de H. contortus foram obtidos de fezes de ovinos infectados e óleo essencial extraído de sementes de plantas através do aparelho de Clevenger. As concentrações avaliadas foram 9,4, 4,7, 2,35, 1,17, 0,58 e 0,29 mg/mL. Verificou-se a Inibição de eclosão dos ovos (IE), Inibição de Desenvolvimento Larval (IDL) e Inibição de Migração Larval (IML). Tiabendazol 0,025 mg/mL em IE e Levamisole 0.02 mg/mL nos testes IDL e IML foram usados como controles positivos, enquanto água destilada e uma solução Tween 80 foram usados como controles negativos. Os resultados de inibição obtidos para a maior concentração de óleo foram: IE 100%, IDL 98,58% e IML 63,7%, diferindo ( 0,05) dos controles negativos. Os principais componentes presentes em 95,93% do óleo total de A. graveolens foram Di-hidrocarvona (39,1%), Carvona (22,24%), D-Limoneno (16,84%), Apiol (10,49%) e Trans-di-hidrocarvona (7,26%). As concentrações mínimas de óleo essencial de A. graveolens necessárias para inibir 50% (IC50) de eclosão dos ovos, desenvolvimento larval e migração larval foram de 0,006 mg/mL, 2,536 mg/mL e 3,963 mg/mL, respectivamente. A viabilidade celular nas células MDBK (rim bovino Madin-Darby), quando incubadas com o óleo essencial de A. graveolens, foi de 86% para a maior (9,4 mg/mL) e 99% para a menor concentração (0,29 mg/mL). O óleo essencial de A. graveolens mostrou ser uma alternativa promissora no controle de nematoides gastrintestinais de ovinos.(AU)

Antihelminthic action of the Anethum graveolens essential oil on Haemonchus contortus eggs and larvae

Abstract Gastrointestinal nematodes are responsible for great economic losses in sheep raising, and their control has long been carried out almost exclusively by the administration of anthelmintics, which have led to serious resistance problems. In the search for alternative control measures, phytotherapic research is highlighted. The aim of this study was to evaluate the action of Anethum graveolens (dill) essential oil on different stages of Haemonchus contortus life cycle, as well its cytotoxicity MDBK (Madin-Darby bovine kidney) cells. H. contortus larvae and eggs were obtained from infected sheep feces, and essential oil extracted from plant seeds through the Clevenger apparatus. 9.4, 4.7, 2.35, 1.17. 0.58 and 0.29 mg/mL concentrations were evaluated. The Egg Hatch Inhibition (HI), Larval Development Inhibition (LDI) and Larval Migration Inhibition (LMI) techniques were used. Thybendazole 0.025 mg/mL in HI and Levamisole 0.02 mg/mL in the LDI and LMI tests were used as positive controls, while distilled water and a Tween 80 solution were used as positive negative controls. The inhibition results obtained for the highest oil concentration were: HI 100%, LDI 98.58% and LMI 63.7%, differing ( 0.05) from negative controls. Main A. graveolens oil components present in 95.93% of the total oil were Dihydrocarvone (39.1%), Carvone (22.24%), D-Limonene (16.84%), Apiol (10.49%) and Trans-dihydrocarvone (7.26%). Minimum A. graveolens essential oil concentrations required to inhibit 50% (IC50) of egg hatching, larval development and larval migration were 0.006 mg/mL, 2.536 mg/mL and 3.963 mg/mL, respectively. Cell viability in MDBK (Madin-Darby bovine kidney) cells, when incubated with A. graveolens essential oil, was 86% for the highest (9.4 mg/mL) and 99% for the lowest concentration (0.29 mg/mL). A. graveolens essential oil, according to the results obtained in this study, is a promising alternative in sheep gastrointestinal nematode control.

