Resumo
O presente estudo teve por objetivo avaliar a fertilidade do sêmen convencional e sexado utilizado em vacas Nelore multíparas que receberam tratamento com PGF2 no momento da inseminação artificial (IA) e expressaram diferentes intensidades de comportamento de estro (com ou sem expressão de estro) em um protocolo de IATF. Adicionalmente o estudo avaliou laboratorialmente as amostras de sêmen sexado e convencional a fim de comparar as características seminais in vitro com os resultados de fertilidade obtidos a campo. No experimento a campo, foram avaliadas as taxas de concepção (TC) de vacas multíparas lactantes da raça Nelore locadas em duas fazendas comerciais de gado de corte (fazenda 1: n=348 e fazenda 2: n=355). Em ambas as fazendas, as vacas foram submetidas ao mesmo protocolo de IATF. Quarenta e oito hs após a remoção do dispositivo de Progesterona (dia 11; D11), a IA foi realizada com sêmen convencional ou sexado de dois touros diferentes, de forma aleatória. Adicionalmente, no momento da IA, as vacas receberam, aleatoriamente, 12,5 mg im de dinoprost trometamina (Dinoprost; Lutalyse®; tratamento PGF) ou 2,5 mL im de soro fisiológico estéril (Controle). O comportamento estral foi aferido no D11 (momento da IATF) pela ativação do dispositivo estrotect®. Os dados foram analisados por regressão logística a um grau de significância de 5%. No experimento laboratorial, foram avaliadas amostras de sêmen sexado e convencional dos dois touros (touros 1 e 2), utilizados na fazenda 1 deste estudo. Foram analisados parâmetros convencionais de qualidade espermática, avaliação da integridade de membrana plasmática (pelo teste hiposmótico), análise computadorizada do sêmen (CASA) e avaliação de morfometria e parâmetros da cromatina espermática pelo Azul de Toluidina. Os dados laboratoriais foram analisados por ANOVA considerando 5% de significância. De acordo com os resultados do estudo a campo, a TC geral foi de 32,8% na Fazenda 1 e 42,3% na Fazenda 2 (P = 0,01). Escore de condição corporal (P = 0,02), comportamento estral (P=0,01) e tipo de sêmen (P <0,001) foram fatores que afetaram a TC. Vacas inseminadas com sêmen convencional tiveram 2,73 vezes mais probabilidade de tornar-se gestantes do que vacas inseminadas com sêmen sexado e vacas exibindo estro tiveram 2,5 vezes mais chance de gestação do que vacas que não exibiram estro. Nenhum efeito do tratamento com PGF2 (P=0,67) foi detectado em vacas que receberam sêmen convencional ou sexado. Ainda assim, foi detectada tendência estatística de interação (P=0,08) entre o tratamento (PGF ou controle) e o comportamento estral (estro ou não). O tratamento com PGF2 no momento da IA aumentou em 70% a TC das vacas que não expressaram estro. Nas análises laboratoriais, o sêmen convencional de ambos os touros apresentou maior (P<0,05) motilidade visual, concentração espermática, espermatozoides móveis na palheta e integridade de membrana plasmática em relação ao sêmen sexado. Nas avaliações pelo sistema CASA, motilidade total (MT) e progressiva (MP) foram significativamente menores nas amostras de sêmen sexado em relação ao convencional no touro 1 (P<0.05). A amplitude de deslocamento lateral de cabeça (ALH) foi maior (P<0.05) no sêmen sexado comparado ao sêmen convencional nos dois animais avaliados. Os resultados de análise morfométrica demonstraram que o touro 2 apresentou menor elipsidade nos espermatozoides sexados em relação ao sêmen convencional (P<0,05), enquanto no touro 1 foi observado menor Fourier1 no sêmen sexado em relação ao convencional. Não foram observadas diferenças na descompactação e heterogeneidade do DNA, quando comparados sêmen convencional e sexado em ambos os touros. Concluiu-se que a fertilidade do sêmen sexado foi menor do que o sêmen convencional, independente do tratamento com PGF2. Porém, vacas que não apresentaram estro e receberam o tratamento com PGF2 no momento da IA demonstraram TC semelhante às vacas em estro, independentemente do tipo de sêmen. Além disso, o processo de sexagem prejudicou diversas características de viabilidade espermática, bem como parâmetros cinéticos e morfométricos dos espermatozoides que estão relacionados com menor capacidade de fertilização deste tipo de sêmen.
The present study aimed to evaluate the fertility of conventional and sexed semen used in multiparous Nelore cows that received PGF2 treatment at the moment of AI and expressed different intensities of estrus behavior (estrus or no estrus expression) in timed-AI protocol. Additionally, laboratory assessment of sexed and conventional semen was performed in order to compare in vitro sperm characteristics with field fertility results. In the field experiment, conception rates (CR) of lactating multiparous Nelore cows from two commercial beef farms (farm 1: n=348 and farm 2: n=355) were evaluated. The animals were submitted to the same timed-AI protocol and 48 hs after the progesterone device removal (day 11; D11), AI was randomly performed with conventional or sexed semen from two different bulls. Additionally, at the time of AI, cows randomly received 12.5 mg im of dinoprost tromethamine (Dinoprost; Lutalyse®; PGF treatment) or 2.5 mL im of sterile saline (Control). Estrus behavior was measured at D11 (moment of timed-AI) by estrotect® device. The data were analyzed by logistic regression at 5% of significance level. In the laboratory experiment, sexed and conventional semen samples from the bulls (bulls 1 and 2) used in farm 1 were evaluated. Conventional sperm quality parameters, plasma membrane integrity (hyposmotic test), computerized semen analysis (CASA) and sperm morphometry and chromatin (Toluidine Blue) assessment were analyzed. The laboratory data were analyzed by ANOVA at 5% of significance. The overall CR was 32.8% in Farm 1 and 42.3% in Farm 2 (P = 0.01). Body condition score (P = 0.02), estrous behavior (P = 0.01) and semen type (P <0.001) were factors affecting CR. Cows inseminated with conventional semen were 2.73 times more likely to become pregnant than cows inseminated with sexed semen and cows exhibiting estrus were 2.5 times more likely to become pregnant than cows not exhibiting estrus. No effect of PGF2 treatment (P=0.67) was detected in cows that received conventional or sexed semen. Still, a statistical tendency of interaction (P=0.08) was detected between treatment (PGF or control) and estrous behavior (estrus or no estrus). Treatment with PGF2 at the time of AI increased by 82% the CR of cows with no estrus behavior. In laboratory analyses, conventional semen from both bulls demonstrated higher (P<0.05) visual motility, sperm concentration, number of motile sperm in the straw and plasma membrane integrity compared to sexed semen. In the CASA assessment, total