Resumo
ABSTRACT This study aimed to establish the reference values for the interpretation of the skin test in sheep experimentally inoculated with standard strains of Mycobacterium bovis AN5 and Mycobacterium avium D4, and evaluated the clinical manifestations induced by the intradermic immune-allergic response to tuberculin. Thirty healthy sheep were separated in three groups: A) sensitized with M. avium, n = 10; B) sensitized with M. bovis, n = 10; and C) control, n = 10, which were injected with saline solution. After 45 days of inoculation, the Comparative Cervical Test (CCT) was evaluated by the variation of dermal thickness measured by skinfold calipers carried out at the following moments: before the administration of tuberculin (PPD purified protein derivative) and at 12, 48, 72 and 96 hours after PPD inoculation. In regard to the bovine PPD, the Single Cervical Test (SCT), observed at 72 hours (± 6 hours) post-tuberculinization (p.t.) the response was considered as: positive, when skinfold thickness was equal or greater than 2.40 mm; inconclusive, when skinfold thickness was between 1 and 2.40 mm; and negative, when skinfold thickness was lower than 1 mm. Analyses of the results of the CCT performed at 72 hr p.t.
RESUMO Esta pesquisa visou estabelecer valores de referência para a interpretação da reação tuberculínica em ovinos experimentalmente inoculados com cepas padrões de Mycobacterium bovis AN5 e Mycobacterium avium D4, além de avaliar possíveis reações clínicas provocadas pela resposta imuno-alérgica intradérmica à tuberculina. Utilizou-se 30 ovinos, distribuídos por 3 grupos de 10 animais cada, a saber: A sensibilizados M. avium; B sensibilizados M. bovis e C não sensibilizado (controle) que receberam injeção de solução fisiológica. Após 45 dias da sensibilização, realizou-se o Teste Cervical Comparativo (TCC) com reação medida pela variação da espessura da pele com cutímetro de mola, nos seguintes momentos: antes da aplicação das tuberculinas (PPDs -derivado protéico purificado), 12h, 24h, 48h, 72h e 96h após a aplicação. Em relação à reação ao PPD bovino, no Teste Cervical Simples (TCS), lido às 72h (± 6 horas) pós-tuberculinização (p. t.), considerou-se uma reação positiva, quando o aumento da espessura da pele foi igual ou maior que 2,40 mm; como inconclusiva, com aumento entre 1,00 e 2,40 mm, e como reação negativa, aumentos da espessura da pele inferiores a 1 mm. A análise dos resultados da leitura do TCC, realizada às 72h p. t., permitiu concluir que o animal poderá ser considerado com resposta: positiva, quando a reação ao PPD bovino superar aquela ao aviário em pelo menos 2 mm; inconclusiva, quando a reação ao PPD bovino for maior que aquela ao aviário, com diferença entre 1 e 1,90 mm, e negativa quando a reação bovina for menor que a aviária ou maior em até 0,90 mm. Estes valores obtidos para o TCS e TCC são propostos como padrão de interpretação desses testes em ovinos.
