A sensitive nested-polymerase chain reaction protocol to detect infectious Laryngotracheitis virus / A sensitive nested-polymerase chain reaction protocol to detect infectious Laryngotracheitis virus

Background: Infectious laryngotracheitis virus (ILTV) is a member of the family Herpesviridae that has a worldwide distribution, although it is well controlled in areas of intensive production in which periodic outbreaks of the disease occur. ILTV is an important respiratory pathogen of chickens that may cause severe or mild disease in layers and broilers. Severe disease is characterized by respiratory depression, gasping, expectoration of bloody exudate and high mortality. Mild diseased chickens exhibit milder clinical signs and low mortality, and laboratory techniques are mandatory for a fi nal diagnosis. Several techniques have been described for the detection of ILTV, however they have disadvantages that constrains their use in routine diagnosis. Viral multiplication is limited to respiratory tissue, which makes the trachea the ideal site to look for the virus. The purpose of the present study was to develop a sensitive and specifi c nested Polymerase Chain Reaction (PCR) protocol to detect ILTV DNA directly from tracheal swabs of naturally or experimentally infected chickens.Materials, Methods & Results: The nested-PCR was carried out with two sets of primers selected from a portion of the ILTV thymidine kinase gene. PCR sensitivity was determined by using fi ve-fold serial dilutions of a commercial laryngotracheitis vaccine. PCR was specifi c as determined by testing

Background: Infectious laryngotracheitis virus (ILTV) is a member of the family Herpesviridae that has a worldwide distribution, although it is well controlled in areas of intensive production in which periodic outbreaks of the disease occur. ILTV is an important respiratory pathogen of chickens that may cause severe or mild disease in layers and broilers. Severe disease is characterized by respiratory depression, gasping, expectoration of bloody exudate and high mortality. Mild diseased chickens exhibit milder clinical signs and low mortality, and laboratory techniques are mandatory for a fi nal diagnosis. Several techniques have been described for the detection of ILTV, however they have disadvantages that constrains their use in routine diagnosis. Viral multiplication is limited to respiratory tissue, which makes the trachea the ideal site to look for the virus. The purpose of the present study was to develop a sensitive and specifi c nested Polymerase Chain Reaction (PCR) protocol to detect ILTV DNA directly from tracheal swabs of naturally or experimentally infected chickens.Materials, Methods & Results: The nested-PCR was carried out with two sets of primers selected from a portion of the ILTV thymidine kinase gene. PCR sensitivity was determined by using fi ve-fold serial dilutions of a commercial laryngotracheitis vaccine. PCR was specifi c as determined by testing

Infestação simultânea por Cytodites nudus e Laminosioptes cysticola e seus aspectos patológicos em galinhas de subsistência

The occurrence of Cytodites nudus and Laminosioptes cysticola mites is rare and there is no report of this simultaneous infestation in Brazilian scientific literature. C. nudus is known as the air sacs mite and may cause respiratory signs as well as pneumonia and weight loss when present in large numbers in the host. L. cysticola is found in connective tissue of galliforms and causes formation of small calcified subcutaneous nodules that can be confused with the characteristic nodules found in avian tuberculosis. In this paper are discussed the pathological findings of lesions caused by C. nudus and L. cysticola and their morphological characterization.

Cytodites nudus e Laminosioptes cysticola são ácaros cuja ocorrência é pouco relatada e cuja infestação simultânea nunca foi descrita na literatura científica brasileira. C. nudus é conhecido como ácaro dos sacos aéreos e pode provocar sinais respiratórios, pneumonia e emagrecimento, quando presente em grande número no hospedeiro. L. cysticola parasita o tecido conjuntivo de galiformes e provoca a formação de pequenos nódulos subcutâneos calcificados, que podem ser confundidos com nódulos de tuberculose aviária. No presente trabalho, são discutidos os aspectos patológicos das lesões causadas pelos ácaros C. nudus e L. cysticola e a caracterização morfológica desses parasitas.

Infestação simultânea por Cytodites nudus e Laminosioptes cysticola e seus aspectos patológicos em galinhas de subsistência

The occurrence of Cytodites nudus and Laminosioptes cysticola mites is rare and there is no report of this simultaneous infestation in Brazilian scientific literature. C. nudus is known as the air sacs mite and may cause respiratory signs as well as pneumonia and weight loss when present in large numbers in the host. L. cysticola is found in connective tissue of galliforms and causes formation of small calcified subcutaneous nodules that can be confused with the characteristic nodules found in avian tuberculosis. In this paper are discussed the pathological findings of lesions caused by C. nudus and L. cysticola and their morphological characterization.

