Resumo
Salmonella enterica sorovar Heidelberg (SH) frequentemente é isolada em coletas de amostras de frango de corte a campo, sua elevada resistência ao ambiente é um fator que traz prejuízos a toda cadeia produtiva. Mesmo com a intensificação de procedimentos de biosseguridade nas granjas, há pressão por parte da indústria para a eliminação deste patógeno. Comercialmente há diversos produtos, a base de amoníacos, utilizados para a limpeza e desinfecção do galpão, contudo, são de alta toxicidade tanto para o ambiente e animais quanto também para as pessoas que aplicam. A busca por agentes desinfetantes alternativos aos usuais faz com que diversos estudos avaliem a ação de óleos essenciais (OEs) frente a distintas bactérias. Por conta disto, o objetivo deste trabalho foi avaliar, in vitro, o efeito do OE de Thymus vulgaris (OET) e timol em SH isoladas de frango de corte, visando seu uso como agente antimicrobiano aditivo para rações. De acordo com as análises cromatográficas, os componentes majoritários OET foram: timol (47,3%), p-cinemo (26,8%) e linalol (5,2%). Para os ensaios antibacterianos in vitro foi utilizada a técnica de quantificação de células planctônicas viáveis em ensaios de microdiluição em caldo. Foram utilizadas quatro diferentes concentrações de OET (0,1%, 0,2%, 0,4% e 0,8%, v/v) contra cinco isolados de SH de frango de corte e ATCC 8326. Além disto, foi avaliada também a atividade do monoterpeno timol nas concentrações de 0,023%, 0,047%, 0,071% e 0,094% (v/v). Para a avaliação da citotoxicidade, foi utilizada a técnica de MTT em células intestinais IEC-6 e fibroblastos NCTC em concentrações de 0,0625%, 0,125%, 0,25% e 0,5% de OET e timol, em 24h, para a avaliação do IC50. A partir da concentração de 0,2% de OET houve atividade bactericida, uma vez que não ocorreu crescimento de unidades formadoras de colônias em todas as bactérias testadas. Já o timol na concentração de 0,094% controlou 83,33% das bactérias, sendo menos eficaz que o óleo. O OET apresentou IC50 de 0,14% e 1,22% enquanto para timol o IC50 foi de 0,068% e 0,001%, para as células IEC-6 e NCTC, respectivamente. Concui-se que ambos compostos testados apresentaram certa citotoxicidade in vitro em células intestinais, limitando seu uso como aditivo para raçoes. Além disso, o timol sozinho não foi capaz de controlar os isolados estudados e teve uma citotoxicidade in vitro maior quando comparado ao OE. Por outro lado, o OET apresentou baixa citotoxicidade em fibroblastos e demonstrou potencial capacidade de ação para eliminação in vitro de cepas de SH na concentração de 0,2%, sugerindo a possibilidade de utilização deste composto na sanitização de estruturas dos aviários contaminados com este sorovar.
Salmonella enterica serovar Heidelberg (SH) is often isolated from samples in broiler chickens farms. Its environmental resistance is a factor that harms the entire meat production chain. Although there is a higher intensification in farms biosecurity procedures, the pressure from the industry to eliminate this pathogen is increasing once salmonellosis can be a problem to the costumers. There are several products with ammonia in its composition that are used for the disinfection of poultry shed structures. These products usually have high toxicity to the environment, the animals, and people who manipulate it. On the other hand, research on essential oils (EO) and its bacterial activity has been increasing through the years. The objective of this study was to evaluate the in vitro effects of Thymus vulgaris essential oil (TEO), popularly known as thyme, on Salmonella enterica sorovar Heidelberg. Qualitative analysis of the oil revealed thymol (47,3%), p-Cimene (26.8%) and linalool (5.2%) as major compounds. Viable plankton cell quantification technique was used for in vitro antibacterial assays. Four different concentrations of TEO (0.1%, 0.2%, 0.4% and 0.8%) were tested in 5 strains of SH isolated from broiler chickens farms plus ATCC 8623. In addition, the activity of the monoterpene thymol at concentrations of 0.023%, 0.047%, 0.071% and 0.094% was also evaluated. For the cytotoxicity assay, MTT technique was used in IEC-6 intestinal cells and NCTC fibroblasts in concentrations of 0.0625%, 0.125%, 0.25% and 0.5% of TEO and thymol, in 24h, to find the IC50. Antibacterial activity was found from 0.2% of TEO in all SH strains tested. Thymol at 0.094% controlled 83.33% of the strains, not being as effective as TEO. TEO cytotoxicity assay showed IC50of 0.14% and 1.22% while thymol presented IC50 of 0.068% and 0.001% for cells IEC-6 and NCTC, respectively. The monoterpene had higher cytotoxicity and did not control all strains of SH. Moreover, TEO presented low cytotoxicity in fibroblasts and demonstrated potential antibacterial activity 0.2%. These results suggest the possible use of TEO as a substitute for commercial products used for the disinfection of poultry sheds that were challenged by these bacteria.