Different methods of real-time PCR for detection of pseudorabies virus

ABSTRACT: Pseudorabies (PR) is a highly contagious viral disease of great animal health and economic importance in swine industry. The aim of this study was to evaluate different genomic regions, real-time PCR chemistries and equipment for the molecular diagnosis of PR. Eight primer pairs targeting four genes (gB, gC, gE, gD), three different qPCR chemistries (SybrGreen, hydrolysis probes and plexor) and two equipment (ABI7500, Rotorgene 3000) were evaluated. Oligonucleotides targeting gB using hydrolysis probes showed the best performance after evaluating efficiency (99%), the detection limit (10-1.5 TCID50 mL-1) and diagnostic sensitivity and; therefore, those primers were selected for performance verification factors such as repeatability, reproducibility and robustness (1.39% variance between days, 24% variance between analysts and 4.07% variance in analysis error). The qPCR standardized and validated in this research proved to be reliable for the diagnosis of PR and may be used in diagnostic laboratories that follow ISO 17025 and ISO 16140.

RESUMO: Pseudorraiva (PR) é uma doença viral altamente contagiosa de grande importância sanitária e econômica na indústria suína. O objetivo deste estudo foi avaliar diferentes regiões genômicas, químicas de PCR em tempo real e equipamentos para o diagnóstico molecular de PR. Foram avaliados quatro genes (GB, GC, GE, gD), três diferentes produtos químicos (SybrGreen, sondas de hidrólise e plexor) e dois equipamentos (ABI7500, Rotorgene 3000). Oligonucleotídeos com alvo para gB baseados na química de sondas de hidrólise apresentaram o melhor desempenho nos testes de eficiência (99%), de limite de detecção (10-1.5 TCID50 mL-1) e sensibilidade diagnóstica. Portanto, estes foram selecionados para fatores de verificação de desempenho, tais como a repetibilidade, reprodutibilidade e robustez (1,39% de variância entre dias, 24% variância entre analistas e 4,07% de variância por erro de análise). A qPCR, padronizada e validada neste trabalho, mostrou-se confiável para o diagnóstico de PR e pode ser utilizada em laboratórios de diagnóstico que se seguem normas internacionais como ISO 17025 e ISO 16140.

In vitro efficacy of teat antiseptics against Staphylococcus aureus strains isolated from bovine mastitis / Eficácia in vitro de antissépticos utilizados no controle da mastite bovina frente a isolados de Staphylococcus aureus

The process of teat disinfection is a widely accepted component of successful mastitis control programs by reducing the number of bacteria on the teat skin and healing teat lesions. For contagious pathogens such as Staphylococcus aureus, post-milking teat disinfection remains a simple, effective and economical practice for prevention of new intramammary infections (IMIs) of lactating dairy cows. Despite the universal acceptance of teat dipping as a method of mastitis control, variations in the susceptibility and resistance profile of mastitis pathogens among antiseptics have been described. Thus, here we sought to explore the in vitro efficacy of the followings antiseptics against S. aureus isolated from IMIs: chlorhexidine (2.0%), chlorine (2.5%), quarternary ammonium (4.0%), lactic acid (2.0%) and iodine (0.6%). We used 50 S. aureus strains isolated from bovine IMIs from 50 dairy herds located at Minas Gerais, São Paulo, Paraná and Rio Grande do Sul States (Brazil). The antiseptics were evaluated at four different specific intervals (15, 30, 60 and 300 s). We found a higher activity for quarternary ammonium and chlorhexidine against S. aureus at all time-points, followed by iodine and then chlorine. Lactic acid treatment produced the worst results for all time-points and strains. Due to variations in the sensitivity and resistance profile of antiseptics against S. aureus isol

