A threefold approach including quantum chemical, molecular docking and molecular dynamic studies to explore the natural compounds from Centaurea jacea as the potential inhibitors for COVID-19 / Uma abordagem tríplice incluindo química quântica, docking molecular e estudos dinâmicos moleculares para explorar os compostos naturais de Centaurea jacea como inibidores potenciais para Covid-19

In the current report, we studied the possible inhibitors of COVID-19 from bioactive constituents of Centaurea jacea using a threefold approach consisting of quantum chemical, molecular docking and molecular dynamic techniques. Centaurea jacea is a perennial herb often used in folk medicines of dermatological complaints and fever. Moreover, anticancer, antioxidant, antibacterial and antiviral properties of its bioactive compounds are also reported. The Mpro (Main proteases) was docked with different compounds of Centaurea jacea through molecular docking. All the studied compounds including apigenin, axillarin, Centaureidin, Cirsiliol, Eupatorin and Isokaempferide, show suitable binding affinities to the binding site of SARS-CoV-2 main protease with their binding energies -6.7 kcal/mol, -7.4 kcal/mol, -7.0 kcal/mol, -5.8 kcal/mol, -6.2 kcal/mol and -6.8 kcal/mol, respectively. Among all studied compounds, axillarin was found to have maximum inhibitor efficiency followed by Centaureidin, Isokaempferide, Apigenin, Eupatorin and Cirsiliol. Our results suggested that axillarin binds with the most crucial catalytic residues CYS145 and HIS41 of the Mpro, moreover axillarin shows 5 hydrogen bond interactions and 5 hydrophobic interactions with various residues of Mpro. Furthermore, the molecular dynamic calculations over 60 ns (6×106 femtosecond) time scale also shown significant insights into the binding effects of axillarin with Mpro of SARS-CoV-2 by imitating protein like aqueous environment. From molecular dynamic calculations, the RMSD and RMSF computations indicate the stability and dynamics of the best docked complex in aqueous environment. The ADME properties and toxicity prediction analysis of axillarin also recommended it as safe drug candidate. Further, in vivo and in [...].

No presente relatório, estudamos os possíveis inibidores de Covid-19 de constituintes bioativos de Centaurea jacea usando uma abordagem tripla que consiste em técnicas de química quântica, docking molecular e dinâmica molecular. Centaurea jacea é uma erva perene frequentemente usada em remédios populares de doenças dermatológicas e febre. Além disso, as propriedades anticâncer, antioxidante, antibacteriana e antiviral de seus compostos bioativos também são relatadas. A Mpro (proteases principais) foi acoplada a diferentes compostos de Centaurea jacea por meio de docking molecular. Todos os compostos estudados, incluindo apigenina, axilarina, Centaureidina, Cirsiliol, Eupatorina e Isokaempferide, mostram afinidades de ligação adequadas ao sítio de ligação da protease principal SARS-CoV-2 com suas energias de ligação -6,7 kcal / mol, -7,4 kcal / mol, - 7,0 kcal / mol, -5,8 kcal / mol, -6,2 kcal / mol e -6,8 kcal / mol, respectivamente. Dentre todos os compostos estudados, a axilarina apresentou eficiência máxima de inibidor, seguida pela Centaureidina, Isokaempferida, Apigenina, Eupatorina e Cirsiliol. Nossos resultados sugeriram que a axilarina se liga aos resíduos catalíticos mais cruciais CYS145 e HIS41 do Mpro, além disso a axilarina mostra 5 interações de ligações de hidrogênio e 5 interações hidrofóbicas com vários resíduos de Mpro. Além disso, os cálculos de dinâmica molecular em uma escala de tempo de 60 ns (6 × 106 femtossegundos) também mostraram percepções significativas sobre os efeitos de ligação da axilarina com Mpro de SARS-CoV-2 por imitação de proteínas como o ambiente aquoso. A partir de cálculos de dinâmica molecular, os cálculos RMSD e RMSF indicam a estabilidade e dinâmica do melhor complexo ancorado em ambiente [...].

A threefold approach including quantum chemical, molecular docking and molecular dynamic studies to explore the natural compounds from Centaurea jacea as the potential inhibitors for COVID-19

Abstract In the current report, we studied the possible inhibitors of COVID-19 from bioactive constituents of Centaurea jacea using a threefold approach consisting of quantum chemical, molecular docking and molecular dynamic techniques. Centaurea jacea is a perennial herb often used in folk medicines of dermatological complaints and fever. Moreover, anticancer, antioxidant, antibacterial and antiviral properties of its bioactive compounds are also reported. The Mpro (Main proteases) was docked with different compounds of Centaurea jacea through molecular docking. All the studied compounds including apigenin, axillarin, Centaureidin, Cirsiliol, Eupatorin and Isokaempferide, show suitable binding affinities to the binding site of SARS-CoV-2 main protease with their binding energies -6.7 kcal/mol, -7.4 kcal/mol, -7.0 kcal/mol, -5.8 kcal/mol, -6.2 kcal/mol and -6.8 kcal/mol, respectively. Among all studied compounds, axillarin was found to have maximum inhibitor efficiency followed by Centaureidin, Isokaempferide, Apigenin, Eupatorin and Cirsiliol. Our results suggested that axillarin binds with the most crucial catalytic residues CYS145 and HIS41 of the Mpro, moreover axillarin shows 5 hydrogen bond interactions and 5 hydrophobic interactions with various residues of Mpro. Furthermore, the molecular dynamic calculations over 60 ns (6×106 femtosecond) time scale also shown significant insights into the binding effects of axillarin with Mpro of SARS-CoV-2 by imitating protein like aqueous environment. From molecular dynamic calculations, the RMSD and RMSF computations indicate the stability and dynamics of the best docked complex in aqueous environment. The ADME properties and toxicity prediction analysis of axillarin also recommended it as safe drug candidate. Further, in vivo and in vitro investigations are essential to ensure the anti SARS-CoV-2 activity of all bioactive compounds particularly axillarin to encourage preventive use of Centaurea jacea against COVID-19 infections.

Resumo No presente relatório, estudamos os possíveis inibidores de Covid-19 de constituintes bioativos de Centaurea jacea usando uma abordagem tripla que consiste em técnicas de química quântica, docking molecular e dinâmica molecular. Centaurea jacea é uma erva perene frequentemente usada em remédios populares de doenças dermatológicas e febre. Além disso, as propriedades anticâncer, antioxidante, antibacteriana e antiviral de seus compostos bioativos também são relatadas. A Mpro (proteases principais) foi acoplada a diferentes compostos de Centaurea jacea por meio de docking molecular. Todos os compostos estudados, incluindo apigenina, axilarina, Centaureidina, Cirsiliol, Eupatorina e Isokaempferide, mostram afinidades de ligação adequadas ao sítio de ligação da protease principal SARS-CoV-2 com suas energias de ligação -6,7 kcal / mol, -7,4 kcal / mol, - 7,0 kcal / mol, -5,8 kcal / mol, -6,2 kcal / mol e -6,8 kcal / mol, respectivamente. Dentre todos os compostos estudados, a axilarina apresentou eficiência máxima de inibidor, seguida pela Centaureidina, Isokaempferida, Apigenina, Eupatorina e Cirsiliol. Nossos resultados sugeriram que a axilarina se liga aos resíduos catalíticos mais cruciais CYS145 e HIS41 do Mpro, além disso a axilarina mostra 5 interações de ligações de hidrogênio e 5 interações hidrofóbicas com vários resíduos de Mpro. Além disso, os cálculos de dinâmica molecular em uma escala de tempo de 60 ns (6 × 106 femtossegundos) também mostraram percepções significativas sobre os efeitos de ligação da axilarina com Mpro de SARS-CoV-2 por imitação de proteínas como o ambiente aquoso. A partir de cálculos de dinâmica molecular, os cálculos RMSD e RMSF indicam a estabilidade e dinâmica do melhor complexo ancorado em ambiente aquoso. As propriedades ADME e a análise de previsão de toxicidade da axilarina também a recomendaram como um candidato a medicamento seguro. Além disso, as investigações in vivo e in vitro são essenciais para garantir a atividade anti-SARS-CoV-2 de todos os compostos bioativos, particularmente a axilarina, para encorajar o uso preventivo de Centaurea jacea contra infecções por Covid-19.

