Reproductive periods of Lucina pectinata (BIVALVE; LUCINIDAE) in the Paranaguá Estuarine Complex, Paraná - Brazil / Período reprodutivo de Lucina pectinata (BIVLAVE; LUCINIDAE) no Complexo Estuarino de Paranaguá, PR - Brasil

Abstract The objectives of the present study is to describe the size for exploitation and gonadal maturation of L. pectinata in Peças Island in Paraná coast. Twenty two individuals were sampled every month, from an intertidal flat of the Peças River, Municipality of Guaraqueçaba, during two periods summer/autumn and winter of the 2009. Environmental parameter data was obtained at the same time of the biological sampling: temperature, salinity and seawater transparency at the Peças River mouth. The animals height, length, width, gross weight, wet weight of meat and dry weight of meat were measured at the lab. The gonad development stages (GDS), condition index (CI) and yield index (Y) were calculated. Sex identification was conducted by direct observation of the gonads and gametes under an optic microscope. Individuals were classified as males (M), females (F) or undetermined (U). The medium height observed was of 49.62 ± 6.84 mm. Period of more expressive gonad repletion were observed in summer when water temperature was higher. Results of GDS in both periods showed a predominance of partially filled gonad stages. This may be related with the fact that L. pectinata has intense gametogenesis activity, that is, the organisms do not have a resting interval, but go back to gonad restructuring rapidly after releasing the gametes. The continuity of the reproductive cycle of the specimens found in both studied periods could demonstrate a possible continuous reproduction of the species and a size for exploitation above 40.00 mm of height.(AU)

Resumo O presente estudo tem como objetivo descrever o tamanho de exploração e a maturação gonadal de L. pectinata na Ilha das Peças no litoral do Paraná. Vinte e dois indivíduos foram amostrados mensalmente na região entre-marés no Rio das Peças, Município de Guaraqueçaba, durante 2 períodos verão/outono e inverno de 2009. Paralelamente às amostragens, foram obtidos dados dos parâmetros ambientais: temperatura, salinidade e transparência da água do mar na foz do Rio das Peças. A altura, comprimento, largura, peso bruto, peso úmido da carne e peso seco da carne dos animais foram medidos no laboratório. Foram calculados os estágios de desenvolvimento gonadal (EDG), índices de condição (IC) e de rendimento (R). A Identificação do sexo foi realizada por observação direta das gônadas e gametas sob microscópio óptico. Os indivíduos foram classificados como: machos (M), fêmeas (F) ou indeterminados (I). A altura média observada foi de 49,62 ± 6,84 mm. O período de maior repleção gonadal foi observado no verão, quando a temperatura da água foi mais elevada. Resultados dos EDG em ambos os períodos mostrou um predomínio de gônadas parcialmente cheias. Isso pode estar relacionado com o fato de que L. pectinata tem atividade gametogênese intensa, ou seja, os organismos não têm um intervalo de repouso, mas voltam a reestruturação das gônadas rapidamente após liberação dos gametas. A continuidade do ciclo reprodutivo dos espécimes encontrados em ambos os períodos estudados, pode demonstrar possível reprodução contínua da espécie e tamanho de exploração superior a 40,00 mm de altura.(AU)

Reproductive periods of Lucina pectinata (BIVALVE; LUCINIDAE) in the Paranaguá Estuarine Complex, Paraná - Brazil