O processo de antissepsia dos tetos é uma prática amplamente recomendada no controle da mastite por reduzir o número de bactérias na pele do teto e curar lesões de teto pré-existentes. Para patógenos contagiosos como o Staphylococcus aureus, a antissepsia dos tetos após a ordenha permanece como uma prática simples, efetiva e economicamente viável na prevenção de novas infecções intramamárias (IMIs). No entanto, variações do perfil de susceptibilidade de patógenos causadores de mastite aos antissépticos têm sido descritas. Desta forma, o presente estudo objetivou avaliar a eficácia in vitro dos antissépticos a base de iodo (0,6%), cloro (2,0%), clorexidine (2,5%), compostos quartenários de amônio (4,0%) e ácido láctico (2,0%) utilizados no pré- e pós-dipping em isolados de Staphylococcus aureus de casos de IMIs. Utilizou-se 50 isolados de S. aureus provenientes de 50 propriedades leiteiras localizadas nos Estados de Minas Gerais, São Paulo, Paraná e Rio Grande do Sul Brasil. Os antissépticos foram avaliados em quatro tempos distintos (15 s, 30 s, 60 s e 300 s). Os resultados apontaram para maior eficácia dos compostos quartenário de amônio e do clorexidine, seguido pelo iodo e cloro contra os isolados de S. aureus nos momentos avaliados. O ácido láctico apresentou a menor atividade antisséptica em todos os momentos avaliados. Desta forma, devido a variações no perfil de suscep

Use of serological diagnostic techniques in the control and eradication of caprine arthritis encephalitis: an update / Uso de técnicas sorológicas de diagnóstico no controle e erradicação da artrite encefalite caprina: atualização

Caprine arthritis encephalitis (CAE) is a chronic disease caused by a small ruminant lentivirus (SRLV), which causes significant losses in goat breeding. The actual state of animal infection with SRLV is difficult to determine due to a complex pathogenesis of the virus, including factors such as delayed or intermittent seroconversion in serological tests. Several serological techniques are available for disease diagnosis, such as screening or confirmation tests, which are different in sensitivity and specificity. Regarding the choice of the test to be applied, availability of commercial immunoreagents, team training, antigen used, and cost of techniques must be considered. This review presents the serological methods available for use in different stages of CAE control and eradication programs, and management measures to be adopted in conjunction with serological diagnosis of the disease(AU)

A artrite encefalite caprina (CAE) é uma enfermidade crônica causada por um lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR), que ocasiona perdas significativas na caprinocultura. O estado real da infecção animal pelo LVPR é de difícil determinação em virtude da complexa patogenia do vírus, incluindo fatores como soroconversão tardia ou intermitente em testes sorológicos. Para o diagnóstico da enfermidade, diversas técnicas sorológicas estão disponíveis, como testes de triagem ou confirmatórios, com variações na sensibilidade e especificidade. Para escolha do teste a ser usado, a disponibilidade de imunorreagentes comerciais, o treinamento da equipe, o antígeno utilizado, e o custo das técnicas devem ser considerados. Esta revisão apresenta os métodos sorológicos disponíveis para uso em diferentes fases dos programas de controle e erradicação da CAE e as medidas de manejo que devem ser adotadas em conjunto com o diagnóstico sorológico da enfermidade(AU)

Detection of agents associated with respiratory diseases of swine by real time PCR

Porcine Respiratory Disease Complex (PRDC) is a group of diseases that cause high losses in the swine industry. Several infectious agents are related to PRDC including porcine circovirus 2 (PCV-2), pseudorabies virus (SuHV-1),Haemophilus parasuis (HP), Mycoplasma hypneumoniae (MH) and Pasteurela multocida (PM). The aim of this study was to develop real-time PCRs (qPCR) for the detection of these infectious agents. Oligonucleotides were designed for each specific infectious agent and labeled with different fluorophores to amplify specific parts of the genome. This was done in two groups of reactionsa duplex qPCR for SuHV-1 and PCV-2 and a multiplex qPCR to detect the three bacteria simultaneously. The reactions were tested in 142 pooled samples of swine lymph nodes and lungs with clinical signs of PRDC. There were 135 samples that tested positive for PCV-2, 61 for HP, 29 for PM, 30 for MH and zero for SuHV-1. We recorded 76 cases of co-infection. The qPCRs developed in this study are useful tools in the diagnosis of PRDC.