A threefold approach including quantum chemical, molecular docking and molecular dynamic studies to explore the natural compounds from Centaurea jacea as the potential inhibitors for COVID-19 / Uma abordagem tríplice incluindo química quântica, docking molecular e estudos dinâmicos moleculares para explorar os compostos naturais de Centaurea jacea como inibidores potenciais para Covid-19

Abstract In the current report, we studied the possible inhibitors of COVID-19 from bioactive constituents of Centaurea jacea using a threefold approach consisting of quantum chemical, molecular docking and molecular dynamic techniques. Centaurea jacea is a perennial herb often used in folk medicines of dermatological complaints and fever. Moreover, anticancer, antioxidant, antibacterial and antiviral properties of its bioactive compounds are also reported. The Mpro (Main proteases) was docked with different compounds of Centaurea jacea through molecular docking. All the studied compounds including apigenin, axillarin, Centaureidin, Cirsiliol, Eupatorin and Isokaempferide, show suitable binding affinities to the binding site of SARS-CoV-2 main protease with their binding energies -6.7 kcal/mol, -7.4 kcal/mol, -7.0 kcal/mol, -5.8 kcal/mol, -6.2 kcal/mol and -6.8 kcal/mol, respectively. Among all studied compounds, axillarin was found to have maximum inhibitor efficiency followed by Centaureidin, Isokaempferide, Apigenin, Eupatorin and Cirsiliol. Our results suggested that axillarin binds with the most crucial catalytic residues CYS145 and HIS41 of the Mpro, moreover axillarin shows 5 hydrogen bond interactions and 5 hydrophobic interactions with various residues of Mpro. Furthermore, the molecular dynamic calculations over 60 ns (6×106 femtosecond) time scale also shown significant insights into the binding effects of axillarin with Mpro of SARS-CoV-2 by imitating protein like aqueous environment. From molecular dynamic calculations, the RMSD and RMSF computations indicate the stability and dynamics of the best docked complex in aqueous environment. The ADME properties and toxicity prediction analysis of axillarin also recommended it as safe drug candidate. Further, in vivo and in vitro investigations are essential to ensure the anti SARS-CoV-2 activity of all bioactive compounds particularly axillarin to encourage preventive use of Centaurea jacea against COVID-19 infections.

Resumo No presente relatório, estudamos os possíveis inibidores de Covid-19 de constituintes bioativos de Centaurea jacea usando uma abordagem tripla que consiste em técnicas de química quântica, docking molecular e dinâmica molecular. Centaurea jacea é uma erva perene frequentemente usada em remédios populares de doenças dermatológicas e febre. Além disso, as propriedades anticâncer, antioxidante, antibacteriana e antiviral de seus compostos bioativos também são relatadas. A Mpro (proteases principais) foi acoplada a diferentes compostos de Centaurea jacea por meio de docking molecular. Todos os compostos estudados, incluindo apigenina, axilarina, Centaureidina, Cirsiliol, Eupatorina e Isokaempferide, mostram afinidades de ligação adequadas ao sítio de ligação da protease principal SARS-CoV-2 com suas energias de ligação -6,7 kcal / mol, -7,4 kcal / mol, - 7,0 kcal / mol, -5,8 kcal / mol, -6,2 kcal / mol e -6,8 kcal / mol, respectivamente. Dentre todos os compostos estudados, a axilarina apresentou eficiência máxima de inibidor, seguida pela Centaureidina, Isokaempferida, Apigenina, Eupatorina e Cirsiliol. Nossos resultados sugeriram que a axilarina se liga aos resíduos catalíticos mais cruciais CYS145 e HIS41 do Mpro, além disso a axilarina mostra 5 interações de ligações de hidrogênio e 5 interações hidrofóbicas com vários resíduos de Mpro. Além disso, os cálculos de dinâmica molecular em uma escala de tempo de 60 ns (6 × 106 femtossegundos) também mostraram percepções significativas sobre os efeitos de ligação da axilarina com Mpro de SARS-CoV-2 por imitação de proteínas como o ambiente aquoso. A partir de cálculos de dinâmica molecular, os cálculos RMSD e RMSF indicam a estabilidade e dinâmica do melhor complexo ancorado em ambiente aquoso. As propriedades ADME e a análise de previsão de toxicidade da axilarina também a recomendaram como um candidato a medicamento seguro. Além disso, as investigações in vivo e in vitro são essenciais para garantir a atividade anti-SARS-CoV-2 de todos os compostos bioativos, particularmente a axilarina, para encorajar o uso preventivo de Centaurea jacea contra infecções por Covid-19.

A threefold approach including quantum chemical, molecular docking and molecular dynamic studies to explore the natural compounds from Centaurea jacea as the potential inhibitors for COVID-19 / Uma abordagem tríplice incluindo química quântica, docking molecular e estudos dinâmicos moleculares para explorar os compostos naturais de Centaurea jacea como inibidores potenciais para Covid-19

In the current report, we studied the possible inhibitors of COVID-19 from bioactive constituents of Centaurea jacea using a threefold approach consisting of quantum chemical, molecular docking and molecular dynamic techniques. Centaurea jacea is a perennial herb often used in folk medicines of dermatological complaints and fever. Moreover, anticancer, antioxidant, antibacterial and antiviral properties of its bioactive compounds are also reported. The Mpro (Main proteases) was docked with different compounds of Centaurea jacea through molecular docking. All the studied compounds including apigenin, axillarin, Centaureidin, Cirsiliol, Eupatorin and Isokaempferide, show suitable binding affinities to the binding site of SARS-CoV-2 main protease with their binding energies -6.7 kcal/mol, -7.4 kcal/mol, -7.0 kcal/mol, -5.8 kcal/mol, -6.2 kcal/mol and -6.8 kcal/mol, respectively. Among all studied compounds, axillarin was found to have maximum inhibitor efficiency followed by Centaureidin, Isokaempferide, Apigenin, Eupatorin and Cirsiliol. Our results suggested that axillarin binds with the most crucial catalytic residues CYS145 and HIS41 of the Mpro, moreover axillarin shows 5 hydrogen bond interactions and 5 hydrophobic interactions with various residues of Mpro. Furthermore, the molecular dynamic calculations over 60 ns (6×106 femtosecond) time scale also shown significant insights into the binding effects of axillarin with Mpro of SARS-CoV-2 by imitating protein like aqueous environment. From molecular dynamic calculations, the RMSD and RMSF computations indicate the stability and dynamics of the best docked complex in aqueous environment. The ADME properties and toxicity prediction analysis of axillarin also recommended it as safe drug candidate. Further, in vivo and in [...].(AU)

No presente relatório, estudamos os possíveis inibidores de Covid-19 de constituintes bioativos de Centaurea jacea usando uma abordagem tripla que consiste em técnicas de química quântica, docking molecular e dinâmica molecular. Centaurea jacea é uma erva perene frequentemente usada em remédios populares de doenças dermatológicas e febre. Além disso, as propriedades anticâncer, antioxidante, antibacteriana e antiviral de seus compostos bioativos também são relatadas. A Mpro (proteases principais) foi acoplada a diferentes compostos de Centaurea jacea por meio de docking molecular. Todos os compostos estudados, incluindo apigenina, axilarina, Centaureidina, Cirsiliol, Eupatorina e Isokaempferide, mostram afinidades de ligação adequadas ao sítio de ligação da protease principal SARS-CoV-2 com suas energias de ligação -6,7 kcal / mol, -7,4 kcal / mol, - 7,0 kcal / mol, -5,8 kcal / mol, -6,2 kcal / mol e -6,8 kcal / mol, respectivamente. Dentre todos os compostos estudados, a axilarina apresentou eficiência máxima de inibidor, seguida pela Centaureidina, Isokaempferida, Apigenina, Eupatorina e Cirsiliol. Nossos resultados sugeriram que a axilarina se liga aos resíduos catalíticos mais cruciais CYS145 e HIS41 do Mpro, além disso a axilarina mostra 5 interações de ligações de hidrogênio e 5 interações hidrofóbicas com vários resíduos de Mpro. Além disso, os cálculos de dinâmica molecular em uma escala de tempo de 60 ns (6 × 106 femtossegundos) também mostraram percepções significativas sobre os efeitos de ligação da axilarina com Mpro de SARS-CoV-2 por imitação de proteínas como o ambiente aquoso. A partir de cálculos de dinâmica molecular, os cálculos RMSD e RMSF indicam a estabilidade e dinâmica do melhor complexo ancorado em ambiente [...].(AU)

Nutritional assessment of servicemen in relation to area of duty and feeding habits: a Pakistani prospective / Avaliação nutricional de militares em relação à área de dever e hábitos alimentares: uma perspectiva paquistanesa

The present study was carried out to determine incidence of overweight and obesity in Pakistani servicemen with reference to their area of duty, feeding habits and also to identify risk factors. Accordingly, 2,501 servicemen selected from all over Pakistan using multiple stage stratified sampling protocol. Nutrition assessment performed using body mass index (BMI), waist to hip ratio (WHR) and dietary assessment using food frequency questionnaire. Collected data was analyzed using the SPSS version 25. Regression was used to find risk factors of obesity and WHR. Results indicated that about 1/4th of servicemen were smokers. Approximately, 1/5th of them were overweight and about one quarter were eating fruits and vegetables for <3 days/ week and <4 days/week, respectively. Only 1/3rd of them were physically active for at least <40 minutes per day. Age and fruits intake were significantly predicting BMI with a direct relation and vegetable intake was negatively correlated to BMI of the servicemen. Age and rank were significant predictors of WHR while, physical activity was negatively correlated to WHR. It is concluded and suggested from our study that there is a need to modify eating patterns and habits as well as improving physical activity on daily basis for healthy and long life of the servicemen.

