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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-222064

Resumo

O crescimento folicular em mamíferos é um evento complexo e dinâmico que requer uma interação de diferentes moléculas e vias de sinalização celular. Em bovinos, principalmente as células da granulosa sofrem diferenciações morfofisiológicas fundamentais para a síntese do 17-estradiol (E2), através da expressão do citocromo P450 da família 19 do membro 1 da subfamília A (CYP19A1). A via de sinalização Hippo regula a homeostase tecidual, controlando o equilíbrio entre a proliferação e a apoptose das células. O efetor YAP1 controla a transcrição de genes proliferativos e anti-apoptóticos ao interagir com fatores de transcrição membros da família de domínios TEA (TEAD), e entre os genes alvo de YAP1 destaca-se o connective tissue growth factor (CTGF). Porém, a participação da via Hippo na dinâmica do crescimento folicular em bovinos ainda não foi totalmente compreendida. No presente trabalho, buscamos entender como ocorre a regulação de YAP1, principalmente sob o estímulo de FSH, durante o processo de divergência folicular. Para isso, utilizamos um cultivo de células da granulosa que mimetiza aspectos fisiológicos (in vitro), bem como células da granulosa de animais ovariectomizados (in vivo). Nossos resultados mostram que os tratamentos com FSH parece aumentama fosforilação de YAP1 para que ocorra a diferenciação celular. Além disso, quando adicionados inibidores da ligação YAP1-TEADo cultivo de células da granulosa, houve aumento da expressão de CYP19A1. Portanto, sugerimos que os níveis de YAP1 fosforilado aumentem à medida que ocorra o estabelecimento da dominância folicular.


Follicular growth in mammals is a complex and dynamic event that requires an interaction of different molecules and cell signaling pathways. In cattle, mainly granulosa cells undergo fundamental morphophysiological differentiations for the synthesis of 17-estradiol (E2), through the expression of cytochrome P450 family 19 subfamily A member 1 (CYP19A1). The Hippo signaling pathway regulates tecidual homeostasis controlling the balance between proliferation and apoptosis. The effector YAP1 controls the transcription of proliferative and anti-apoptotic genes by interacting with transcription factors of the TEA domain family member (TEAD); among the target genes of YAP1, we are particularly interested in the connective tissue growth factor (CTGF). In the present work, we seek to understand how YAP1 regulation occurs, mainly under FSH stimulation, during the follicular divergence process. To accomplish this aim we use a culture of granulosa cells that mimics physiological aspects (in vitro) and also granulosa cells of ovariectomized animals (in vivo). Our results show that FSH appears to increase YAP1 phosphorylation, allowing cell differentiation to occur. In addition, when YAP1 inhibitors were added to the granulosa cell culture, there was an increase in CYP19A1 expression. Therefore, we suggest that the levels of phosphorylated YAP1 will increase as follicular dominance is established.

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