Cytodites nudus e Laminosioptes cysticola são ácaros cuja ocorrência é pouco relatada e cuja infestação simultânea nunca foi descrita na literatura científica brasileira. C. nudus é conhecido como ácaro dos sacos aéreos e pode provocar sinais respiratórios, pneumonia e emagrecimento, quando presente em grande número no hospedeiro. L. cysticola parasita o tecido conjuntivo de galiformes e provoca a formação de pequenos nódulos subcutâneos calcificados, que podem ser confundidos com nódulos de tuberculose aviária. No presente trabalho, são discutidos os aspectos patológicos das lesões causadas pelos ácaros C. nudus e L. cysticola e a caracterização morfológica desses parasitas.

Infestação simultânea por Cytodites nudus e Laminosioptes cysticola e seus aspectos patológicos em galinhas de subsistência

The occurrence of Cytodites nudus and Laminosioptes cysticola mites is rare and there is no report of this simultaneous infestation in Brazilian scientific literature. C. nudus is known as the air sacs mite and may cause respiratory signs as well as pneumonia and weight loss when present in large numbers in the host. L. cysticola is found in connective tissue of galliforms and causes formation of small calcified subcutaneous nodules that can be confused with the characteristic nodules found in avian tuberculosis. In this paper are discussed the pathological findings of lesions caused by C. nudus and L. cysticola and their morphological characterization.

Cytodites nudus e Laminosioptes cysticola são ácaros cuja ocorrência é pouco relatada e cuja infestação simultânea nunca foi descrita na literatura científica brasileira. C. nudus é conhecido como ácaro dos sacos aéreos e pode provocar sinais respiratórios, pneumonia e emagrecimento, quando presente em grande número no hospedeiro. L. cysticola parasita o tecido conjuntivo de galiformes e provoca a formação de pequenos nódulos subcutâneos calcificados, que podem ser confundidos com nódulos de tuberculose aviária. No presente trabalho, são discutidos os aspectos patológicos das lesões causadas pelos ácaros C. nudus e L. cysticola e a caracterização morfológica desses parasitas.

Listeria sp. presence in Brazilian colonial cheese: potential risk to public health / Presença de Listeria sp. em queijos tipo colonial no Brasil: risco potencial para a saúde pública

This work was carried out aiming to isolate microorganisms belonging to the Listeria genus. For that purpose, 161 samples of commercial colonial cheese obtained in several geographic regions of Rio Grande do Sul, from 2003 to 2006, were bacteriologicaly examined according to the official protocol of Brazilian Ministry of Agriculture. Isolated of Listeria sp. from 12 samples were examined regarding to phenotypic characteristics based on colonial morphology, elective culture media and blood agar, type of hemolysis, sugar fermentation and CAMP test. Listeria innocua was the most frequent isolate from 10 cheese samples, followed by L. monocytogenes which was isolated from 2 samples.

Este trabalho foi conduzido com o objetivo de isolar microrganismos do gênero Listeria. Para tanto foram analisadas 161 amostras de queijos comercializados em diversos pontos de venda do Estado do Rio Grande do Sul, no período compreendido entre os anos 2003 e 2006. As análises microbiológicas para o isolamento do agente seguiram a metodologia oficial do Ministério da Agricultura Pecuária e Abastecimento do Brasil. Em 12 amostras bacterianas inicialmente classificadas como pertencentes ao gênero Listeria foram observadas as características relativas à morfologia colonial em meios seletivos e Ágar-sangue, morfologia e coloração dos microrganismos, fermentação de açúcares e reação no CAMP teste. Os resultados obtidos mostraram que a espécie Listeria innocua foi a mais prevalente, tendo sido isolada de 10 amostras, seguida de L. monocytogenes, isolada em duas amostras.

