Assessment of the antibacterial, cytotoxic and antioxidant activities of Morus nigra L. (Moraceae)

Abstract This study was carried out to assess the antibacterial, cytotoxic and antioxidant activities of extracts of Morus nigra L. HPLC was used to determine the fingerprint chromatogram of the crude ethanolic extract (Mn-EtOH). The antibacterial effect was assessed through the method of microdilution. The cytotoxicity was tested against human tumour cell lines using the 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT) assay. The total phenolic and flavonoid contents were also assessed through the Folin-Ciocalteu and aluminum chloride methods, respectively. Antioxidant activities of the extracts were evaluated by using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazil (DPPH) radical scavenging and -carotene-linoleic acid bleaching methods. The presence of phenolic compounds in Mn-EtOH was confirmed using HPLC. The extracts showed activity against most microorganisms tested. The extracts did not show any expressive antiproliferative effect in the assessment of cytotoxicity. The most significant total phenolic content was 153.00 ± 11.34 mg of gallic acid equivalent/g to the ethyl acetate extract (AcOEt). The total flavonoid content was 292.50 ± 70.34 mg of catechin equivalent/g to the AcOEt extract, which presented the best antioxidant activity (IC50 50.40 ± 1.16 g/mL) for DPPH scavenging. We can conclude that this species shows strong antibacterial and antioxidant activities, as well as weak cytotoxic effects.

Resumo Este estudo foi realizado para avaliar as atividades antibacteriana, citotóxica e antioxidante de extratos de Morus nigra L. HPLC foi utilizado para determinar o perfil de compostos fenólicos do extrato etanólico bruto (Mn-EtOH). O efeito antibacteriano foi avaliado através do método de microdiluição. A citotoxicidade foi testada contra linhagens celulares de tumores humanos utilizando o ensaio do brometo de 3-(4,5-dimetil-2-tiazolil)-2,5-difenil-2H-tetrazólio (MTT). O conteúdo total de compostos fenólicos e flavonoides também foi avaliado por meio dos métodos de Folin-Ciocalteu e cloreto de alumínio, respectivamente. A atividade antioxidante dos extratos foi avaliada por meio do sequestro do radical livre 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH) e co-oxidação do sistema -caroteno-ácido linoleico. A presença de compostos fenólicos em Mn-EtOH foi confirmada utilizando HPLC. Os extratos mostraram atividade contra a maioria dos microrganismos testados. Os extratos não mostraram qualquer efeito antiproliferativo expressivo na avaliação da citotoxicidade. O conteúdo fenólico total mais significativo foi de 153,00 ± 11,34 mg de equivalente de ácido gálico/g para o extrato acetato de etila (AcOEt). O conteúdo de flavonoides totais foi de 292,50 ± 70,34 mg de equivalente de catequina/g para o extrato AcOEt, que apresentou a melhor atividade antioxidante (IC50 50,40 ± 1,16 mg/mL) para o sequestro do DPPH. Podemos concluir que esta espécie apresenta forte atividade antibacteriana e antioxidante, bem como fraca atividade citotóxica.

Assessment of the antibacterial, cytotoxic and antioxidant activities of Morus nigra L. (Moraceae)

Abstract This study was carried out to assess the antibacterial, cytotoxic and antioxidant activities of extracts of Morus nigra L. HPLC was used to determine the fingerprint chromatogram of the crude ethanolic extract (Mn-EtOH). The antibacterial effect was assessed through the method of microdilution. The cytotoxicity was tested against human tumour cell lines using the 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT) assay. The total phenolic and flavonoid contents were also assessed through the Folin-Ciocalteu and aluminum chloride methods, respectively. Antioxidant activities of the extracts were evaluated by using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazil (DPPH) radical scavenging and -carotene-linoleic acid bleaching methods. The presence of phenolic compounds in Mn-EtOH was confirmed using HPLC. The extracts showed activity against most microorganisms tested. The extracts did not show any expressive antiproliferative effect in the assessment of cytotoxicity. The most significant total phenolic content was 153.00 ± 11.34 mg of gallic acid equivalent/g to the ethyl acetate extract (AcOEt). The total flavonoid content was 292.50 ± 70.34 mg of catechin equivalent/g to the AcOEt extract, which presented the best antioxidant activity (IC50 50.40 ± 1.16 g/mL) for DPPH scavenging. We can conclude that this species shows strong antibacterial and antioxidant activities, as well as weak cytotoxic effects.