Resumo Os nematoides gastrintestinais são responsáveis por grandes perdas econômicas na ovinocultura, e seu controle tem sido realizado quase exclusivamente pela administração de anti-helmínticos, que levaram a sérios problemas de resistência. Na busca de medidas alternativas de controle, destaca-se a pesquisa fitoterápica. O objetivo deste trabalho foi avaliar a ação do óleo essencial de Anethum graveolens (endro) em diferentes estágios de Haemonchus contortus, bem como testar a viabilidade celular para o óleo. Larvas e ovos de H. contortus foram obtidos de fezes de ovinos infectados e óleo essencial extraído de sementes de plantas através do aparelho de Clevenger. As concentrações avaliadas foram 9,4, 4,7, 2,35, 1,17, 0,58 e 0,29 mg/mL. Verificou-se a Inibição de eclosão dos ovos (IE), Inibição de Desenvolvimento Larval (IDL) e Inibição de Migração Larval (IML). Tiabendazol 0,025 mg/mL em IE e Levamisole 0.02 mg/mL nos testes IDL e IML foram usados como controles positivos, enquanto água destilada e uma solução Tween 80 foram usados como controles negativos. Os resultados de inibição obtidos para a maior concentração de óleo foram: IE 100%, IDL 98,58% e IML 63,7%, diferindo ( 0,05) dos controles negativos. Os principais componentes presentes em 95,93% do óleo total de A. graveolens foram Di-hidrocarvona (39,1%), Carvona (22,24%), D-Limoneno (16,84%), Apiol (10,49%) e Trans-di-hidrocarvona (7,26%). As concentrações mínimas de óleo essencial de A. graveolens necessárias para inibir 50% (IC50) de eclosão dos ovos, desenvolvimento larval e migração larval foram de 0,006 mg/mL, 2,536 mg/mL e 3,963 mg/mL, respectivamente. A viabilidade celular nas células MDBK (rim bovino Madin-Darby), quando incubadas com o óleo essencial de A. graveolens, foi de 86% para a maior (9,4 mg/mL) e 99% para a menor concentração (0,29 mg/mL). O óleo essencial de A. graveolens mostrou ser uma alternativa promissora no controle de nematoides gastrintestinais de ovinos.

Antihelminthic action of the Anethum graveolens essential oil on Haemonchus contortus eggs and larvae

Abstract Gastrointestinal nematodes are responsible for great economic losses in sheep raising, and their control has long been carried out almost exclusively by the administration of anthelmintics, which have led to serious resistance problems. In the search for alternative control measures, phytotherapic research is highlighted. The aim of this study was to evaluate the action of Anethum graveolens (dill) essential oil on different stages of Haemonchus contortus life cycle, as well its cytotoxicity MDBK (Madin-Darby bovine kidney) cells. H. contortus larvae and eggs were obtained from infected sheep feces, and essential oil extracted from plant seeds through the Clevenger apparatus. 9.4, 4.7, 2.35, 1.17. 0.58 and 0.29 mg/mL concentrations were evaluated. The Egg Hatch Inhibition (HI), Larval Development Inhibition (LDI) and Larval Migration Inhibition (LMI) techniques were used. Thybendazole 0.025 mg/mL in HI and Levamisole 0.02 mg/mL in the LDI and LMI tests were used as positive controls, while distilled water and a Tween 80 solution were used as positive negative controls. The inhibition results obtained for the highest oil concentration were: HI 100%, LDI 98.58% and LMI 63.7%, differing ( 0.05) from negative controls. Main A. graveolens oil components present in 95.93% of the total oil were Dihydrocarvone (39.1%), Carvone (22.24%), D-Limonene (16.84%), Apiol (10.49%) and Trans-dihydrocarvone (7.26%). Minimum A. graveolens essential oil concentrations required to inhibit 50% (IC50) of egg hatching, larval development and larval migration were 0.006 mg/mL, 2.536 mg/mL and 3.963 mg/mL, respectively. Cell viability in MDBK (Madin-Darby bovine kidney) cells, when incubated with A. graveolens essential oil, was 86% for the highest (9.4 mg/mL) and 99% for the lowest concentration (0.29 mg/mL). A. graveolens essential oil, according to the results obtained in this study, is a promising alternative in sheep gastrointestinal nematode control.

