Influence of prolonged flaxseed ( Linum usitatissimum ) consumption over epididymis and testicle histoarchitecture of Wistar rats / Influência do consumo prolongado de semente de linhaça ( Linum usitatissimum ) sobre a histoarquitetura dos testículo e epidídimo de ratos Wistar

Flaxseed is considered a functional food with several health benefits. However, because of its high phytoestrogen content, flaxseed influences hormone metabolism and affects the gonadal biomorphology. In this study, computerized histomorphometry was used to evaluate seminiferous and epididymal tubules, considering the different regions of the epididymis (head, body and tail) of rats subjected to a prolonged diet of flaxseed. Young adult male Wistar rats (n=20) were divided into 2 groups during their lactation period: Control Group (CG), fed casein-based meals and Flaxseed Group (FG), fed a 25% flaxseed meal. After 250 days of continuous ingestion, the animals were euthanized and a blood sample was collected. The testicles and epididymis were removed and fixed in buffered formalin solution. The samples were subjected to routine histological paraffin techniques and stained with hematoxilin and eosin. Immunostaining was performed using an antivimentin antibody for Sertoli cell identification. For morphometry, images of the slides were scanned and analyzed using Image J to determine the epithelial height, tubular and luminal diameter and tubular and luminal area. In the hormonal evaluation, FG had a higher serum concentration of estrogen (P=0.001), but no change was observed in the concentration of testosterone. The morphometric assay of seminiferous tubules and epididymal regions revealed no significant differences between the analyzed groups. Similarly, Sertoli cell quantification showed no significant differences in the FG (P=0.98). These results revealed that the continuous and prolonged intake of 25% flaxseed meals from gestation to 250 days of age, even with a significant increase in serum levels of estradiol, does not exert adverse effects on the testicular and epididymal structure or on the cells participating in the spermatogenesis of rats.(AU)

A semente de linhaça é considerada um alimento funcional com vários efeitos benéficos à saúde. Entretanto, devido ao seu elevado teor de fitoestrógenos, esta semente pode influenciar no metabolismo hormonal e interferir na biomorfologia gonadal. Neste estudo, utilizamos a histomorfometria computadorizada para avaliar os túbulos seminíferos e epididimários, considerando as diferentes regiões do epidídimo (cabeça, corpo e cauda) de ratos submetidos a uma dieta prolongada de semente de linhaça. Foram utilizados ratos Wistar machos adultos jovens (n=20) divididos em 2 grupos, durante o período de lactação: Grupo Controle (GC) a base de caseína e Grupo Linhaça (GL) alimentados com 25% de semente de linhaça. Ao final de 250 dias de ingestão contínua, os animais foram sacrificados e amostra de sangue foi coletada. Os testículos e epidídimos foram retirados e fixados em formol tamponado. As amostras foram submetidas ao processamento histológico de rotina para parafina e coradas em hematoxilina e eosina. Foi feita a imunomarcação com anticorpo antivimentina para identificação das células de Sertoli. Para morfometria, as imagens das lâminas foram digitalizadas e analisadas pelo software ImageJ para obtenção dos dados de altura epitelial, diâmetro e área tubular e luminal. Na avaliação hormonal o GL teve maior concentração de estrógeno sérico (p=0,001), mas nenhuma mudança na concentração de testosterona foi observada. Nos parâmetros morfométricos dos túbulos seminíferos e das regiões epididimárias, não houve diferenças significativas entre os grupos analisados. Da mesma forma, a quantificação das células de Sertoli não apresentaram diferenças significativas no GL (p=0,98). Estes resultados mostraram que o consumo contínuo e prolongado de 25% de semente de linhaça desde período gestacional até 250 dias de idade, mesmo com o aumento significativo nos níveis séricos de estradiol, não exerceram efeitos adversos sobre a estrutura testicular e epididimária, assim como nas células participantes da espermatogênese em ratos.(AU)

Influence of prolonged flaxseed ( Linum usitatissimum ) consumption over epididymis and testicle histoarchitecture of Wistar rats / Influência do consumo prolongado de semente de linhaça ( Linum usitatissimum ) sobre a histoarquitetura dos testículo e epidídimo de ratos Wistar