Abstract The objectives of the present study is to describe the size for exploitation and gonadal maturation of L. pectinata in Peças Island in Paraná coast. Twenty two individuals were sampled every month, from an intertidal flat of the Peças River, Municipality of Guaraqueçaba, during two periods summer/autumn and winter of the 2009. Environmental parameter data was obtained at the same time of the biological sampling: temperature, salinity and seawater transparency at the Peças River mouth. The animals height, length, width, gross weight, wet weight of meat and dry weight of meat were measured at the lab. The gonad development stages (GDS), condition index (CI) and yield index (Y) were calculated. Sex identification was conducted by direct observation of the gonads and gametes under an optic microscope. Individuals were classified as males (M), females (F) or undetermined (U). The medium height observed was of 49.62 ± 6.84 mm. Period of more expressive gonad repletion were observed in summer when water temperature was higher. Results of GDS in both periods showed a predominance of partially filled gonad stages. This may be related with the fact that L. pectinata has intense gametogenesis activity, that is, the organisms do not have a resting interval, but go back to gonad restructuring rapidly after releasing the gametes. The continuity of the reproductive cycle of the specimens found in both studied periods could demonstrate a possible continuous reproduction of the species and a size for exploitation above 40.00 mm of height.

Resumo O presente estudo tem como objetivo descrever o tamanho de exploração e a maturação gonadal de L. pectinata na Ilha das Peças no litoral do Paraná. Vinte e dois indivíduos foram amostrados mensalmente na região entre-marés no Rio das Peças, Município de Guaraqueçaba, durante 2 períodos verão/outono e inverno de 2009. Paralelamente às amostragens, foram obtidos dados dos parâmetros ambientais: temperatura, salinidade e transparência da água do mar na foz do Rio das Peças. A altura, comprimento, largura, peso bruto, peso úmido da carne e peso seco da carne dos animais foram medidos no laboratório. Foram calculados os estágios de desenvolvimento gonadal (EDG), índices de condição (IC) e de rendimento (R). A Identificação do sexo foi realizada por observação direta das gônadas e gametas sob microscópio óptico. Os indivíduos foram classificados como: machos (M), fêmeas (F) ou indeterminados (I). A altura média observada foi de 49,62 ± 6,84 mm. O período de maior repleção gonadal foi observado no verão, quando a temperatura da água foi mais elevada. Resultados dos EDG em ambos os períodos mostrou um predomínio de gônadas parcialmente cheias. Isso pode estar relacionado com o fato de que L. pectinata tem atividade gametogênese intensa, ou seja, os organismos não têm um intervalo de repouso, mas voltam a reestruturação das gônadas rapidamente após liberação dos gametas. A continuidade do ciclo reprodutivo dos espécimes encontrados em ambos os períodos estudados, pode demonstrar possível reprodução contínua da espécie e tamanho de exploração superior a 40,00 mm de altura.

Campylobacter Jejuni Increases Transcribed Il-1 B and Causes Morphometric Changes in the Ileal Enterocytes of Chickens

Campylobacteriosis is a worldwide foodborne zoonosis disease caused by Campylobacter jejuni. This microorganism is considered a commensal bacterium in chicken hosts. C. jejuni produces epithelial cell modifications and induces a cytokine gene transcription innate immunity repertoire. In the present study, we describe the invasiveness, morphological cellular modifications, and transcript level expressions of innate immune cytokines from C. jejuni-inoculated chicken ileum explants. C. jejuni was internalized by epithelial ileum cells at 15 minutes postinoculation (p.i.) and was detected intracellularly for 4hs (p.i.). Inoculated explants displayed significant increases in cell height. C. jejuni induced a significant elevation of Transforming Growth Factor Beta 3 (TGF-b3) and Interleukin-1b (IL-1b) transcripts. In conclusion, C. jejuni is internalized in explanted epithelial ileum cells, produces morphological cell modifications, and induces gene transcription of both anti-inflammatory and pro-inflammatory cytokines.