Complexo de Doenças Respiratórias de Suínos (CDRS ) é um grupo de doenças que causam grandes perdas na indústria suína. Vários agentes infecciosos estão relacionados com a CDRS , entre eles o circovírus suíno 2 (PCV -2), vírus da pseudo-raiva (SuHV -1) , Haemophilus parasuis (HP) ,Mycoplasma hypneumoniae (MH ) e Pasteurela multocida (PM). O objetivo com este estudo foi desenvolver PCR em tempo real (qPCR) para a detecção destes agentes infecciosos. Os oligonucleotídeos foram concebidos para cada agente infeccioso específico e marcado com fluoróforos diferentes para amplificar partes específicas do genoma em dois grupos de reacções , uma qPCR dúplex em SuHV -1 e PCV- 2 e uma qPCR multiplex para detectar as três bactérias simultaneamente. As reações foram testadas em 142 amostras de pools de linfonodos e pulmões de suínos com sinais clínicos de CDRS. Foram detectadas 135 amostras positivas para PCV- 2 , 61 para a HP, 29 para PM e 30 para MH e zero para SuHV -1, dentre esses foram registrados 76 casos de co-infecção . As qPCRs desenvolvidas neste estudo são ferramentas úteis no diagnóstico da CDRS.

Detection of agents associated with respiratory diseases of swine by real time PCR

Porcine Respiratory Disease Complex (PRDC) is a group of diseases that cause high losses in the swine industry. Several infectious agents are related to PRDC including porcine circovirus 2 (PCV-2), pseudorabies virus (SuHV-1),Haemophilus parasuis (HP), Mycoplasma hypneumoniae (MH) and Pasteurela multocida (PM). The aim of this study was to develop real-time PCRs (qPCR) for the detection of these infectious agents. Oligonucleotides were designed for each specific infectious agent and labeled with different fluorophores to amplify specific parts of the genome. This was done in two groups of reactionsa duplex qPCR for SuHV-1 and PCV-2 and a multiplex qPCR to detect the three bacteria simultaneously. The reactions were tested in 142 pooled samples of swine lymph nodes and lungs with clinical signs of PRDC. There were 135 samples that tested positive for PCV-2, 61 for HP, 29 for PM, 30 for MH and zero for SuHV-1. We recorded 76 cases of co-infection. The qPCRs developed in this study are useful tools in the diagnosis of PRDC.

Complexo de Doenças Respiratórias de Suínos (CDRS ) é um grupo de doenças que causam grandes perdas na indústria suína. Vários agentes infecciosos estão relacionados com a CDRS , entre eles o circovírus suíno 2 (PCV -2), vírus da pseudo-raiva (SuHV -1) , Haemophilus parasuis (HP) ,Mycoplasma hypneumoniae (MH ) e Pasteurela multocida (PM). O objetivo com este estudo foi desenvolver PCR em tempo real (qPCR) para a detecção destes agentes infecciosos. Os oligonucleotídeos foram concebidos para cada agente infeccioso específico e marcado com fluoróforos diferentes para amplificar partes específicas do genoma em dois grupos de reacções , uma qPCR dúplex em SuHV -1 e PCV- 2 e uma qPCR multiplex para detectar as três bactérias simultaneamente. As reações foram testadas em 142 amostras de pools de linfonodos e pulmões de suínos com sinais clínicos de CDRS. Foram detectadas 135 amostras positivas para PCV- 2 , 61 para a HP, 29 para PM e 30 para MH e zero para SuHV -1, dentre esses foram registrados 76 casos de co-infecção . As qPCRs desenvolvidas neste estudo são ferramentas úteis no diagnóstico da CDRS.

Equilíbrio eletrolítico e ácido-base em bovinos

The knowledge of the physiology and regulation of electrolytes and blood gas parameters is necessary because the health of the animal depends directly on the normal composition of fluid in body compartments. The regulation of these is closely intertwined with a rigorous and precise control so that an abnormality in one of these compartments reflects the change in the other. The evaluation of electrolyte and acid-base balance can provide key information for diagnosis, prognosis and therapeutic decision for several diseases in animals such as neonatal diarrhea, anaplasmosis and babesiosis, displacement of abomasum and septic processes. The corrections of these changes with appropriate treatment are key to minimizing losses due to mortality in these diseases.