O presente estudo foi realizado para determinar a incidência de sobrepeso e obesidade em militares paquistaneses com referência à sua área de serviço, hábitos alimentares e também para identificar fatores de risco. Assim, 2.501 militares selecionados de todo o Paquistão usando protocolo de amostragem estratificada de múltiplos estágios. Avaliação nutricional realizada por meio do índice de massa corporal (IMC), relação cintura-quadril (RCQ) e avaliação alimentar por meio de questionário de frequência alimentar. Os dados coletados foram analisados por meio do SPSS versão 25. A regressão foi usada para encontrar fatores de risco para obesidade e RCQ. Os resultados indicaram que cerca de 1/4 dos militares eram fumantes. Aproximadamente, 1/5 deles estava com sobrepeso e cerca de um quarto comia frutas e vegetais por <3 dias / semana e <4 dias / semana, respectivamente. Apenas 1/3 deles era fisicamente ativo por pelo menos <40 minutos por dia. Idade e ingestão de frutas foram preditores significativos do IMC com uma relação direta e ingestão de vegetais foi negativamente correlacionada com o IMC dos militares. Idade e posição foram preditores significativos de RCQ, enquanto a atividade física foi negativamente correlacionada com RCQ. Conclui-se e sugere-se a partir de nosso estudo que há necessidade de modificar os padrões e hábitos alimentares, bem como melhorar a atividade física no dia a dia para uma vida longa e saudável dos militares.

Nutritional assessment of servicemen in relation to area of duty and feeding habits: a Pakistani prospective

Abstract The present study was carried out to determine incidence of overweight and obesity in Pakistani servicemen with reference to their area of duty, feeding habits and also to identify risk factors. Accordingly, 2,501 servicemen selected from all over Pakistan using multiple stage stratified sampling protocol. Nutrition assessment performed using body mass index (BMI), waist to hip ratio (WHR) and dietary assessment using food frequency questionnaire. Collected data was analyzed using the SPSS version 25. Regression was used to find risk factors of obesity and WHR. Results indicated that about 1/4th of servicemen were smokers. Approximately, 1/5th of them were overweight and about one quarter were eating fruits and vegetables for 3 days/ week and 4 days/week, respectively. Only 1/3rd of them were physically active for at least 40 minutes per day. Age and fruits intake were significantly predicting BMI with a direct relation and vegetable intake was negatively correlated to BMI of the servicemen. Age and rank were significant predictors of WHR while, physical activity was negatively correlated to WHR. It is concluded and suggested from our study that there is a need to modify eating patterns and habits as well as improving physical activity on daily basis for healthy and long life of the servicemen.

Resumo

Nutritional assessment of servicemen in relation to area of duty and feeding habits: a Pakistani prospective / Avaliação nutricional de militares em relação à área de dever e hábitos alimentares: uma perspectiva paquistanesa

The present study was carried out to determine incidence of overweight and obesity in Pakistani servicemen with reference to their area of duty, feeding habits and also to identify risk factors. Accordingly, 2,501 servicemen selected from all over Pakistan using multiple stage stratified sampling protocol. Nutrition assessment performed using body mass index (BMI), waist to hip ratio (WHR) and dietary assessment using food frequency questionnaire. Collected data was analyzed using the SPSS version 25. Regression was used to find risk factors of obesity and WHR. Results indicated that about 1/4th of servicemen were smokers. Approximately, 1/5th of them were overweight and about one quarter were eating fruits and vegetables for <3 days/ week and <4 days/week, respectively. Only 1/3rd of them were physically active for at least <40 minutes per day. Age and fruits intake were significantly predicting BMI with a direct relation and vegetable intake was negatively correlated to BMI of the servicemen. Age and rank were significant predictors of WHR while, physical activity was negatively correlated to WHR. It is concluded and suggested from our study that there is a need to modify eating patterns and habits as well as improving physical activity on daily basis for healthy and long life of the servicemen.(AU)

O presente estudo foi realizado para determinar a incidência de sobrepeso e obesidade em militares paquistaneses com referência à sua área de serviço, hábitos alimentares e também para identificar fatores de risco. Assim, 2.501 militares selecionados de todo o Paquistão usando protocolo de amostragem estratificada de múltiplos estágios. Avaliação nutricional realizada por meio do índice de massa corporal (IMC), relação cintura-quadril (RCQ) e avaliação alimentar por meio de questionário de frequência alimentar. Os dados coletados foram analisados por meio do SPSS versão 25. A regressão foi usada para encontrar fatores de risco para obesidade e RCQ. Os resultados indicaram que cerca de 1/4 dos militares eram fumantes. Aproximadamente, 1/5 deles estava com sobrepeso e cerca de um quarto comia frutas e vegetais por <3 dias / semana e <4 dias / semana, respectivamente. Apenas 1/3 deles era fisicamente ativo por pelo menos <40 minutos por dia. Idade e ingestão de frutas foram preditores significativos do IMC com uma relação direta e ingestão de vegetais foi negativamente correlacionada com o IMC dos militares. Idade e posição foram preditores significativos de RCQ, enquanto a atividade física foi negativamente correlacionada com RCQ. Conclui-se e sugere-se a partir de nosso estudo que há necessidade de modificar os padrões e hábitos alimentares, bem como melhorar a atividade física no dia a dia para uma vida longa e saudável dos militares.(AU)

Habitat selection by Asiatic black bear (Ursus thibetanus) in Siran and Kaghan Valleys, Pakistan / Seleção de habitat pelo urso-negro asiático (Ursus thibetanus) nos vales Siran e Kaghan, Paquistão

Asiatic black bear is present in variety of habitats like broad-leaves and coniferous forests, extending form sea level to 4300m elevation and change their habitat for food purpose seasonally. The present study was conducted at Kaghan and Siran Valleys, District Mansehra, Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan to assess habitat of black bear. Line transect method was used for observation of bear signs. Twelve meter circular radius plots were selected for the concern vegetation’s i.e. (trees, shrubs and herbs) and three to six plots were placed in each transect. At the result of sign survey, thirteen different categories of bear signs were recorded and encounter rate was calculated for each sign. A total of 1858 signs were observed during field surveys. Total (81%) coniferous species were recoded among trees, with the highest appearance of Pinus wallichiana (34.22%) and Spruce spp (27.76%), similarly broad leaves trees (18.56%) were also recoded from habitat plots. Most of the signs were encountered in bushy areas, whereas high number of Viburnum Spp (60.29%) was present. It is indicated that black bear prefers blend of Coniferous Trees, Viburnum and Ferns Species; probably because these plants provide enough food, protection, and meticulous shelter because more than 80% of habitat composed of these three species. Currently habitat destruction and increase in human population are the up-growing issues for wild animals (especially Asiatic black bear), which is highly sensitive to such problems. High levels of conservation efforts are recommended for the protection of black bear habitat and to avoid human interference in their territory.

O urso-negro asiático está presente em uma variedade de habitats, como folhas largas e florestas de coníferas, estendendo-se do nível do mar até 4.300 m de altitude e mudando seu habitat para fins alimentares sazonalmente. O presente estudo foi conduzido nos vales Kaghan e Siran, distrito de Mansehra, Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão, para avaliar o habitat do urso preto. O método de transecto linear foi usado para a observação de sinais do urso. Parcelas de raio circular de 12 m foram selecionadas para a vegetação de preocupação, ou seja, árvores, arbustos e ervas, e 3 a 6 parcelas foram colocadas em cada transecto. No resultado da pesquisa de sinais, 13 categorias diferentes de sinais de urso foram registradas e a taxa de encontro foi calculada para cada sinal. Um total de 1858 sinais foi observado durante os levantamentos de campo. O total (81%) de espécies de coníferas foi recodificado entre as árvores, com maior aparecimento de Pinus wallichiana (34,22%) e Spruce spp (27,76%); árvores de folhas largas (18,56%) também foram recodificadas em parcelas de habitat. A maioria dos sinais foi encontrada em áreas com arbustos, enquanto um alto número de Viburnum spp (60,29%) estava presente. É indicado que o urso-negro prefere a mistura de árvores coníferas, espécies de viburnos e samambaias; provavelmente porque essas plantas fornecem alimento suficiente, proteção e abrigo meticuloso porque mais de 80% do habitat é composto por essas três espécies. Atualmente, a destruição do habitat e o aumento da população humana são questões crescentes para os animais selvagens, especialmente o urso-negro asiático, que é altamente sensível a esses problemas. Altos níveis de esforços de conservação são recomendados para a proteção do habitat do urso-negro e para evitar a interferência humana em seu território.

