Toxicity and oxidative stress of canine mesenchymal stromal cells from adipose tissue in different culture passages

Abstract: Stem cells in regenerative therapy have received attention from researchers in recent decades. The culture of these cells allows studies about their behavior and metabolism. Thus, cell culture is the basis for cell therapy and tissue engineering researches. A major concern regarding the use of cultivated stem cell in human or veterinary clinical routine is the risk of carcinogenesis. Cellular activities require a balanced redox state. However, when there is an imbalance in this state, oxidative stress occurs. Oxidative stress contributes to cytotoxicity, which may result in cell death or genomic alterations, favoring the development of cancer cells. The aim of this study was to determine whether there are differences in the behavior of cultured mesenchymal stem cells from canine adipose tissue according to its site of collection (omentum and subcutaneous) evaluating the rate of proliferation, viability, level of oxidative stress and cytotoxicity over six passages. For this experiment, two samples of adipose tissue from subcutaneous and omentum where taken from a female dog corpse, 13 years old, Pitbull. The results showed greater levels of oxidative stress in the first and last passages of both groups, favoring cytotoxicity and cell death.

Resumo: O uso de células-tronco como terapia regenerativa tem recebido atenção de pesquisadores nas últimas décadas. A possibilidade de cultivá-las permite o estudo de seu comportamento e metabolismo. Assim, o cultivo celular representa a base para pesquisas de terapia celular e engenharia de tecidos. Uma das principais preocupações relativa ao uso de células-tronco cultivas na rotina clínica humana ou veterinária é a reprogramação dessas células em tumores benignos ou malignos. As atividades celulares necessitam de um estado redox balanceado e quando há algum desequilíbrio nessas reações ocorre o estresse oxidativo. O quadro de estresse oxidativo contribui pra a citotoxicidade podendo resultar em morte celular e até mesmo em alterações genômicas e ocorrência de células cancerígenas. O objetivo deste trabalho foi verificar se há diferenças no comportamento de células-tronco mesenquimais estromais de tecido adiposo de cão de acordo com o seu tecido de coleta (omento e subcutâneo) avaliando o cultivo dessas células quanto a sua taxa de proliferação, viabilidade, estresse oxidativo e citotoxicidade ao longo de seis passagens. Para a execução deste experimento foram utilizadas duas amostras de tecido adiposo coletas do subcutâneo e omento do cadáver de um cão, fêmea, 13 anos de idade, da raça Pitbull. O cadáver era oriundo do Hospital Veterinário Universitário e sofreu eutanásia devido a complicações no seu quadro de cardiomiopatia. As duas amostras foram encaminhadas para o isolamento e cultura celular. Os resultados mostraram que a primeira e última passagem em ambos os grupos são as passagens mais submetidas ao estresse oxidativo ficando mais sujeitas à citotoxicidade.

Toxicity and oxidative stress of canine mesenchymal stromal cells from adipose tissue in different culture passages

Abstract: Stem cells in regenerative therapy have received attention from researchers in recent decades. The culture of these cells allows studies about their behavior and metabolism. Thus, cell culture is the basis for cell therapy and tissue engineering researches. A major concern regarding the use of cultivated stem cell in human or veterinary clinical routine is the risk of carcinogenesis. Cellular activities require a balanced redox state. However, when there is an imbalance in this state, oxidative stress occurs. Oxidative stress contributes to cytotoxicity, which may result in cell death or genomic alterations, favoring the development of cancer cells. The aim of this study was to determine whether there are differences in the behavior of cultured mesenchymal stem cells from canine adipose tissue according to its site of collection (omentum and subcutaneous) evaluating the rate of proliferation, viability, level of oxidative stress and cytotoxicity over six passages. For this experiment, two samples of adipose tissue from subcutaneous and omentum where taken from a female dog corpse, 13 years old, Pitbull. The results showed greater levels of oxidative stress in the first and last passages of both groups, favoring cytotoxicity and cell death.