Staphylococcal canine pyoderma: species identification and drug sensitivity / Pioderma estafilocócico canino: identificação das espécies e sensibilidade aos antimicrobianos

This paper reports the results of bacteriological examination on clinical cases of pyoderma in dogs, patients from the Veterinary Hospital, ULBRA University, during the year of 2005. The disease was diagnosed in different degrees of evolution. Isolated of Staphylococcus sp. from 42 samples were taken. Samples were examined regarding phenotypic characteristics, based on colony pigmentation, kind of hemolysis, growth and reaction in Baird-Parker (BP) medium, DNAse production, slide coagulase test (Clumping Factor), sugar fermentation, salt tolerance, MR, VP and Polimixin B behavior. The antimicrobial susceptibility tests were performed by the disk diffusion method (Kirby-Bauer). The most prevalent staphylococal species identified was Staphylococcus intermedius, regardless of the extension of the disease in the examined patient. The antimicrobial susceptibility tests showed at least 70% of sensitivity or more to amoxicilin+clavulanic acid, ceftiofur, cefalexyn, amicacyn and enrofloxacyn.

Durante o ano de 2005 foram estudadas 42 amostras de Staphylococcus sp. obtidas de cães atendidos no Hospital Veterinário do curso de Medicina Veterinária da ULBRA, que apresentaram pioderma em variadas fases de evolução e extensão. As amostras bacterianas identificadas foram observadas quanto às características fenotípicas relativas à pigmentação das colônias e tipo de hemólise, crescimento e reação ao meio Baird-Parker (BP), assim como a produção de DNAse, reações de coagulase em lâmina, fermentação de açúcares, tolerância ao meio hipertônico, reações de Vermelho de Metila (VM) e Voges Proskauer (VP) e o comportamento frente à Polimixina B. Os testes de suscetibilidade aos antibacterianos foram realizados pelo método de Kirby-Bauer. Os resultados obtidos mostraram que Staphylococcus intermedius foi a espécie mais prevalente, independente da evolução da doença. Os antibiogramas revelaram que os antibacterianos mais eficazes, por apresentarem mais de 70% de sensibilidade, foram amoxicilina+ácido clavulânico, ceftiofur, cefalexina, amicacina e enrofloxacina.

Lesões cutâneas em frangos de corte: características morfológicas e moleculares

O crescimento da avicultura mundial vem ocorrendo significativamente nos últimos anos. Todavia, em função de modificações no processo de criação industrial dos frangos de corte, algumas enfermidades tornam-se cada vez mais importantes, como é o caso das cutâneas como a celulite, a varíola, o carcinoma dérmico de células escamosas (CDCE) e as dermatites inespecíficas. Como as lesões macroscópicas nessas doenças não são específicas, o diagnóstico na inspeção de carcaças é difícil, tendendo-se a agrupar as alterações cutâneas em uma categoria denominada dermatose, o que inviabiliza a obtenção de dados relativos à prevalência das mesmas e o estudo dos fatores envolvidos na causa das mesmas. Esta tese consta de quatro artigos que relatam estudos sobre a ocorrência de lesões na pele de frangos de corte. No Artigo 1 descreve-se a ocorrência de casos de varíola atípica em frangos de corte no RGS, em que as lesões ocorreram nas áreas do corpo cobertas pelas penas, enquanto que no Artigo 2 relata-se o encontro de lesões semelhantes às do carcinoma dérmico de células escamosas (CDCE) associadas a lesões típicas de varíola em membranas cório-alantóides (M.C.A.) de ovos embrionados inoculados com preparados de amostras de pele contendo lesões de varíola ou de CDCE. O Artigo 3 relata os resultados dos exames histopatológicos em 800 amostras de pele de carcaças de frangos condenadas total o

Lesões cutâneas em frangos de corte: características morfológicas e moleculares

O crescimento da avicultura mundial vem ocorrendo significativamente nos últimos anos. Todavia, em função de modificações no processo de criação industrial dos frangos de corte, algumas enfermidades tornam-se cada vez mais importantes, como é o caso das cutâneas como a celulite, a varíola, o carcinoma dérmico de células escamosas (CDCE) e as dermatites inespecíficas. Como as lesões macroscópicas nessas doenças não são específicas, o diagnóstico na inspeção de carcaças é difícil, tendendo-se a agrupar as alterações cutâneas em uma categoria denominada dermatose, o que inviabiliza a obtenção de dados relativos à prevalência das mesmas e o estudo dos fatores envolvidos na causa das mesmas. Esta tese consta de quatro artigos que relatam estudos sobre a ocorrência de lesões na pele de frangos de corte. No Artigo 1 descreve-se a ocorrência de casos de varíola atípica em frangos de corte no RGS, em que as lesões ocorreram nas áreas do corpo cobertas pelas penas, enquanto que no Artigo 2 relata-se o encontro de lesões semelhantes às do carcinoma dérmico de células escamosas (CDCE) associadas a lesões típicas de varíola em membranas cório-alantóides (M.C.A.) de ovos embrionados inoculados com preparados de amostras de pele contendo lesões de varíola ou de CDCE. O Artigo 3 relata os resultados dos exames histopatológicos em 800 amostras de pele de carcaças de frangos condenadas total o

