Prostaglandin F2α treatment concurrent with artificial insemination does not affect bovine embryo production / Administração de prostaglandina F2 alfa no momento da inseminação artificial não afeta a produção de embriões bovinos

Treatment with prostaglandin F2α (PGF) induces ovulation and increases conception rates in cows, while improving embryo production in buffalos. However, its effect on superovulated cows is unknown. This study verified whether single PGF administration concurrent with artificial insemination (AI) improves fertilization and embryo production rates in superovulated cows. In each replicate, embryo donor cows were equally allocated to two groups: the untreated control and PGF groups. The latter of which received 482 µg of cloprostenol concurrent with the first AI. Each cow (n = 35) was subjected to two superovulations (SOV) in a crossover design (total = 70 embryo collections). In the control and PGF groups, respectively, the observed responses were [median (95% CI)]: 12 (10-18) and 15 (12-18) total structures, 9 (7-11) and 7 (6-10) viable embryos, 1 (0-1) and 1 (1-3) degenerated embryos, and 1 (0-3) and 2 (0-5) oocytes (P > 0.05). In conclusion, single PGF treatment concurrent with the first AI did not affect embryo production in superovulated cows.

A prostaglandina F2α (PGF) pode induzir a ovulação e melhorar tanto a concepção em vacas, como a produção de embriões em búfalas, mas o efeito em vacas superovuladas é desconhecido. Esse estudo teve como objetivo verificar se a administração de uma dose de PGF na inseminação artificial (IA) após a superovulação (SOV) melhora as taxas de fecundação e produção embrionária em vacas. Em cada replicação, vacas doadoras de embriões foram equilibradamente alocadas em dois grupos: controle, não tratado, ou PGF, que recebeu 482 µg de cloprostenol no momento da primeira IA. Cada doadora (n = 35) foi submetida a duas SOV em um delineamento crossover (total = 70 coletas de embriões). Nos grupos controle e PGF, respectivamente, foram observados [medianas (IC 95%)]: 12 (10-18) e 15 (12-18) estruturas totais; 9 (7-11) e 7 (6-10) embriões viáveis; 1 (0-1) e 1 (1-3) embriões degenerados; e 1 (0-3) e 2 (0-5) ovócitos (P > 0,05). Conclui-se que uma única administração de PGF no momento da primeira IA não afeta a produção embrionária de vacas superovuladas.

Prostaglandin F2α treatment concurrent with artificial insemination does not affect bovine embryo production / Administração de prostaglandina F2 alfa no momento da inseminação artificial não afeta a produção de embriões bovinos

ABSTRACT: Treatment with prostaglandin F2α (PGF) induces ovulation and increases conception rates in cows, while improving embryo production in buffalos. However, its effect on superovulated cows is unknown. This study verified whether single PGF administration concurrent with artificial insemination (AI) improves fertilization and embryo production rates in superovulated cows. In each replicate, embryo donor cows were equally allocated to two groups: the untreated control and PGF groups. The latter of which received 482 µg of cloprostenol concurrent with the first AI. Each cow (n = 35) was subjected to two superovulations (SOV) in a crossover design (total = 70 embryo collections). In the control and PGF groups, respectively, the observed responses were [median (95% CI)]: 12 (10-18) and 15 (12-18) total structures, 9 (7-11) and 7 (6-10) viable embryos, 1 (0-1) and 1 (1-3) degenerated embryos, and 1 (0-3) and 2 (0-5) oocytes (P > 0.05). In conclusion, single PGF treatment concurrent with the first AI did not affect embryo production in superovulated cows.

RESUMO: A prostaglandina F2α (PGF) pode induzir a ovulação e melhorar tanto a concepção em vacas, como a produção de embriões em búfalas, mas o efeito em vacas superovuladas é desconhecido. Esse estudo teve como objetivo verificar se a administração de uma dose de PGF na inseminação artificial (IA) após a superovulação (SOV) melhora as taxas de fecundação e produção embrionária em vacas. Em cada replicação, vacas doadoras de embriões foram equilibradamente alocadas em dois grupos: controle, não tratado, ou PGF, que recebeu 482 µg de cloprostenol no momento da primeira IA. Cada doadora (n = 35) foi submetida a duas SOV em um delineamento crossover (total = 70 coletas de embriões). Nos grupos controle e PGF, respectivamente, foram observados [medianas (IC 95%)]: 12 (10-18) e 15 (12-18) estruturas totais; 9 (7-11) e 7 (6-10) embriões viáveis; 1 (0-1) e 1 (1-3) embriões degenerados; e 1 (0-3) e 2 (0-5) ovócitos (P > 0,05). Conclui-se que uma única administração de PGF no momento da primeira IA não afeta a produção embrionária de vacas superovuladas.

Manual collapse of blastocoels in not effective in increasing the viability of vitrified equine embryos / Colabamento manual da blastocele não foi efetivo para aumentar a viabilidade de embriões equinos vitrificados

Embryo cryopreservation methods have been used for commercialization and formation of genetic banks. Cryopreservation of equine embryos <300 µm in diameter, collected at days 6-6.5 after ovulation, allows satisfactory pregnancy rates. However, higher embryo collection rates in mares are obtained when uterine flush is performed between days 7 and 8 after ovulation when embryos are >300 µm in diameter, needing blastocoel collapse for satisfactory resistance to cryopreservation by vitrification. To evaluate the viability of simplified blastocoel collapse by embryo puncture with low technology and low-cost equipment, 22 embryos, collected at day 8 post-ovulation (D8), were allocated to the following groups: (1) micropuncture with a 30 G needle, assisted by a mechanical micromanipulator, before vitrification (n=4); (2) manual blade microsection before vitrification (n=6); (3) no manipulation prior to vitrification (n=8); and (4) freshly inovulated embryos (n=4). Despite the high re-expansion rates observed after vitrification, embryos manipulated prior to vitrification (groups MP and MS) did not result in pregnancy 25 days after transfer. On the other hand, embryos from groups NM (non-micromanipulated) and FR (freshly inovulated) resulted in pregnancies at 25 days. Under the conditions of the present study, manual blastocoel collapse was not efficient in increasing cryotolerance to vitrification among large embryos, requiring improvements to obtain pregnancies.(AU)