Flaxseed is considered a functional food with several health benefits. However, because of its high phytoestrogen content, flaxseed influences hormone metabolism and affects the gonadal biomorphology. In this study, computerized histomorphometry was used to evaluate seminiferous and epididymal tubules, considering the different regions of the epididymis (head, body and tail) of rats subjected to a prolonged diet of flaxseed. Young adult male Wistar rats (n=20) were divided into 2 groups during their lactation period: Control Group (CG), fed casein-based meals and Flaxseed Group (FG), fed a 25% flaxseed meal. After 250 days of continuous ingestion, the animals were euthanized and a blood sample was collected. The testicles and epididymis were removed and fixed in buffered formalin solution. The samples were subjected to routine histological paraffin techniques and stained with hematoxilin and eosin. Immunostaining was performed using an antivimentin antibody for Sertoli cell identification. For morphometry, images of the slides were scanned and analyzed using Image J to determine the epithelial height, tubular and luminal diameter and tubular and luminal area. In the hormonal evaluation, FG had a higher serum concentration of estrogen (P=0.001), but no change was observed in the concentration of testosterone. The morphometric assay of seminiferous tubules and epididymal regions revealed no significant differences between the analyzed groups. Similarly, Sertoli cell quantification showed no significant differences in the FG (P=0.98). These results revealed that the continuous and prolonged intake of 25% flaxseed meals from gestation to 250 days of age, even with a significant increase in serum levels of estradiol, does not exert adverse effects on the testicular and epididymal structure or on the cells participating in the spermatogenesis of rats.(AU)

A semente de linhaça é considerada um alimento funcional com vários efeitos benéficos à saúde. Entretanto, devido ao seu elevado teor de fitoestrógenos, esta semente pode influenciar no metabolismo hormonal e interferir na biomorfologia gonadal. Neste estudo, utilizamos a histomorfometria computadorizada para avaliar os túbulos seminíferos e epididimários, considerando as diferentes regiões do epidídimo (cabeça, corpo e cauda) de ratos submetidos a uma dieta prolongada de semente de linhaça. Foram utilizados ratos Wistar machos adultos jovens (n=20) divididos em 2 grupos, durante o período de lactação: Grupo Controle (GC) a base de caseína e Grupo Linhaça (GL) alimentados com 25% de semente de linhaça. Ao final de 250 dias de ingestão contínua, os animais foram sacrificados e amostra de sangue foi coletada. Os testículos e epidídimos foram retirados e fixados em formol tamponado. As amostras foram submetidas ao processamento histológico de rotina para parafina e coradas em hematoxilina e eosina. Foi feita a imunomarcação com anticorpo antivimentina para identificação das células de Sertoli. Para morfometria, as imagens das lâminas foram digitalizadas e analisadas pelo software ImageJ para obtenção dos dados de altura epitelial, diâmetro e área tubular e luminal. Na avaliação hormonal o GL teve maior concentração de estrógeno sérico (p=0,001), mas nenhuma mudança na concentração de testosterona foi observada. Nos parâmetros morfométricos dos túbulos seminíferos e das regiões epididimárias, não houve diferenças significativas entre os grupos analisados. Da mesma forma, a quantificação das células de Sertoli não apresentaram diferenças significativas no GL (p=0,98). Estes resultados mostraram que o consumo contínuo e prolongado de 25% de semente de linhaça desde período gestacional até 250 dias de idade, mesmo com o aumento significativo nos níveis séricos de estradiol, não exerceram efeitos adversos sobre a estrutura testicular e epididimária, assim como nas células participantes da espermatogênese em ratos.(AU)

Influence of prolonged flaxseed ( Linum usitatissimum ) consumption over epididymis and testicle histoarchitecture of Wistar rats

ABSTRACT: Flaxseed is considered a functional food with several health benefits. However, because of its high phytoestrogen content, flaxseed influences hormone metabolism and affects the gonadal biomorphology. In this study, computerized histomorphometry was used to evaluate seminiferous and epididymal tubules, considering the different regions of the epididymis (head, body and tail) of rats subjected to a prolonged diet of flaxseed. Young adult male Wistar rats (n=20) were divided into 2 groups during their lactation period: Control Group (CG), fed casein-based meals and Flaxseed Group (FG), fed a 25% flaxseed meal. After 250 days of continuous ingestion, the animals were euthanized and a blood sample was collected. The testicles and epididymis were removed and fixed in buffered formalin solution. The samples were subjected to routine histological paraffin techniques and stained with hematoxilin and eosin. Immunostaining was performed using an antivimentin antibody for Sertoli cell identification. For morphometry, images of the slides were scanned and analyzed using Image J to determine the epithelial height, tubular and luminal diameter and tubular and luminal area. In the hormonal evaluation, FG had a higher serum concentration of estrogen (P=0.001), but no change was observed in the concentration of testosterone. The morphometric assay of seminiferous tubules and epididymal regions revealed no significant differences between the analyzed groups. Similarly, Sertoli cell quantification showed no significant differences in the FG (P=0.98). These results revealed that the continuous and prolonged intake of 25% flaxseed meals from gestation to 250 days of age, even with a significant increase in serum levels of estradiol, does not exert adverse effects on the testicular and epididymal structure or on the cells participating in the spermatogenesis of rats.

