Produção semissólida de Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana em diferentes substratos e efeito da radiação ultravioleta e da temperatura sobre propágulos desses entomopatógenos / Semi-solid production of Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok and Beauveria bassiana (Bals) Vuill on different media and the effects of ultraviolet radiation and temperature on the infective propagules of these fungi

O trabalho teve os seguintes objetivos: 1) avaliar diferentes substratos para a produção semissólida dos fungos Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana; 2) verificar a tolerância dos conídios produzidos ao efeito da radiação ultravioleta e da temperatura; e 3) avaliar a patogenicidade dos conídios a Diatraea saccharalis. Para ambos os fungos, foram utilizadas 6 repetições para cada tratamento: amido de milho, arroz integral, arroz parboilizado tipo1, arroz tipo 1 e 2, aveia em flocos, canjiquinha, farelo de trigo, farinhas de mandioca crua, de milho amarela e de trigo especial, fubá, milho em grãos, polvilho azedo, soja em grãos, trigo moído e turfa. Os conídios foram quantificados em câmara de Neubauer e a determinação da viabilidade foi realizada através da observação em microscópio, dos conídios germinados e não germinados, após espalhamento da suspensão fúngica em placas de Petri contendo BDA. No ensaio com radiação os fungos foram expostos à radiação por 25 e 50 segundos e foi considerado um tratamento sem exposição; para temperatura os fungos foram expostos a 20, 25, 30 e 35o C. Utilizando a torre de Potter, 2 mL de cada suspensão fúngica dos tratamentos foram pulverizados em lagartas de D. saccharalis. As maiores concentrações de conídios de M. anisopliae e B. bassiana foram encontradas nos tratamentos com arroz parboilizado tipo 1, arroz tipo 1 e 2, farinha de milho amarela, fubá e trigo moído e a viabilidade dos conídios produzidos superou os 94%. Quanto maior o tempo de exposição à radiação menor foi o número de conídios viáveis; também ocorreu perda significativa da viabilidade dos conídios quando expostos à temperatura de 35o C. Os fungos foram patogênicos para D. saccharalis.

The present study was aimed to evaluate different (semi-solid) media for the production of Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana propagules, and to evaluate the tolerance of these propagules to ultraviolet radiation and temperature. The experiments were performed at the Biological Control Laboratory of the Instituto Biológico at Campinas, São Paulo, Brazil. For both fungi, 6 repetitions were performed for each of the 17 treatments: corn starch, full rice, parboiled rice, type-1 rice, type-2 rice, oat flakes, canjiquinha [grits], wheat flour, raw cassava flour, yellow corn flour, special wheat flour, corn flour, corn in grains, cassava starch, soy in grains, crushed wheat, and turf. The viability analysis was done in plastic plates containing BDA. For the bioassays involving exposure to ultraviolet light and temperature, BDA was also used for viability analysis, and each treatment was exposed to the UV radiation for 0, 25 and 50 seconds, the temperature exposure being at 20, 25, 30 and 35º C. Using a Potter tower, 2 mL of fungus suspension from each treatment was inoculated to the Diatraea saccharalis caterpillars. Regarding the sporulation, the largest concentrations of M. anisopliae and B. bassiana were found for the treatments with parboiled rice, type-1 rice, type-2 rice, yellow corn flour, corn flour and crushed wheat. The viability of all treatments was superior to 94.00%. Also, the longer the duration of the exposition to the UV, the 2Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Ciências Agronômicas, Botucatu, SP, Brasil.

Produção semissólida de Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana em diferentes substratos e efeito da radiação ultravioleta e da temperatura sobre propágulos desses entomopatógenos.