Métodos de criopreservação de embriões têm sido utilizados com diversos objetivos. Maiores taxas de coleta embrio-nária em éguas com lavagem uterina realizada 7 a 8 dias pós ovulação. A criopreservação de embriões equinos com diâmetro <300 µm (6-6,5 dias após a ovulação) permite a obtenção de taxas de prenhez satisfatórias. Embriões com diâmetro >300 µm (7º dia pós-ovulação) somente são adequadamente criopreservados quando submetidos a colabamento da blastocele. Objetivando avaliar a viabilidade da punção da blastocele com equipamento de baixa sofisticação e custo, 22 embriões coletados no 8º. dia pós-ovulação (D8) foram alocados aos seguintes grupos: (1) micropunção com uma agulha 30 G assistida por micromanipula-dor antes da vitrificação (n=4); (2) microssecção manual por lâmina antes da vitrificação (n=6); (3) sem manipulação anterior à vitrificação (n=8); e (4) transferidos a fresco (n=4). Apesar de altas taxas de reexpansão após a criopreservação, os embriões manipulados previamente a vitrificação não resultaram em prenhez aos 25 dias. Tanto os embriões não micromanipulados, quanto os transferidos a fresco resultaram em prenhezes aos 25 dias. A microssecção manual não se mostrou eficiente como método para aumento da criotolerância de embriões grandes, necessitando um aprimoramento visando a obtenção de prenhezes.(AU)

Paraoxonase 1 activity in the sperm-rich portion of boar ejaculates is positively associated with sperm quality

Associations of the activity of the paraoxonase 1 (PON1) enzyme with boar sperm quality still needs to be characterized, since boar ejaculates present distinct portions with differences in sperm concentration and quality. This study evaluated PON1 activity in the serum, in the distinct portions of boar ejaculates and estimated correlations with sperm quality parameters. Ejaculates and blood samples were collected from six boars for three weeks (two per week per boar; n = 36). Serum and post-spermatic portion PON1 activities were positively correlated (P = 0.01) but were both uncorrelated with the PON1 activity in the sperm-rich portion and in the whole ejaculate (P > 0.05). Differences in PON1 activity among boars were only observed in the sperm-rich portion of the ejaculate (P < 0.05). The PON1 activity in the serum and in the post-spermatic portion was generally negatively correlated with parameters of spermatozoa kinetics (P < 0.05). In the sperm-rich portion, PON1 activity was positively correlated with sperm concentration (P < 0.0001), curvilinear distance and velocity (both P < 0.05) and DNA integrity (P < 0.05), but negatively correlated with straightness and linearity (P < 0.05). Thus, boar ejaculates with increased PON1 activity in the sperm-rich portion may present increased concentration and spermatozoa with acceptable curvilinear velocity and distance and DNA integrity, which suggests that PON1 activity may be a biomarker for potential fertility.(AU)

Hormônios utilizados na indução da ovulação em bovinos – Artigo de revisão / Hormones used as ovulation inducers in cattle – A review

Diversos hormônios podem ser utilizados em protocolos que visam otimizar biotécnicas reprodutivas como a inseminação artificial (IA) e inseminação artificial em tempo fixo (IATF), que exigem controle preciso do ciclo estral e da ovulação. Alguns hormônios possuem ação central no eixo hipotalâmico-hipofisário, como o hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH) e os ésteres de estradiolcomo o benzoato (BE) e o cipionato de estradiol (CE), enquanto outros como a gonadotrofina coriônica humana (hCG) e o hormônio luteinizante (LH) apresentam ação local, a nível ovariano. Atualmente os protocolos mais utilizados para indução da ovulação utilizam GnRH e estrógenos. Recentemente, foi demonstrado que as prostaglandinas possuem efeitos positivos na indução do processo ovulatório, mas seu mecanismo de ação não está totalmente esclarecido. A presente revisão tem por objetivo abordar os principais indutores da ovulação utilizados em protocolos para controle do ciclo estral em bovinos, relatando o período de ocorrência das ovulações após a sua aplicação.

Several hormones may be used in protocols aimed to optimize reproductive biotechniques such as artificial insemination (AI) and fixed-timed artificial insemination (FTAI) which require precise control of the estrous cycle and the ovulation. Some hormones act on the hypothalamic-pituitary axis, such as the gonadotrophin releasing hormone (GnRH) and estradiol esters such as estradiol benzoate (EB) and cypionate (EC), whereas others act directly on the ovaries, such as human chorionic gonadotrophin (hCG) and luteinizing hormone (LH). Currently, the most commonly used protocols for ovulation induction use GnRH or estrogen. Prostaglandins have recently been shown to have positive effects on induction of the ovulatory process, but their mechanism of action is not fully understood. The present review aims to address the main ovulation inducers used in protocols to control the estrous cycle in cattle, emphasizing the period between their administration and the occurrence of ovulation.

Hormônios utilizados na indução da ovulação em bovinos Artigo de revisão / Hormones used as ovulation inducers in cattle A review

Diversos hormônios podem ser utilizados em protocolos que visam otimizar biotécnicas reprodutivas como a inseminação artificial (IA) e inseminação artificial em tempo fixo (IATF), que exigem controle preciso do ciclo estral e da ovulação. Alguns hormônios possuem ação central no eixo hipotalâmico-hipofisário, como o hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH) e os ésteres de estradiolcomo o benzoato (BE) e o cipionato de estradiol (CE), enquanto outros como a gonadotrofina coriônica humana (hCG) e o hormônio luteinizante (LH) apresentam ação local, a nível ovariano. Atualmente os protocolos mais utilizados para indução da ovulação utilizam GnRH e estrógenos. Recentemente, foi demonstrado que as prostaglandinas possuem efeitos positivos na indução do processo ovulatório, mas seu mecanismo de ação não está totalmente esclarecido. A presente revisão tem por objetivo abordar os principais indutores da ovulação utilizados em protocolos para controle do ciclo estral em bovinos, relatando o período de ocorrência das ovulações após a sua aplicação.(AU)