Resumo Este estudo foi realizado para avaliar as atividades antibacteriana, citotóxica e antioxidante de extratos de Morus nigra L. HPLC foi utilizado para determinar o perfil de compostos fenólicos do extrato etanólico bruto (Mn-EtOH). O efeito antibacteriano foi avaliado através do método de microdiluição. A citotoxicidade foi testada contra linhagens celulares de tumores humanos utilizando o ensaio do brometo de 3-(4,5-dimetil-2-tiazolil)-2,5-difenil-2H-tetrazólio (MTT). O conteúdo total de compostos fenólicos e flavonoides também foi avaliado por meio dos métodos de Folin-Ciocalteu e cloreto de alumínio, respectivamente. A atividade antioxidante dos extratos foi avaliada por meio do sequestro do radical livre 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH) e co-oxidação do sistema -caroteno-ácido linoleico. A presença de compostos fenólicos em Mn-EtOH foi confirmada utilizando HPLC. Os extratos mostraram atividade contra a maioria dos microrganismos testados. Os extratos não mostraram qualquer efeito antiproliferativo expressivo na avaliação da citotoxicidade. O conteúdo fenólico total mais significativo foi de 153,00 ± 11,34 mg de equivalente de ácido gálico/g para o extrato acetato de etila (AcOEt). O conteúdo de flavonoides totais foi de 292,50 ± 70,34 mg de equivalente de catequina/g para o extrato AcOEt, que apresentou a melhor atividade antioxidante (IC50 50,40 ± 1,16 mg/mL) para o sequestro do DPPH. Podemos concluir que esta espécie apresenta forte atividade antibacteriana e antioxidante, bem como fraca atividade citotóxica.

Comparação da concentração de citocinas no líquido amnióticos de bezerros nelore concebidos por meio de diferentes biotecnologias da reprodução

O objetivo deste trabalho foi determinar as concentrações de TNF-a, IFN-g, IL-6 e IL-8 no fluido amniótico de bezerros concebidos por meio de PIV, TE e IA no momento do parto. Utilizaram-se sessenta animais divididos em grupos: 1- vinte vacas gestando bezerros Nelore de inovulações de embriões provenientes de doadoras superovuladas (TE); 2- vinte vacas gestando bezerros Nelore de inovulações de embriões provenientes de PIV; 3- vinte vacas Nelore gestando bezerros de IA. Durante a fase de expulsão, realizou-se a colheita do líquido amniótico que foi depositado em tubo plástico e congelado em freezer. Realizou-se ELISA para a dosagem das citocinas, cujas concentrações foram submetidas ao teste de Kruskal-Wallis, com p0,05). Contudo no grupo IA, a concentração de TNF-a foi inferior ao do grupo PIV (p0,05). Apenas duas amostras do grupo PIV apresentaram concentração detectável de IL-6 e para IL-8 apenas uma amostra do mesmo grupo. Os resultados desse experimento podem ser adotados como padrões para gestação normal de bovinos. Entretanto novas pesquisas na área da imunologia da gestação são necessárias para melhor descrever o papel das citocinas na manutenção da gestação e no desencadeamento do trabalho de parto em bovinos. PALAVRAS-CHAVE: Bezerros Nelore. Líquido amniótico. Citocinas. Biotecnologias

Intramuscular glycogen and lipid contents of active and inactive young horses of the brasileiro de hipismo breed

Objetivou-se determinar o conteúdo bioquímico de lipídeos e glicogênio nas fibras do músculo gluteus medius de cavalos da raça Brasileiro de Hipismo (BH), observando-se as variáveis idade, gênero, profundidade da biópsia e atividade física de baixa intensidade. Para tanto, utilizaram-se 89 eqüinos, sendo 78 inativos e 11 com atividade física moderada. A análise de glicogênio intramuscular foi realizada por meio da coloração de "PAS" e, a determinação de lipídios utilizando-se a coloração de "oil red O". Para a tipificação das fibras I, IIA e IIX empregaram-se a técnica de NADH-TR. Não houve diferença no conteúdo de glicogênio na comparação entre as idades. Observou-se diferenças entre os sexos, sendo que as fêmeas apresentaram maior conteúdo de glicogênio em relação aos machos, principalmente nas fibras do tipo IIA e IIX. Independente da idade, sexo e profundidade da biópsia muscular o conteúdo de lipídios nas miofibras tipo I foi maior. O mesmo resultado foi verificado em relação à atividade física, não havendo diferenças em relação ao conteúdo de glicogênio e lipídeos quando se comparou as intensidades de coloração nos animais inativos e treinados por 10 meses. Concluiu-se que a atividade física leve não foi capaz de alterar as reservas de glicogênio em repouso. Por outro lado, as fêmeas apresentaram maiores conteúdo de glicogênio podendo sugerir um melhor desempenho desses a