Molecular detection and prevalence of Rotavirus with acute gastroenteritis among the children of rural and urban areas / Detecção molecular e prevalência de rotavírus com gastroenterite aguda entre as crianças de áreas rurais e urbanas

Rotavirus is the main infective agent of acute gastroenteritis (AGE) in children under the age of five years and causing significant morbidity as well as mortality throughout the world. The study was carried out to detect the prevalence rate, genotypes strain and risk factors of Rotavirus among the children of rural and urban areas of district Bannu Khyber Pakhtunkhwa Pakistan. A total of 180 stool samples were collected from children under the age of 5 years from two major hospitals of Bannu from January to December (2015). The samples were analyzed by Reverse-transcriptase Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) for the detection of Rotavirus, positive samples were further processed for genotyping (G and P type) through specific PCR. Of the total, 41 (23%) samples were positive for Rotavirus. The most prevalent G genotypes found were: G3, G8, G9 (each 29%), followed by G10 (15%), and G11 (10%). Whereas the prevalent P genotypes were: P-8 (25%), P-4 and P-10 (each 20%), P-9 (15%), followed by P-6 and P-11 (each 10%). Moreover, Rotavirus infection was more prevalent in summer (23.73%) and winter (22.7%) than spring (20%) and autumn (21.4%). Rotavirus infection exhibited high frequency in June (14%), October (8%) and November (6%). It is concluded that Rotavirus is more prevalent in children and various genotypes (G and P) of Rotavirus are present in the study area. Lack of studies, awareness and rarer testing of Rotavirus are the principal reasons of virus prevalence in district Bannu, Pakistan.

O rotavírus é o principal agente infeccioso da gastroenterite aguda (AGE) em crianças menores de 5 anos e causa de morbidade e mortalidade significativas em todo o mundo. O estudo foi realizado para detectar a taxa de prevalência, cepa de genótipos e fatores de risco de rotavírus entre as crianças de áreas rurais e urbanas do distrito de Bannu Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão. Um total de 180 amostras de fezes foi coletada de crianças menores de 5 anos de dois grandes hospitais de Bannu de janeiro a dezembro (2015). As amostras foram analisadas por reação em cadeia da polimerase transcriptase reversa (RT-PCR) para detecção de rotavírus; as amostras positivas foram posteriormente processadas para genotipagem (tipo G e P) através de PCR específica. Do total, 41 (23%) amostras foram positivas para rotavírus. Os genótipos G mais prevalentes encontrados foram: G3, G8, G9 (cada 29%), seguidos de G10 (15%) e G11 (10%). Considerando que os genótipos P prevalentes foram: P-8 (25%), P-4 e P-10 (cada 20%), P-9 (15%), seguido por P-6 e P-11 (cada 10%). Além disso, a infecção por rotavírus foi mais prevalente no verão (23,73%) e inverno (22,7%) do que na primavera (20%) e no outono (21,4%). A infecção por rotavírus apresentou alta frequência em junho (14%), outubro (8%) e novembro (6%). Conclui-se que o rotavírus é mais prevalente em crianças e vários genótipos (G e P) do rotavírus estão presentes na área de estudo. A falta de estudos, conhecimento e testes mais raros de rotavírus são as principais razões da prevalência do vírus no distrito de Bannu, Paquistão.

Habitat selection by Asiatic black bear (Ursus thibetanus) in Siran and Kaghan Valleys, Pakistan

Abstract Asiatic black bear is present in variety of habitats like broad-leaves and coniferous forests, extending form sea level to 4300m elevation and change their habitat for food purpose seasonally. The present study was conducted at Kaghan and Siran Valleys, District Mansehra, Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan to assess habitat of black bear. Line transect method was used for observation of bear signs. Twelve meter circular radius plots were selected for the concern vegetations i.e. (trees, shrubs and herbs) and three to six plots were placed in each transect. At the result of sign survey, thirteen different categories of bear signs were recorded and encounter rate was calculated for each sign. A total of 1858 signs were observed during field surveys. Total (81%) coniferous species were recoded among trees, with the highest appearance of Pinus wallichiana (34.22%) and Spruce spp (27.76%), similarly broad leaves trees (18.56%) were also recoded from habitat plots. Most of the signs were encountered in bushy areas, whereas high number of Viburnum Spp (60.29%) was present. It is indicated that black bear prefers blend of Coniferous Trees, Viburnum and Ferns Species; probably because these plants provide enough food, protection, and meticulous shelter because more than 80% of habitat composed of these three species. Currently habitat destruction and increase in human population are the up-growing issues for wild animals (especially Asiatic black bear), which is highly sensitive to such problems. High levels of conservation efforts are recommended for the protection of black bear habitat and to avoid human interference in their territory.

Resumo O urso-negro asiático está presente em uma variedade de habitats, como folhas largas e florestas de coníferas, estendendo-se do nível do mar até 4.300 m de altitude e mudando seu habitat para fins alimentares sazonalmente. O presente estudo foi conduzido nos vales Kaghan e Siran, distrito de Mansehra, Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão, para avaliar o habitat do urso preto. O método de transecto linear foi usado para a observação de sinais do urso. Parcelas de raio circular de 12 m foram selecionadas para a vegetação de preocupação, ou seja, árvores, arbustos e ervas, e 3 a 6 parcelas foram colocadas em cada transecto. No resultado da pesquisa de sinais, 13 categorias diferentes de sinais de urso foram registradas e a taxa de encontro foi calculada para cada sinal. Um total de 1858 sinais foi observado durante os levantamentos de campo. O total (81%) de espécies de coníferas foi recodificado entre as árvores, com maior aparecimento de Pinus wallichiana (34,22%) e Spruce spp (27,76%); árvores de folhas largas (18,56%) também foram recodificadas em parcelas de habitat. A maioria dos sinais foi encontrada em áreas com arbustos, enquanto um alto número de Viburnum spp (60,29%) estava presente. É indicado que o urso-negro prefere a mistura de árvores coníferas, espécies de viburnos e samambaias; provavelmente porque essas plantas fornecem alimento suficiente, proteção e abrigo meticuloso porque mais de 80% do habitat é composto por essas três espécies. Atualmente, a destruição do habitat e o aumento da população humana são questões crescentes para os animais selvagens, especialmente o urso-negro asiático, que é altamente sensível a esses problemas. Altos níveis de esforços de conservação são recomendados para a proteção do habitat do urso-negro e para evitar a interferência humana em seu território.

Molecular detection and prevalence of Rotavirus with acute gastroenteritis among the children of rural and urban areas

Abstract Rotavirus is the main infective agent of acute gastroenteritis (AGE) in children under the age of five years and causing significant morbidity as well as mortality throughout the world. The study was carried out to detect the prevalence rate, genotypes strain and risk factors of Rotavirus among the children of rural and urban areas of district Bannu Khyber Pakhtunkhwa Pakistan. A total of 180 stool samples were collected from children under the age of 5 years from two major hospitals of Bannu from January to December (2015). The samples were analyzed by Reverse-transcriptase Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) for the detection of Rotavirus, positive samples were further processed for genotyping (G and P type) through specific PCR. Of the total, 41 (23%) samples were positive for Rotavirus. The most prevalent G genotypes found were: G3, G8, G9 (each 29%), followed by G10 (15%), and G11 (10%). Whereas the prevalent P genotypes were: P-8 (25%), P-4 and P-10 (each 20%), P-9 (15%), followed by P-6 and P-11 (each 10%). Moreover, Rotavirus infection was more prevalent in summer (23.73%) and winter (22.7%) than spring (20%) and autumn (21.4%). Rotavirus infection exhibited high frequency in June (14%), October (8%) and November (6%). It is concluded that Rotavirus is more prevalent in children and various genotypes (G and P) of Rotavirus are present in the study area. Lack of studies, awareness and rarer testing of Rotavirus are the principal reasons of virus prevalence in district Bannu, Pakistan.