Campylobacter Jejuni Increases Transcribed Il-1 B and Causes Morphometric Changes in the Ileal Enterocytes of Chickens

Campylobacteriosis is a worldwide foodborne zoonosis disease caused by Campylobacter jejuni. This microorganism is considered a commensal bacterium in chicken hosts. C. jejuni produces epithelial cell modifications and induces a cytokine gene transcription innate immunity repertoire. In the present study, we describe the invasiveness, morphological cellular modifications, and transcript level expressions of innate immune cytokines from C. jejuni-inoculated chicken ileum explants. C. jejuni was internalized by epithelial ileum cells at 15 minutes postinoculation (p.i.) and was detected intracellularly for 4hs (p.i.). Inoculated explants displayed significant increases in cell height. C. jejuni induced a significant elevation of Transforming Growth Factor Beta 3 (TGF-b3) and Interleukin-1b (IL-1b) transcripts. In conclusion, C. jejuni is internalized in explanted epithelial ileum cells, produces morphological cell modifications, and induces gene transcription of both anti-inflammatory and pro-inflammatory cytokines.(AU)

Bactérias na otite externa canina: etiologia e resistência

A otite externa canina é uma doença comum e recorrente dos cães domésticos. Os objetivos deste estudo retrospectivo foram determinar as principais características (raça, faixa etária e sexo) dos cães acometidos por otite externa, as bactérias frequentemente identificadas e seus perfis de resistência a antimicrobianos. Foram utilizados dados de 148 cães atendidos no Hospital Veterinário de Uberaba entre 2009 e 2013 e diagnosticados com otite externa. 221 isolados bacterianos foram obtidos e identificados por suas características morfológicas, tintoriais e bioquímicas e testados contra onze antimicrobianos (amicacina; ampicilina; azitromicina; amoxicilina/ácido clavulânico; cefalexina; ceftiofur; ciprofloxacina; enrofloxacina; gentamicina; neomicina e tobramicina), conforme o método Kirby-Bauer. Dos 148 cães com otite externa, 51,4% (76/148) eram machos e 48,6% (72/148) fêmeas. Os casos foram detectados principalmente nos cães com idade igual ou superior a sete anos (54,7%; 81/148). A raça Poodle foi a mais acometida (14,84%; 22/148). As bactérias mais isoladas foram Staphylococcus coagulase negativo (StCN) 33,9% (75/221); Staphylococcus coagulase positivo (StCP) 19% (42/221); Proteus spp. 17,2% (38/221) e Pseudomonas aeruginosa 9,5% (21/221). Com exceção dos antimicrobianos amicacina e ciprofloxacina, com eficácia in vitro superior a 81%, as bactérias Gram negativas apresentara

CARACTERIZAÇÃO DA RESISTÊNCIA AOS ANTIMICROBIANOS DE Staphylococcus spp. ISOLADOS DE MASTITE BOVINA

A mastite pode ser causada por muitos agentes infecciosos diferentes, e é a doença infecciosa mais comumente encontrada em bovinos leiteiros de criação intensiva. Os objetivos deste trabalho foram: (i) isolar bactérias do gênero Staphylococcus do leite de vacas com mastite e (ii) identificar os antimicrobianos para os quais elas apresentam maior sensibilidade e resistência in vitro. Foi realizado um estudo retrospectivo com 122 Staphylococcus spp. isolados de leites de vacas com mastite enviados ao Hospital Veterinário de Uberaba (HVU), no período de janeiro de 2010 a junho de 2014. As bactérias foram identificadas de acordo com suas características morfológicas e bioquímicas. O teste de sensibilidade aos antimicrobianos foi realizado pelo método Kirby-Bauer de difusão em disco. Foram testados os seguintes antibióticos: ampicilina; amoxicilina/ácido clavulâmico; cefalexina; ceftiofur; ciprofloxacina; eritromicina; enrofloxacina; gentamicina; oxacilina; penicilina; sulfa/trimetoprim ; tetraciclina e tilmicosin. Destes isolados, 59% (72/122) eram de Staphylococcus coagulase-positivo (SCP) e 41% (50/122) de Staphylococcus coagulase-negativo (SCN). Os melhores resultados observados foram para Amoxicilina/ácido clavulânico, Ceftiofur, Ciprofloxacina, Florfenicol e Gentamicina, e sugerem que estas bases podem ser opções terapêuticas para mastite estafilocócica da região de Uberaba,

