Resumo
Esta tese é composta por três capítulos. No Capítulo I, foi realizada uma infecção 3 experimental em dois caprinos (animais 1 e 2) e dois ovinos (animais 3 e 4) com uma cepa 4 de Actinobacillus seminis isolada de caprino no Brasil. Foram utilizadas amostras de sêmen, 5 punção e fragmentos de epidídimo, ducto deferente, testículos e glândulas seminíferas, e 6 foram realizados exame histopatológico, cultivo microbiológico e diagnóstico molecular. Na 7 avaliação clínica observou-se aumento unilateral de consistência firme após 30 dias no 8 epidídimo e testículo do animal 4 que continuou até o dia da eutanásia, bem como o animal 9 1 apresentou discreto aumento unilateral dos testículos. As lesões macroscópicas e 10 microscópicas observadas nos animais 3 e 4 foram compatíveis com aquelas causadas pela 11 infecção por A. seminis. A. seminis foi isolado de material de punção, fragmento de testículo 12 e sêmen de um ovino (animal 4). No Capítulo II, objetivou-se avaliar, experimentalmente 13 em 15 caprinos, a patogenicidade do isolado denominado SAAS01. Os animais foram 14 analisados clinicamente no período de 12 semanas, e na ocasião foram feitas coletas de 15 sêmen por eletro-ejaculação e a mensuração do diâmetro escrotal a cada 20 dias. Esses 16 animais foram desafiados com 2 mL de suspensão contendo 1,2 x 10 UFC/mL de A. seminis 17 (isolado SAAS01) pelas vias: intraprepucial, cauda do epidídimo e via conjuntival. Na 18 avaliação clínica pode-se observar aumento unilateral de consistência firme após 30 dias no 19 epidídimo e testículo dos animais 18, 51 e 57 que continuou até o dia da eutanásia. Os 20 animais 51 e 57 apresentaram achados histopatológicos com alterações macroscopicamente 21 e microscopicamente significativas. Foi possível o isolamento de colônias pequenas (1 a 2 22 mm), lisas, brilhantes e sem pigmento a partir de material de sêmen dos animais 18, 51 e 57 23 colhido na 3ª e 4ª coleta. Amplificou-se DNA de A. seminis a partir de sêmen dos animais 24 51, 57, 22, 00, 18 e 12, e de fragmentos de testículo dos animais 12 e 57. No Capítulo III, 25 objetivou-se selecionar amostras de ovinos sorologicamente positivos no teste de IDGA, de 26 ambos os sexos, e de vários estados do Nordeste (PI, CE, SE, PB, RN), sendo 130 do banco 27 de soros da Embrapa Caprinos e Ovinos provenientes dos animais testados (n= 2465 ovinos) 28 e 41 do banco de soros do Laboratório de Doenças Transmissíveis do CSTR/UFCG (n= 1134 29 ovinos), totalizando 171 ovinos positivos, e se comparou com os testes de Fixação do 30 Complemento (FC) e ELISA de competição. No teste de FC não se observou sorologia 31 positiva, enquanto no ELISA quatro animais (2,33%) apresentaram-se soropositivos e 20 32 animais (11,69%) suspeitos. 33
This thesis is composed by three Chapters. In Chapters I, the study was conducted 3 experimental infection in two goats (animals 1 and 2) and two sheep (animals 3 and 4) with 4 an Actinobacillus seminis strain isolated from goat in Brazil. Samples of semen, puncture 5 and fragments of epididymis, deferent duct, testicles and seminal vesicles were used, and 6 histopathological, microbiological culture and molecular diagnoses were performed. At 7 clinical evaluation it were found unilateral swelling of firm consistency after 30 days in 8 epididymis and testicle from animal 4 that continued until the day of euthanasia, as well as 9 animal 1 shown discrete unilateral swelling of testicles. Gross and microscopic lesions in 10 animals 3 and 4 were compatibles with that caused by A. seminis infection. A. seminis was 11 isolated from material of puncture, testicle fragment and semen of one sheep (animal 4). In 12 Chapter II, the objective of experimentally evaluate the pathogenicity of an isolate named 13 SAAS01 in 15 goats. The animals were clinically analyzed over a 12-week period, during 14 which time semen collections were performed by electroejaculation, and the scrotal diameter 15 was measured every 20 days. These animals were challenged with 2 mL of a suspension 16 containing 1.2 x 10 CFU/mL of A. seminis (SAAS01 isolate)16 by the following routes: 17 intrapreputial, cauda epididymis, and conjunctival. In the clinical evaluation, a unilateral 18 increase in firm consistency can be observed in the epididymides and testes of animals 18, 19 51, and 57 after 30 days; this firmness continued until the day of euthanasia. Animals 51 and 20 57 presented histopathological findings with macroscopically and microscopically 21 significant changes. The isolation of small (1 to 2 mm), smooth, shiny, and pigment-free 22 colonies was possible from the semen material collected from animals 18, 51, and 57 in the 23 third and fourth collections. DNA of A. seminis was amplified from the semen of animals 24 51, 57, 22, 00, 18, and 12, and from testicular fragments from animals 12 and 57. In Chapter 25 III, the objective of this work was to select samples from seropositive sheep in the AGIDA 26 test, both sexes, and from several states of the Northeast (PI, CE, SE, PB, RN), of which 130 27 were from Embrapa Goat and Sheep serum bank (N = 2465 sheep) and 41 from the sera bank 28 of the Laboratory of Communicable Diseases of the CSTR / UFCG (n = 1134 sheep), totaling 29 171 positive sheep, and compared with the Complement Fixation test (FC) and competition 30 ELISA. In the FC test, no positive serology was observed, while in the ELISA-i four animals 31 (2.33%) were seropositive and 20 animals (11.69%) suspected. 32 Key words: