Uso de PCR universal de hemoplasma para avaliação de cavalos altamente expostos a picadas de carrapato no Sul do Brasil / Use of pan-hemoplasma PCR for screening horses highly exposed to tick bites from southern Brazil

Mycoplasma sp. são bactérias hemotrópicas dos eritrócitos e é o agente causador da hemoplasmose. O diagnóstico da infecção é realizado pela reação em cadeia da polimerase (PCR) e PCR em tempo real (qPCR) baseada no gene 16S RNA desta bactéria. O objetivo deste estudo foi avaliar cavalos para a infecção por Mycoplasma sp. utilizando um protocolo de SYBR green qPCR universal para hemoplasmas. Um total de 198 amostras de sangue de cavalos foram coletadas, o DNA foi extraído e a qPCR universal para hemoplasmas realizado. Todas as amostras foram negativas pela qPCR. Para verificar a presença de DNA amplificável, PCR para o gene gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase foi realizada em todas as amostras. Este estudo foi parte de um programa de vigilância ativa, o qual é crucial para o monitoramento do estado de saúde animal, particularmente em cavalos.(AU)

Mycoplasma sp. are hemotropic bacteria of red blood cells and the causative agent of hemoplasmosis. Diagnosis of infection is reached by polymerase chain reaction (PCR) and real-time PCR (qPCR) of the 16S RNA gene of this bacteria. The aim of this study was to screen horses for Mycoplasma sp. Infection using a pan-hemoplasma SYBR green qPCR assay. A total of 198 blood samples from horses were collected, DNA extracted and pan-hemoplasma qPCR performed. All samples were negative by qPCR. To verify the presence of amplifiable DNA, PCR for glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase gene was performed on all samples. This study was part of an active surveillance program, which is critical for monitoring animal health status, particularly in horses. (AU)

Detection of anti-Toxoplasma gondii antibodies in carthorses in the metropolitan region of Curitiba, Paraná, Brazil / Detecção de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em cavalos carroceiros da região metropolitana de Curitiba, Paraná, Brasil

Toxoplasma gondii, the agent for toxoplasmosis, has worldwide distribution. Horses normally play a secondary role in its life cycle, but movement around urban areas, feeding on grass and the increasing use of carthorses for gathering recyclable material in some urban areas of Brazil may increase their exposure to T. gondii infection. The aim of the present study was to investigate the frequency of anti-T. gondii antibodies in carthorses in the metropolitan region of Curitiba, PR. IgG antibodies against T. gondii were detected using the indirect fluorescence antibody test (IFAT) (titers ≥ 64). Seventeen (17.0%) of the 100 horses sampled were seropositive. There were no statistical differences in relation to sex (p = 0.28) or age (p = 0.15). Our findings suggest that carthorses are exposed to T. gondii infections and that no associations with age or sex exist.

Toxoplasma gondii, agente da toxoplasmose, tem distribuição mundial. Geralmente cavalos desempenham papel secundário no ciclo de vida do T. gondii. Entretanto, a circulação em meio urbano, a alimentação com gramíneas e o aumento no uso de cavalos carroceiros para recolhimento de material reciclável em algumas áreas urbanas do Brasil podem aumentar a exposição desses cavalos ao T. gondii. O objetivo deste estudo foi investigar a frequência de anticorpos anti-T. gondii em cavalos carroceiros da região metropolitana de Curitiba, PR. Os anticorpos da classe IgG contra T. gondii foram detectados pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) (títulos ≥ 64). Dezessete (17%) dos 100 cavalos avaliados foram positivos e não houve diferença entre sexos (p = 0,28) ou idade (p = 0,15). Esses achados sugerem que cavalos carroceiros estão expostos a infecções por T. gondii, não existindo associação com a idade ou o sexo dos animais.