Several hormones may be used in protocols aimed to optimize reproductive biotechniques such as artificial insemination (AI) and fixed-timed artificial insemination (FTAI) which require precise control of the estrous cycle and the ovulation. Some hormones act on the hypothalamic-pituitary axis, such as the gonadotrophin releasing hormone (GnRH) and estradiol esters such as estradiol benzoate (EB) and cypionate (EC), whereas others act directly on the ovaries, such as human chorionic gonadotrophin (hCG) and luteinizing hormone (LH). Currently, the most commonly used protocols for ovulation induction use GnRH or estrogen. Prostaglandins have recently been shown to have positive effects on induction of the ovulatory process, but their mechanism of action is not fully understood. The present review aims to address the main ovulation inducers used in protocols to control the estrous cycle in cattle, emphasizing the period between their administration and the occurrence of ovulation.(AU)

Identificação de fatores de virulência de isolados de Escherichia coli oriundos de fezes de bezerros na região Sul do Brasil / Identification of virulence factors of Escherichia coli isolates from fecal samples of calves in southern Brazil

Background: Escherichia coli (E. coli) is an enteropathogen that commonly causes diarrhea in calves. However, not all E. coli isolates are pathogenic. The aim of this study was to identify E. coli virulence factors derived from fecal samples collected in the southern region of Rio Grande do Sul state (RS) from calves with and without diarrhea, as well as investigate the antimicrobial susceptibility of E. coli isolates from calves with diarrhea. Materials, Methods & Results: Forty stool samples were collected in 12 farms, each one from calves having one day to six months of age, with and without diarrhea. The total DNA of from these isolates was extracted and a PCR using primers specific for the virulence factors Stx1, Eae, F41, F5 and STa was conducted. The susceptibility testing used the disk diffusion method and the susceptibility profile was evaluated against the following antimicrobials: ampicillin, penicillin, chloramphenicol, enrofloxacin, gentamicin, trimethoprim, sulfonamide, tetracycline and streptomycin. From all calves, 15 (15/40, 37.5%) had diarrheal stools and 25 (25/40, 62.5%) had normal or semi-liquid stools. Twelve (12/40; 30%) E. coli isolates showed at least one virulence factor. These factors were found in four isolates (4/15; 26.6%) from diarrheal stools and eight isolates (8/25; 28.5%) from normal stool. The Stx1 factor was identified in five isolates (5/40; 12.5%), and the Eae and the Sta factors in one (1/40; 0.2%) and in atypical associations between Stx1 and Eae and also between Eae and F41 in two isolates (2/40; 0.5%). Also, the Eae and Sta factors were identified in one isolate (1/40; 0.2%). The susceptibility test showed resistance to penicillin and tetracycline in 93% and 80% of the tested isolates, respectively. Discussion: The identification of virulence factors is necessary because E. coli is an enterobacterium present in calves gastrointestinal tract, to prove its pathogenicity. […]

Identification of Virulence Factors of Escherichia coli Isolates from Fecal Samples of Calves in Southern Brazil

Background: Escherichia coli (E. coli) is an enteropathogen that commonly causes diarrhea in calves. However, not all E. coli isolates are pathogenic. The aim of this study was to identify E. coli virulence factors derived from fecal samples collected in the southern region of Rio Grande do Sul state (RS) from calves with and without diarrhea, as well as investigate the antimicrobial susceptibility of E. coli isolates from calves with diarrhea.Materials, Methods & Results: Forty stool samples were collected in 12 farms, each one from calves having one day to six months of age, with and without diarrhea. The total DNA of from these isolates was extracted and a PCR using primers specific for the virulence factors Stx1, Eae, F41, F5 and STa was conducted. The susceptibility testing used the disk diffusion method and the susceptibility profile was evaluated against the following antimicrobials: ampicillin, penicillin, chloramphenicol, enrofloxacin, gentamicin, trimethoprim, sulfonamide, tetracycline and streptomycin. From all calves, 15 (15/40, 37.5%) had diarrheal stools and 25 (25/40, 62.5%) had normal or semi-liquid stools. Twelve (12/40; 30%) E. coli isolates showed at least one virulence factor. These factors were found in four isolates (4/15; 26.6%) from diarrheal stools and eight isolates (8/25; 28.5%) from normal stool. The Stx1 factor was identified in five isolates (5

Identificação de fatores de virulência de isolados de Escherichia coli oriundos de fezes de bezerros na região Sul do Brasil / Identification of virulence factors of Escherichia coli isolates from fecal samples of calves in southern Brazil

Background: Escherichia coli (E. coli) is an enteropathogen that commonly causes diarrhea in calves. However, not all E. coli isolates are pathogenic. The aim of this study was to identify E. coli virulence factors derived from fecal samples collected in the southern region of Rio Grande do Sul state (RS) from calves with and without diarrhea, as well as investigate the antimicrobial susceptibility of E. coli isolates from calves with diarrhea. Materials, Methods & Results: Forty stool samples were collected in 12 farms, each one from calves having one day to six months of age, with and without diarrhea. The total DNA of from these isolates was extracted and a PCR using primers specific for the virulence factors Stx1, Eae, F41, F5 and STa was conducted. The susceptibility testing used the disk diffusion method and the susceptibility profile was evaluated against the following antimicrobials: ampicillin, penicillin, chloramphenicol, enrofloxacin, gentamicin, trimethoprim, sulfonamide, tetracycline and streptomycin. From all calves, 15 (15/40, 37.5%) had diarrheal stools and 25 (25/40, 62.5%) had normal or semi-liquid stools. Twelve (12/40; 30%) E. coli isolates showed at least one virulence factor. These factors were found in four isolates (4/15; 26.6%) from diarrheal stools and eight isolates (8/25; 28.5%) from normal stool. The Stx1 factor was identified in five isolates (5/40; 12.5%), and the Eae and the Sta factors in one (1/40; 0.2%) and in atypical associations between Stx1 and Eae and also between Eae and F41 in two isolates (2/40; 0.5%). Also, the Eae and Sta factors were identified in one isolate (1/40; 0.2%). The susceptibility test showed resistance to penicillin and tetracycline in 93% and 80% of the tested isolates, respectively. Discussion: The identification of virulence factors is necessary because E. coli is an enterobacterium present in calves gastrointestinal tract, to prove its pathogenicity. […](AU)