PRODUÇÃO E PURIFICAÇÃO DE ANTICORPOS POLICLONAIS IgY ANTI-P21 RECOMBINANTE DE TRYPANOSOMA CRUZI

Os objetivos deste trabalho foram: (i) produzir anticorpos policlonais IgY contra a versão recombinante da proteína de invasão celular P21 (P21r) de Trypanosoma cruzi; (ii) purificar os anticorpos IgY totais da gema do ovo de galinhas imunizadas com P21r; (iii) avaliar a qualidade dos procedimentos de purificação. Para a produção dos anticorpos IgY, três galinhas da linhagem HySex (25 semanas de idade), foram imunizadas com 100µg de P21r /250 µl de PBS (pH 7,2) emulsionado em 250 µl de adjuvante completo (primeira imunização) e incompleto (segunda e terceira imunizações) de Freund. Realizaram-se três imunizações, intramusculares, com intervalo de 14 dias. O volume final (500 µl) foi inoculado em quatro locais do músculo peitoral. Os ovos foram colhidos diariamente, durante sete semanas. As gemas foram armazenadas a -20ºC. Para a purificação, a fração solúvel em água (FSA) foi obtida da gema total, por meio de precipitação em água acidificada (pH 5,0-5,2), seguida de salting-out da FSA com sulfato de sódio (19% e 14%). A extração dos anticorpos IgY foi avaliada por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) 12% e pelo teste de dot-blot com anticorpos anti-IgY marcados com peroxidase. A água acidificada produziu um sobrenadante translucido (FSA) e um precipitado denso de cor amarela (P1, precipitado 1). O salting-out da FSA resultou em um precipitado de cor branca (

PRODUÇÃO E PURIFICAÇÃO DE ANTICORPOS POLICLONAIS IgY ESPECÍFICOS PARA LEISHMANIA AMAZONENSIS

Os objetivos foram: (i) produzir anticorpos policlonais IgY contra o antígeno total de promastigotas (ATPro) de Leishmania amazonensis; (ii) purificar anticorpos da gema do ovo de galinhas imunizadas; (iii) avaliar a qualidade da purificação; e (iv) diagnosticar as alterações macroscópicas pós-imunização. Três galinhas da linhagem HiSex foram imunizadas com 100 µg de ATPro/250 µL de PBS (pH 7,2) emulsionado em 250 µL de adjuvante completo (imunização primária) e incompleto (2º e 3º booster) de Freund, pela via intramuscular e com intervalo de 14 dias. O volume final (500 µL) foi inoculado em quatro locais do músculo peitoral. Os ovos foram colhidos diariamente e as gemas foram armazenadas a -20ºC. A fração solúvel em água (FSA) foi obtida da gema total, por meio de precipitação em água acidificada (pH 5,0-5,2), seguida de salting-out da FSA com sulfato de sódio (19% e 14%). A purificação foi avaliada por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) 12% e pelo teste de dot-blot com anticorpos anti-IgY. O diagnóstico das alterações macroscópicas foi realizado durante a necropsia das aves imunizadas, por inspeção do músculo peitoral. Obteve-se um sobrenadante translúcido (FSA) e um precipitado denso de cor amarela. O salting-out da FSA resultou em um precipitado de cor branca (PY). O SDS-PAGE demonstrou a progressiva remoção de contaminantes, a cada etapa da purificaçã