Resumo: O uso de células-tronco como terapia regenerativa tem recebido atenção de pesquisadores nas últimas décadas. A possibilidade de cultivá-las permite o estudo de seu comportamento e metabolismo. Assim, o cultivo celular representa a base para pesquisas de terapia celular e engenharia de tecidos. Uma das principais preocupações relativa ao uso de células-tronco cultivas na rotina clínica humana ou veterinária é a reprogramação dessas células em tumores benignos ou malignos. As atividades celulares necessitam de um estado redox balanceado e quando há algum desequilíbrio nessas reações ocorre o estresse oxidativo. O quadro de estresse oxidativo contribui pra a citotoxicidade podendo resultar em morte celular e até mesmo em alterações genômicas e ocorrência de células cancerígenas. O objetivo deste trabalho foi verificar se há diferenças no comportamento de células-tronco mesenquimais estromais de tecido adiposo de cão de acordo com o seu tecido de coleta (omento e subcutâneo) avaliando o cultivo dessas células quanto a sua taxa de proliferação, viabilidade, estresse oxidativo e citotoxicidade ao longo de seis passagens. Para a execução deste experimento foram utilizadas duas amostras de tecido adiposo coletas do subcutâneo e omento do cadáver de um cão, fêmea, 13 anos de idade, da raça Pitbull. O cadáver era oriundo do Hospital Veterinário Universitário e sofreu eutanásia devido a complicações no seu quadro de cardiomiopatia. As duas amostras foram encaminhadas para o isolamento e cultura celular. Os resultados mostraram que a primeira e última passagem em ambos os grupos são as passagens mais submetidas ao estresse oxidativo ficando mais sujeitas à citotoxicidade.

Substituição dos ligamentos cruzados cranial e caudal em cães por duplo implante de polipropileno

The objective of this study is to point out an effective alternative in the treatment of the cranial and caudal cruciate ligaments rupture in dogs, with no association of external immobilization. Six dogs with rupture of both cruciate ligaments were included in the present study. Stifle joint was surgically stabilized by an intracapsular technique, using two polypropylene synthetic implants. The animals returned to full member support in 11.8±3.5 days and did not sustain any joint instability degree after 0, 30 and 90 days of clinical evaluation after surgery. At 90 days after surgery, it became apparent lameness in any of the six patients. It was concluded that the technique employed caused total joint stability in the absence of caudal and cranial cruciate ligaments.

O objetivo deste trabalho é salientar uma alternativa eficaz no tratamento da ruptura dos ligamentos cruzados cranial e caudal de cães, sem associação de imobilização externa. Foram atendidos seis animais portadores de ruptura de ambos os ligamentos cruzados. Optou-se pela correção cirúrgica intracapsular, utilizando-se dois implantes sintéticos de polipropileno, para a estabilização da articulação. Os pacientes retornaram ao apoio completo do membro em 11,8±3,5 dias e não mantiveram instabilidade articular, após 0, 30 e 90 dias de avaliação clínica pós-operatória. Aos 90 dias após a cirurgia, não se percebeu claudicação nos pacientes avaliados. Concluiu-se que a técnica utilizada promoveu total estabilidade articular na ausência dos ligamentos cruzados cranial e caudal.

Substituição dos ligamentos cruzados cranial e caudal em cães por duplo implante de polipropileno

The objective of this study is to point out an effective alternative in the treatment of the cranial and caudal cruciate ligaments rupture in dogs, with no association of external immobilization. Six dogs with rupture of both cruciate ligaments were included in the present study. Stifle joint was surgically stabilized by an intracapsular technique, using two polypropylene synthetic implants. The animals returned to full member support in 11.8±3.5 days and did not sustain any joint instability degree after 0, 30 and 90 days of clinical evaluation after surgery. At 90 days after surgery, it became apparent lameness in any of the six patients. It was concluded that the technique employed caused total joint stability in the absence of caudal and cranial cruciate ligaments.