Concentração de lactato de cálcio e tempo de incubação sobre a capacidade de adesão e penetração de espermatozoides suínos na membrana perivitelina do ovo da galinha

This study tested the effect of different calcium lactate concentrations and incubation periods on the binding and penetration capacity of swine sperm to the perivitelline layers (PL) of chicken eggs, with the expectation of developing a test to estimate the potential fertility of boars used as sperm donors. In the first experiment, semen samples (n=12) were incubated with TCM medium ant two calcium lactate levels: 1.1 and 2.2µg mL-1. After the set up of fixed calcium lactate level (1.1µg mL-1), the second experiment compared three incubation periods: 10, 15 and 20min. The observed variables were binding rate (BR) and number of bound sperm (NB) in the outer PL, and penetration rate (PR) and number of holes (NH) in the inner PL. The BR to the outer MP was 100%, regardless of the tested concentrations and incubation periods. The NB to the outer perivitelline layer and the PR and the NH in the inner perivitelline layer were greater with 1.1µg mL-1 calcium lactate than 2.2µg mL-1. The NB in the outer PL was greater with 20min incubation than with shorter period (P 0.05). Using 10min incubation, there was no penetration in the inner PL, but, with incubation for 20min, the PR and the NH in the inner PL were greater than those with incubation for 15 min (P 0.05). Using 1.1µg mL-1 calcium lactate and incubation for 20min, the in vitro test using PL can be efficiently conducted to assess important steps of the fertilization process.

Este estudo testou o efeito de diferentes concentrações de lactato de cálcio e tempos de incubação sobre a capacidade de adesão e a penetração dos espermatozoides suínos nas membranas perivitelinas (MP) de ovos de galinhas, na expectativa de desenvolver um teste para estimar o potencial de fertilidade de machos doadores de sêmen. No primeiro experimento, amostras de sêmen (n=12) foram incubadas em meio TCM com lactato de cálcio a 1,1 e 2,2µg mL-1. Posteriormente, após definida a concentração de 1,1µg mL-1 de lactato de cálcio, um segundo experimento comparou três períodos de incubação a 39°C: 10, 15 e 20min. As respostas testadas foram: a taxa de adesão (TA) e o número de espermatozoides aderidos (NA) na MP externa, e a taxa de penetração (TP) e o número de orifícios (NO) na MP interna. A TA na MP externa foi de 100%, independentemente da concentração e dos períodos testados. Com a concentração de lactato de cálcio de 1,1µg mL-1, o NA na membrana perivitelina externa e TP e NO na membrana perivitelina interna foram superiores (P 0,05) aos com 2,2µg mL-1. O NA foi superior com incubação por 20min, em comparação aos períodos mais curtos (P 0,05). No período de incubação por 10min, não houve penetração na MP interna. Porém, com 20min de incubação, a TP na MP interna e o NO foram superiores aos obtidos com a incubação por 15min (P 0,05). A concentração de 1,1µg mL-1 de lactato de cálcio e o perídodo de incubação por 20min permitem a execução eficiente de testes in vitro usando MP para verificar etapas importantes do processo de fertilização.

Concentração de lactato de cálcio e tempo de incubação sobre a capacidade de adesão e penetração de espermatozoides suínos na membrana perivitelina do ovo da galinha

This study tested the effect of different calcium lactate concentrations and incubation periods on the binding and penetration capacity of swine sperm to the perivitelline layers (PL) of chicken eggs, with the expectation of developing a test to estimate the potential fertility of boars used as sperm donors. In the first experiment, semen samples (n=12) were incubated with TCM medium ant two calcium lactate levels: 1.1 and 2.2µg mL-1. After the set up of fixed calcium lactate level (1.1µg mL-1), the second experiment compared three incubation periods: 10, 15 and 20min. The observed variables were binding rate (BR) and number of bound sperm (NB) in the outer PL, and penetration rate (PR) and number of holes (NH) in the inner PL. The BR to the outer MP was 100%, regardless of the tested concentrations and incubation periods. The NB to the outer perivitelline layer and the PR and the NH in the inner perivitelline layer were greater with 1.1µg mL-1 calcium lactate than 2.2µg mL-1. The NB in the outer PL was greater with 20min incubation than with shorter period (P 0.05). Using 10min incubation, there was no penetration in the inner PL, but, with incubation for 20min, the PR and the NH in the inner PL were greater than those with incubation for 15 min (P 0.05). Using 1.1µg mL-1 calcium lactate and incubation for 20min, the in vitro test using PL can be efficiently conducted to assess important steps of the fertilization process.

Este estudo testou o efeito de diferentes concentrações de lactato de cálcio e tempos de incubação sobre a capacidade de adesão e a penetração dos espermatozoides suínos nas membranas perivitelinas (MP) de ovos de galinhas, na expectativa de desenvolver um teste para estimar o potencial de fertilidade de machos doadores de sêmen. No primeiro experimento, amostras de sêmen (n=12) foram incubadas em meio TCM com lactato de cálcio a 1,1 e 2,2µg mL-1. Posteriormente, após definida a concentração de 1,1µg mL-1 de lactato de cálcio, um segundo experimento comparou três períodos de incubação a 39°C: 10, 15 e 20min. As respostas testadas foram: a taxa de adesão (TA) e o número de espermatozoides aderidos (NA) na MP externa, e a taxa de penetração (TP) e o número de orifícios (NO) na MP interna. A TA na MP externa foi de 100%, independentemente da concentração e dos períodos testados. Com a concentração de lactato de cálcio de 1,1µg mL-1, o NA na membrana perivitelina externa e TP e NO na membrana perivitelina interna foram superiores (P 0,05) aos com 2,2µg mL-1. O NA foi superior com incubação por 20min, em comparação aos períodos mais curtos (P 0,05). No período de incubação por 10min, não houve penetração na MP interna. Porém, com 20min de incubação, a TP na MP interna e o NO foram superiores aos obtidos com a incubação por 15min (P 0,05). A concentração de 1,1µg mL-1 de lactato de cálcio e o perídodo de incubação por 20min permitem a execução eficiente de testes in vitro usando MP para verificar etapas importantes do processo de fertilização.