RESUMO: A semente de linhaça é considerada um alimento funcional com vários efeitos benéficos à saúde. Entretanto, devido ao seu elevado teor de fitoestrógenos, esta semente pode influenciar no metabolismo hormonal e interferir na biomorfologia gonadal. Neste estudo, utilizamos a histomorfometria computadorizada para avaliar os túbulos seminíferos e epididimários, considerando as diferentes regiões do epidídimo (cabeça, corpo e cauda) de ratos submetidos a uma dieta prolongada de semente de linhaça. Foram utilizados ratos Wistar machos adultos jovens (n=20) divididos em 2 grupos, durante o período de lactação: Grupo Controle (GC) a base de caseína e Grupo Linhaça (GL) alimentados com 25% de semente de linhaça. Ao final de 250 dias de ingestão contínua, os animais foram sacrificados e amostra de sangue foi coletada. Os testículos e epidídimos foram retirados e fixados em formol tamponado. As amostras foram submetidas ao processamento histológico de rotina para parafina e coradas em hematoxilina e eosina. Foi feita a imunomarcação com anticorpo antivimentina para identificação das células de Sertoli. Para morfometria, as imagens das lâminas foram digitalizadas e analisadas pelo software ImageJ para obtenção dos dados de altura epitelial, diâmetro e área tubular e luminal. Na avaliação hormonal o GL teve maior concentração de estrógeno sérico (p=0,001), mas nenhuma mudança na concentração de testosterona foi observada. Nos parâmetros morfométricos dos túbulos seminíferos e das regiões epididimárias, não houve diferenças significativas entre os grupos analisados. Da mesma forma, a quantificação das células de Sertoli não apresentaram diferenças significativas no GL (p=0,98). Estes resultados mostraram que o consumo contínuo e prolongado de 25% de semente de linhaça desde período gestacional até 250 dias de idade, mesmo com o aumento significativo nos níveis séricos de estradiol, não exerceram efeitos adversos sobre a estrutura testicular e epididimária, assim como nas células participantes da espermatogênese em ratos.

Histological and immunohistochemical study of the ovaries and oviducts of the juvenile female of Caiman latirostris (Crocodilia: Alligatoridae)

The purpose of this study was to examine the ovaries and the oviduct of juvenile females of the broad-snouted caiman, Caiman latirostris (Daudin, 1802), using light microscopy, histochemical and immunocytochemical techniques. The ovarian cortex was observed to contain groups of germinative cells and abundant previtellogenic follicles at different stages of development. In previtellogenic follicles, the oocyte was surrounded by a single cuboidal layer of granulosa cells, supported by the theca layer. The theca was formed by a concentric layer containing collage nous fibers, predominantly type I, and several smooth muscle fibers. The inner perivitelline layer appeared as a narrow basophilic region between the oocyte and the granulosa. The ovarian medullary region of loose connective tissue contained blood and lymphatic vessels, as well as numerous lacunae, being covered by a simple squamous epithelium, supported by a thin layer of connective tissue. The oviduct of C. latirostris showed five histologically distinct regions: infundibulum, magnum, isthmus, uterus and vagina. The infundibulum was composed of an irregularly folded mucosa covered by a simple columnar epithelium with the presence of ciliated cells, weakly reactive to PAS staining. In the magnum, the mucosa was highly folded, and pseudostratified columnar epithelium contains mucous cells, which reacted positively to PAS staining. The isthmus was lining by an epithelium of ciliated and non-ciliated secretory cells, but no gland was visualized in mucosa. In the uterus, the folded mucosa was composed of a simple epithelium of high cylindrical cells and the lamina propria, which was predominantly formed by strongly birefringent fibers, but yellow-green weakly birefringent fibers were also present. The epithelium of the vagina contained intensely ciliated and non-ciliated cells, both of which were positive to PAS staining and no gland was observed in this region. Although the ovary and the oviduct showed some morphological particularities, they are similar to other crocodilians.