O objetivo deste trabalho é salientar uma alternativa eficaz no tratamento da ruptura dos ligamentos cruzados cranial e caudal de cães, sem associação de imobilização externa. Foram atendidos seis animais portadores de ruptura de ambos os ligamentos cruzados. Optou-se pela correção cirúrgica intracapsular, utilizando-se dois implantes sintéticos de polipropileno, para a estabilização da articulação. Os pacientes retornaram ao apoio completo do membro em 11,8±3,5 dias e não mantiveram instabilidade articular, após 0, 30 e 90 dias de avaliação clínica pós-operatória. Aos 90 dias após a cirurgia, não se percebeu claudicação nos pacientes avaliados. Concluiu-se que a técnica utilizada promoveu total estabilidade articular na ausência dos ligamentos cruzados cranial e caudal.

OSTECTOMIA BILATERAL TOTAL DO ARCO ZIGOMÁTICO NA CORREÇÃO DE LUXAÇÃO E BLOQUEIO MANDIBULAR CRÔNICO EM FELINO: RELATO DE CASO

Travamento de mandíbula ocorre quando o processo coronóide se prende em baixo do arco zigomático, sendo raro em cães e gatos. As causas mais comuns desta afecção são através de luxação temporomandibular, que pode ser traumática, associada ou não a lesões mandibulares e por displasia temporomandibular. O objetivo deste trabalho é relatar um caso de luxação bilateral crônica da articulação temporomandibular em um felino, onde o tratamento cirúrgico foi através de ostectomia bilateral total do arco zigomático.

Retrospective study on the incidence of spinal injuries by computed tomographic scan. Part II: Thoracolumbar and lumbosacral

For vertebromedullary injuries, epidemiological knowledge is essential to guide the choice of the most effective diagnostic method. The objective of this retrospective study is to trace the epidemiological profile of thoracolumbar and lumbosacral spine lesions diagnosed by computed tomography scan. A compilation of CT scan reports for the aforementioned regions performed in a comercial diagnostic center from 04/01/2017 to 04/30/2020, contrasted and non-contrasted, from routine, was performed in order to list the most common lesions, breeds and locations. There were 1164 CT scans performed in the period evaluated, 670 (57,56%) for the spine, with 601 reports accessed (89,7%), where the regions mentioned here added up to 439 studies (73,05%). In both regions, male French Bulldog dogs had the most injuries. For the thoracolumbar region, disk mineralization, followed by extrusion, were the most frequent injuries, while the site was T12-13 and the mean age 6,5±3,63 years old. In the lumbosacral, disk protrusion was most frequent, the most affected site was L7-S1 and age 6,65±3,79 years. It was concluded that the spine is the main target of CT scans, and that lesions related to the intervertebral disk were the main ones identified, with chondrodystrophic animals being more predisposed to injury.

Para lesões vertebromedulares é indispensável o conhecimento epidemiológico para direcionar a escolha do método diagnóstico mais eficaz. O objetivo desse estudo retrospectivo é traçar o perfil epidemiológico das lesões em coluna vertebral toracolombar e lombossacral diagnosticadas através de exame tomográfico. Realizou-se a compilação de laudos de tomografias computadorizadas para as referidas regiões realizadas em centro diagnóstico comercial, entre 01/04/2017 a 30/04/2020, contrastadas e não-contrastadas, provenientes da rotina, a fim de relacionar as lesões, raças e locais mais comuns. Foram realizados 1164 exames tomográficos no período avaliado, sendo 670 (57,56%) para a coluna, com 601 laudos acessados (89,7%), onde as regiões aqui referidas somaram 439 estudos (73,05%). Em ambas as regiões, os cães Bulldog Francês machos foram os que mais apresentaram lesões. Para a região toracolombar, a mineralização de disco, seguida pela extrusão, foram as lesões mais frequentes, enquanto o local foi T12-13 e a média de idade 6,5±3,63 anos. Na lombossacral, a protusão de disco foi mais frequente, o local mais afetado foi L7-S1 e idade de 6,65±3,79 anos. Concluiu-se que a coluna vertebral é o principal alvo de tomografias, e que as lesões relacionadas ao disco intervertebral foram as principais identificadas, sendo os animais condrodistróficos mais predispostos a lesões.