Resumo
The objectives of this study were to establish appropriate conditions for obtaining plant regeneration and acclimatization of the 'RB92579' and 'RB93509' sugarcane cultivars and to elucidate the shoots origin through histological analysis. For both cultivars, obtaining shoots showed better results with the culture of explants on a callus induction medium containing 2.0mg L-1 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, followed by cultivation on a shoot induction medium containing 0.1mg L-1 kinetin and 0.2mg L-1 benzilaminopurine. The MS medium without growth regulators proved to be appropriate for elongation and rooting of shoots and the use of the composed substrate of vermiculite + MS salts was effective for acclimatization. Histological analysis revealed that the origin of the shoots in both cultivars occurred through indirect organogenesis.
Os objetivos deste estudo foram estabelecer condições apropriadas para a obtenção de regeneração de plantas e aclimatização das cultivares 'RB92579' e 'RB93509' de cana-de-açúcar e elucidar a origem das brotações através da análise histológica. Em ambas as cultivares, as brotações obtidas apresentaram os melhores resultados com a cultura dos explantes em um meio de indução de calo contendo 2,0mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético, seguido do cultivo em meio indutor de brotações, contendo 0,1mg L-1 de cinetina e 0,2mg L-1 benzilaminopurina. O meio MS sem reguladores de crescimento foi adequado para o alongamento e enraizamento das brotações e da utilização do substrato composto de vermiculite + sais do meio MS, foi eficaz para a aclimatização. A análise histológica revelou que a origem das brotações em ambas as cultivares ocorreu via organogênese indireta.
Resumo
The objectives of this study were to establish appropriate conditions for obtaining plant regeneration and acclimatization of the 'RB92579' and 'RB93509' sugarcane cultivars and to elucidate the shoots origin through histological analysis. For both cultivars, obtaining shoots showed better results with the culture of explants on a callus induction medium containing 2.0mg L-1 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, followed by cultivation on a shoot induction medium containing 0.1mg L-1 kinetin and 0.2mg L-1 benzilaminopurine. The MS medium without growth regulators proved to be appropriate for elongation and rooting of shoots and the use of the composed substrate of vermiculite + MS salts was effective for acclimatization. Histological analysis revealed that the origin of the shoots in both cultivars occurred through indirect organogenesis.
Os objetivos deste estudo foram estabelecer condições apropriadas para a obtenção de regeneração de plantas e aclimatização das cultivares 'RB92579' e 'RB93509' de cana-de-açúcar e elucidar a origem das brotações através da análise histológica. Em ambas as cultivares, as brotações obtidas apresentaram os melhores resultados com a cultura dos explantes em um meio de indução de calo contendo 2,0mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético, seguido do cultivo em meio indutor de brotações, contendo 0,1mg L-1 de cinetina e 0,2mg L-1 benzilaminopurina. O meio MS sem reguladores de crescimento foi adequado para o alongamento e enraizamento das brotações e da utilização do substrato composto de vermiculite + sais do meio MS, foi eficaz para a aclimatização. A análise histológica revelou que a origem das brotações em ambas as cultivares ocorreu via organogênese indireta.
Resumo
The objectives of this study were to establish appropriate conditions for obtaining plant regeneration and acclimatization of the 'RB92579' and 'RB93509' sugarcane cultivars and to elucidate the shoots origin through histological analysis. For both cultivars, obtaining shoots showed better results with the culture of explants on a callus induction medium containing 2.0mg L-1 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, followed by cultivation on a shoot induction medium containing 0.1mg L-1 kinetin and 0.2mg L-1 benzilaminopurine. The MS medium without growth regulators proved to be appropriate for elongation and rooting of shoots and the use of the composed substrate of vermiculite + MS salts was effective for acclimatization. Histological analysis revealed that the origin of the shoots in both cultivars occurred through indirect organogenesis.
Os objetivos deste estudo foram estabelecer condições apropriadas para a obtenção de regeneração de plantas e aclimatização das cultivares 'RB92579' e 'RB93509' de cana-de-açúcar e elucidar a origem das brotações através da análise histológica. Em ambas as cultivares, as brotações obtidas apresentaram os melhores resultados com a cultura dos explantes em um meio de indução de calo contendo 2,0mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético, seguido do cultivo em meio indutor de brotações, contendo 0,1mg L-1 de cinetina e 0,2mg L-1 benzilaminopurina. O meio MS sem reguladores de crescimento foi adequado para o alongamento e enraizamento das brotações e da utilização do substrato composto de vermiculite + sais do meio MS, foi eficaz para a aclimatização. A análise histológica revelou que a origem das brotações em ambas as cultivares ocorreu via organogênese indireta.