Efeito de diferentes métodos de congelamento, diluentes e tempos de resfriamento sobre a qualidade do sêmen suíno criopreservado / Effect of different freezing methods, extenders and duration of freezing on quality of frozen boar semen

Artificial inseminations in swine are conducted with liquid semen cooled at 15 to 18ºC for 1 to 5 d. Frozen semen in not routinely used due to its poor reproductive performance in comparison with cooled semen. In semen freezing protocols, egg yolk is added to extenders to protect the sperm membrane against cold shock. The cryoprotectant effect of egg yolk is attributed to the presence of low density lipoprotein (LDL) in its composition. Thus, replacement of egg yolk by LDL in the composition of extenders may be feasible to reduce cryoinjuries in sperm cells due to cold shock. During the process of sperm freezing the cell receive structural and functional injuries that could impair the fertilization process. Two experiments were conducted to evaluate the effect of freezing method, extenders and duration of the freezing process.[...](AU)

Efeito de diferentes métodos de congelamento, diluentes e tempos de resfriamento sobre a qualidade do sêmen suíno criopreservado / Effect of different freezing methods, extenders and duration of freezing on quality of frozen boar semen

Artificial inseminations in swine are conducted with liquid semen cooled at 15 to 18ºC for 1 to 5 d. Frozen semen in not routinely used due to its poor reproductive performance in comparison with cooled semen. In semen freezing protocols, egg yolk is added to extenders to protect the sperm membrane against cold shock. The cryoprotectant effect of egg yolk is attributed to the presence of low density lipoprotein (LDL) in its composition. Thus, replacement of egg yolk by LDL in the composition of extenders may be feasible to reduce cryoinjuries in sperm cells due to cold shock. During the process of sperm freezing the cell receive structural and functional injuries that could impair the fertilization process. Two experiments were conducted to evaluate the effect of freezing method, extenders and duration of the freezing process.[...]

Número de inseminações artificiais por estro em fêmeas suínas: Associação com o perfil estral e impacto sobre o desemprenho reprodutivo / Number of artificial inseminations per estrus in swine: Association with estrus profiles and impact on reproductive performance

Em suínos, é comum a realização de múltiplas inseminações artificiais (IA) por estro, em função da longa duração do estro. Este estudo observacional teve o objetivo de verificar a associação entre o número de IA realizada por estro com a duração do estro e o desempenho reprodutivo subsequente, em uma granja comercial. Após avaliação do perfile estral e da dinâmica folicular por ultrassonografia, por equipes independentes, o número de IA por estro foi registrado, sem interferência no manejo da granja. A primeira IA era realizada no momento da detecção do estro e as IA subsequentes eram realizadas em intervalos de 12 horas, enquanto a fêmea mostrasse sinais de estro. Compararam-se a taxa de parição e o tamanho total da leitegada em função do número de IA por estro. Também foi estimado o risco da realização de mais de 3 IA por estro, em função da duração do estro. A taxa de parição das fêmeas que receberam duas IA (92,0%) foi maior (p 0,05) entre fêmeas que receberam duas, três ou quatro a seis IA (10,6, 12,0 e 12,0, respectivamente). Para as fêmeas com duração do estro superior a 78 horasoras, o risco de receberem quatro a seis IA durante o estro foi 6,1 vezes maior do que o risco para fêmeas com duração do estro inferior a 50 horasoras (p < 0,05) e 3,4 vezes maior do que o risco para fêmeas com duração do estro entre 50 a 74 horas (p < 0,05). Ainda que a longa duração do estro permita um maior número de IA por estro, pode-se concluir que um número de IA por estro superior a três não é recomendado, pois não há benefício para o desempenho reprodutivo.

In swine, multiple artificial inseminations (AI) are commonly performed per estrus due to the long estrus duration. This observational study aimed to evaluate the association among the number of AI conducted per estrus, the estrus duration and the subsequent reproductive performance on a commercial swine farm. After evaluation of both estrus profile and follicle dynamics using ultrasound, by two independent teams, the number of AI per estrus was recorded, with no interference in the farm habitual management. The first AI was done at the time of estrus detection and subsequent AIs were done at 12 h intervals, as long as females showed estrus signs. The risk of conducting more than three AI per estrus as a function of estrus duration was also estimated. For females receiving two AI per estrus, farrowing rate (92.0%) was higher (p 0.05) for females receiving two, three or 4 to 6 AI per estrus (10.6, 12.0 and 12.0, respectively). For females having estrus longer than 78 horas, the odds of receiving 4-6 AI were 6.1 times higher than for those having estrus shorter than 50 hours, and 3.4 times higher than for those having estrus within 50 to 74 h (both p < 0.05). Thus, although long estrus duration allows multiple AI per estrus, we concluded that more than three AIs per estrus are not recommended because there is no benefit for subsequent reproductive performance.

Genetic paternity test for piglets generated by heterospermic cervical and post-cervical artificial insemination / Determinação genética da paternidade em leitões nascidos de inseminação artificial heterospérmica cervical e pós-cervical

Post-cervical artificial insemination (AI) with reduced sperm concentration allows the use of semen from few boars on a high number of females, but the common use of pooled semen in commercial AI programs masks the subfertility of individual boars. This study compared the reproductive performance of post-cervical and cervical heterospermic AI, in commercial farm conditions and through paternity tests. Each AI method was conducted in two groups of 150 sows. Sperm concentration was 3.0 x 109/85mL for cervical AI and 1.5 x 109/60mL for post-cervical AI. Conception and farrowing rates for post-cervical AI (90.7% and 85.3%, respectively) were lower (P<0.05) than for cervical AI (98.7% and 94.7%, respectively). Total litter size did not differ (P>0.05) for post-cervical (12.8 ± 0.3) and cervical AI (13.5 ± 0.3), but it was greater (P<0.05) for parity-two females than for those having 3-5 parities. The paternity test used nine microsatellite markers to genotype 300 piglets from 25 litters, but paternity exclusion was achieved for only 95 piglets, which did not differentiate boars across AI methods.