Effect of the athletic conditioning on the middle gluteal muscle of arabian horses / Efeito do condicionamento atlético sobre o músculo glúteo médio de eqüinos puro sangue arabes

The aim of this study was to evaluate and compare the skeletal musculature adaptations of Arabian Horses submitted to two different types of trainings. Muscular samples of middle gluteal muscle were obtained before and after the six week-period of training. These samples were submitted to histochemical analysis using myosin adenosine triphosphatase(mATPase) and nicotinamide adenine dinucleotide tetrazolium reductase (NADH-TR). Body weight and corporal score of the animals, as well as the area and frequency of the different types of muscular fibres were determined. The results demonstrated that the weight and corporal score did not differ significantly among groups even after training. The group did not exert significant effect on the composition and size of fibres. The training caused decrease in the percentage and area of type I fibres and increase in the percentage and relative area of type IIX fibres. KEY WORDS: muscular biopsy, middle gluteal muscle, equine, NADH.

O presente trabalho teve como objetivo avaliar e comparar as adaptações da musculatura esquelética de eqüinos Puro Sangue Árabe submetidos a dois tipos diferentes de treinamentos em trilha. Foram colhidas amostras do músculo glúteo médio antes e após o período de treinamento de seis semanas, as quais foram submetidas às analises histoquímicas utilizando a adenosina trifosfatase miosínica(mATPase) e a nicotinamida adenina dinucleotídeo tetrazólio redutase (NADH-TR). Determinou-se o peso e escore corporal dos animais, a área e a freqüência dos diferentes tipos de fibras musculares. Os resultados demonstraram que o peso corpóreo e escore corporal não diferiram significativamente entre os grupos mesmo após o treinamento. O grupo não exerceu efeito significativo sobre a composição e tamanho fibrilar. O treinamento ocasionou diminuição na porcentagem e área das fibras tipo I e aumento no percentual e da área relativa das fibras tipo IIX.PALAVRAS CHAVE: Biopsia muscular. Glúteo médio. Eqüinos. NADH.

Neutralization of the neuromuscular activity of bothropstoxin-i, a myotoxin from Bothrops jararacussu snake venom, by a hydroalcoholic extract of Casearia sylvestris Sw. (guaçatonga)

Numerous plants are used as snakebite antidotes in Brazilian folk medicine, including Casearia sylvestris Swartz, popularly known as guaçatonga. In this study, we examined the action of a hydroalcoholic extract from C. sylvestris on the neuromuscular blockade caused by bothropstoxin-I (BthTX-I), a myotoxin from Bothrops jararacussu venom, in mouse isolated phrenic nerve-diaphragm (PND) preparations. Aqueous (8 and 12 mg/ml, n=4 and 5, respectively) and hydroalcoholic (12 mg/ml, n=12) extracts of the leaves of C. sylvestris caused facilitation in PND preparations followed by partial neuromuscular blockade. BthTX-I (20 µg/ml, n=4) caused 50% paralysis after 65±15 min (mean ± S.E.M). Preincubation (30 min at 37° C) of BthTX-I (20 µg/ml, n=4) with a concentration of the hydroalcoholic extract (4 mg/ml) that had no neuromuscular activity, such as the control (n=5), prevented the neuromuscular blockade caused by the toxin. This protection may be mediated by compounds such as flavonoids and phenols identified by thin-layer chromatography and colorimetric assays.

Poliodontia heterotopica em cavalos: cinco casos (2002-2003)

O artigo não apresenta resumo.

COMPARAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO DE CITOCINAS NO LÍQUIDO AMNIÓTICOS DE BEZERROS NELORE CONCEBIDOS POR MEIO DE DIFERENTES BIOTECNOLOGIAS DA REPRODUÇÃO

O objetivo deste trabalho foi determinar as concentrações de TNF-a, IFN-g, IL-6 e IL-8 no fluido amniótico de bezerros concebidos por meio de PIV, TE e IA no momento do parto. Utilizaram-se sessenta animais divididos em grupos: 1- vinte vacas gestando bezerros Nelore de inovulações de embriões provenientes de doadoras superovuladas (TE); 2- vinte vacas gestando bezerros Nelore de inovulações de embriões provenientes de PIV; 3- vinte vacas Nelore gestando bezerros de IA. Durante a fase de expulsão, realizou-se a colheita do líquido amniótico que foi depositado em tubo plástico e congelado em freezer. Realizou-se ELISA para a dosagem das citocinas, cujas concentrações foram submetidas ao teste de Kruskal-Wallis, com p0,05). Contudo no grupo IA, a concentração de TNF-a foi inferior ao do grupo PIV (p0,05). Apenas duas amostras do grupo PIV apresentaram concentração detectável de IL-6 e para IL-8 apenas uma amostra do mesmo grupo. Os resultados desse experimento podem ser adotados como padrões para gestação normal de bovinos. Entretanto novas pesquisas na área da imunologia da gestação são necessárias para melhor descrever o papel das citocinas na manutenção da gestação e no desencadeamento do trabalho de parto em bovinos. PALAVRAS-CHAVE: Bezerros Nelore. Líquido amniótico. Citocinas. Biotecnologias