Resumo O rotavírus é o principal agente infeccioso da gastroenterite aguda (AGE) em crianças menores de 5 anos e causa de morbidade e mortalidade significativas em todo o mundo. O estudo foi realizado para detectar a taxa de prevalência, cepa de genótipos e fatores de risco de rotavírus entre as crianças de áreas rurais e urbanas do distrito de Bannu Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão. Um total de 180 amostras de fezes foi coletada de crianças menores de 5 anos de dois grandes hospitais de Bannu de janeiro a dezembro (2015). As amostras foram analisadas por reação em cadeia da polimerase transcriptase reversa (RT-PCR) para detecção de rotavírus; as amostras positivas foram posteriormente processadas para genotipagem (tipo G e P) através de PCR específica. Do total, 41 (23%) amostras foram positivas para rotavírus. Os genótipos G mais prevalentes encontrados foram: G3, G8, G9 (cada 29%), seguidos de G10 (15%) e G11 (10%). Considerando que os genótipos P prevalentes foram: P-8 (25%), P-4 e P-10 (cada 20%), P-9 (15%), seguido por P-6 e P-11 (cada 10%). Além disso, a infecção por rotavírus foi mais prevalente no verão (23,73%) e inverno (22,7%) do que na primavera (20%) e no outono (21,4%). A infecção por rotavírus apresentou alta frequência em junho (14%), outubro (8%) e novembro (6%). Conclui-se que o rotavírus é mais prevalente em crianças e vários genótipos (G e P) do rotavírus estão presentes na área de estudo. A falta de estudos, conhecimento e testes mais raros de rotavírus são as principais razões da prevalência do vírus no distrito de Bannu, Paquistão.

Molecular detection and prevalence of Rotavirus with acute gastroenteritis among the children of rural and urban areas / Detecção molecular e prevalência de rotavírus com gastroenterite aguda entre as crianças de áreas rurais e urbanas

Rotavirus is the main infective agent of acute gastroenteritis (AGE) in children under the age of five years and causing significant morbidity as well as mortality throughout the world. The study was carried out to detect the prevalence rate, genotypes strain and risk factors of Rotavirus among the children of rural and urban areas of district Bannu Khyber Pakhtunkhwa Pakistan. A total of 180 stool samples were collected from children under the age of 5 years from two major hospitals of Bannu from January to December (2015). The samples were analyzed by Reverse-transcriptase Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) for the detection of Rotavirus, positive samples were further processed for genotyping (G and P type) through specific PCR. Of the total, 41 (23%) samples were positive for Rotavirus. The most prevalent G genotypes found were: G3, G8, G9 (each 29%), followed by G10 (15%), and G11 (10%). Whereas the prevalent P genotypes were: P-8 (25%), P-4 and P-10 (each 20%), P-9 (15%), followed by P-6 and P-11 (each 10%). Moreover, Rotavirus infection was more prevalent in summer (23.73%) and winter (22.7%) than spring (20%) and autumn (21.4%). Rotavirus infection exhibited high frequency in June (14%), October (8%) and November (6%). It is concluded that Rotavirus is more prevalent in children and various genotypes (G and P) of Rotavirus are present in the study area. Lack of studies, awareness and rarer testing of Rotavirus are the principal reasons of virus prevalence in district Bannu, Pakistan.(AU)

O rotavírus é o principal agente infeccioso da gastroenterite aguda (AGE) em crianças menores de 5 anos e causa de morbidade e mortalidade significativas em todo o mundo. O estudo foi realizado para detectar a taxa de prevalência, cepa de genótipos e fatores de risco de rotavírus entre as crianças de áreas rurais e urbanas do distrito de Bannu Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão. Um total de 180 amostras de fezes foi coletada de crianças menores de 5 anos de dois grandes hospitais de Bannu de janeiro a dezembro (2015). As amostras foram analisadas por reação em cadeia da polimerase transcriptase reversa (RT-PCR) para detecção de rotavírus; as amostras positivas foram posteriormente processadas para genotipagem (tipo G e P) através de PCR específica. Do total, 41 (23%) amostras foram positivas para rotavírus. Os genótipos G mais prevalentes encontrados foram: G3, G8, G9 (cada 29%), seguidos de G10 (15%) e G11 (10%). Considerando que os genótipos P prevalentes foram: P-8 (25%), P-4 e P-10 (cada 20%), P-9 (15%), seguido por P-6 e P-11 (cada 10%). Além disso, a infecção por rotavírus foi mais prevalente no verão (23,73%) e inverno (22,7%) do que na primavera (20%) e no outono (21,4%). A infecção por rotavírus apresentou alta frequência em junho (14%), outubro (8%) e novembro (6%). Conclui-se que o rotavírus é mais prevalente em crianças e vários genótipos (G e P) do rotavírus estão presentes na área de estudo. A falta de estudos, conhecimento e testes mais raros de rotavírus são as principais razões da prevalência do vírus no distrito de Bannu, Paquistão.(AU)

Habitat selection by Asiatic black bear (Ursus thibetanus) in Siran and Kaghan Valleys, Pakistan / Seleção de habitat pelo urso-negro asiático (Ursus thibetanus) nos vales Siran e Kaghan, Paquistão

Asiatic black bear is present in variety of habitats like broad-leaves and coniferous forests, extending form sea level to 4300m elevation and change their habitat for food purpose seasonally. The present study was conducted at Kaghan and Siran Valleys, District Mansehra, Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan to assess habitat of black bear. Line transect method was used for observation of bear signs. Twelve meter circular radius plots were selected for the concern vegetations i.e. (trees, shrubs and herbs) and three to six plots were placed in each transect. At the result of sign survey, thirteen different categories of bear signs were recorded and encounter rate was calculated for each sign. A total of 1858 signs were observed during field surveys. Total (81%) coniferous species were recoded among trees, with the highest appearance of Pinus wallichiana (34.22%) and Spruce spp (27.76%), similarly broad leaves trees (18.56%) were also recoded from habitat plots. Most of the signs were encountered in bushy areas, whereas high number of Viburnum Spp (60.29%) was present. It is indicated that black bear prefers blend of Coniferous Trees, Viburnum and Ferns Species; probably because these plants provide enough food, protection, and meticulous shelter because more than 80% of habitat composed of these three species. Currently habitat destruction and increase in human population are the up-growing issues for wild animals (especially Asiatic black bear), which is highly sensitive to such problems. High levels of conservation efforts are recommended for the protection of black bear habitat and to avoid human interference in their territory.(AU)

O urso-negro asiático está presente em uma variedade de habitats, como folhas largas e florestas de coníferas, estendendo-se do nível do mar até 4.300 m de altitude e mudando seu habitat para fins alimentares sazonalmente. O presente estudo foi conduzido nos vales Kaghan e Siran, distrito de Mansehra, Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão, para avaliar o habitat do urso preto. O método de transecto linear foi usado para a observação de sinais do urso. Parcelas de raio circular de 12 m foram selecionadas para a vegetação de preocupação, ou seja, árvores, arbustos e ervas, e 3 a 6 parcelas foram colocadas em cada transecto. No resultado da pesquisa de sinais, 13 categorias diferentes de sinais de urso foram registradas e a taxa de encontro foi calculada para cada sinal. Um total de 1858 sinais foi observado durante os levantamentos de campo. O total (81%) de espécies de coníferas foi recodificado entre as árvores, com maior aparecimento de Pinus wallichiana (34,22%) e Spruce spp (27,76%); árvores de folhas largas (18,56%) também foram recodificadas em parcelas de habitat. A maioria dos sinais foi encontrada em áreas com arbustos, enquanto um alto número de Viburnum spp (60,29%) estava presente. É indicado que o urso-negro prefere a mistura de árvores coníferas, espécies de viburnos e samambaias; provavelmente porque essas plantas fornecem alimento suficiente, proteção e abrigo meticuloso porque mais de 80% do habitat é composto por essas três espécies. Atualmente, a destruição do habitat e o aumento da população humana são questões crescentes para os animais selvagens, especialmente o urso-negro asiático, que é altamente sensível a esses problemas. Altos níveis de esforços de conservação são recomendados para a proteção do habitat do urso-negro e para evitar a interferência humana em seu território.(AU)

Current understanding of an Emerging Coronavirus usingin silico approach: Severe Acute Respiratory Syndrome-Coronavirus-2 (SARS-CoV-2) / Compreensão atual de um coronavírus emergente usando abordagem in silico: síndrome respiratória aguda grave - coronavírus-2 (SARS-CoV-2)

Novel coronavirus (nCoV) namely "SARS-CoV-2" is being found responsible for current PANDEMIC commenced from Wuhan (China) since December 2019 and has been described with epidemiological linkage to China in about 221 countries and territories until now. In this study we have characterized the genetic lineage of SARS-CoV-2 and report the recombination within the genus and subgenus of coronaviruses. Phylogenetic relationship of thirty nine coronaviruses belonging to its four genera and five subgenera was analyzed by using the Neighbor-joining method using MEGA 6.0. Phylogenetic trees of full length genome, various proteins (spike, envelope, membrane and nucleocapsid) nucleotide sequences were constructed separately. Putative recombination was probed via RDP4. Our analysis describes that the "SARS-CoV-2" although shows great similarity to Bat-SARS-CoVs sequences through whole genome (giving sequence similarity 89%), exhibits conflicting grouping with the Bat-SARS-like coronavirus sequences (MG772933 and MG772934). Furthermore, seven recombination events were observed in SARS-CoV-2 (NC_045512) by RDP4. But not a single recombination event fulfills the high level of certainty. Recombination mostly housed in spike protein genes than rest of the genome indicating breakpoint cluster arises beyond the 95% and 99% breakpoint density intervals. Genetic similarity levels observed among "SARS-CoV-2" and Bat-SARS-CoVs advocated that the latter did not exhibit the specific variant that cause outbreak in humans, proposing a suggestion that "SARS-CoV-2" has originated possibly from bats. These genomic features and their probable association with virus characteristics along with virulence in humans require further consideration.