O conhecimento sobre a fisiologia e regulação dos eletrólitos e do equilíbrio ácido-base é necessário, pois a saúde do animal depende diretamente da composição normal dos fluídos nos diversos compartimentos corporais. Esta regulação está intimamente entrelaçada em um rigoroso e preciso controle, de modo que uma anormalidade em um destes compartimentos reflete na alteração dos demais. A avaliação do equilíbrio eletrolítico e ácido-base pode fornecer informações fundamentais para o diagnóstico, prognóstico e decisão terapêutica de diversas enfermidades nos bovinos, tais como diarreias neonatais, hemoparasitoses (anaplasmose e a babesiose), deslocamento de abomaso e processos de sépticos. As correções destas alterações com medidas terapêuticas adequadas são pontos chave para minimizar as perdas por mortalidade causadas por estas enfermidades.

Equilíbrio eletrolítico e ácido-base em bovinos

The knowledge of the physiology and regulation of electrolytes and blood gas parameters is necessary because the health of the animal depends directly on the normal composition of fluid in body compartments. The regulation of these is closely intertwined with a rigorous and precise control so that an abnormality in one of these compartments reflects the change in the other. The evaluation of electrolyte and acid-base balance can provide key information for diagnosis, prognosis and therapeutic decision for several diseases in animals such as neonatal diarrhea, anaplasmosis and babesiosis, displacement of abomasum and septic processes. The corrections of these changes with appropriate treatment are key to minimizing losses due to mortality in these diseases.

O conhecimento sobre a fisiologia e regulação dos eletrólitos e do equilíbrio ácido-base é necessário, pois a saúde do animal depende diretamente da composição normal dos fluídos nos diversos compartimentos corporais. Esta regulação está intimamente entrelaçada em um rigoroso e preciso controle, de modo que uma anormalidade em um destes compartimentos reflete na alteração dos demais. A avaliação do equilíbrio eletrolítico e ácido-base pode fornecer informações fundamentais para o diagnóstico, prognóstico e decisão terapêutica de diversas enfermidades nos bovinos, tais como diarreias neonatais, hemoparasitoses (anaplasmose e a babesiose), deslocamento de abomaso e processos de sépticos. As correções destas alterações com medidas terapêuticas adequadas são pontos chave para minimizar as perdas por mortalidade causadas por estas enfermidades.

Etiologic diagnosis of bovine infectious abortion by PCR

Infectious abortion is a significant cause of reproductive failure and economic losses in cattle. The goal of this study was to detect nucleic acids of several infectious agents known to cause abortion including Arcanobacterium pyogenes, Bovine Herpesvirus 1, Brucella abortus, Campylobacter fetus subsp. venerealis, Chlamydophila abortus, Leptospira sp., Listeria monocytogenes, Salmonella sp., Mycoplasma bovis, Mycoplasma bovigenitalium, Neospora caninum, and Tritrichomonas foetus. Tissue homogenates from 42 fetuses and paraffin-embedded tissues from 28 fetuses and 14 placentas/endometrium were included in this study. Brucella abortus was detected in 14.2% (12/84) of the samples. Salmonella sp. DNA was amplified from 2 fetuses, and there was one positive for Neospora caninum, and another for Listeria monocytogenes. This PCR-based approach resulted in identification of the etiology in 19% of samples, or 20% if considered fetal tissues only.

Aborto infeccioso é uma causa significativa de falhas reprodutivas e perdas econômicas na bovinocultura. O objetivo deste estudo foi detectar ácidos nucleicos de vários agentes infecciosos reconhecidos como causadores de aborto, incluindo-se Arcanobacterium pyogenes, Herpesvirus bovino tipo 1, Brucella abortus, Campylobacter fetus subsp. venerealis, Chlamydophila abortus, Leptospira sp., Listeria monocytogenes, Salmonella sp., Mycoplasma bovis, Mycoplasma bovigenitalium, Neospora caninum e Tritrichomonas foetus. Homogenados de tecidos de 42 fetos e tecidos incluídos em parafina de 28 fetos e 14 placentas/endométrio foram incluídos neste estudo. Brucella abortus foi detectada em 14,2% (12/84) das amostras. DNA de Salmonella sp. foi amplificado de dois fetos e houve um feto positivo para Neospora caninum e outro para Listeria monocytogenes. Essa metodologia baseada em PCR resultou na identificação da etiologia em 19% das amostras ou 20% se considerados somente os tecidos fetais.