Resumo Os nematoides gastrintestinais são responsáveis por grandes perdas econômicas na ovinocultura, e seu controle tem sido realizado quase exclusivamente pela administração de anti-helmínticos, que levaram a sérios problemas de resistência. Na busca de medidas alternativas de controle, destaca-se a pesquisa fitoterápica. O objetivo deste trabalho foi avaliar a ação do óleo essencial de Anethum graveolens (endro) em diferentes estágios de Haemonchus contortus, bem como testar a viabilidade celular para o óleo. Larvas e ovos de H. contortus foram obtidos de fezes de ovinos infectados e óleo essencial extraído de sementes de plantas através do aparelho de Clevenger. As concentrações avaliadas foram 9,4, 4,7, 2,35, 1,17, 0,58 e 0,29 mg/mL. Verificou-se a Inibição de eclosão dos ovos (IE), Inibição de Desenvolvimento Larval (IDL) e Inibição de Migração Larval (IML). Tiabendazol 0,025 mg/mL em IE e Levamisole 0.02 mg/mL nos testes IDL e IML foram usados como controles positivos, enquanto água destilada e uma solução Tween 80 foram usados como controles negativos. Os resultados de inibição obtidos para a maior concentração de óleo foram: IE 100%, IDL 98,58% e IML 63,7%, diferindo ( 0,05) dos controles negativos. Os principais componentes presentes em 95,93% do óleo total de A. graveolens foram Di-hidrocarvona (39,1%), Carvona (22,24%), D-Limoneno (16,84%), Apiol (10,49%) e Trans-di-hidrocarvona (7,26%). As concentrações mínimas de óleo essencial de A. graveolens necessárias para inibir 50% (IC50) de eclosão dos ovos, desenvolvimento larval e migração larval foram de 0,006 mg/mL, 2,536 mg/mL e 3,963 mg/mL, respectivamente. A viabilidade celular nas células MDBK (rim bovino Madin-Darby), quando incubadas com o óleo essencial de A. graveolens, foi de 86% para a maior (9,4 mg/mL) e 99% para a menor concentração (0,29 mg/mL). O óleo essencial de A. graveolens mostrou ser uma alternativa promissora no controle de nematoides gastrintestinais de ovinos.

Didelphis albiventris lund, 1841, parasitado por ixodes loricatus neumann, 1899, e amblyomma aureolatum (pallas, 1772) (acari: ixodidae) no rio grande do sul / Didelphis albiventris, lund 1841, parasitized by ixodes loricatus neumann, l899, and amblyomma aureolatum (pallas, l772) (acari: ixodidae) in the state of rio grande do sul, brazil

RESUMO Trinta exemplares de Didelphis albiventris foram examinados para estudo de ixodídeos, no Município de Pelotas e adjacências, sul do Rio Grande do Sul, no período 2001-2003. Os carrapatos removidos da superfície externa dos gambás foram conservados em álcool etílico a 70°GL e identificados ao estereomicroscópio. Do total de gambás examinados, 43,33% estavam infestados com Ixodes loricatus, Amblyomma aureolatum e Amblyomma sp. (ninfas), com prevalências de 36,7%, 3,3% e 6,7%, respectivamente. A. aureolatum e I. loricatus foram registrados pela primeira vez parasitando D. albiventris no Rio Grande do Sul e A. aureolatum para o Brasil. I.loricatus foi o carrapato que apresentou maior prevalência, com predominância de formas adultas. D. albiventris foi a única espécie do gênero encontrada na região circunscrita, neste estudo.

ABSTRACT Ectoparasites were examined in 30 Didelphis albiventris marsupials, for studying their ixodids, in the county of Pelotas and nearby areas, southern Rio Grande do Sul, in the period 2001-2003. The ticks removed from the external surface of the animals were conserved in ethylic alcohol 70°GL and identified under a stereomicroscope, according s to pecific keys. From all animals examined, 43.33% were infested with Ixodes loricatus, Amblyomma aureolatum and Amblyomma sp. (nymphs), with prevalences of 36.7%, 3.3% and 6.7%, respectively. A. aureolatum and I. loricatus were registered for the first time parasitizing D. albiventris inthesestate. I. loricatus was the tick with the highest prevalence on D. albiventris, with a predominance of adult forms. D. albiventris was the only species found in the region studied.