Detection of Neospora sp. antibodies in cart horses from urban areas of Curitiba, Southern Brazil / Detecção de anticorpos anti-Neospora sp. em cavalos de carroceiros de áreas urbanas de Curitiba, Sul do Brasil

Neospora caninum is a protozoan parasite which affects dogs as definitive hosts and several mammalian species as intermediate hosts mainly causing abortions and central nervous system disorders. The reemerging population of cart horses for carrying recycling material in urban areas of major cities in Brazil may have an impact on disease spreading, and these animals may be used as sentinels for environmental surveillance. Thus, the present study investigated the frequency of Neospora sp. antibodies in cart horses from Curitiba and surrounding areas, Paraná State, Southern Brazil. IgG antibodies against Neospora sp. were detected using indirect fluorescence antibody test (IFAT), and titers equal to or higher than 1:50 were considered reactive. Of all samples, 14/97 (14.4%) were positive: 2/29 (6.9%) were younger than 5; 5/26 (19.2%) between 6 and 9; and 6/31 (19.4%) older than 10 years of age. One of the 11 animals with unknown age was positive (9.1%). Cart horses are likely to be more exposed to dog feces and to Neospora sp. oocyst contamination in urban settings and a lower frequency of disease in dogs may have a negative impact on horse infection risk in these areas.(AU)

Neospora caninum é um protozoário parasita que afeta cães como hospedeiros definitivos e diversos mamíferos como hospedeiros intermediários, envolvido em abortos e distúrbios do sistema nervoso central. A população reemergente de cavalos de carroceiros utilizados para transportar material reciclável em áreas urbanas de grandes cidades brasileiras na disseminação de doenças, e estes animais podem ser utilizados como sentinelas para vigilância ambiental. Deste modo, no presente estudo foi investigada a frequência de anticorpos anti-Neospora sp. em cavalos de carroceiros da Região Metropolitana de Curitiba, Estado do Paraná, Sul do Brasil. Anticorpos da classe IgG anti-Neospora sp. foram detectados utilizando a reação de imunofluorescência indireta (RIFI), e títulos maiores ou iguais a 1:50 foram considerados reagentes. Do total de amostras testadas, 14/97 (14,4%) foram positivas: 2/29 (6,9%) tinham menos do que 5,5/26 (19,2%) entre 6 and 9, e 6/31 (19,4%) mais de 10 anos de idade. Um dos 11 animais positivos não tinha a idade conhecida (9,1%). Como cavalos de carroceiros possivelmente estejam mais expostos a oocistos de Neospora sp. em ambientes urbanos, uma baixa freqüência da doença em cães pode ter impacto negativo no risco de infecção de cavalos nestas áreas.(AU)

Uso de PCR universal de hemoplasma para avaliação de cavalos altamente expostos a picadas de carrapato no Sul do Brasil / Use of pan-hemoplasma PCR for screening horses highly exposed to tick bites from southern Brazil

Mycoplasma sp. são bactérias hemotrópicas dos eritrócitos e é o agente causador da hemoplasmose. O diagnóstico da infecção é realizado pela reação em cadeia da polimerase (PCR) e PCR em tempo real (qPCR) baseada no gene 16S RNA desta bactéria. O objetivo deste estudo foi avaliar cavalos para a infecção por Mycoplasma sp. utilizando um protocolo de SYBR green qPCR universal para hemoplasmas. Um total de 198 amostras de sangue de cavalos foram coletadas, o DNA foi extraído e a qPCR universal para hemoplasmas realizado. Todas as amostras foram negativas pela qPCR. Para verificar a presença de DNA amplificável, PCR para o gene gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase foi realizada em todas as amostras. Este estudo foi parte de um programa de vigilância ativa, o qual é crucial para o monitoramento do estado de saúde animal, particularmente em cavalos.

Mycoplasma sp. are hemotropic bacteria of red blood cells and the causative agent of hemoplasmosis. Diagnosis of infection is reached by polymerase chain reaction (PCR) and real-time PCR (qPCR) of the 16S RNA gene of this bacteria. The aim of this study was to screen horses for Mycoplasma sp. Infection using a pan-hemoplasma SYBR green qPCR assay. A total of 198 blood samples from horses were collected, DNA extracted and pan-hemoplasma qPCR performed. All samples were negative by qPCR. To verify the presence of amplifiable DNA, PCR for glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase gene was performed on all samples. This study was part of an active surveillance program, which is critical for monitoring animal health status, particularly in horses.