PRODUÇÃO E PURIFICAÇÃO DE ANTICORPOS POLICLONAIS IgY ANTI-P21 RECOMBINANTE DE TRYPANOSOMA CRUZI

Os objetivos deste trabalho foram: (i) produzir anticorpos policlonais IgY contra a versão recombinante da proteína de invasão celular P21 (P21r) de Trypanosoma cruzi; (ii) purificar os anticorpos IgY totais da gema do ovo de galinhas imunizadas com P21r; (iii) avaliar a qualidade dos procedimentos de purificação. Para a produção dos anticorpos IgY, três galinhas da linhagem HySex (25 semanas de idade), foram imunizadas com 100µg de P21r /250 µl de PBS (pH 7,2) emulsionado em 250 µl de adjuvante completo (primeira imunização) e incompleto (segunda e terceira imunizações) de Freund. Realizaram-se três imunizações, intramusculares, com intervalo de 14 dias. O volume final (500 µl) foi inoculado em quatro locais do músculo peitoral. Os ovos foram colhidos diariamente, durante sete semanas. As gemas foram armazenadas a -20ºC. Para a purificação, a fração solúvel em água (FSA) foi obtida da gema total, por meio de precipitação em água acidificada (pH 5,0-5,2), seguida de salting-out da FSA com sulfato de sódio (19% e 14%). A extração dos anticorpos IgY foi avaliada por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) 12% e pelo teste de dot-blot com anticorpos anti-IgY marcados com peroxidase. A água acidificada produziu um sobrenadante translucido (FSA) e um precipitado denso de cor amarela (P1, precipitado 1). O salting-out da FSA resultou em um precipitado de cor branca (

Perfil microbiológico de sêmens comerciais de touros da região de uberaba-mg / microbiological profile of commercial semen of bulls in the region of uberaba-mg

Os microrganismos presentes no trato reprodutivo dos bovinos podem contaminar o sêmen e reduzir o número e a qualidade dos embriões produzidos, resultando em doenças nas receptoras e nos animais nascidos. O macho sendo a fonte de infecção pode desencadear a transmissão direta porém, outros meios de contaminação não podem ser descartadas como: o meio ambiente; a manipulação pelo funcionário; e a água utilizada na preparação do diluente. O presente trabalho teve como objetivo detectar os principais agentes presentes em sêmens comerciais avaliados em espermoculturas e o número de unidades formadoras de colônias por mL (UFC/mL). Foi realizado um estudo retrospectivo, através dos registros de resultados de espermoculturas mantidos no Laboratório de Medicina Preventiva Veterinária do Hospital Veterinário de Uberaba no período de 2006 a 2012. Estas amostras foram submetidas à diluição seriada base 10 para a contagem de colônias, por plaqueamento em profundidade (Pour Plate) e as placas contendo entre 30 e 300 colônias foram selecionadas para posterior identifica&

CARACTERIZAÇÃO DA RESISTÊNCIA AOS ANTIMICROBIANOS DE Staphylococcus spp. ISOLADOS DE MASTITE BOVINA

A mastite pode ser causada por muitos agentes infecciosos diferentes, e é a doença infecciosa mais comumente encontrada em bovinos leiteiros de criação intensiva. Os objetivos deste trabalho foram: (i) isolar bactérias do gênero Staphylococcus do leite de vacas com mastite e (ii) identificar os antimicrobianos para os quais elas apresentam maior sensibilidade e resistência in vitro. Foi realizado um estudo retrospectivo com 122 Staphylococcus spp. isolados de leites de vacas com mastite enviados ao Hospital Veterinário de Uberaba (HVU), no período de janeiro de 2010 a junho de 2014. As bactérias foram identificadas de acordo com suas características morfológicas e bioquímicas. O teste de sensibilidade aos antimicrobianos foi realizado pelo método Kirby-Bauer de difusão em disco. Foram testados os seguintes antibióticos: ampicilina; amoxicilina/ácido clavulâmico; cefalexina; ceftiofur; ciprofloxacina; eritromicina; enrofloxacina; gentamicina; oxacilina; penicilina; sulfa/trimetoprim ; tetraciclina e tilmicosin. Destes isolados, 59% (72/122) eram de Staphylococcus coagulase-positivo (SCP) e 41% (50/122) de Staphylococcus coagulase-negativo (SCN). Os melhores resultados observados foram para Amoxicilina/ácido clavulânico, Ceftiofur, Ciprofloxacina, Florfenicol e Gentamicina, e sugerem que estas bases podem ser opções terapêuticas para mastite estafilocócica da região de Uberaba,