ABSTRACT The present study was aimed to evaluate different (semi-solid) media for the production of Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana propagules, and to evaluate the tolerance of these propagules to ultraviolet radiation and temperature. The experiments were performed at the Biological Control Laboratory of the Instituto Biológico at Campinas, São Paulo, Brazil. For both fungi, 6 repetitions were performed for each of the 17 treatments: corn starch, full rice, parboiled rice, type-1 rice, type-2 rice, oat flakes, canjiquinha [grits], wheat flour, raw cassava flour, yellow corn flour, special wheat flour, corn flour, corn in grains, cassava starch, soy in grains, crushed wheat, and turf. The viability analysis was done in plastic plates containing BDA. For the bioassays involving exposure to ultraviolet light and temperature, BDA was also used for viability analysis, and each treatment was exposed to the UV radiation for 0, 25 and 50 seconds, the temperature exposure being at 20, 25, 30 and 35º C. Using a Potter tower, 2 mL of fungus suspension from each treatment was inoculated to the Diatraea saccharalis caterpillars. Regarding the sporulation, the largest concentrations of M. anisopliae and B. bassiana were found for the treatments with parboiled rice, type-1 rice, type-2 rice, yellow corn flour, corn flour and crushed wheat. The viability of all treatments was superior to 94.00%. Also, the longer the duration of the exposition to the UV, the 2Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Ciências Agronômicas, Botucatu, SP, Brasil.

RESUMO O trabalho teve os seguintes objetivos: 1) avaliar diferentes substratos para a produção semissólida dos fungos Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana; 2) verificar a tolerância dos conídios produzidos ao efeito da radiação ultravioleta e da temperatura; e 3) avaliar a patogenicidade dos conídios a Diatraea saccharalis. Para ambos os fungos, foram utilizadas 6 repetições para cada tratamento: amido de milho, arroz integral, arroz parboilizado tipo1, arroz tipo 1 e 2, aveia em flocos, canjiquinha, farelo de trigo, farinhas de mandioca crua, de milho amarela e de trigo especial, fubá, milho em grãos, polvilho azedo, soja em grãos, trigo moído e turfa. Os conídios foram quantificados em câmara de Neubauer e a determinação da viabilidade foi realizada através da observação em microscópio, dos conídios germinados e não germinados, após espalhamento da suspensão fúngica em placas de Petri contendo BDA. No ensaio com radiação os fungos foram expostos à radiação por 25 e 50 segundos e foi considerado um tratamento sem exposição; para temperatura os fungos foram expostos a 20, 25, 30 e 35o C. Utilizando a torre de Potter, 2 mL de cada suspensão fúngica dos tratamentos foram pulverizados em lagartas de D. saccharalis. As maiores concentrações de conídios de M. anisopliae e B. bassiana foram encontradas nos tratamentos com arroz parboilizado tipo 1, arroz tipo 1 e 2, farinha de milho amarela, fubá e trigo moído e a viabilidade dos conídios produzidos superou os 94%. Quanto maior o tempo de exposição à radiação menor foi o número de conídios viáveis; também ocorreu perda significativa da viabilidade dos conídios quando expostos à temperatura de 35o C. Os fungos foram patogênicos para D. saccharalis.

Compatibilidade de lecan icillium lecanii (hyphomycetes), em condições de laboratório e estufa, aos agrotóxicos utilizados na cultura do crisântemo

ABSTRACT The objective of this study was to evaluate, under laboratory and greenhouse conditions, the compatibility of Lecanicillium lecanii, JAB 02, with pesticides. The compatibility in the laboratory was verified adding pesticides to the PDA media and evaluating the parameters of vegetative growth, sporulation and viability of the entomopathogen. In the greenhouse, L. lecanii were sprayed on chrysanthemum plants after the spraying of the pesticides; subsequently, four leaves of each treatment were collected and washed to obtain a suspension that was transfered to PDA medium to evaluate the growth of the fungus colonies in laboratory conditions. The acaricides and most of insecticides were compatible to the isolate JAB 02, except the insecticide Thiodan®, which was classified as very toxic. All the evaluated fungicides were classified as toxic or very toxic. In greenhouse assays, the fungicide Rovral® produced a number of grown colonies similar to those of the control, not affecting fungus growth. This compatibility was also shown by the products Alto 100® and Thiodan® in some of the evaluated periods. Rovral® and Alto 100® can be used, combined, when applied before the entomopathogen.

