Resumo
O carcinoma de células escamosas cutâneo (CCEc) é um dos tumores mais comuns em gatos devido à exposição crônica à luz ultravioleta. Tratamentos locais como a eletroquimioterapia (ECT) promovem o controle da doença ou mesmo a remissão completa. Nossa hipótese é que os gatos poderiam se beneficiar de tratamentos com bleomicina em dosagens reduzidas. Um estudo prospectivo não randomizado simples-cego avaliou os parâmetros clínicos, local de lesão, estadiamento, intervalo livre de doença (DFI) e tempo de sobrevida comparando a dose padrão de bleomicina (15.000 UI / m²) (n = 22) com uma dose reduzida (10.000 UI / m²) (n = 34) em gatos com CCEc que foram submetidos à ECT como única modalidade de tratamento. Nenhuma diferença estatisticamente significativa em DFI ou sobrevida global foi observada entre os 2 grupos. Um maior DFI foi encontrado em gatos com tumor de tamanho pequeno em comparação com gatos com tumor de tamanho grande (P = 0,045) (mediana de 335 vs. 60 dias, respectivamente). Além disso, foi observado um tempo de sobrevida global reduzido para gatos com estágio clínico avançado no grupo padrão SG (T3 e T4) (P = 0,004) quando comparado ao dos gatos com estágio clínico inicial (T1 e T2). Em conclusão, a ECT usando ambas as doses de bleomicina pode atingir a mesma taxa de resposta em termos de resposta geral, DFI e sobrevida global.
Cutaneous squamous cell carcinoma (cSCC) is one of the most common tumors in cats due to chronic exposure to ultraviolet light. Local treatments such as electrochemotherapy (ECT) promote disease control or even complete remission. We hypothesize that cats could benefit from treatments using bleomycin at reduced dosages. A prospective nonrandomized single-blind study evaluated the clinical parameters, site lesion, staging, disease-free interval (DFI) and survival time by comparing the standard dose of bleomycin (15,000 UI/m²) (n=22) with a reduced dose (10,000 UI/m²) (n=34) in cats with cSCC that underwent ECT as the sole treatment modality. No statistically significant difference in DFI or overall survival was observed between the 2 groups. A higher DFI was found in cats with a small tumor size compared with that for cats with a large tumor size (P = 0.045) (median 335 vs. 60 days, respectively). Furthermore, a reduced overall survival time for cats with a higher stage in the standard group SG (T3 and T4) (P = 0.004) was observed when compared to that for cats with a lower stage (T1 and T2). In conclusion, ECT using both doses of bleomycin may achieve the same response rate in terms of the overall response, DFI, and overall survival.
Resumo
O objetivo do estudo foi avaliar o efeito da eletroquimioterapia no tecido tumoral, avaliando pela técnica de imunoistoquímica, o índice proliferativo pela marcação de Ki67 (MIB-1), o índice apoptótico pela marcação de Bcl-2 e Bax, a remissão tumoral através da mensuração do volume tumoral antes e após o tratamento e a associação entre o tamanho tumoral antes do tratamento e a resposta promovida pela EQT em carcinomas de células escamosas cutâneos de cães. Foram avaliados 11 cães (totalizando 18 lesões), tratados com bleomicina (15 UI/m²) e doxorrubicina (30 mg/m²), ambas por via intravenosa juntamente com a aplicação de pulsos elétricos. O índice proliferativo apresentou diminuição significativa após o tratamento (D21), quando comparado ao momento inicial (D0) (p=0,031). Antes do tratamento, observou-se que nenhuma lesão apresentou Ki67 de escore 1 (<10%), sendo a maioria das lesões representadas por escore 2 (n=7), 3 (n=6) e, esporadicamente 4 (n=2). Todas as amostras de CCEc apresentaram marcação predominantemente citoplasmática para Bcl-2 e exclusivamente citoplasmática para Bax. Porém, não houve diferença significativa entre os momentos para ambos os marcadores (Bcl-2, p=0,64 e Bax, p=0,7). Das 18 lesões, a média do volume após o tratamento apresentou diminuição significativa (p=0,04) em relação ao volume tumoral. Quanto à resposta tumoral à EQT, baseada pela mensuração do volume tumoral, observou-se que 11 (61,1%) lesões apresentaram remissão parcial, quatro (22,2%) doença progressiva e três (16,6%) doença estável. Porém, a associação entre o tamanho tumoral antes do tratamento e a resposta promovida pela EQT, não foi significativa (p=0,332). Apesar dos quimioterápicos utilizados terem a capacidade causar danos celulares que induzam a morte celular por apoptose, as marcações de Bcl-2 e Bax nas amostras avaliadas não foram alteradas. É possível que outras proteínas envolvidas nas vias de apoptose exerçam maior influência no processo de morte celular induzida pela EQT. Concluindo-se, apesar da redução no volume tumoral e na proliferação celular, nossos resultados mostraram que as proteínas Bcl-2 e Bax não apresentaram alteração em suas expressões em resposta à EQT, no momento avaliado.
This study aimed to evaluate the effect of electrochemotherapy in tumor tissue, evaluating the proliferative index by Ki67 (MIB-1), the apoptotic index by Bcl-2 and Bax staining, tumor remission through tumor volume measurement before and after treatment and the association between tumor size before treatment and the response promoted by ECT in dogs with cutaneous squamous cell carcinoma (cSCC). Eleven dogs (18 lesions) were treated with bleomycin (15 IU / m²) plus doxorubicin (30 mg / m²), both intravenously with the application of electrical pulses. The proliferative index showed a significant decrease after treatment (D21) when compared to the initial moment (D0) (p = 0.031). Before treatment, we observed that no lesion had Ki67 of score 1 (<10%), with the most lesions represented by score 2 (n = 7), 3 (n = 6) and sporadically 4 (n = 2). All cSCC samples showed predominantly cytoplasmic staining for Bcl-2 and exclusively cytoplasmic labeling for Bax. However, there was no significant difference between the moments for both markers (Bcl-2, p = 0.64 and Bax, p = 0.7). Of the 18 lesions, the mean volume before treatment was higher than the mean volume after treatment, with a significant decrease (p = 0.04). Regarding the tumor response to ECT, based on tumor volume measurement, 11 (61.1%) lesions presented partial remission, four (22.2%) progressive disease and three (16.6%) stable diseases. However, the association between tumor size before treatment and the response promoted by the ECT was not significant (p = 0.332). Although the chemotherapeutic agents have the capacity to cause cell damage that induce cell death by apoptosis, the Bcl-2 and Bax markers in the evaluated samples were not altered. It is possible that other proteins involved in the apoptosis pathways exert a greater influence on the process of cell death induced by the ECT. In conclusion, despite the reduction in tumor volume and cell proliferation, our results showed that the Bcl-2 and Bax proteins showed no alteration in their expressions in response to the ECT, at the time evaluated.