PRODUÇÃO E PURIFICAÇÃO DE ANTICORPOS POLICLONAIS IgY ANTI-P21 RECOMBINANTE DE TRYPANOSOMA CRUZI

Os objetivos deste trabalho foram: (i) produzir anticorpos policlonais IgY contra a versão recombinante da proteína de invasão celular P21 (P21r) de Trypanosoma cruzi; (ii) purificar os anticorpos IgY totais da gema do ovo de galinhas imunizadas com P21r; (iii) avaliar a qualidade dos procedimentos de purificação. Para a produção dos anticorpos IgY, três galinhas da linhagem HySex (25 semanas de idade), foram imunizadas com 100µg de P21r /250 µl de PBS (pH 7,2) emulsionado em 250 µl de adjuvante completo (primeira imunização) e incompleto (segunda e terceira imunizações) de Freund. Realizaram-se três imunizações, intramusculares, com intervalo de 14 dias. O volume final (500 µl) foi inoculado em quatro locais do músculo peitoral. Os ovos foram colhidos diariamente, durante sete semanas. As gemas foram armazenadas a -20ºC. Para a purificação, a fração solúvel em água (FSA) foi obtida da gema total, por meio de precipitação em água acidificada (pH 5,0-5,2), seguida de salting-out da FSA com sulfato de sódio (19% e 14%). A extração dos anticorpos IgY foi avaliada por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) 12% e pelo teste de dot-blot com anticorpos anti-IgY marcados com peroxidase. A água acidificada produziu um sobrenadante translucido (FSA) e um precipitado denso de cor amarela (P1, precipitado 1). O salting-out da FSA resultou em um precipitado de cor branca (

BACTÉRIAS NA OTITE EXTERNA CANINA: ETIOLOGIA E RESISTÊNCIA

A otite externa canina é uma doença comum e recorrente dos cães domésticos. Os objetivos deste estudo retrospectivo foram determinar as principais características (raça, faixa etária e sexo) dos cães acometidos por otite externa, as bactérias frequentemente identificadas e seus perfis de resistência a antimicrobianos. Foram utilizados dados de 148 cães atendidos no Hospital Veterinário de Uberaba entre 2009 e 2013 e diagnosticados com otite externa. 221 isolados bacterianos foram obtidos e identificados por suas características morfológicas, tintoriais e bioquímicas e testados contra onze antimicrobianos (amicacina; ampicilina; azitromicina; amoxicilina/ácido clavulânico; cefalexina; ceftiofur; ciprofloxacina; enrofloxacina; gentamicina; neomicina e tobramicina), conforme o método Kirby-Bauer. Dos 148 cães com otite externa, 51,4% (76/148) eram machos e 48,6% (72/148) fêmeas. Os casos foram detectados principalmente nos cães com idade igual ou superior a sete anos (54,7%; 81/148). A raça Poodle foi a mais acometida (14,84%; 22/148). As bactérias mais isoladas foram Staphylococcus coagulase negativo (StCN) 33,9% (75/221); Staphylococcus coagulase positivo (StCP) 19% (42/221); Proteus spp. 17,2% (38/221) e Pseudomonas aeruginosa 9,5% (21/221). Com exceção dos antimicrobianos amicacina e ciprofloxacina, com eficácia in vitro superior a 81%, as bactérias Gram negativas apresentara

PERFIL MICROBIOLÓGICO DE SÊMENS COMERCIAIS DE TOUROS DA REGIÃO DE UBERABA-MG / MICROBIOLOGICAL PROFILE OF COMMERCIAL SEMEN OF BULLS IN THE REGION OF UBERABA-MG

