Resumo
O ácido giberélico (GA3) é um hormônio vegetal pertencente a grande família dos terpenoides. A ingestão desse composto pode limitar o desenvolvimento e reduzir a eficiência alimentar de insetos-pragas quando tratados em baixas concentrações. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi investigar o efeito de diferentes níveis de inclusão do ácido giberélico na ração de abelhas Apis mellifera africanizadas sobre o consumo da dieta, mortalidade, alterações morfológicas no intestino médio e corpo gorduroso, bem como, expressão do gene vitelogenina (VG). O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente ao acaso, composto por cinco repetições por tratamento, tendo em média 150 abelhas por repetição, todas em idades definidas de 0 3 dias de vida. As gaiolas foram divididas em cinco tratamentos, sendo eles: sem adição de ácido giberélico na ração (CTRL), adição de 0,45 mg/g de GA3 na ração (DT045), adição de 0,90 mg/g de GA3 na ração (DT09), adição de 1,35 mg/g de GA3 na ração (DT135) e adição de 1,80 mg/g de GA3 na ração (DT180). As abelhas foram mantidas em estufa incubadora tipo B.O.D. (Biochemical Oxygen Demand), em temperatura de 34 ± 2°C, com umidade relativa de 60 ± 10% durante todo período experimental por sete dias. As mensurações do consumo da dieta e mortalidade foram realizadas a cada 24 horas e, a substituição da ração por uma nova ração com as mesmas características, realizadas a cada três dias. Ao término do período experimental, as abelhas foram submetidas a eutanasia por congelamento e CO2 e, posteriormente, dissecadas para remoção do intestino médio e corpo gorduroso. As abelhas submetidas aos tratamentos DT045, DT09 e DT135 apresentaram redução no consumo de ração e aumento da mortalidade, sendo estatisticamente diferentes de CTRL e DT180, enquanto que as abelhas do tratamento DT180 apresentaram consumo e mortalidade estatisticamente igual ao CTRL. As análises histológicas evidenciaram o efeito causado pelo ácido giberélico sobre o epitélio do intestino médio, bem como, trofócitos e enócitos do corpo gorduroso, sugerindo o comprometimento da absorção de nutrientes da dieta de insetos submetidos a baixas concentrações de GA3, enquanto as células pericárdicas denotaram o processo de detoxificação desencadeado pelas altas concentrações de GA3 na dieta. Houve redução nos níveis de expressão do gene VG para todos os tratamentos. Este trabalho evidenciou as formas de avaliação do efeito de agentes xenobióticos em abelhas submetidas a experimentos em laboratório, com o fornecimento de dieta contendo fonte energética e proteica para incentivar o desenvolvimento dos indivíduos, bem como, a utilização de biomarcadores para identificação de cascatas fisiológicas. Dessa forma, foi possível identificar que a inclusão de GA3 provoca alterações no consumo da dieta e aumento do percentual de mortalidade, quando utilizada as doses intermediárias desse experimento. Além disso, danos sobre as células do epitélio do intestino médio, modificações de trofócitos e enócitos do corpo gorduroso e mudanças de estágio nas células pericárdicas foram observadas nos tratamentos intermediários, denotando a capacidade de um possível processo de detoxificação do organismo quando exposto ao GA3. A expressão do gene da vitelogenina foi reduzida em todos os tratamentos, indicando que, é provável uma relação fisiológica em resposta a interações entre hormônios vegetais e hormônios de insetos.
Gibberellic acid (GA3) is a plant hormone belonging to the large terpenoid family. The ingestion of this compound is investigated about its influence on development limitation and in feed efficiency reduction, mainly on insect pests when treated at low concentrations. In this sense, the objective of this work was to investigate the effect of different inclusion levels of gibberellic acid in food of Africanized Apis mellifera bees, evaluating dietary intake, mortality, morphological changes in the midgut and fat body, as well as the level of vitellogenin (VG) gene expression. The experiment was carried out in a completely randomized design, consisting of five replicates for each treatment, with an average of 150 bees per repetition, all at defined ages of 0 3 days of life. The cages were divided into five treatments, namely: No addition of gibberellic acid in the ration (CTRL), addition of 0.45 mg/g of GA3 to the feed (DT045), addition of 0.90 mg/g (DT09), addition of 1.35 mg/g (DT135) and addition of 1.80 mg/g of GA3 to the feed (DT180). The bees were kept in a B.O.D. (Biochemical Oxygen Demand), at a temperature of 34 ± 2°C, with a relative humidity of 60 ± 10% during the entire experimental period for seven days. Measurements of dietary intake and mortality were performed every 24 hours and the replacement of the ration with a new ration with the same characteristics was performed every three days. At the end of the experimental period, the bees were euthanized by freezing and CO2 and later dissected to remove the midgut and fat body. Bees subjected to treatments D045, DT09 and DT135 showed a reduction in feed intake and increased mortality, being statistically different from CTRL and DT180, while bees in the DT180 treatment showed consumption and mortality statistically equal to CTRL treatment. Histological analyzes showed the effect caused by gibberellic acid on the midgut epithelium, as well as trophocytes and oenocytes of the fat body, suggesting the compromised absorption of nutrients in of insects subjected to low GA3 concentrations, while the pericardial cells denote the detoxification process triggered by high GA3 concentrations in the diet. There was a reduction in VG gene expression levels for all treatments. Thus, the imbalance of vitellogenin levels in hemolymph can cause hormonal disturbances that could reflect a reduction in longevity, however further investigations are needed. This work showed how to evaluate the effect of xenobiotic agents in bees submitted to laboratory experiments, with the provision of a diet containing energy and protein to encourage the development of individuals, as well as the use of biomarkers to identify physiological cascades. Thus, it was possible to identify that the GA3 inclusion causes changes in the diet consumption and an increase in the mortality percentage, when using the intermediate doses of this experiment. Furthermore, damage to midgut epithelial cells, changes in adipose cells and stage changes in pericardial cells were observed in intermediate treatments, denoting the organism's responsiveness when exposed to GA3. Vitellogenin gene expression was reduced in all treatments, denoting that there really is a hormone-physiological relationship between plant hormones and insect hormones.