Lesões cutâneas em frangos de corte: características morfológicas e moleculares

O crescimento da avicultura mundial vem ocorrendo significativamente nos últimos anos. Todavia, em função de modificações no processo de criação industrial dos frangos de corte, algumas enfermidades tornam-se cada vez mais importantes, como é o caso das cutâneas como a celulite, a varíola, o carcinoma dérmico de células escamosas (CDCE) e as dermatites inespecíficas. Como as lesões macroscópicas nessas doenças não são específicas, o diagnóstico na inspeção de carcaças é difícil, tendendo-se a agrupar as alterações cutâneas em uma categoria denominada dermatose, o que inviabiliza a obtenção de dados relativos à prevalência das mesmas e o estudo dos fatores envolvidos na causa das mesmas. Esta tese consta de quatro artigos que relatam estudos sobre a ocorrência de lesões na pele de frangos de corte. No Artigo 1 descreve-se a ocorrência de casos de varíola atípica em frangos de corte no RGS, em que as lesões ocorreram nas áreas do corpo cobertas pelas penas, enquanto que no Artigo 2 relata-se o encontro de lesões semelhantes às do carcinoma dérmico de células escamosas (CDCE) associadas a lesões típicas de varíola em membranas cório-alantóides (M.C.A.) de ovos embrionados inoculados com preparados de amostras de pele contendo lesões de varíola ou de CDCE. O Artigo 3 relata os resultados dos exames histopatológicos em 800 amostras de pele de carcaças de frangos condenadas total o

DERMATITE ESTAFILOCÓCICA EM OVINO NO RIO GRANDE DO SUL

SUMMARY A case of Staphylococcal Dermatitis is presented and discussed. The macroscopic and microscopic lesions found are described as well as the characteristics of Staphylococcus aureus strain isolated.

RESUMO Relata-se um caso de Dermatite Estafilocócica ocorrido em ovelha criada a campo no Rio Grande do Sul. São descritas e discutidas as lesões macroscópicas e microscópicas encontradas, assim como o isolamento do Staphylococcus aureus da lesão.

Dermatite estafilocócica em ovino no rio grande do sul

SUMMARY A case of Staphylococcal Dermatitis is presented and discussed. The macroscopic and microscopic lesions found are described as well as the characteristics of Staphylococcus aureus strain isolated.

RESUMO Relata-se um caso de Dermatite Estafilocócica ocorrido em ovelha criada a campo no Rio Grande do Sul. São descritas e discutidas as lesões macroscópicas e microscópicas encontradas, assim como o isolamento do Staphylococcus aureus da lesão.

Listeria sp. presence in Brazilian colonial cheese: potential risk to public health / Presença de Listeria sp. em queijos tipo colonial no Brasil: risco potencial para a saúde pública

This work was carried out aiming to isolate microorganisms belonging to the Listeria genus. For that purpose, 161 samples of commercial colonial cheese obtained in several geographic regions of Rio Grande do Sul, from 2003 to 2006, were bacteriologicaly examined according to the official protocol of Brazilian Ministry of Agriculture. Isolated of Listeria sp. from 12 samples were examined regarding to phenotypic characteristics based on colonial morphology, elective culture media and blood agar, type of hemolysis, sugar fermentation and CAMP test. Listeria innocua was the most frequent isolate from 10 cheese samples, followed by L. monocytogenes which was isolated from 2 samples.

Este trabalho foi conduzido com o objetivo de isolar microrganismos do gênero Listeria. Para tanto foram analisadas 161 amostras de queijos comercializados em diversos pontos de venda do Estado do Rio Grande do Sul, no período compreendido entre os anos 2003 e 2006. As análises microbiológicas para o isolamento do agente seguiram a metodologia oficial do Ministério da Agricultura Pecuária e Abastecimento do Brasil. Em 12 amostras bacterianas inicialmente classificadas como pertencentes ao gênero Listeria foram observadas as características relativas à morfologia colonial em meios seletivos e Ágar-sangue, morfologia e coloração dos microrganismos, fermentação de açúcares e reação no CAMP teste. Os resultados obtidos mostraram que a espécie Listeria innocua foi a mais prevalente, tendo sido isolada de 10 amostras, seguida de L. monocytogenes, isolada em duas amostras.