O novo coronavírus (nCoV), nomeadamente "SARS-CoV-2", foi considerado responsável pela pandemia atual iniciada em Wuhan (China) desde dezembro de 2019 e foi descrito com ligação epidemiológica à China em cerca de 221 países e territórios até agora. Neste estudo, caracterizamos a linhagem genética do SARS-CoV-2 e relatamos a recombinação dentro do gênero e subgênero dos coronavírus. A relação filogenética de 39 coronavírus pertencentes a seus quatro gêneros e cinco subgêneros foi analisada usando o método de Neighbour-joining usando MEGA 6.0. Árvores filogenéticas do genoma de comprimento total, várias proteínas (espícula, envelope, membrana e nucleocapsídeo), sequências de nucleotídeos foram construídas separadamente. A recombinação putativa foi testada via RDP4. Nossa análise descreve que o "SARS-CoV-2", embora mostre grande semelhança com as sequências de Bat-SARS-CoVs em todo o genoma (dando semelhança de sequência de 89%), exibe agrupamento conflitante com as sequências de coronavírus do tipo Bat-SARS (MG772933 e MG772934) Além disso, sete eventos de recombinação foram observados em SARS-CoV-2 (NC045512) por RDP4. Mas nem um único evento de recombinação preenche o alto nível de certeza. A recombinação está alojada mais em genes de proteína de pico, principalmente, do que no resto do genoma, indicando que o cluster de ponto de interrupção surge além dos intervalos de densidade de ponto de interrupção de 95% e 99%. Os níveis de similaridade genética observados entre "SARS-CoV-2" e Bat-SARS-CoVs defendem que o último não exibe a variante específica que causa surto em humanos, sugerindo que "SARS-CoV-2" tenha se originado possivelmente de morcegos. Essas características genômicas e sua provável associação com as características do vírus, juntamente com a virulência em humanos, requerem uma consideração mais aprofundada.

Detection of microorganisms with antibacterial activities from different industrial wastes and GC-MS analysis of crude microbial extract / Detecção de microrganismos com atividades antibacterianas de diferentes resíduos industriais e análise por GC-MS do extrato microbiano bruto

Many soil microorganisms' i.e., bacteria and fungi produce secondary metabolites called antibiotics. These are used for the treatment of some of the bacterial, fungal and protozoal diseases of humans. There is a need for isolation of a broad spectrum of antibiotics from microorganisms due to the emergence of antibiotic resistance. In the present study two antibiotic producing bacteria Klebsiella pneumoniae and Bacillus cereus were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry of Hattar, Haripur Pakistan. Total 10 waste samples were collected from different industries (Marble, Ghee, Soap, Mineral, Steel, Poultry Feed, Pharmaceutical, Qarshi, Cosmetic and Glass). Thirty-three bacterial strains were isolated from industrial wastes of these ten different industries. Fourteen out of thirty-three bacterial strains exhibited antimicrobial activities against at least one of the test microbes considered in this study including Escherchia coli, Staphylococcus aureus and Salmonella typhi. The bacteria were isolated by standard serial dilution spread plate technique. Morphological characterization of the isolates was done by Gram staining. Nine bacterial isolates out of fourteen were initially identified as B. cereus and five as K. pneumoniae through biochemical characterization. The antibacterial activities were tested by well diffusion method. Maximum number of antibiotic producing bacteria were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry based on the results of primary screening, the most potential isolates S9, S19, S20, S22 and S23 were selected for secondary screening. The maximum activity against E. coli and S. aureus was recorded by bacterial isolate S19 i.e zones of inhibition of 6.5mm and 9mm while S20 showed 7.5mm and 6mm zones respectively. Molecular identification was carried out on the basis of 16S rRNA sequence [...].

Muitos microrganismos do solo, ou seja, bactérias e fungos produzem metabólitos secundários chamados antibióticos. Eles são usados para tratamento de algumas doenças bacterianas, fúngicas e protozoárias em humanos. Há necessidade de isolamento de um amplo espectro de antibióticos de microrganismos devido ao surgimento de resistência aos antibióticos. No presente estudo, duas bactérias produtoras de antibióticos, Klebsiella pneumoniae e Bacillus cereus, foram isoladas da indústria farmacêutica e de ração avícola de Hattar, Haripur, Paquistão. Um total de 10 amostras de resíduos foi coletado de diferentes indústrias (mármore, ghee, sabão, mineral, aço, ração para aves, farmacêutica, Qarshi, cosmética e vidro). Trinta e três cepas bacterianas foram isoladas de resíduos industriais dessas dez diferentes indústrias. Quatorze das 33 cepas bacterianas exibiram atividades antimicrobianas contra pelo menos um dos micróbios de teste considerados neste estudo, incluindo Escherchia coli, Staphylococcus aureus e Salmonella typhi. As bactérias foram isoladas pela técnica de placa de diluição em série padrão. A caracterização morfológica dos isolados foi feita por coloração de gram. Nove isolados bacterianos de 14 foram inicialmente identificados como B. cereus e cinco como K. pneumoniae por meio de caracterização bioquímica. As atividades antibacterianas foram testadas pelo método de difusão em poço. O número máximo de bactérias produtoras de antibióticos foi isolado da indústria farmacêutica e de ração avícola com base nos resultados da triagem primária, os isolados mais potenciais S9, S19, S20, S22 e S23 foram selecionados para a triagem secundária. A atividade máxima contra E. coli e S. aureus foi registrada pelo isolado bacteriano S19, ou seja, zonas de inibição de 6,5 mm e 9 mm, enquanto S20 mostrou zonas de 7,5 mm e 6 mm, respectivamente. A identificação molecular foi realizada com base na análise da sequência 16S [...].

Hyperhomocysteinemia as an Independent Risk Factor for Coronary Heart Disease. Comparison with Conventional Risk Factors / Hiper-homocisteinemia como fator de risco independente para doença coronariana: comparação com fatores de risco convencionais

The present study was designed to evaluate the strength of association of raised plasma homocysteine concentration as a risk factor for coronary heart disease independent of conventional risk factor. It was a case control study conducted at Punjab Institute of Cardiology Lahore. A total of 210 subjects aged 25 to 60 years comprising of 105 newly admitted patients of CHD as cases and 105 age and sex matched healthy individuals with no history of CHD as control were recruited for the study. Fasting blood samples were obtained from cases and controls. Plasma homocysteine was analyzed by fluorescence polarization immunoassay (FPIA) method on automated immunoassay analyzer (Abbott IMX). Total cholesterol, triglyceride and HDL cholesterol were analyzed using calorimetric kit methods. The concentration of LDL cholesterol was calculated using Friedewald formula. The patients were also assessed for traditional risk factors such as age, sex, family history of CVD, hypertension, smoking and physical activity, and were compared with control subjects. The collected data was entered in SPSS version 24 for analysis and interpretation.The mean age in controls and experimental groups were 43.00± 8.42 years and 44.72± 8.59 years with statistically same distribution (p- value= 0.144). The mean plasma homocysteine for cases was 22.33± 9.22 µmol/L where as it was 12.59±3.73 µmol/L in control group. Highly significant difference was seen between the mean plasma level of homocysteine in cases and controls (p˂0.001).Simple logistic regression indicates a strong association of coronary heart disease with hyperhomocysteinemia (OR 7.45), which remained significantly associated with coronary heart disease by multivariate logistic regression (OR 7.10, 95%C1 3.12-12.83, p=0.000). The present study concludes that elevated levels of Plasma homocysteine is an independent risk factor [...].