A inseminação artificial intra-uterina (IAIC) com reduzida concentração de espermatozóides por dose permite que o sêmen de um menor número de reprodutores seja usado em um maior número de fêmeas. Porém, o uso freqüente de pools de sêmen de dois ou mais machos na inseminação heterospérmica pode mascarar o baixo desempenho de alguns reprodutores. O objetivo deste estudo foi comparar o desempenho reprodutivo da IAIU com a inseminação artificial intracervical (IAIC), usando amostras heterospérmicas de sêmen, em condições de rotina de campo e através de teste de paternidade. A IAIC foi feita com 3,0 x 109espermatozóides/85mL e a IAIU foi feita com 1,5 x 109 espermatozóides/60mL, ambas em grupos de 150 fêmeas. A IAIU apresentou taxas menores (P<0,05) de concepção (90,7%) e parição (85,3%) do que a IAIC (98,7% e 94,7%, respectivamente). O tamanho total da leitegada não diferiu (P>0,05) entre IAIC (13,7 ± 0,3) e IAIU (13,0 ± 0,3), mas foi mais alto nas fêmeas de segundo parto do que nas com 3-5 partos (P<0,05). O teste de paternidade usou nove microssatélites para a genotipagem de 25 leitegadas, totalizando 300 leitões, havendo exclusão de paternidade somente em 95 leitões, o que não permitiu diferenciação entre os machos, dentro das técnicas de IA.

Genetic paternity test for piglets generated by heterospermic cervical and post-cervical artificial insemination / Determinação genética da paternidade em leitões nascidos de inseminação artificial heterospérmica cervical e pós-cervical

Post-cervical artificial insemination (AI) with reduced sperm concentration allows the use of semen from few boars on a high number of females, but the common use of pooled semen in commercial AI programs masks the subfertility of individual boars. This study compared the reproductive performance of postcervical and cervical heterospermic AI, in commercial farm conditions and through paternity tests. Each AI method was conducted in two groups of 150 sows. Sperm concentration was 3.0 x 109/85mL for cervical AI and 1.5 x 109/60mL for post-cervical AI. Conception and farrowing rates for post-cervical AI (90.7% and 85.3%, respectively) were lower (P<0.05) than for cervical AI (98.7% and 94.7%, respectively). Total litter size did not differ (P>0.05) for post-cervical (12.8 ± 0.3) and cervical AI (13.5 ± 0.3), but it was greater (P<0.05) for paritytwo females than for those having 3-5 parities. The paternity test used nine microsatellite markers to genotype 300 piglets from 25 litters, but paternity exclusion was achieved for only 95 piglets, which did not differentiate boars across AI methods.(AU)

A inseminação artificial intra-uterina (IAIC) com reduzida concentração de espermatozóides por dose permite que o sêmen de um menor número de reprodutores seja usado em um maior número de fêmeas. Porém, o uso freqüente de pools de sêmen de dois ou mais machos na inseminação heterospérmica pode mascarar o baixo desempenho de alguns reprodutores. O objetivo deste estudo foi comparar o desempenho reprodutivo da IAIU com a inseminação artificial intracervical (IAIC), usando amostras heterospérmicas de sêmen, em condições de rotina de campo e através de teste de paternidade. A IAIC foi feita com 3,0 x 109 espermatozóides/85mL e a IAIU foi feita com 1,5 x 109 espermatozóides/60mL, ambas em grupos de 150 fêmeas. A IAIU apresentou taxas menores (P<0,05) de concepção (90,7%) e parição (85,3%) do que a IAIC (98,7% e 94,7%, respectivamente). O tamanho total da leitegada não diferiu (P>0,05) entre IAIC (13,7 ± 0,3) e IAIU (13,0 ± 0,3), mas foi mais alto nas fêmeas de segundo parto do que nas com 3-5 partos (P<0,05). O teste de paternidade usou nove microssatélites para a genotipagem de 25 leitegadas, totalizando 300 leitões, havendo exclusão de paternidade somente em 95 leitões, o que não permitiu diferenciação entre os machos, dentro das técnicas de IA.(AU)

Número de inseminações artificiais por estro em fêmeas suínas: Associação com o perfil estral e impacto sobre o desemprenho reprodutivo / Number of artificial inseminations per estrus in swine: Association with estrus profiles and impact on reproductive performance

Em suínos, é comum a realização de múltiplas inseminações artificiais (IA) por estro, em função da longa duração do estro. Este estudo observacional teve o objetivo de verificar a associação entre o número de IA realizada por estro com a duração do estro e o desempenho reprodutivo subsequente, em uma granja comercial. Após avaliação do perfile estral e da dinâmica folicular por ultrassonografia, por equipes independentes, o número de IA por estro foi registrado, sem interferência no manejo da granja. A primeira IA era realizada no momento da detecção do estro e as IA subsequentes eram realizadas em intervalos de 12 horas, enquanto a fêmea mostrasse sinais de estro. Compararam-se a taxa de parição e o tamanho total da leitegada em função do número de IA por estro. Também foi estimado o risco da realização de mais de 3 IA por estro, em função da duração do estro. A taxa de parição das fêmeas que receberam duas IA (92,0%) foi maior (p < 0,05) do que a observada para fêmeas que receberam três (77,5%) ou quatro a seis IA (79,6%). O tamanho total da leitegada não diferiu (p > 0,05) entre fêmeas que receberam duas, três ou quatro a seis IA (10,6, 12,0 e 12,0, respectivamente). Para as fêmeas com duração do estro superior a 78 horasoras, o risco de receberem quatro a seis IA durante o estro foi 6,1 vezes maior do que o risco para fêmeas com duração do estro inferior a 50 horasoras (p < 0,05) e 3,4 vezes maior do que o risco para fêmeas com duração do estro entre 50 a 74 horas (p < 0,05). Ainda que a longa duração do estro permita um maior número de IA por estro, pode-se concluir que um número de IA por estro superior a três não é recomendado, pois não há benefício para o desempenho reprodutivo.(AU)

