Resumo
O objetivo de realizar este estudo, foi avaliar o desempenho, rendimentos de cortes e expressão de genes de enzimas que catalisam etapas chaves das vias de metilação, transulfuração e síntese de novo de metionina, além dos genes codificadores para enzimas atuantes na via mTORC1 em células do Pectoralis major de frangos de corte, em respostas à duas fontes e três níveis de metionina+cistina digestível (Met+CysD) na dieta. O experimento envolveu 450 frangos de corte distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 2x3, sendo duas fontes de metionina, DL-Metionina (DL-Met) e Metionina hidroxi-análoga (DL-MHA-FA) x três níveis de Met+CysD, resultando em seis tratamentos com cinco repetições de 15 aves. Os níveis de metionina digestível (deficiência, exigência e excesso) foram, respectivamente, 0,63, 0,88 e 1,13% de 8 a 21 dias, 0,58, 0,83 e 1,08% de 22 a 33 dias, 0,52, 0,77 e 1,02% de 34 a 49 dias de idade. Aos 42 e 49 dias de idade, cinco aves por tratamento foram abatidas. O primeiro grupo de cinco aves foi destinado para avaliação dos cortes da carcaça, o segundo grupo foi utilizado para coletas de amostras do Pectoralis major para as análises de qPCR. O excesso de Met+CysD melhorou o ganho de peso e conversão alimentar comparado a deficiência. Os pesos e rendimentos de peito sem pele+osso foram maiores com excesso de Met+CysD na dieta em comparação com os níveis deficiente e exigência. A suplementação da dieta com DL-Met melhorou o ganho de peso, conversão alimentar e o peso e rendimento de peito sem pele+osso (P<0,05) comparado aos frangos alimentados com a fonte DL-MHA-FA. Na expressão dos genes da via mTORC1, o nível de exigência e de deficiência de ambas as fontes estimulou maior expressão (P<0,05) do gene EIF4B, por outro lado, o excesso de Met+CysD quando a fonte suplementar foi a DL-MHAFA e a deficiência quando a fonte foi DL-Met, induziram maior atividade (P0,05) da RPS6KB1. As maiores expressões da RPS6 ocorreram em nível de exigência de Met+CysD quando a fonte foi a DL-Met e no excesso quando a fonte foi a DL-MHA-FA, estimulando as atividades (P0,05) da Proteína EIF4EBP1 e EIF4E1B. A oferta da dieta suplementada com DL-MHA-FA para atender o nível de exigência dos frangos em Met+CysD proporcionou maior expressão de mRNA da BHMT da via de remetilação da homocisteína dependente de betaína para síntese de novo de metionina, não ocorrendo com a DL-Met. Independente da fonte, a deficiência de Met+CysD aumentou a expressão do MTRR. Também foi observada maior expressão de mRNA da CBS. Níveis acima da recomendação de Met+CysD nas dietas de 8 a 21, 22 a 33 e 34 a 42 dias melhoram o desempenho, peso e rendimento de peito sem osso e pele. A DL-MHA-FA é menos efetiva que a DL-Met em promover o desempenho, peso e rendimento de peito sem osso e pele em frangos. As expressões dos genes da mTORC1 e das vias de metabolismo da metionina são reguladas de forma diferente pelos níveis e fonte de metionina na dieta de frangos.
The objective of this study was to evaluate the performance, cutting yields and expression of enzyme genes that catalyze key stages of the methylation, transulfurization and de novo synthesis of methionine pathways, in addition to the genes encoding enzymes acting on the mTORC1 pathway in cells of Pectoralis major of broilers, in responses to two sources and three levels of methionine + digestible cystine (Met + CysD) in the diet. The experiment involved 450 broilers distributed in a completely randomized design, in a 2x3 factorial scheme, with two sources of methionine, DL-Methionine (DL-Met) and hydroxy-analogous Methionine (DL-MHA-FA) x three levels of Met + CysD, resulting in six treatments with five repetitions of 15 birds. The levels of digestible methionine (deficiency, demand and excess) were, respectively, 0.63, 0.88 and 1.13% from 8 to 21 days, 0.58, 0.83 and 1.08% from 22 to 33 days, 0.52, 0.77 and 1.02% from 34 to 49 days of age. At 42 and 49 days of age, five birds per treatment were slaughtered. The first group of five birds was used to evaluate carcass cuts, the second group was used to collect samples of the Pectoralis major for qPCR analyzes. Excess Met + CysD improved weight gain and feed conversion compared to deficiency. Weights and yields of skinless breast + bone were higher with excess Met + CysD in the diet compared to deficient and demanding levels. Supplementing the diet with DL-Met improved weight gain, feed conversion and the weight and yield of skinless breast + bone (P <0.05) compared to chickens fed with the DL-MHA-FA source. In the expression of genes in the mTORC1 pathway, the level of demand and deficiency of both sources stimulated greater expression (P <0.05) of the EIF4B gene, on the other hand, the excess of Met + CysD when the supplementary source was DL -MHA-FA and the deficiency when the source was DLMet, induced greater activity (P0.05) of RPS6KB1. The greatest expressions of RPS6 occurred at the level of requirement of Met + CysD when the source was DL-Met and in excess when the source was DL-MHA-FA, stimulating the activities (P0.05) of Protein EIF4EBP1 and EIF4E1B. The offer of the diet supplemented with DL-MHA-FA to meet the requirement level of the chickens in Met + CysD provided greater expression of BHMT mRNA from the betaine-dependent homocysteine pathway for synthesis of methionine de novo, not occurring with the DL-Met. Regardless of the source, the Met + CysD deficiency increased MTRR expression. Higher CBS mRNA expression was also observed. Levels above the recommendation of Met + CysD in diets 8 to 21, 22 to 33 and 34 to 42 days improve the performance, weight and performance of boneless breasts and skin. DL-MHA-FA is less effective than DL-Met in promoting the performance, weight and performance of boneless and skinned broilers in chickens. The expressions of mTORC1 genes and methionine metabolism pathways are regulated differently by the levels and source of methionine in the chicken diet.
