Resumo
O objetivo deste estudo foi avaliar a ação de duas concentrações de medroxi-progesterona (MAP), associadas ou não ao benzoato de estradiol (BE), sobre o desenvolvimento folicular e o mecanismo celular de liberação de PGF2?. No primeiro experimento foram utilizadas 20 vacas da raça Hereford pré-sincronizadas com análogo sintético de PGF2 alfa, divididas aleatoriamente nos seguintes grupos: MAP250BE: (n=4) aplicação de um pessário intra-vaginal contendo 250 mg de MAP, associado a uma injeção intramuscular de 5 mg de BE; MAP250: (n=5) pessário intra-vaginal contendo 250 mg de MAP; MAP500BE: (n=4) pessário intra-vaginal contendo 500 mg de MAP, associado a uma injeção intramuscular de 5 mg de BE; MAP500: (n=4) pessário intra-vaginal contendo 500 mg de MAP e, no grupo CONTROLE (GC), nenhum tratamento hormonal (n=3). Os animais estavam nos dias sete e oito do ciclo estral (dia 0=cio) no início dos tratamentos. Todos os grupos foram submetidos a sete avaliações ultra-sonográficas durante 15 dias, com intervalo de aproximadamente 48 horas entre cada avaliação. Os pessários intra-vaginais contendo MAP foram mantidos por um período de sete dias. Após 24 h destes, as vacas foram observadas duas vezes por dia para detecção de estro, durante oito dias. Para o segundo experimento, utilizou-se 18 vacas multíparas pré-sincronizadas. No primeiro grupo (tratado) foram administradas 5 mg de BE e seis horas após 50 UI de ocitocina (OC). No segundo (controle) foram aplicadas apenas 50 UI de ocitocina. Duas horas após a aplicação da OC foram coletados fragmentos endometriais e carunculares nos dias quatro, 13 e 17 do ciclo estral (dia 0=cio). O material foi armazenado em RNA Latter ® (Qiagen) e posteriormente congelado em nitrogênio líquido. As extrações de RNA foram realizadas com Trizol® (Invitrogen) e posteriormente submetido à reação de transcriptase reversa utilizando o kit onmiscript® (Qiagen). O cDNA foi amplificado através de iniciadores específicos para COX-2, RP4 e GAPDH. No primeiro experimento, até a segunda avaliação não houve diferença entre o diâmetro do maior folículo entre os tratamentos e GC. Na terceira avaliação, o diâmetro do maior folículo (média de 13,4 a 17,7 mm) foi significativamente menor do que o observado no GC (média de 22,4 mm; P<0,05), demonstrando uma redução do crescimento folicular em conseqüência dos tratamentos. No entanto, na quarta avaliação, o tamanho médio do maior folículo nos grupos MAP250 (23,9 mm) e MAP500BE (18,8 mm) foi similar aos 23,7 mm de diâmetro obtidos nos animais do GC, enquanto houve uma redução no desenvolvimento do maior folículo nos animais dos grupos MAP250BE (16,6 mm) e MAP500 (15,1 mm; P<0,05). Após a retirada do MAP, o diâmetro do maior folículo não diferiu entre as vacas dos tratamentos e GC (13,7 mm a 18,4 mm; P>0,05). A maioria dos animais manifestou cio (15/20) entre sete e oito dias após a retirada do MAP, correspondendo esse período aos dias 21 e 22 do ciclo estral. No segundo experimento os resultados foram avaliados através da medida da densidade ótica utilizando o software Alfa DigDoc 1000. Não houve diferença significativa na expressão de COX-2 e RP4 entre o grupo CONTROLE e TRATADO (P>0,05) nos dois tecidos estudados e nem nos diferentes dias do ciclo estral. Os resultados indicam que, mesmo em diferentes fases do ciclo, o BE não foi capaz de aumentar a expressão de COX-2, imprescindível na produção de PGs. O MAP 500 mg ou 250 mg associado ao BE (5 mg) suprimi o desenvolvimento folic