In swine, multiple artificial inseminations (AI) are commonly performed per estrus due to the long estrus duration. This observational study aimed to evaluate the association among the number of AI conducted per estrus, the estrus duration and the subsequent reproductive performance on a commercial swine farm. After evaluation of both estrus profile and follicle dynamics using ultrasound, by two independent teams, the number of AI per estrus was recorded, with no interference in the farm habitual management. The first AI was done at the time of estrus detection and subsequent AIs were done at 12 h intervals, as long as females showed estrus signs. The risk of conducting more than three AI per estrus as a function of estrus duration was also estimated. For females receiving two AI per estrus, farrowing rate (92.0%) was higher (p < 0.05) than for those receiving three (77.5%) or four to six AI (79.6%). Total litter size did not differ (p > 0.05) for females receiving two, three or 4 to 6 AI per estrus (10.6, 12.0 and 12.0, respectively). For females having estrus longer than 78 horas, the odds of receiving 4-6 AI were 6.1 times higher than for those having estrus shorter than 50 hours, and 3.4 times higher than for those having estrus within 50 to 74 h (both p < 0.05). Thus, although long estrus duration allows multiple AI per estrus, we concluded that more than three AIs per estrus are not recommended because there is no benefit for subsequent reproductive performance.(AU)

Effects of different litter depths on environmental parameters and growth performance of growing finishing pigs

Deep litter systems represent low cost alternatives to raise growing-finishing pigs, reducing slurry accumulation, although pig's thermal comfort may be negatively affected by the heat produced inside the litter. This study compared environmental and performance parameters for growing-finishing pigs raised on deep litter systems having distinct depths and on solid floor. The experiment was conducted in a region of temperate climate of Brazil, comparing three treatments: litter having rice husk 0.5m (T1); and 0.25m deep (T2); and solid concrete floor (T3). The first litter was used in two lots and replaced by a second litter used in other two lots, during 52 weeks. Each lot included five pigs in a 7m² pen, from 60 to 145 d of age. Environmental parameters were determined at weekly intervals, including: atmospheric temperature; relative humidity; temperature at the center of the pen, in the surface (TSF); and at half of the depth (THD), only for T1 and T2. Feed consumption and weight of pigs were measured every four weeks. Atmospheric temperature and relative humidity were not influenced by the treatments (P>0.05). Mean TSF was 22.8 ± 3.6°C, being lower for T3 (P 0.05), but with no difference between T1 and T2 (P>0.05). TSF was higher for new than for used litters (P 0.001) and for the first than for the second litter (P=0.03), apparently increasing in lots raised during termophilic phases. Mean THD was 33.8±10.8°C, being higher for T1 than for T2 (P 0.05). THD was also higher for new than for used litters (P 0.001) and for the first than for the second litters (P 0.05). No growth performance parameter differed across treatments (P>0.05). Despite the potential unfavorable thermal comfort under high temperatures, deep litter systems can be used to raise pigs in the growing-finishing phases due to the absence of negative effects for growth performance.

O uso de cama representa uma alternativa de baixo custo para a criação de suínos em crescimento e em terminação, promovendo redução do acúmulo de dejetos, embora o conforto térmico dos animais possa ser prejudicado pelo calor produzido no interior da cama. Este estudo compara os parâmetros ambientais e o desempenho de crescimento de suínos em sistemas de criação sobre cama, com profundidades distintas, e sobre piso concreto. O experimento foi realizado em uma região de clima temperado na região Sul do Brasil, comparando três tratamentos: cama de casca de arroz com 0,5m (T1), com 0,25m de profundidade (T2) e piso de concreto (T3). A primeira cama foi usada em dois lotes de animais e foi substituída por uma segunda, usada em outros dois lotes, compreendendo 52 semanas. Cada lote foi constituído por cinco animais criados dos 60 aos 145 dias de idade, em uma baia de 7m². Os seguintes parâmetros ambientais foram medidos semanalmente: temperatura ambiente, umidade relativa e temperatura no centro da baia, na superfície (TSF) e na metade da profundidade da cama (TMP), apenas em T1 e T2. O consumo de ração e o peso dos animais foram aferidos a cada quatro semanas. A temperatura ambiente e a umidade relativa não foram influenciadas pelos tratamentos (P>0,05). A TSF média foi de 22,8±3,6°C, sendo menor no T3 (P 0,05), mas sem diferir entre T1 e T2 (P>0,05). A TSF foi mais alta nas camas novas do que nas usadas (P 0,001) e nas primeiras camas em comparação com as segundas (P=0,03), aparentemente sendo mais alta nos lotes criados durante as fases termofílicas. A TMP média foi de 33,8 ± 10,8°C, sendo mais alta no T1 do que no T2 (P 0,05). A TMP também foi mais alta nas camas novas do que nas usadas (P 0,001) e nas primeiras camas em comparação com as segundas (P 0,05). Nenhum dos parâmetros de crescimento diferiu entre os tratamentos (P 0,05). Ainda que possam ocorrer condições de conforto térmico desfavoráveis aos animais, principalmente sob temperaturas mais elevadas, o sistema de criação sobre cama pode ser usado nos setores de crescimento e terminação sem prejuízo para o desempenho de crescimento.