O presente estudo foi desenhado para avaliar a força da associação da concentração elevada de homocisteína no plasma como um fator de risco para doença cardíaca coronária independente do fator de risco convencional. Foi um estudo de caso-controle realizado no Punjab Institute of Cardiology Lahore. Um total de 210 indivíduos com idade entre 25 e 60 anos, compreendendo 105 pacientes recém-admitidos de CHD como casos e 105 indivíduos saudáveis pareados por idade e sexo sem histórico de CHD como controle, foi recrutado para o estudo. Amostras de sangue em jejum foram obtidas de casos e controles. A homocisteína plasmática foi analisada pelo método de imunoensaio de polarização de fluorescência (FPIA) em analisador de imunoensaio automatizado (Abbott IMX). Colesterol total, triglicerídeos e colesterol HDL foram analisados usando métodos de kit calorimétrico. A concentração de colesterol LDL foi calculada pela fórmula de Friedewald. Os pacientes também foram avaliados para fatores de risco tradicionais, como idade, sexo, história familiar de DCV, hipertensão, tabagismo e atividade física, e foram comparados com indivíduos de controle. Os dados coletados foram inseridos no SPSS versão 24 para análise e interpretação. A média de idade nos grupos controles e experimentais foi de 43,00 ± 8,42 anos e 44,72 ± 8,59 anos com distribuição estatisticamente igual (p-valor = 0,144). A homocisteína plasmática média para os casos foi de 22,33 ± 9,22 µmol / L, enquanto no grupo controle foi de 12,59 ± 3,73 µmol / L. Diferença altamente significativa foi observada entre o nível plasmático médio de homocisteína em casos e controles (p ˂ 0,001). A regressão logística simples indica uma forte associação de doença cardíaca coronária com hiper-homocisteinemia (OR 7,45), que permaneceu significativamente associada com doença cardíaca coronária por multivariada regressão logística (OR 7,10, 95% C1 3,12-12,83, p = 0,000). O presente estudo conclui [...].

Stoichioproteomics study of differentially expressed proteins and pathways in head and neck cancer / Estudo estequioproteômico de proteínas e vias expressas diferencialmente no câncer de cabeça e pescoço

Hypoxia is a prominent feature of head and neck cancer. However, the oxygen element characteristics of proteins and how they adapt to hypoxia microenvironments of head and neck cancer are still unknown. Human genome sequences and proteins expressed data of head and neck cancer were retrieved from pathology atlas of Human Protein Atlas project. Then compared the oxygen and carbon element contents between proteomes of head and neck cancer and normal oral mucosa-squamous epithelial cells, genome locations, pathways, and functional dissection associated with head and neck cancer were also studied. A total of 902 differentially expressed proteins were observed where the average oxygen content is higher than that of the lowly expressed proteins in head and neck cancer proteins. Further, the average oxygen content of the up regulated proteins was 2.54% higher than other. None of their coding genes were distributed on the Y chromosome. The up regulated proteins were enriched in endocytosis, apoptosis and regulation of actin cytoskeleton. The increased oxygen contents of the highly expressed and the up regulated proteins might be caused by frequent activity of cytoskeleton and adapted to the rapid growth and fast division of the head and neck cancer cells. The oxygen usage bias and key proteins may help us to understand the mechanisms behind head and neck cancer in targeted therapy, which lays a foundation for the application of stoichioproteomics in targeted therapy and provides promise for potential treatments for head and neck cancer.

A hipóxia é uma característica proeminente do câncer de cabeça e pescoço. No entanto, as características do elemento oxigênio das proteínas e como elas se adaptam aos microambientes de hipóxia do câncer de cabeça e pescoço ainda são desconhecidas. Sequências do genoma humano e dados expressos de proteínas de câncer de cabeça e pescoço foram recuperados do atlas de patologia do projeto Human Protein Atlas. Em seguida, comparou o conteúdo do elemento de oxigênio e carbono entre proteomas de câncer de cabeça e pescoço, e células epiteliais escamosas da mucosa oral normal, localizações do genoma, vias e dissecção funcional associada ao câncer de cabeça e pescoço também foram estudadas. Um total de 902 proteínas expressas diferencialmente foi observado onde o conteúdo médio de oxigênio é maior do que as proteínas expressas de forma humilde em proteínas de câncer de cabeça e pescoço. Além disso, o conteúdo médio de oxigênio das proteínas reguladas positivamente foi 2,54% maior do que das outras. Nenhum de seus genes codificadores foi distribuído no cromossomo Y. As proteínas reguladas positivamente foram enriquecidas em endocitose, apoptose e regulação do citoesqueleto de actina. O conteúdo aumentado de oxigênio das proteínas altamente expressas e reguladas pode ser causado pela atividade frequente do citoesqueleto e adaptado ao rápido crescimento e divisão das células cancerosas de cabeça e pescoço. O viés do uso de oxigênio e as proteínas-chave podem nos ajudar a entender os mecanismos por trás do câncer de cabeça e pescoço na terapia direcionada, o que estabelece uma base para a aplicação da estequioproteômica na terapia direcionada e oferece uma promessa para potenciais tratamentos para o câncer de cabeça e pescoço.

Current understanding of an Emerging Coronavirus using in silico approach: Severe Acute Respiratory Syndrome-Coronavirus-2 (SARS-CoV-2)

Abstract Novel coronavirus (nCoV) namely SARS-CoV-2 is being found responsible for current PANDEMIC commenced from Wuhan (China) since December 2019 and has been described with epidemiological linkage to China in about 221 countries and territories until now. In this study we have characterized the genetic lineage of SARS-CoV-2 and report the recombination within the genus and subgenus of coronaviruses. Phylogenetic relationship of thirty nine coronaviruses belonging to its four genera and five subgenera was analyzed by using the Neighbor-joining method using MEGA 6.0. Phylogenetic trees of full length genome, various proteins (spike, envelope, membrane and nucleocapsid) nucleotide sequences were constructed separately. Putative recombination was probed via RDP4. Our analysis describes that the SARS-CoV-2 although shows great similarity to Bat-SARS-CoVs sequences through whole genome (giving sequence similarity 89%), exhibits conflicting grouping with the Bat-SARS-like coronavirus sequences (MG772933 and MG772934). Furthermore, seven recombination events were observed in SARS-CoV-2 (NC_045512) by RDP4. But not a single recombination event fulfills the high level of certainty. Recombination mostly housed in spike protein genes than rest of the genome indicating breakpoint cluster arises beyond the 95% and 99% breakpoint density intervals. Genetic similarity levels observed among SARS-CoV-2 and Bat-SARS-CoVs advocated that the latter did not exhibit the specific variant that cause outbreak in humans, proposing a suggestion that SARS-CoV-2 has originated possibly from bats. These genomic features and their probable association with virus characteristics along with virulence in humans require further consideration.

Resumo O novo coronavírus (nCoV), nomeadamente SARS-CoV-2, foi considerado responsável pela pandemia atual iniciada em Wuhan (China) desde dezembro de 2019 e foi descrito com ligação epidemiológica à China em cerca de 221 países e territórios até agora. Neste estudo, caracterizamos a linhagem genética do SARS-CoV-2 e relatamos a recombinação dentro do gênero e subgênero dos coronavírus. A relação filogenética de 39 coronavírus pertencentes a seus quatro gêneros e cinco subgêneros foi analisada usando o método de Neighbour-joining usando MEGA 6.0. Árvores filogenéticas do genoma de comprimento total, várias proteínas (espícula, envelope, membrana e nucleocapsídeo), sequências de nucleotídeos foram construídas separadamente. A recombinação putativa foi testada via RDP4. Nossa análise descreve que o SARS-CoV-2, embora mostre grande semelhança com as sequências de Bat-SARS-CoVs em todo o genoma (dando semelhança de sequência de 89%), exibe agrupamento conflitante com as sequências de coronavírus do tipo Bat-SARS (MG772933 e MG772934) Além disso, sete eventos de recombinação foram observados em SARS-CoV-2 (NC045512) por RDP4. Mas nem um único evento de recombinação preenche o alto nível de certeza. A recombinação está alojada mais em genes de proteína de pico, principalmente, do que no resto do genoma, indicando que o cluster de ponto de interrupção surge além dos intervalos de densidade de ponto de interrupção de 95% e 99%. Os níveis de similaridade genética observados entre SARS-CoV-2 e Bat-SARS-CoVs defendem que o último não exibe a variante específica que causa surto em humanos, sugerindo que SARS-CoV-2 tenha se originado possivelmente de morcegos. Essas características genômicas e sua provável associação com as características do vírus, juntamente com a virulência em humanos, requerem uma consideração mais aprofundada.