Resumo
ABSTRACT The aim of the present study was to evaluate variations in proteinogram occurring during the estrus cycle of animals infected or not by caprine arthritis encephalitis. Forty blood samples were collected from female goats in different phases of the estrus cycle (estrus, proestrus, metaestrus and diestrus). Samples were classified as positive (n = 5) and negative (n = 5), according to the results of the survey of antibodies against caprine arthritis encephalitis as performed by immunodiffusion in agar gel. Samples were also used in the determination of albumin, total protein and alpha, beta and gammaglobulin by means of electrophoresis and biuret method, respectively. Electrophoresis showed that estrus, proestrus, metaestrus and diestrus positive animals presented total protein mean equal to 7.96 ± 0.69, 7.67 ± 1.14, 7.77 ± 0.36, 7.48 ± 0.83; mean albumin equal to 3.22 ± 0.41, 3.11 ± 0.68, 3.30 ± 0.67, 3.28 ± 0.57; mean alphaglobulin equal to 0.70 ± 0.09, 0.70 ± 0.12, 0.69 ± 0.12, 0.61 ± 0.11; mean betaglobulin 1 equal to 0.85 ± 0.04, 0.87 ± 0.04, 0.90 ± 0.12, 0.83 ± 0.11; mean betaglobulin 2 equal to 0.77 ± 0.18, 0.68 ± 0.17, 0.60 ± 0.15, 0.54 ± 0.09; and mean gammaglobulin equal to 2.43 ± 0.47, 2.31 ± 0.54, 2.28 ± 0.49, 2.21 ± 0.54. Negative animals presented mean total protein equal 7.76 ± 1.31, 8.03 ± 1.10, 7.50 ± 0.51, 6.49 ± 1.14; mean albumin equal to 3.06 ± 0.46, 3.19 ± 0.46, 3.03 ± 0.62, 2.93 ± 0.96; mean alphaglobulin equal to 0.69 ± 0.19, 0.75 ± 0.18, 0.70 ± 0.24, 0.58 ± 0.20; mean betaglobulin 1 equal to 0.79 ± 0.03, 0.79 ± 0.23, 0.80 ± 0.15, 0.66 ± 0.16; mean betaglobulin 2 equal to 0.67 ± 0.20, 0.95 ± 0.37, 0.81 ± 0.40, 0.73 ± 0.41; and mean gammaglobulin equal to 2.35 ± 1.42; 2.42 ± 1.30, 2.23 ± 1.03, 1.92 ± 0.70, respectively. Variance analysis did not show any statistically significant differences. Animals infected by caprine arthritis encephalitis (CAE) did not present any changes in proteinogram, regardless of the phase of the estrus cycle they were in.
RESUMO O presente trabalho teve com objetivo avaliar variações ocorridas durante o ciclo estral no proteinograma em animais infectados pela artrite encefalite caprina. Foram coletadas 40 amostras de sangue de cabras, nas diferentes fases do ciclo estral (estro, proestro, metaestro e diestro), as quais foram classificadas como positivas (n = 5) e negativas (n = 5), de acordo com o resultado da pesquisa de anticorpos contra o vírus da artrite encefalite caprina realizada pela prova de imunodifusão em gel de ágar. Nas amostras foram determinadas as concentrações de albumina, alfaglobulina, betaglobulina e gamaglobulina e dosagem de proteínas totais pelos métodos de eletroforese e biureto respectivamente. As análises eletroforéticas, realizadas, estro, proestro, metaestro e no diestro, os animais positivos apresentaram média de 7,96 ± 0,69, 7,67 ± 1,14, 7,77 ± 0,36, 7,48 ± 0,83 de proteína total, média de 3,22 ± 0,41, 3,11 ± 0,68, 3,30 ± 0,67, 3,28 ± 0,57 de albumina, média de 0,70 ± 0,09, 0,70 ± 0,12, 0,69 ± 0,12, 0,61 ± 0,11 de alfaglobulina, média de 0,85 ± 0,04, 0,87 ± 0,04, 0,90 ± 0,12, 0,83 ± 0,11 de betaglobulina1, média de 0,77 ± 0,18, 0,68 ± 0,17, 0,60 ± 0,15; 0,54 ± 0,09 de betaglobulina2 e média de 2,43 ± 0,47, 2,31 ± 0,54, 2,28 ± 0,49, 2,21 ± 0,54 de gamaglobulina e os animais negativos apresentaram média de 7,76 ± 1,31, 8,03 ± 1,10, 7,50 ± 0,51, 6,49 ± 1,14 de proteína total; média de 3,06 ± 0,46; 3,19±0,46; 3,03±0,62; 2,93±0,96 de albumina; média de 0,69 ± 0,19, 0,75 ± 0,18, 0,70 ± 0,24, 0,58 ± 0,20 de alfaglobulina; média de 0,79 ± 0,03, 0,79 ± 0,23, 0,80 ± 0,15, 0,66 ± 0,16 de betaglobulina1; média de 0,67 ± 0,20, 0,95 ± 0,37, 0,81 ± 0,40, 0,73 ± 0,41 de betaglobulina2; e média de 2,35 ± 1,42, 2,42 ± 1,30, 2,23 ± 1,03, 1,92 ± 0,70 de gamaglobulina, respectivamente. Não foram encontradas diferenças estatísticas significantes na análise de variância. Os animais infectados pela artrite encefalite caprina (CAE) não apresentam alterações no proteinograma independentemente da fase do ciclo estral em que se encontravam.