Os microrganismos presentes no trato reprodutivo dos bovinos podem contaminar o sêmen e reduzir o número e a qualidade dos embriões produzidos, resultando em doenças nas receptoras e nos animais nascidos. O macho sendo a fonte de infecção pode desencadear a transmissão direta porém, outros meios de contaminação não podem ser descartadas como: o meio ambiente; a manipulação pelo funcionário; e a água utilizada na preparação do diluente. O presente trabalho teve como objetivo detectar os principais agentes presentes em sêmens comerciais avaliados em espermoculturas e o número de unidades formadoras de colônias por mL (UFC/mL). Foi realizado um estudo retrospectivo, através dos registros de resultados de espermoculturas mantidos no Laboratório de Medicina Preventiva Veterinária do Hospital Veterinário de Uberaba no período de 2006 a 2012. Estas amostras foram submetidas à diluição seriada base 10 para a contagem de colônias, por plaqueamento em profundidade (Pour Plate) e as placas contendo entre 30 e 300 colônias foram selecionadas para posterior identifica&

CARACTERIZAÇÃO DA RESISTÊNCIA AOS ANTIMICROBIANOS DE Staphylococcus spp. ISOLADOS DE MASTITE BOVINA

A mastite pode ser causada por muitos agentes infecciosos diferentes, e é a doença infecciosa mais comumente encontrada em bovinos leiteiros de criação intensiva. Os objetivos deste trabalho foram: (i) isolar bactérias do gênero Staphylococcus do leite de vacas com mastite e (ii) identificar os antimicrobianos para os quais elas apresentam maior sensibilidade e resistência in vitro. Foi realizado um estudo retrospectivo com 122 Staphylococcus spp. isolados de leites de vacas com mastite enviados ao Hospital Veterinário de Uberaba (HVU), no período de janeiro de 2010 a junho de 2014. As bactérias foram identificadas de acordo com suas características morfológicas e bioquímicas. O teste de sensibilidade aos antimicrobianos foi realizado pelo método Kirby-Bauer de difusão em disco. Foram testados os seguintes antibióticos: ampicilina; amoxicilina/ácido clavulâmico; cefalexina; ceftiofur; ciprofloxacina; eritromicina; enrofloxacina; gentamicina; oxacilina; penicilina; sulfa/trimetoprim ; tetraciclina e tilmicosin. Destes isolados, 59% (72/122) eram de Staphylococcus coagulase-positivo (SCP) e 41% (50/122) de Staphylococcus coagulase-negativo (SCN). Os melhores resultados observados foram para Amoxicilina/ácido clavulânico, Ceftiofur, Ciprofloxacina, Florfenicol e Gentamicina, e sugerem que estas bases podem ser opções terapêuticas para mastite estafilocócica da região de Uberaba,

PRODUÇÃO E PURIFICAÇÃO DE ANTICORPOS POLICLONAIS IgY ANTI-P21 RECOMBINANTE DE TRYPANOSOMA CRUZI

Os objetivos deste trabalho foram: (i) produzir anticorpos policlonais IgY contra a versão recombinante da proteína de invasão celular P21 (P21r) de Trypanosoma cruzi; (ii) purificar os anticorpos IgY totais da gema do ovo de galinhas imunizadas com P21r; (iii) avaliar a qualidade dos procedimentos de purificação. Para a produção dos anticorpos IgY, três galinhas da linhagem HySex (25 semanas de idade), foram imunizadas com 100µg de P21r /250 µl de PBS (pH 7,2) emulsionado em 250 µl de adjuvante completo (primeira imunização) e incompleto (segunda e terceira imunizações) de Freund. Realizaram-se três imunizações, intramusculares, com intervalo de 14 dias. O volume final (500 µl) foi inoculado em quatro locais do músculo peitoral. Os ovos foram colhidos diariamente, durante sete semanas. As gemas foram armazenadas a -20ºC. Para a purificação, a fração solúvel em água (FSA) foi obtida da gema total, por meio de precipitação em água acidificada (pH 5,0-5,2), seguida de salting-out da FSA com sulfato de sódio (19% e 14%). A extração dos anticorpos IgY foi avaliada por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) 12% e pelo teste de dot-blot com anticorpos anti-IgY marcados com peroxidase. A água acidificada produziu um sobrenadante translucido (FSA) e um precipitado denso de cor amarela (P1, precipitado 1). O salting-out da FSA resultou em um precipitado de cor branca (