Detection of microorganisms with antibacterial activities from different industrial wastes and GC-MS analysis of crude microbial extract

Abstract Many soil microorganisms i.e., bacteria and fungi produce secondary metabolites called antibiotics. These are used for the treatment of some of the bacterial, fungal and protozoal diseases of humans. There is a need for isolation of a broad spectrum of antibiotics from microorganisms due to the emergence of antibiotic resistance. In the present study two antibiotic producing bacteria Klebsiella pneumoniae and Bacillus cereus were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry of Hattar, Haripur Pakistan. Total 10 waste samples were collected from different industries (Marble, Ghee, Soap, Mineral, Steel, Poultry Feed, Pharmaceutical, Qarshi, Cosmetic and Glass). Thirty-three bacterial strains were isolated from industrial wastes of these ten different industries. Fourteen out of thirty-three bacterial strains exhibited antimicrobial activities against at least one of the test microbes considered in this study including Escherchia coli, Staphylococcus aureus and Salmonella typhi. The bacteria were isolated by standard serial dilution spread plate technique. Morphological characterization of the isolates was done by Gram staining. Nine bacterial isolates out of fourteen were initially identified as B. cereus and five as K. pneumoniae through biochemical characterization. The antibacterial activities were tested by well diffusion method. Maximum number of antibiotic producing bacteria were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry based on the results of primary screening, the most potential isolates S9, S19, S20, S22 and S23 were selected for secondary screening. The maximum activity against E. coli and S. aureus was recorded by bacterial isolate S19 i.e zones of inhibition of 6.5mm and 9mm while S20 showed 7.5mm and 6mm zones respectively. Molecular identification was carried out on the basis of 16S rRNA sequence analysis. Finally, the isolates were identified as B. cereus accession number LC538271and K. pneumoniae accession number MT078679. Analysis of bacterial extract S20 through GC-MS indicated the presence of 8 compounds of diverse nature and structure. Present study suggests that wastes of pharmaceutical and poultry feed industry may have antibiotic producing bacteria. These bacteria could be utilized for the production of antibiotics. B. cereus and K. pneumoniae isolated from wastes of poultry feed and pharmaceutical industries have the potential to produce antibiotics and could be used to control the microbial growth.

Resumo Muitos microrganismos do solo, ou seja, bactérias e fungos produzem metabólitos secundários chamados antibióticos. Eles são usados para tratamento de algumas doenças bacterianas, fúngicas e protozoárias em humanos. Há necessidade de isolamento de um amplo espectro de antibióticos de microrganismos devido ao surgimento de resistência aos antibióticos. No presente estudo, duas bactérias produtoras de antibióticos, Klebsiella pneumoniae e Bacillus cereus, foram isoladas da indústria farmacêutica e de ração avícola de Hattar, Haripur, Paquistão. Um total de 10 amostras de resíduos foi coletado de diferentes indústrias (mármore, ghee, sabão, mineral, aço, ração para aves, farmacêutica, Qarshi, cosmética e vidro). Trinta e três cepas bacterianas foram isoladas de resíduos industriais dessas dez diferentes indústrias. Quatorze das 33 cepas bacterianas exibiram atividades antimicrobianas contra pelo menos um dos micróbios de teste considerados neste estudo, incluindo Escherchia coli, Staphylococcus aureus e Salmonella typhi. As bactérias foram isoladas pela técnica de placa de diluição em série padrão. A caracterização morfológica dos isolados foi feita por coloração de gram. Nove isolados bacterianos de 14 foram inicialmente identificados como B. cereus e cinco como K. pneumoniae por meio de caracterização bioquímica. As atividades antibacterianas foram testadas pelo método de difusão em poço. O número máximo de bactérias produtoras de antibióticos foi isolado da indústria farmacêutica e de ração avícola com base nos resultados da triagem primária, os isolados mais potenciais S9, S19, S20, S22 e S23 foram selecionados para a triagem secundária. A atividade máxima contra E. coli e S. aureus foi registrada pelo isolado bacteriano S19, ou seja, zonas de inibição de 6,5 mm e 9 mm, enquanto S20 mostrou zonas de 7,5 mm e 6 mm, respectivamente. A identificação molecular foi realizada com base na análise da sequência 16S rRNA. Finalmente, os isolados foram identificados como B. cereus número de acesso LC538271 e K. pneumoniae número de acesso MT078679. A análise do extrato bacteriano S20 por meio de GC-MS indicou a presença de oito compostos de natureza e estrutura diversas. O presente estudo sugere que resíduos da indústria farmacêutica e de ração para aves podem conter bactérias produtoras de antibióticos. Essas bactérias podem ser utilizadas para a produção de antibióticos B. cereus e K. pneumoniae isolados de resíduos de rações de aves e indústrias farmacêuticas têm potencial para produzir antibióticos e podem ser usados para controlar o crescimento microbiano.

Hyperhomocysteinemia as an Independent Risk Factor for Coronary Heart Disease. Comparison with Conventional Risk Factors

Abstract The present study was designed to evaluate the strength of association of raised plasma homocysteine concentration as a risk factor for coronary heart disease independent of conventional risk factor. It was a case control study conducted at Punjab Institute of Cardiology Lahore. A total of 210 subjects aged 25 to 60 years comprising of 105 newly admitted patients of CHD as cases and 105 age and sex matched healthy individuals with no history of CHD as control were recruited for the study. Fasting blood samples were obtained from cases and controls. Plasma homocysteine was analyzed by fluorescence polarization immunoassay (FPIA) method on automated immunoassay analyzer (Abbott IMX). Total cholesterol, triglyceride and HDL cholesterol were analyzed using calorimetric kit methods. The concentration of LDL cholesterol was calculated using Friedewald formula. The patients were also assessed for traditional risk factors such as age, sex, family history of CVD, hypertension, smoking and physical activity, and were compared with control subjects. The collected data was entered in SPSS version 24 for analysis and interpretation.The mean age in controls and experimental groups were 43.00± 8.42 years and 44.72± 8.59 years with statistically same distribution (p- value= 0.144). The mean plasma homocysteine for cases was 22.33± 9.22 µmol/L where as it was 12.59±3.73 µmol/L in control group. Highly significant difference was seen between the mean plasma level of homocysteine in cases and controls (p0.001).Simple logistic regression indicates a strong association of coronary heart disease with hyperhomocysteinemia (OR 7.45), which remained significantly associated with coronary heart disease by multivariate logistic regression (OR 7.10, 95%C1 3.12-12.83, p=0.000). The present study concludes that elevated levels of Plasma homocysteine is an independent risk factor for coronary heart disease independent of conventional risk factors and can be used as an indicator for predicting the future possibility for the onset of CVD.

Resumo O presente estudo foi desenhado para avaliar a força da associação da concentração elevada de homocisteína no plasma como um fator de risco para doença cardíaca coronária independente do fator de risco convencional. Foi um estudo de caso-controle realizado no Punjab Institute of Cardiology Lahore. Um total de 210 indivíduos com idade entre 25 e 60 anos, compreendendo 105 pacientes recém-admitidos de CHD como casos e 105 indivíduos saudáveis pareados por idade e sexo sem histórico de CHD como controle, foi recrutado para o estudo. Amostras de sangue em jejum foram obtidas de casos e controles. A homocisteína plasmática foi analisada pelo método de imunoensaio de polarização de fluorescência (FPIA) em analisador de imunoensaio automatizado (Abbott IMX). Colesterol total, triglicerídeos e colesterol HDL foram analisados usando métodos de kit calorimétrico. A concentração de colesterol LDL foi calculada pela fórmula de Friedewald. Os pacientes também foram avaliados para fatores de risco tradicionais, como idade, sexo, história familiar de DCV, hipertensão, tabagismo e atividade física, e foram comparados com indivíduos de controle. Os dados coletados foram inseridos no SPSS versão 24 para análise e interpretação. A média de idade nos grupos controles e experimentais foi de 43,00 ± 8,42 anos e 44,72 ± 8,59 anos com distribuição estatisticamente igual (p-valor = 0,144). A homocisteína plasmática média para os casos foi de 22,33 ± 9,22 µmol / L, enquanto no grupo controle foi de 12,59 ± 3,73 µmol / L. Diferença altamente significativa foi observada entre o nível plasmático médio de homocisteína em casos e controles (p 0,001). A regressão logística simples indica uma forte associação de doença cardíaca coronária com hiper-homocisteinemia (OR 7,45), que permaneceu significativamente associada com doença cardíaca coronária por multivariada regressão logística (OR 7,10, 95% C1 3,12-12,83, p = 0,000). O presente estudo conclui que níveis elevados de homocisteína plasmática são fator de risco independente para doença cardíaca coronária, independentemente dos fatores de risco convencionais, e pode ser usado como um indicador para prever a possibilidade futura de aparecimento de DCV.