Etiologic diagnosis of bovine infectious abortion by PCR

Infectious abortion is a significant cause of reproductive failure and economic losses in cattle. The goal of this study was to detect nucleic acids of several infectious agents known to cause abortion including Arcanobacterium pyogenes, Bovine Herpesvirus 1, Brucella abortus, Campylobacter fetus subsp. venerealis, Chlamydophila abortus, Leptospira sp., Listeria monocytogenes, Salmonella sp., Mycoplasma bovis, Mycoplasma bovigenitalium, Neospora caninum, and Tritrichomonas foetus. Tissue homogenates from 42 fetuses and paraffin-embedded tissues from 28 fetuses and 14 placentas/endometrium were included in this study. Brucella abortus was detected in 14.2% (12/84) of the samples. Salmonella sp. DNA was amplified from 2 fetuses, and there was one positive for Neospora caninum, and another for Listeria monocytogenes. This PCR-based approach resulted in identification of the etiology in 19% of samples, or 20% if considered fetal tissues only.

Aborto infeccioso é uma causa significativa de falhas reprodutivas e perdas econômicas na bovinocultura. O objetivo deste estudo foi detectar ácidos nucleicos de vários agentes infecciosos reconhecidos como causadores de aborto, incluindo-se Arcanobacterium pyogenes, Herpesvirus bovino tipo 1, Brucella abortus, Campylobacter fetus subsp. venerealis, Chlamydophila abortus, Leptospira sp., Listeria monocytogenes, Salmonella sp., Mycoplasma bovis, Mycoplasma bovigenitalium, Neospora caninum e Tritrichomonas foetus. Homogenados de tecidos de 42 fetos e tecidos incluídos em parafina de 28 fetos e 14 placentas/endométrio foram incluídos neste estudo. Brucella abortus foi detectada em 14,2% (12/84) das amostras. DNA de Salmonella sp. foi amplificado de dois fetos e houve um feto positivo para Neospora caninum e outro para Listeria monocytogenes. Essa metodologia baseada em PCR resultou na identificação da etiologia em 19% das amostras ou 20% se considerados somente os tecidos fetais.

Experimental rabies in ovine and caprine inoculated with a brazilian fox (Dusicyon vetulus) isolate virus sample / Raiva experimental em caprinos e ovinos inoculados com uma amostra de vírus isolada de raposa (Dusicyon vetulus)

In the region of Patos, northeastern Brazil, ovine and caprine are important for the local economy. The animals are raised freely to find their own food, thus, they are susceptible to the attack ofthe Brazilian fox Dusicyon vetulus, frequently positive for rabies. The symptoms of this disease in those animals are poorly known. In order to better understand the disease in these species, two ovines and two caprines, aged 3-4 months old were inoculated in the masseter muscle with a fox rabies virus isolate and were kept confined. Seventeen days after inoculation, ovine 1 showed signs of loss ofapetite, stertorous, itching, lowered ears, difficulty in biting and swallowing, salivation, cough and failure in vocalization. Death occurred after 24 hours, when the other animals presented symptoms. On the twentieth day, ovine 2 manifested lateral decumbency, cycling movements, bit the hooves and the fence and died. Both caprines presented exacerbation of sexual instinct, priapism, and had to be separated due to agressiveness. Progressively they presented incoordination, decumbent position, opisthotonus, myoclonia and died after three and five days respectively for caprine 1 and 2. Each animal was necropsied and all presented pulmonary oedema and increased volume of cephalorrachidian fluid. Through the RT-PCR technique viral particles were detected in different organs, although virus isol