PRODUÇÃO E PURIFICAÇÃO DE ANTICORPOS POLICLONAIS IgY ESPECÍFICOS PARA LEISHMANIA AMAZONENSIS

Os objetivos foram: (i) produzir anticorpos policlonais IgY contra o antígeno total de promastigotas (ATPro) de Leishmania amazonensis; (ii) purificar anticorpos da gema do ovo de galinhas imunizadas; (iii) avaliar a qualidade da purificação; e (iv) diagnosticar as alterações macroscópicas pós-imunização. Três galinhas da linhagem HiSex foram imunizadas com 100 µg de ATPro/250 µL de PBS (pH 7,2) emulsionado em 250 µL de adjuvante completo (imunização primária) e incompleto (2º e 3º booster) de Freund, pela via intramuscular e com intervalo de 14 dias. O volume final (500 µL) foi inoculado em quatro locais do músculo peitoral. Os ovos foram colhidos diariamente e as gemas foram armazenadas a -20ºC. A fração solúvel em água (FSA) foi obtida da gema total, por meio de precipitação em água acidificada (pH 5,0-5,2), seguida de salting-out da FSA com sulfato de sódio (19% e 14%). A purificação foi avaliada por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) 12% e pelo teste de dot-blot com anticorpos anti-IgY. O diagnóstico das alterações macroscópicas foi realizado durante a necropsia das aves imunizadas, por inspeção do músculo peitoral. Obteve-se um sobrenadante translúcido (FSA) e um precipitado denso de cor amarela. O salting-out da FSA resultou em um precipitado de cor branca (PY). O SDS-PAGE demonstrou a progressiva remoção de contaminantes, a cada etapa da purificaçã

PRODUÇÃO E PURIFICAÇÃO DE ANTICORPOS POLICLONAIS IgY ESPECÍFICOS PARA LEISHMANIA AMAZONENSIS

Os objetivos foram: (i) produzir anticorpos policlonais IgY contra o antígeno total de promastigotas (ATPro) de Leishmania amazonensis; (ii) purificar anticorpos da gema do ovo de galinhas imunizadas; (iii) avaliar a qualidade da purificação; e (iv) diagnosticar as alterações macroscópicas pós-imunização. Três galinhas da linhagem HiSex foram imunizadas com 100 µg de ATPro/250 µL de PBS (pH 7,2) emulsionado em 250 µL de adjuvante completo (imunização primária) e incompleto (2º e 3º booster) de Freund, pela via intramuscular e com intervalo de 14 dias. O volume final (500 µL) foi inoculado em quatro locais do músculo peitoral. Os ovos foram colhidos diariamente e as gemas foram armazenadas a -20ºC. A fração solúvel em água (FSA) foi obtida da gema total, por meio de precipitação em água acidificada (pH 5,0-5,2), seguida de salting-out da FSA com sulfato de sódio (19% e 14%). A purificação foi avaliada por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) 12% e pelo teste de dot-blot com anticorpos anti-IgY. O diagnóstico das alterações macroscópicas foi realizado durante a necropsia das aves imunizadas, por inspeção do músculo peitoral. Obteve-se um sobrenadante translúcido (FSA) e um precipitado denso de cor amarela. O salting-out da FSA resultou em um precipitado de cor branca (PY). O SDS-PAGE demonstrou a progressiva remoção de contaminantes, a cada etapa da purificaçã