Laryngotracheitis: reproducibility of the disease and comparison of diagnostic methods

Infectious laryngotracheitis virus (ILTV) cause mild to severe respiratory disease in chickens, the purpose of our study being to use Brazilian isolate of ILTV to reproduce ILTV disease in chickens by experimental infection and to compare three diagnostic methods (nested polymerase chain reaction (PCR), virus isolation, histopathology) for detection of ILTV. Forty-eight chickens intratracheally inoculated with ILTV and a further 48 with PBS, showing mild respiratory signs 48 hours post infection (PI) but no signs of infection after day 10 PI. Every 2 days PI, six birds were arbitrarily selected from the control and infected groups, sacrificed and the trachea collected. Both the nested PCR and virus isolation detected the virus from day 2 until day 12 PI. However, at day 12 PI, PCR detected ILTV DNA in 100% of the samples while the virus isolation method detected ILTV in only 33% of the samples. Tracheal histopathology showed intranuclear inclusion bodies on days 8 and 10 PI. The results indicate that the field-isolate of ILTV studied by us is of low pathogenicity and that our nested PCR protocol was able to detect positive samples over a longer infection period than many ILTV diagnostic test already described.

O vírus da laringotraqueíte (VLT) causa de leve a severa doença respiratório em galinhas, o propósito do nosso estudo foi usar um isolado brasileiro de VLT para reproduzir a doença em frangos através da infecção experimental e comparar três métodos de diagnóstico (nested PCR, isolamento viral e histopatologia) para detectar o VLT. Quarenta e oito frangos inoculados intratraquealmente com VLT e outros 48 com PBS, apresentaram sinais respiratórios leves 48 horas após a infecção (PI), mas nenhum sinal após o dia 10 PI. A cada dois dias, seis aves foram selecionados arbitrariamente do controle e do grupo infectado, sacrificados e as traquéias coletadas. Ambos nested PCR e isolamento viral detectaram o vírus do dia 2 até o dia 12 PI. No entanto, no dia 12 PI, a PCR detectou o DNA viral em 100% das amostras enquanto o isolamento viral detectou em somente 33% das amostras. Histopatologia da traquéia revelou corpúsculos de inclusão intranuclear nos dias 8 e 10 PI. Os resultados indicam que o VLT isolado de campo estudado é de baixa patogenicidade e que o protocolo de Nested PCR foi capaz de detectar amostras positivas por um período mais longo da infecção do que muitos testes de diagnósticos descritos.

Staphylococcal canine pyoderma: species identification and drug sensitivity / Pioderma estafilocócico canino: identificação das espécies e sensibilidade aos antimicrobianos

This paper reports the results of bacteriological examination on clinical cases of pyoderma in dogs, patients from the Veterinary Hospital, ULBRA University, during the year of 2005. The disease was diagnosed in different degrees of evolution. Isolated of Staphylococcus sp. from 42 samples were taken. Samples were examined regarding phenotypic characteristics, based on colony pigmentation, kind of hemolysis, growth and reaction in Baird-Parker (BP) medium, DNAse production, slide coagulase test (Clumping Factor), sugar fermentation, salt tolerance, MR, VP and Polimixin B behavior. The antimicrobial susceptibility tests were performed by the disk diffusion method (Kirby-Bauer). The most prevalent staphylococal species identified was Staphylococcus intermedius, regardless of the extension of the disease in the examined patient. The antimicrobial susceptibility tests showed at least 70% of sensitivity or more to amoxicilin+clavulanic acid, ceftiofur, cefalexyn, amicacyn and enrofloxacyn.

Durante o ano de 2005 foram estudadas 42 amostras de Staphylococcus sp. obtidas de cães atendidos no Hospital Veterinário do curso de Medicina Veterinária da ULBRA, que apresentaram pioderma em variadas fases de evolução e extensão. As amostras bacterianas identificadas foram observadas quanto às características fenotípicas relativas à pigmentação das colônias e tipo de hemólise, crescimento e reação ao meio Baird-Parker (BP), assim como a produção de DNAse, reações de coagulase em lâmina, fermentação de açúcares, tolerância ao meio hipertônico, reações de Vermelho de Metila (VM) e Voges Proskauer (VP) e o comportamento frente à Polimixina B. Os testes de suscetibilidade aos antibacterianos foram realizados pelo método de Kirby-Bauer. Os resultados obtidos mostraram que Staphylococcus intermedius foi a espécie mais prevalente, independente da evolução da doença. Os antibiogramas revelaram que os antibacterianos mais eficazes, por apresentarem mais de 70% de sensibilidade, foram amoxicilina+ácido clavulânico, ceftiofur, cefalexina, amicacina e enrofloxacina.