Resumo
O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da suplementação de L-Glutamina + ácido glutâmico e/ou L-arginina sobre o desempenho produtivo, incidência de diarreia, parâmetros séricos e a morfometria intestinal de leitões desmamados aos 28 dias de idade. Para tanto, foi realizado um experimento utilizando 64 leitões, sendo 32 machos castrados e 32 fêmeas da linhagem comercial Agroceres®. Os animais foram distribuídos em quatro tratamentos, sendo estes compostos por: DC- Dieta controle, composta principalmente por milho, farelo de soja e produto lácteo, sem suplementação de L- glutamina + ácido glutâmico e L-arginina; DAM Dieta composta principalmente por milho, farelo de soja e produto lácteo suplementada com 1% de L-glutamina + ácido glutâmico; DA - Dieta composta principalmente por milho, farelo de soja e produto lácteo suplementada com 1% de L-arginina; DGA Dieta composta principalmente por milho, farelo de soja e produto lácteo suplementada com 0,5% de L-glutamina + ácido glutâmico e 0,5% de L-arginina, com oito repetições, sendo dois animais por parcela experimental, um macho e uma fêmea. Os animais foram distribuídos em blocos ao acaso para controle do peso inicial (6,120 ± 0,622 kg). Foram analisados os seguintes períodos: I-28 aos 35 dias, II- 28 aos 42 dias, III- 28 aos 49 dias e IV- 28 a 63 dias de idade. Os resultados demonstraram que a adição de 1% L-arginina na dieta de leitões, melhorou o ganho de peso dos animais e apresentou a melhor conversão alimentar. O melhor ganho de peso médio diário foi observado naqueles animais que receberam a dieta controle e a adição de 1% de L-glutamina + ácido glutâmico, como também os animais que receberam a adição de 1% L-arginina apresentaram a melhor conversão alimentar. As dietas em que foram adicionados os dois aminoácidos (DAM, DA e DGA) os animais apresentaram menor incidência de diarreia (11,31; 15,48 e 16,07% respectivamente. Na morfometria intestinal, houve diferença significativa para: altura de vilo (AV), relação vilo/cripta (AV/PC), espessura de mucosa (EM), espessura de vilo (EV), área absortiva (AA), densidade de vilos por área (DV) e contagem de células caliciformes do duodeno, onde a maior altura de vilo, como também a maior relação vilo/cripta foi observada quando adicionado 1% L-glutamina + ácido glutâmico e 1% de L-arginina nas dietas. A utilização dos dois aminoácidos de forma conjunta ou em separados diminui a incidência de diarreias em leitões recém desmamados, não influencia o leucograma dos animais, porém melhora os parâmetros morfométricos do trato gastrointestinal.
The objective of this study was to evaluate the effects of supplementation of LGlutamine + glutamic acid and / or L-arginine on performance, incidence of diarrhea, serum parameters and intestinal morphology of piglets weaned at 28 days of age. Therefore, an experiment was conducted using 64 pigs, 32 barrows and 32 females of the commercial line Agroceres®. The animals were distributed in four treatments, which are composed of: DC- diet control, mainly composed of corn, soybean meal and milk product without supplemental L-glutamine + glutamic acid and L-arginine; DAM - Diet mainly composed of corn, soybean and milk product supplemented with 1% Lglutamine + glutamic acid; DA - Diet mainly composed of corn, soybean and milk product supplemented with 1% L-arginine; DGA - diet composed mainly of corn, soybean meal and milk product supplemented with 0.5% L-glutamine + glutamic acid and 0.5% L-arginine, with eight replications and two animals per experimental plot, a male and a female. The animals were distributed in blocks to control the initial weight (6.120 ± 0.622 kg). the following periods were analyzed: I-28 to 35 days, II- 28 to 42 days 28 to 49 days III and IV-28-63 days old. The results showed that addition of 1% Larginine in the diet of pigs improved the weight gain of the animals and presented better feed conversion. The best average daily gain weight was observed in those animals that received the control diet and the addition of 1% L-glutamine + glutamic acid as well as animals that received the addition of 1% L-arginine showed the best feed conversion. Diets that were added two amino acids (DAM, DA and DGA) animals had a lower incidence of diarrhea (11.31, 15.48 and 16.07% respectively In intestinal morphometry, a significant difference:. Height of villus (AV), villus / crypt ratio (AV / PC) thick mucosal (iN), thickness of villi (EV) absorptive area (AA), villous density per area (DV) and goblet cells of the duodenum count, where greater villus height, as well as the higher ratio villus / crypt were observed when added 1% L-glutamine + glutamic acid and 1% L-arginine in the diets. the use of two amino acids in a joint or separate decreases incidence of diarrhea in weanling pigs, does not influence the white blood cell count of animals, but improves the morphometric parameters of the gastrointestinal tract.