RESUMO Este trabalho teve como objetivo avaliar, em condições de laboratório e estufa, a compatibilidade de Lecanicillium lecanii, JAB 02, com agrotóxicos. A compatibilidade em laboratório foi verificada misturando-se os agrotóxicos ao meio de cultura BDA e os parâmetros utilizados para a avaliação foram: crescimento vegetativo, esporulação e viabilidade do entomopatógeno. Em condições de estufa, as suspensões dos agrotóxicos e, posteriormente, a do fungo foram pulverizadas em plantas de crisântemo. Após a aplicação, folhas foram coletadas e lavadas obtendo-se uma suspensão que foi plaqueada em BDA, sendo então avaliado o crescimento das colônias do fungo. Verificou-se, em laboratório, que a maioria dos inseticidas e os acaricidas foram compatíveis ao fungo, com exceção do inseticida Thiodan® classificado como muito tóxico. Todos os fungicidas testados foram classificados como tóxico e muito tóxico. Em condições de estufa, no tratamento com o fungicida Rovral® foi observado um número de colônias fúngicas formadas compatível com a testemunha, não afetando o desenvolvimento do fungo. Essa compatibilidade repetiu-se para os produtos Alto 100® e Thiodan® em alguns dos tempos avaliados. Os produtos Rovral® e Alto 100® podem ser utilizados, conjuntamente, quando aplicados previamente ao entomopatógeno.

Efeito de agrotóxicos utilizados na cultura da goiaba sobre o fungo entomopatogênico beauveria bassiana (bals.) vuill

ABSTRACT The effect of 8 insecticides and 12 fungicides used in guava crops was evaluated on the fungus Beauveria bassianain vitro and under semi-field conditions. The effect in the laboratory was verified adding pesticides to the PDA media, according to the recommended concentrations and evaluating the parameters of mean diameter of colonies, the number of conidia produced and the virulence on the Galleria mellonella. For the semi-field tests, the suspensions of the chemical products and of the fungi were sprayed on guava plants in three different ways: a) the fungi were sprayed on after the spraying of the chemical products; b) chemical products were sprayed on after the spraying of the fungi; c) chemical products and fungi were sprayed on all together. Subsequently, leaves were collected and washed to obtain a suspension that was transferred to PDA medium to evaluate the sporulation, viability and virulence of the fungus. The results sowed that: in vitro, only the Actara 250 WG was compatible with the fungus, the other products being classified as moderately compatible, toxic and very toxic. For the semifield tests, the manner of implementation interfered in the development of the fungus, and Cuprozeb PM, Manzate 800 PM and Cerconil PM did not affect the entomopathogen in any of the parameters measured, so are indicated for use in a program of integrated pest management. In tests of virulence, the viability of the conidia was not affected, the fungus being pathogenic to G. mellonella.

RESUMO O efeito de oito inseticidas e doze fungicidas, utilizados na cultura da goiaba, foi avaliado sobre o fungo Beauveria bassiana sob condições in vitro e de semi-campo. Em laboratório, o efeito foi verificado misturando-se os agrotóxicos ao meio de cultura BDA, nas concentrações recomendadas, e os parâmetros avaliados foram o diâmetro médio das colônias, o número de conídios produzidos e a virulência sobre Galleria mellonella. Em condições de semi-campo, preparações dos produtos químicos e do entomopatógeno foram pulverizadas em mudas de goiaba de três diferentes formas, a saber: primeiramente os produtos químicos e depois o fungo; primeiro o fungo e posteriormente o produto químico e os dois simultaneamente. Após a aplicação, folhas foram coletadas e lavadas obtendo-se uma suspensão que foi plaqueada em BDA para avaliação da esporulação, viabilidade e virulência dos conídios dos fungos. Os resultados mostraram que, in vitro, somente o inseticida Actara 250 WG foi compatível com o fungo e os demais produtos foram classificados como moderadamente compatível, tóxicos e muito tóxicos. Para os testes de semicampo, a forma de aplicação interferiu no desenvolvimento do fungo e, além disso, Cuprozeb PM, Manzate 800 PM e Cerconil PM não afetaram o entomopatógeno em nenhum dos parâmetros avaliados, portanto são indicados para serem utilizados num programa de manejo integrado de pragas. Nos testes de virulência, os conídios não tiveram sua viabilidade afetada, mostrando-se patogênicos a traça-dos-favos, G. mellonella.