Histological and immunohistochemical study of the ovaries and oviducts of the juvenile female of Caiman latirostris (Crocodilia: Alligatoridae)

The purpose of this study was to examine the ovaries and the oviduct of juvenile females of the broad-snouted caiman, Caiman latirostris (Daudin, 1802), using light microscopy, histochemical and immunocytochemical techniques. The ovarian cortex was observed to contain groups of germinative cells and abundant previtellogenic follicles at different stages of development. In previtellogenic follicles, the oocyte was surrounded by a single cuboidal layer of granulosa cells, supported by the theca layer. The theca was formed by a concentric layer containing collage nous fibers, predominantly type I, and several smooth muscle fibers. The inner perivitelline layer appeared as a narrow basophilic region between the oocyte and the granulosa. The ovarian medullary region of loose connective tissue contained blood and lymphatic vessels, as well as numerous lacunae, being covered by a simple squamous epithelium, supported by a thin layer of connective tissue. The oviduct of C. latirostris showed five histologically distinct regions: infundibulum, magnum, isthmus, uterus and vagina. The infundibulum was composed of an irregularly folded mucosa covered by a simple columnar epithelium with the presence of ciliated cells, weakly reactive to PAS staining. In the magnum, the mucosa was highly folded, and pseudostratified columnar epithelium contains mucous cells, which reacted positively to PAS staining. The isthmus was lining by an epithelium of ciliated and non-ciliated secretory cells, but no gland was visualized in mucosa. In the uterus, the folded mucosa was composed of a simple epithelium of high cylindrical cells and the lamina propria, which was predominantly formed by strongly birefringent fibers, but yellow-green weakly birefringent fibers were also present. The epithelium of the vagina contained intensely ciliated and non-ciliated cells, both of which were positive to PAS staining and no gland was observed in this region. Although the ovary and the oviduct showed some morphological particularities, they are similar to other crocodilians.(AU)

Stereological study of the elastic fiber and smooth muscle cell system in the bovine and buffalo penis / Estereologia do sistema elástico e das células musculares lisas no pênis fibroelástico zebuino e bubalino

Samples of ten penises of Mediterranean buffaloes and ten penises of Red Sindhi cattle were used. The thickness of the tunica albuginea (TA), distribution of smooth muscle cells (SMC) and volume density (Vv) of elastic system fibers in TA, corpus cavernosum (CC) and corpus spongiosum (CS) were evaluated. The Vv of elastic system fibers in buffalo and bovine penis was respectively 4.07% ±0.88% and 3.36% ±1.21% in TA; 17.32% ±2.21% and 13.14% ±1.27% (CC), 26.58% ±4.31% and 31.36% ±3.67% (CS). The CC of buffalo presented higher Vv of elastic fibers than bovine, while in the CS the Vv of elastic fibers in buffaloes was smaller than in cattle. The TA thickness showed a significant difference among the species studied. The arrangement of SMC in the bovine penises and in the water buffalo suggests that this pattern is common to animals that have fibroelastic penises.(AU)

O pênis dos zebuinos e bubalinos são classificados como do tipo fibroelástico, sendo grande parte de sua rigidez conferida pelas fibras colágenas e elásticas presentes na matriz extracelular. Embora alguns estudos tenham abordado estes componentes em bovinos europeus, os dados na literatura sobre zebuínos e bubalinos são escassos. Nós avaliamos a espessura da túnica albugínea, a distribuição das células musculares lisas e a densidade volumétrica (Vv) das fibras do sistema elásticona túnica albugínea, no corpo cavernoso e esponjoso do pênis de animais jovens adultos inteiros.Foram utilizados 10 fragmentos de pênis de búfalos da raça Mediterrâneo e 10 fragmentos de pênis de bovinos da raça Red Sindi. Os fragmentos de pênis foram processados de acordo com a técnica histológica de rotina para inclusão em parafina e corados pela Fucsina Resorcina de Weigert, Picro Sirius Red, Tricrômio de Gomori e anticorpo anti α actina. As fibras elásticas foram determinadas em 25 campos aleatórios de cada fragmento, utilizando o sistema teste modelo M42. A Vv das fibras do sistema elástico no pênis do búfalo e bovino foram(média e desvio padrão respectivamente) de 4,07% ±0,88 e 3,36% ±1,21 na túnica albugínea; 17,32% ±2,21 e 13,14% ±1,27 no corpo cavernoso; 26,58% ±4,31 e 31,36% ±3,67 no corpo esponjoso, respectivamente. Houve diferença na Vv das fibras elásticas entre as duas espécies, no corpo cavernoso e no corpo esponjoso. Na espessura da túnica albugínea houve diferença significativa entre o búfalo Mediterrâneo (1,4mm ±0,11) e o bovino Red Sindi (1,76mm ±0,23). Nas duas espécies, as fibras musculares lisas foram encontradas apenas associadas ao endotélio de revestimento dos seios cavernosos. Com base nestes resultados, podemos concluir que existem diferenças na proporção entre os componentes da matriz extracelular nas espécies estudadas, fato que deve ser considerado nos procedimentos clínicos e cirúrgicos veterinários e continua a ser investigado.(AU)