EFFECT OF THE ATHLETIC CONDITIONING ON THE MIDDLE GLUTEAL MUSCLE OF ARABIAN HORSES. / EFEITO DO CONDICIONAMENTO ATLÉTICO SOBRE O MÚSCULO GLÚTEO MÉDIO DE EQÜINOS PURO SANGUE ARABES.

The aim of this study was to evaluate and compare the skeletal musculature adaptations of Arabian Horses submitted to two different types of trainings. Muscular samples of middle gluteal muscle were obtained before and after the six week-period of training. These samples were submitted to histochemical analysis using myosin adenosine triphosphatase(mATPase) and nicotinamide adenine dinucleotide tetrazolium reductase (NADH-TR). Body weight and corporal score of the animals, as well as the area and frequency of the different types of muscular fibres were determined. The results demonstrated that the weight and corporal score did not differ significantly among groups even after training. The group did not exert significant effect on the composition and size of fibres. The training caused decrease in the percentage and area of type I fibres and increase in the percentage and relative area of type IIX fibres. KEY WORDS: muscular biopsy, middle gluteal muscle, equine, NADH.

O presente trabalho teve como objetivo avaliar e comparar as adaptações da musculatura esquelética de eqüinos Puro Sangue Árabe submetidos a dois tipos diferentes de treinamentos em trilha. Foram colhidas amostras do músculo glúteo médio antes e após o período de treinamento de seis semanas, as quais foram submetidas às analises histoquímicas utilizando a adenosina trifosfatase miosínica(mATPase) e a nicotinamida adenina dinucleotídeo tetrazólio redutase (NADH-TR). Determinou-se o peso e escore corporal dos animais, a área e a freqüência dos diferentes tipos de fibras musculares. Os resultados demonstraram que o peso corpóreo e escore corporal não diferiram significativamente entre os grupos mesmo após o treinamento. O grupo não exerceu efeito significativo sobre a composição e tamanho fibrilar. O treinamento ocasionou diminuição na porcentagem e área das fibras tipo I e aumento no percentual e da área relativa das fibras tipo IIX.PALAVRAS CHAVE: Biopsia muscular. Glúteo médio. Eqüinos. NADH.

Poliodontia heterotopica em cavalos: cinco casos (2002-2003)

O artigo não apresenta resumo.

INTRAMUSCULAR GLYCOGEN AND LIPID CONTENTS OF ACTIVE AND INACTIVE YOUNG HORSES OF THE BRASILEIRO DE HIPISMO BREED

Objetivou-se determinar o conteúdo bioquímico de lipídeos e glicogênio nas fibras do músculo gluteus medius de cavalos da raça Brasileiro de Hipismo (BH), observando-se as variáveis idade, gênero, profundidade da biópsia e atividade física de baixa intensidade. Para tanto, utilizaram-se 89 eqüinos, sendo 78 inativos e 11 com atividade física moderada. A análise de glicogênio intramuscular foi realizada por meio da coloração de "PAS" e, a determinação de lipídios utilizando-se a coloração de "oil red O". Para a tipificação das fibras I, IIA e IIX empregaram-se a técnica de NADH-TR. Não houve diferença no conteúdo de glicogênio na comparação entre as idades. Observou-se diferenças entre os sexos, sendo que as fêmeas apresentaram maior conteúdo de glicogênio em relação aos machos, principalmente nas fibras do tipo IIA e IIX. Independente da idade, sexo e profundidade da biópsia muscular o conteúdo de lipídios nas miofibras tipo I foi maior. O mesmo resultado foi verificado em relação à atividade física, não havendo diferenças em relação ao conteúdo de glicogênio e lipídeos quando se comparou as intensidades de coloração nos animais inativos e treinados por 10 meses. Concluiu-se que a atividade física leve não foi capaz de alterar as reservas de glicogênio em repouso. Por outro lado, as fêmeas apresentaram maiores conteúdo de glicogênio podendo sugerir um melhor desempenho desses a