A sensitive nested-polymerase chain reaction protocol to detect infectious Laryngotracheitis virus / A sensitive nested-polymerase chain reaction protocol to detect infectious Laryngotracheitis virus

Background: Infectious laryngotracheitis virus (ILTV) is a member of the family Herpesviridae that has a worldwide distribution, although it is well controlled in areas of intensive production in which periodic outbreaks of the disease occur. ILTV is an important respiratory pathogen of chickens that may cause severe or mild disease in layers and broilers. Severe disease is characterized by respiratory depression, gasping, expectoration of bloody exudate and high mortality. Mild diseased chickens exhibit milder clinical signs and low mortality, and laboratory techniques are mandatory for a fi nal diagnosis. Several techniques have been described for the detection of ILTV, however they have disadvantages that constrains their use in routine diagnosis. Viral multiplication is limited to respiratory tissue, which makes the trachea the ideal site to look for the virus. The purpose of the present study was to develop a sensitive and specifi c nested Polymerase Chain Reaction (PCR) protocol to detect ILTV DNA directly from tracheal swabs of naturally or experimentally infected chickens.Materials, Methods & Results: The nested-PCR was carried out with two sets of primers selected from a portion of the ILTV thymidine kinase gene. PCR sensitivity was determined by using fi ve-fold serial dilutions of a commercial laryngotracheitis vaccine. PCR was specifi c as determined by testing

Background: Infectious laryngotracheitis virus (ILTV) is a member of the family Herpesviridae that has a worldwide distribution, although it is well controlled in areas of intensive production in which periodic outbreaks of the disease occur. ILTV is an important respiratory pathogen of chickens that may cause severe or mild disease in layers and broilers. Severe disease is characterized by respiratory depression, gasping, expectoration of bloody exudate and high mortality. Mild diseased chickens exhibit milder clinical signs and low mortality, and laboratory techniques are mandatory for a fi nal diagnosis. Several techniques have been described for the detection of ILTV, however they have disadvantages that constrains their use in routine diagnosis. Viral multiplication is limited to respiratory tissue, which makes the trachea the ideal site to look for the virus. The purpose of the present study was to develop a sensitive and specifi c nested Polymerase Chain Reaction (PCR) protocol to detect ILTV DNA directly from tracheal swabs of naturally or experimentally infected chickens.Materials, Methods & Results: The nested-PCR was carried out with two sets of primers selected from a portion of the ILTV thymidine kinase gene. PCR sensitivity was determined by using fi ve-fold serial dilutions of a commercial laryngotracheitis vaccine. PCR was specifi c as determined by testing

Laryngotracheitis: reproducibility of the disease and comparison of diagnostic methods

Infectious laryngotracheitis virus (ILTV) cause mild to severe respiratory disease in chickens, the purpose of our study being to use Brazilian isolate of ILTV to reproduce ILTV disease in chickens by experimental infection and to compare three diagnostic methods (nested polymerase chain reaction (PCR), virus isolation, histopathology) for detection of ILTV. Forty-eight chickens intratracheally inoculated with ILTV and a further 48 with PBS, showing mild respiratory signs 48 hours post infection (PI) but no signs of infection after day 10 PI. Every 2 days PI, six birds were arbitrarily selected from the control and infected groups, sacrificed and the trachea collected. Both the nested PCR and virus isolation detected the virus from day 2 until day 12 PI. However, at day 12 PI, PCR detected ILTV DNA in 100% of the samples while the virus isolation method detected ILTV in only 33% of the samples. Tracheal histopathology showed intranuclear inclusion bodies on days 8 and 10 PI. The results indicate that the field-isolate of ILTV studied by us is of low pathogenicity and that our nested PCR protocol was able to detect positive samples over a longer infection period than many ILTV diagnostic test already described.