Celiac artery in New Zealand rabbit: anatomical study of its origin and arrangement for experimental research and surgical practice

Rabbits have been used as an experimental model in many diseases and for the study of toxicology, pharmacology and surgery in many universities. However, some aspects of their macro anatomy need a more detailed description, especially the abdominal and pelvic arterial vascular system, which has a huge variability in distribution and trajectory. Thirty cadaveric adult New Zealand rabbits, 13 male and 17 female, with an average weight and rostrum-sacral length of 2.5 kg and 40cm, respectively, were used. The thoracic aorta was cannulated and the vascular system was filled with stained latex S-65. The celiac artery and its proximal branches were dissected and lengthened in order to evidence origin and proximal ramifications. The celiac artery emerged between the 12th and 13th thoracic vertebra in 11 (36.7 percent) rabbits; at the level of the 13th thoracic vertebra in 6 (20 percent) rabbits; between the 13th thoracic vertebra and the 1st lumbar vertebra in 12 (40 percent) rabbits; and at the level of the 1st lumbar vertebra in only one (3.3 percent) rabbit. The mean length of the celiac artery was 0.5cm. The celiac artery first branch was the lienal artery, the second branch was the left gastric artery and the hepatic artery arose from the left gastric artery in all the dissected rabbits. No relation was observed between the celiac artery length and the rostrum-sacral length in rabbits. The number of left gastric and lienal artery branches and the distribution of celiac artery origin are not gender dependent.(AU)

Os coelhos têm sido usados como modelo experimental em diferentes patologias e para estudos de toxicologia, farmacologia e cirurgia em várias universidades. Entretanto apesar de sua grande utilização, muitos aspectos de sua macroanatomia, em especial os que se referem ao sistema vascular arterial que irrigam as viscerais abdomino-pélvicas ainda carecem de uma descrição mais detalhada, pois os vasos arteriais apresentam grande variabilidade na sua distribuição e trajeto. Foram utilizados 30 coelhos, 13 machos e 17 fêmeas, pesando em media 2,5 kg e apresentando comprimento rostro-sacral em torno de 40cm. A artéria aorta torácica foi canulada e através da mesma foi feita à fixação com solução de formaldeído a 10 por cento e repleções vasculares com solução de Petrolátex S65 corado. A artéria celíaca e suas ramificações proximais foram dissecadas ao longo do seu percurso, registrando com auxílio de um paquímetro seu comprimento e sua esqueletopia. A artéria celíaca teve sua emergência de forma única diretamente da artéria aorta abdominal em todos os animais dissecados. Emitiu inicialmente a artéria lienal e a seguir a artéria gástrica esquerda que se continuou como hepática em todos os 30 animais. A artéria celíaca teve sua origem entre a 12ª e 13ª vértebra torácica em 11 animais (36,7 por cento), na 13ª vértebra torácica em 6 (20 por cento), entre a 13ª vértebra torácica e a 1ª vértebra lombar em 12 (40 por cento) e na 1ª vértebra lombar em apenas 1 animal (3,3 por cento). O comprimento médio da artéria celíaca foi de 0,5cm. Não foi observada relação entre o comprimento da artéria celíaca e o comprimento rostro-sacral dos coelhos. O número de artérias gástricas esquerdas, ramificações principais da artéria lienal, bem como a origem da artéria celíaca independeram do sexo do animal.(AU)