Resumo
The hybrid Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla presents high levels of productivity and potential for use in paper, cellulose and fiber industries. The bud organogenesis from leaf explants of two clones of E. grandis × E. urophylla was studied in order to verify the effect of several factors: subculture duration on multiplication medium, type of explants, entire and half leaves: basal and apical portions, and duration of the culture on a regeneration medium. Differences in organogenic capacity of the two clones tested were observed. The explant most recommended for organogenesis is the basal section of the leaf collected from shoot clusters subcultured every 17 days. Moreover, the leaf explants must be transferred to a fresh bud induction medium every five days. This study also aimed at evaluating factors affecting the genetic transformation of leaf explants with the uidA gene, via co-cultivation with Agrobacterium tumefaciens, such as the pre-culture of the explants on a specific medium, the duration of their co-culture with the bacteria and the addition of acetosyringone to the culture media. The best conditions for the expression of the uidA gene were two days of pre-culture of the leaf tissues, three days of co-culture with the bacteria and the addition of acetosyringone in pre- and co-culture media.
O híbrido Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla apresenta alta produtividade e potencial para indústrias de papel, celulose e fibras. A organogênese de explantes foliares de dois clones de E. grandis × E. urophylla foi estudada para verificar fatores como tempo de repicagem das plântulas matrizes em meio de multiplicação; tipo de explantes, folhas inteiras e de meias-folhas (porções basais e apicais) e dos dias que os explantes foliares permaneceram em meio de regeneração. Foram observadas diferenças na capacidade organogênica dos dois clones testados. A parte basal das folhas, coletadas de brotações repicadas a cada 17 dias, apresentou superioridade organogênica. Explantes foliares devem ser transferidos para novo meio de indução de brotações a cada cinco dias. Este estudo também teve como objetivo avaliar fatores que afetam a transformação genética de explantes foliares com o gene uidA, via co-cultivo com Agrobacterium tumefaciens, tais como a pré-cultura, a duração da co-cultura e a adição da acetoseringona no meio de cultura. As melhores condições para a expressão do gene uidA foram a cada dois dias de pré-cultura de explantes foliares, três dias de co-cultura com a bactéria e a adição de acetoseringona nos meios de pré e co-cultura.
Resumo
The hybrid Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla presents high levels of productivity and potential for use in paper, cellulose and fiber industries. The bud organogenesis from leaf explants of two clones of E. grandis × E. urophylla was studied in order to verify the effect of several factors: subculture duration on multiplication medium, type of explants, entire and half leaves: basal and apical portions, and duration of the culture on a regeneration medium. Differences in organogenic capacity of the two clones tested were observed. The explant most recommended for organogenesis is the basal section of the leaf collected from shoot clusters subcultured every 17 days. Moreover, the leaf explants must be transferred to a fresh bud induction medium every five days. This study also aimed at evaluating factors affecting the genetic transformation of leaf explants with the uidA gene, via co-cultivation with Agrobacterium tumefaciens, such as the pre-culture of the explants on a specific medium, the duration of their co-culture with the bacteria and the addition of acetosyringone to the culture media. The best conditions for the expression of the uidA gene were two days of pre-culture of the leaf tissues, three days of co-culture with the bacteria and the addition of acetosyringone in pre- and co-culture media.
O híbrido Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla apresenta alta produtividade e potencial para indústrias de papel, celulose e fibras. A organogênese de explantes foliares de dois clones de E. grandis × E. urophylla foi estudada para verificar fatores como tempo de repicagem das plântulas matrizes em meio de multiplicação; tipo de explantes, folhas inteiras e de meias-folhas (porções basais e apicais) e dos dias que os explantes foliares permaneceram em meio de regeneração. Foram observadas diferenças na capacidade organogênica dos dois clones testados. A parte basal das folhas, coletadas de brotações repicadas a cada 17 dias, apresentou superioridade organogênica. Explantes foliares devem ser transferidos para novo meio de indução de brotações a cada cinco dias. Este estudo também teve como objetivo avaliar fatores que afetam a transformação genética de explantes foliares com o gene uidA, via co-cultivo com Agrobacterium tumefaciens, tais como a pré-cultura, a duração da co-cultura e a adição da acetoseringona no meio de cultura. As melhores condições para a expressão do gene uidA foram a cada dois dias de pré-cultura de explantes foliares, três dias de co-cultura com a bactéria e a adição de acetoseringona nos meios de pré e co-cultura.