O vírus da laringotraqueíte (VLT) causa de leve a severa doença respiratório em galinhas, o propósito do nosso estudo foi usar um isolado brasileiro de VLT para reproduzir a doença em frangos através da infecção experimental e comparar três métodos de diagnóstico (nested PCR, isolamento viral e histopatologia) para detectar o VLT. Quarenta e oito frangos inoculados intratraquealmente com VLT e outros 48 com PBS, apresentaram sinais respiratórios leves 48 horas após a infecção (PI), mas nenhum sinal após o dia 10 PI. A cada dois dias, seis aves foram selecionados arbitrariamente do controle e do grupo infectado, sacrificados e as traquéias coletadas. Ambos nested PCR e isolamento viral detectaram o vírus do dia 2 até o dia 12 PI. No entanto, no dia 12 PI, a PCR detectou o DNA viral em 100% das amostras enquanto o isolamento viral detectou em somente 33% das amostras. Histopatologia da traquéia revelou corpúsculos de inclusão intranuclear nos dias 8 e 10 PI. Os resultados indicam que o VLT isolado de campo estudado é de baixa patogenicidade e que o protocolo de Nested PCR foi capaz de detectar amostras positivas por um período mais longo da infecção do que muitos testes de diagnósticos descritos.

Detecção de aflatoxina B1 no organismo de frangos de corte através do emprego de ensaio imuno-enzimático utilizando anticorpos monoclonais(ELISA)

As aflatoxinas prejudicam os parâmetros de produção, causam imunodepressão humoral e celular e afetam o mecanismo de coagulação. No sul do Brasil, a aflatoxicose representou de 15 a 29% dos casos examinados em laboratório de 1985 a 1991, sendo uma das principais enfermidades diagnosticadas no período em questão.Frangos de corte com 42 dias de idade, fêmeas, com peso médio de 1.800 g foram inoculados diretamente no inglúvio com 360 mg de aflatoxina B 1 através de dose única. Aos 30 minutos, 1, 2, 5, 8, 12 e 24 horas após a inoculação, cinco animais tratados e quatro controles foram sacrificados e coletados 40g de fígado, de cada um, para serem processados individualmente. Usou-se o kit comercial Veratox da Neogen Co. que emprega o ensaio imunoenzimático utilizando anticorpos monoclonais (ELISA). Nos fígados, houve diferenças significativas (P

Detecção de aflatoxina B1 no organismo de frangos de corte através do emprego de ensaio imuno-enzimático utilizando anticorpos monoclonais(ELISA)

As aflatoxinas prejudicam os parâmetros de produção, causam imunodepressão humoral e celular e afetam o mecanismo de coagulação. No sul do Brasil, a aflatoxicose representou de 15 a 29% dos casos examinados em laboratório de 1985 a 1991, sendo uma das principais enfermidades diagnosticadas no período em questão.Frangos de corte com 42 dias de idade, fêmeas, com peso médio de 1.800 g foram inoculados diretamente no inglúvio com 360 mg de aflatoxina B 1 através de dose única. Aos 30 minutos, 1, 2, 5, 8, 12 e 24 horas após a inoculação, cinco animais tratados e quatro controles foram sacrificados e coletados 40g de fígado, de cada um, para serem processados individualmente. Usou-se o kit comercial Veratox da Neogen Co. que emprega o ensaio imunoenzimático utilizando anticorpos monoclonais (ELISA). Nos fígados, houve diferenças significativas (P

Detecção de aflatoxina B1 no organismo de frangos de corte através do emprego de ensaio imuno-enzimático utilizando anticorpos monoclonais(ELISA)

As aflatoxinas prejudicam os parâmetros de produção, causam imunodepressão humoral e celular e afetam o mecanismo de coagulação. No sul do Brasil, a aflatoxicose representou de 15 a 29% dos casos examinados em laboratório de 1985 a 1991, sendo uma das principais enfermidades diagnosticadas no período em questão.Frangos de corte com 42 dias de idade, fêmeas, com peso médio de 1.800 g foram inoculados diretamente no inglúvio com 360 mg de aflatoxina B 1 através de dose única. Aos 30 minutos, 1, 2, 5, 8, 12 e 24 horas após a inoculação, cinco animais tratados e quatro controles foram sacrificados e coletados 40g de fígado, de cada um, para serem processados individualmente. Usou-se o kit comercial Veratox da Neogen Co. que emprega o ensaio imunoenzimático utilizando anticorpos monoclonais (ELISA). Nos fígados, houve diferenças significativas (P