Na região de Patos-PB, semiárido nordestino, caprinos e ovinos são importante fonte de renda. Criados extensivamente, tornam-se suscetíveis ao ataque de raposas Dusicyon vetulus, frequentemente diagnosticadas com raiva. Os sintomas dessa doença nesses animais são pouco conhecidos. Para melhor compreender a raiva nessas espécies, dois ovinos e dois caprinos entre 3 -4 meses de idade, foram inoculados no masseter com vírus rábico isolado de raposa e mantidos confinados. Dezessete dias após, o ovino 1 apresentou inapetência, estertores, prurido, orelhas caídas, dificuldade em apreensão e deglutição, salivação, tosse, tentativa de vocalizar e morte após 24 horas. No dia seguinte os outros animais iniciaram os sintomas. No vigésimo dia, o ovino 2 posicionou-se em decúbito lateral com movimentos de pedalar, morder os cascos e a gaiola e morreu. as caprinos apresentaram exacerbação da libido, priapismo e agressividade. Progressivamente, houve incoordenação motora, decúbito, opist6tono e contrações musculares. A morte ocorreu após três e cinco dias para os caprinos 1 e 2, respectivamente. À necropsia, observou-se edema pulmonar e aumento do liquor nos quatro animais. Pela técnica de RT-PCR detectou-se RNA viral em vários órgãos; cérebro, coração, pulmão, rins, fígado e glândulas salivares, porem, só foi possível isolar o vírus em camundongo, a partir dos cérebros. Na prova de IFD todos

Seroprevalence of holders farms for eastern equine encephalitis and western equine encephalomyelitis in Uruará Municipality, Pará State, Northen Brazil / Soroprevalência da encefalomielite eqüina do leste e do oeste no Município de Uruará, PA, Brasil

The aim of this study was to verify the prevalence of herds with EEEV and WEEV infected animals, in Uruará municipal district, Pará State-Brazil. In view of that, the serum neutralization test was utilized. The following prevalence of positive herds were observed: 17 positive herds for EEEV out of 32 herds, therefore, prevalence is 53.12% (IC 35.03 - 70.49%). One positive herd was found for WEEV out of the 32 studied herds, thus performing 3.12% (IC 0.16 - 18.00%) prevalence. The prevalence of serum reactors animals were observed: 27,37% (IC 15,33 - 39,21%), WEE 1,05% (IC 0,06 - 6,78%).

O objetivo do presente foi estimar a soroprevalência de anticorpos contra o vírus da EEE e da WEE utilizando como unidades de análise os eqüídeos e as propriedades rurais do tipo familiar do município de Uruará, PA. Os anticorpos contra o vírus das EEE e da WEE foram pesquisados pela microtécnica de soroneutralização. As seguintes prevalências de animais sororeatores para os diferentes vírus foram observadas: EEE 27,37% (IC 15,33 - 39,21%), WEE 1,05% (IC 0,06 - 6,78%). Para as propriedades obtivemos as seguintes prevalências: EEE 53,12% (IC 35,03 - 70,49%), WEE 3,12% (IC 0,16 - 18,00%).

Comparison of a commercial enzyme immune assay (ELISA) and serum neutralization techniques for the detection of antibodies against BHV-1 in buffaloes (Bubalus bubalis) sera / Comparação das técnicas de ELISA indireto e de soroneutralização na detecção de anticorpos contra o BHV-1 em amostras de soro bubalino (Bubalus bubalis)

The performance of a commercial ELISA (Bovine Rhinotracheitis virus antibody test Kit, Herdcheck®, IDEXX Laboratories Inc., USA) designed to detect the presence of antibody to the Bovine Herpesvirus type 1 (BHV-1) in bovine serum, was evaluated in samples of buffaloes (Bubalus bubalis) serum. Sera of 133 buffaloes without IBR vaccination were performed both by ELISA and standard serum neutralization technique. Sensitivity and specificity of ELISA were 97.14% and 46.03%, respectively. The estimated concordance between two serologic diagnostic methods by kappa index was 0.44 IC (0.29-0.59) using 95% confidence level.