Resumo
The sugar cane is a crop widely planted because of the economic importance of its products, sugar and ethanol. Brazil is the largest producer and exporter of sugar, so the crop is often inserted in breeding programs. Genetic transformation strategy is used to obtain resistant and productive cultivars. Defined and optimized in vitro regeneration protocols are required to obtain transgenic plants. The aim of this study was to evaluate the influence of different concentrations of 2,4-D (2,4-dichlorophenoxyacetic acid) to obtain embryogenic callus on cultivars RB966928 and RB986419 clone. Immature leaves from 10 months old plants were used as a source of explants. Leaf 8 x 150 mm cylinders, segmented into 4 mm were inoculated on MS medium with five concentrations of 2,4-D (1, 3, 9, 16 and 27 ?M). A second experiment was conducted with concentrations 3, 9 and 16 ?M of 2,4-D. For both experiments, the dedifferentiation occurred in the dark. Calli were transferred after 45 days of subculture to new medium with the same concentrations of origin for their multiplication. The cultivar RB966928 had responses to somatic embryogenesis of 30 and 41% using 16 ?M of 2,4-D for the first and second experiments, respectively. The clone RB986419 showed respectively 26 and 80% formation of embryogenic callus, using 9 ?M of 2,4-D in the first and second experiment. The calli were transferred to MS m
A cana-de-açúcar é uma cultura muito plantada devido a sua grande importância econômica, provenientes de seus produtos, etanol e açúcar. O Brasil é o maior produtor e exportador mundial de açúcar, sendo assim a cultura está freqüentemente inserida em programas de melhoramento genético. A transformação genética é estratégia para obtenção de cultivares resistentes e produtivas. Para obtenção de plantas transgênicas são necessários protocolos definidos e otimizados de regeneração in vitro. O objetivo desse trabalho foi avaliar a influência de diferentes concentrações de 2,4-D (ácido 2,4 diclorofenoxiacético) para obtenção de calos embriogênicos na cultivar RB966928 e no clone RB986419. Folhas imaturas, de plantas com 10 meses de idade, foram utilizadas como fonte de explantes. Cilindros foliares de 8 x 150 mm, segmentados em 4 mm, foram inoculados em meio de cultura MS com cinco concentrações de 2,4-D (1, 3, 9, 16 e 27 ?M).Um segundo experimento foi realizado com as concentrações de 3, 9 e 16 ?M de 2,4-D. Para os dois experimentos, a desdiferenciação do material ocorreu no escuro. Os calos foram transferidos após 45 dias de subcultivo para novo meio de cultura, com as mesmas concentrações de origem para sua multiplicação. A cultivar RB966928 teve respostas de embriogênese somática de 30 e 41% utilizando 16 ?M de 2,4-D para o primeiro e segundo experimentos, respectivamente. O clon
Resumo
The sugar cane is a crop widely planted because of the economic importance of its products, sugar and ethanol. Brazil is the largest producer and exporter of sugar, so the crop is often inserted in breeding programs. Genetic transformation strategy is used to obtain resistant and productive cultivars. Defined and optimized in vitro regeneration protocols are required to obtain transgenic plants. The aim of this study was to evaluate the influence of different concentrations of 2,4-D (2,4-dichlorophenoxyacetic acid) to obtain embryogenic callus on cultivars RB966928 and RB986419 clone. Immature leaves from 10 months old plants were used as a source of explants. Leaf 8 x 150 mm cylinders, segmented into 4 mm were inoculated on MS medium with five concentrations of 2,4-D (1, 3, 9, 16 and 27 ?M). A second experiment was conducted with concentrations 3, 9 and 16 ?M of 2,4-D. For both experiments, the dedifferentiation occurred in the dark. Calli were transferred after 45 days of subculture to new medium with the same concentrations of origin for their multiplication. The cultivar RB966928 had responses to somatic embryogenesis of 30 and 41% using 16 ?M of 2,4-D for the first and second experiments, respectively. The clone RB986419 showed respectively 26 and 80% formation of embryogenic callus, using 9 ?M of 2,4-D in the first and second experiment. The calli were transferred to MS m
A cana-de-açúcar é uma cultura muito plantada devido a sua grande importância econômica, provenientes de seus produtos, etanol e açúcar. O Brasil é o maior produtor e exportador mundial de açúcar, sendo assim a cultura está freqüentemente inserida em programas de melhoramento genético. A transformação genética é estratégia para obtenção de cultivares resistentes e produtivas. Para obtenção de plantas transgênicas são necessários protocolos definidos e otimizados de regeneração in vitro. O objetivo desse trabalho foi avaliar a influência de diferentes concentrações de 2,4-D (ácido 2,4 diclorofenoxiacético) para obtenção de calos embriogênicos na cultivar RB966928 e no clone RB986419. Folhas imaturas, de plantas com 10 meses de idade, foram utilizadas como fonte de explantes. Cilindros foliares de 8 x 150 mm, segmentados em 4 mm, foram inoculados em meio de cultura MS com cinco concentrações de 2,4-D (1, 3, 9, 16 e 27 ?M).Um segundo experimento foi realizado com as concentrações de 3, 9 e 16 ?M de 2,4-D. Para os dois experimentos, a desdiferenciação do material ocorreu no escuro. Os calos foram transferidos após 45 dias de subcultivo para novo meio de cultura, com as mesmas concentrações de origem para sua multiplicação. A cultivar RB966928 teve respostas de embriogênese somática de 30 e 41% utilizando 16 ?M de 2,4-D para o primeiro e segundo experimentos, respectivamente. O clon