O desempenho de um ELISA comercial (Bovine Rhinotracheitis virus antibody test Kit, Herdcheck®, IDEXX Laboratories Inc., USA) para a identificação de anticorpos anti-herpesvírus bovino tipo 1 (BHV-1), em soro bovino, foi avaliado em 133 amostras de soro de búfalos (Bubalus bubalis), sem histórico de vacinação para IBR, da Região do Vale do Ribeira, Estado de São Paulo. Tomando-se a técnica de soroneutralização como referência, o ELISA indireto apresentou sensibilidade e especificidade relativa de 97,14 e 46,03%, respectivamente. A concordância estimada pelo índice kappa, entre os dois métodos, foi de 0,44 IC (0,29-0,59), utilizando um intervalo de confiança de 95%.

Prevalência de anticorpos contra o vírus da língua azul em ovinos do Distrito Federal / Prevalence of bluetongue virus antibodies in sheep from Distrito Federal, Brazil

O objetivo deste trabalho foi estimar a prevalência de anticorpos contra o vírus da língua azul (BTV) em rebanhos ovinos do Distrito Federal. Soros de 606 ovinos, pertencentes a 18 propriedades, foram analisados pela técnica de imunodifusão em ágar gel (AGID), para pesquisa de anticorpos contra o BTV. As prevalências de rebanhos e de animais infectados pelo vírus da língua azul no Distrito Federal foram respectivamente de 100% (IC 95%: 84,67% a 100%) e de 52,37% (389/606) (IC 95%: 35,76% a 68,98%). Assim, o presente estudo permite concluir que o vírus da língua azul está amplamente disseminada no rebanho ovino do Distrito Federal.

The aims of the present study were to determine the prevalence of bluetongue virus antibodies in sheep from Distrito Federal. Sera from 606 sheep of 18 herds were submitted to the agar-gel immunodiffusion for bluetongue virus antibodies. The prevalences of bluetongue infection found in Distrito Federal were 100% (CI 95%: 84.67 to 100.00) for flocks and 52.37% (389/606) (CI 95%: 35.76 to 68.98) for animals. Thus, data from the present study showed that infection by bluetongue virus is highly widespread in sheep flocks in the Distrito Federal, which intensifies the need for assessments on the impact of this disease in Brazil.

Anticorpos anti-Brucella abortus em equídeos errantes do município de Mossoró, Rio Grande do Norte / Anti-Brucella abortus antibodies in free-ranging equids from Mossoró, Rio Grande do Norte, Brazil

Os objetivos deste trabalho foram (i) determinar a ocorrência da infecção por Brucella abortus em equídeos de vida livre no município de Mossoró, Rio Grande do Norte e (ii) avaliar possíveis fatores associados a esta infecção. Soros de 227 equídeos (178 asininos, 43 equinos e 6 muares), capturados pela polícia rodoviária e funcionários da prefeitura, foram coletados por punção venosa. A pesquisa de anticorpos anti-Brucella abortus foi realizada empregando-se, como triagem, o teste do antígeno acidificado tamponado (AAT) e como confirmatório o teste de redução pelo 2-Mercaptoetanol (2ME). Dos animais testados, quatro (1,76%) foram positivos para anticorpos anti- B. abortus. Todos os positivos eram equinos (9,30%, 4/43). A análise das variáveis levantadas (sexo e idade) como possíveis fatores associados à infecção por B. abortus não revelou a existência de associação entre estas e a soropositividade. Assim, o presente estudo permite concluir que a infecção por B. abortus está presente em equinos do município de Mossoró, Rio Grande do Norte.

The aims of the present study were (i) to determine the occurrence and (ii) to evaluate possible factors associated with infection by Brucella abortus in free-ranging equids from Mossoró, Rio Grande do Norte, Brazil. Sera from 227 free-ranging equids (178 donkeys, 43 horses and 6 mules), captured by the highway police and the prefecture agents, were screened by the rose bengal test (RBT) and confirmed for B. abortus-antibodies by the standard tube agglutination (STAT) and the 2-mercaptoethanol (2ME) tests. Of the 227 equids tested, four (1.76%) were positive for B. abortus antibodies. All were horses, which resulted in an observed frequency of infection for this species of 9.30% (4/43). No association was found among seropositivity for B. abortus and the age and sex. Thus, data from the present study showed that infection by B. abortus is present among horses in Mossoró, Rio Grande do Norte, Brazil.