Effects of different litter depths on environmental parameters and growth performance of growing finishing pigs

Deep litter systems represent low cost alternatives to raise growing-finishing pigs, reducing slurry accumulation, although pig's thermal comfort may be negatively affected by the heat produced inside the litter. This study compared environmental and performance parameters for growing-finishing pigs raised on deep litter systems having distinct depths and on solid floor. The experiment was conducted in a region of temperate climate of Brazil, comparing three treatments: litter having rice husk 0.5m (T1); and 0.25m deep (T2); and solid concrete floor (T3). The first litter was used in two lots and replaced by a second litter used in other two lots, during 52 weeks. Each lot included five pigs in a 7m² pen, from 60 to 145 d of age. Environmental parameters were determined at weekly intervals, including: atmospheric temperature; relative humidity; temperature at the center of the pen, in the surface (TSF); and at half of the depth (THD), only for T1 and T2. Feed consumption and weight of pigs were measured every four weeks. Atmospheric temperature and relative humidity were not influenced by the treatments (P>0.05). Mean TSF was 22.8 ± 3.6°C, being lower for T3 (P 0.05), but with no difference between T1 and T2 (P>0.05). TSF was higher for new than for used litters (P 0.001) and for the first than for the second litter (P=0.03), apparently increasing in lots raised during termophilic phases. Mean THD was 33.8±10.8°C, being higher for T1 than for T2 (P 0.05). THD was also higher for new than for used litters (P 0.001) and for the first than for the second litters (P 0.05). No growth performance parameter differed across treatments (P>0.05). Despite the potential unfavorable thermal comfort under high temperatures, deep litter systems can be used to raise pigs in the growing-finishing phases due to the absence of negative effects for growth performance.

O uso de cama representa uma alternativa de baixo custo para a criação de suínos em crescimento e em terminação, promovendo redução do acúmulo de dejetos, embora o conforto térmico dos animais possa ser prejudicado pelo calor produzido no interior da cama. Este estudo compara os parâmetros ambientais e o desempenho de crescimento de suínos em sistemas de criação sobre cama, com profundidades distintas, e sobre piso concreto. O experimento foi realizado em uma região de clima temperado na região Sul do Brasil, comparando três tratamentos: cama de casca de arroz com 0,5m (T1), com 0,25m de profundidade (T2) e piso de concreto (T3). A primeira cama foi usada em dois lotes de animais e foi substituída por uma segunda, usada em outros dois lotes, compreendendo 52 semanas. Cada lote foi constituído por cinco animais criados dos 60 aos 145 dias de idade, em uma baia de 7m². Os seguintes parâmetros ambientais foram medidos semanalmente: temperatura ambiente, umidade relativa e temperatura no centro da baia, na superfície (TSF) e na metade da profundidade da cama (TMP), apenas em T1 e T2. O consumo de ração e o peso dos animais foram aferidos a cada quatro semanas. A temperatura ambiente e a umidade relativa não foram influenciadas pelos tratamentos (P>0,05). A TSF média foi de 22,8±3,6°C, sendo menor no T3 (P 0,05), mas sem diferir entre T1 e T2 (P>0,05). A TSF foi mais alta nas camas novas do que nas usadas (P 0,001) e nas primeiras camas em comparação com as segundas (P=0,03), aparentemente sendo mais alta nos lotes criados durante as fases termofílicas. A TMP média foi de 33,8 ± 10,8°C, sendo mais alta no T1 do que no T2 (P 0,05). A TMP também foi mais alta nas camas novas do que nas usadas (P 0,001) e nas primeiras camas em comparação com as segundas (P 0,05). Nenhum dos parâmetros de crescimento diferiu entre os tratamentos (P 0,05). Ainda que possam ocorrer condições de conforto térmico desfavoráveis aos animais, principalmente sob temperaturas mais elevadas, o sistema de criação sobre cama pode ser usado nos setores de crescimento e terminação sem prejuízo para o desempenho de crescimento.

Effects of different litter depths on environmental parameters and growth performance of growing finishing pigs

Deep litter systems represent low cost alternatives to raise growing-finishing pigs, reducing slurry accumulation, although pig's thermal comfort may be negatively affected by the heat produced inside the litter. This study compared environmental and performance parameters for growing-finishing pigs raised on deep litter systems having distinct depths and on solid floor. The experiment was conducted in a region of temperate climate of Brazil, comparing three treatments: litter having rice husk 0.5m (T1); and 0.25m deep (T2); and solid concrete floor (T3). The first litter was used in two lots and replaced by a second litter used in other two lots, during 52 weeks. Each lot included five pigs in a 7m² pen, from 60 to 145 d of age. Environmental parameters were determined at weekly intervals, including: atmospheric temperature; relative humidity; temperature at the center of the pen, in the surface (TSF); and at half of the depth (THD), only for T1 and T2. Feed consumption and weight of pigs were measured every four weeks. Atmospheric temperature and relative humidity were not influenced by the treatments (P>0.05). Mean TSF was 22.8 ± 3.6°C, being lower for T3 (P 0.05), but with no difference between T1 and T2 (P>0.05). TSF was higher for new than for used litters (P 0.001) and for the first than for the second litter (P=0.03), apparently increasing in lots raised during termophilic phases. Mean THD was 33.8±10.8°C, being higher for T1 than for T2 (P 0.05). THD was also higher for new than for used litters (P 0.001) and for the first than for the second litters (P 0.05). No growth performance parameter differed across treatments (P>0.05). Despite the potential unfavorable thermal comfort under high temperatures, deep litter systems can be used to raise pigs in the growing-finishing phases due to the absence of negative effects for growth performance.

O uso de cama representa uma alternativa de baixo custo para a criação de suínos em crescimento e em terminação, promovendo redução do acúmulo de dejetos, embora o conforto térmico dos animais possa ser prejudicado pelo calor produzido no interior da cama. Este estudo compara os parâmetros ambientais e o desempenho de crescimento de suínos em sistemas de criação sobre cama, com profundidades distintas, e sobre piso concreto. O experimento foi realizado em uma região de clima temperado na região Sul do Brasil, comparando três tratamentos: cama de casca de arroz com 0,5m (T1), com 0,25m de profundidade (T2) e piso de concreto (T3). A primeira cama foi usada em dois lotes de animais e foi substituída por uma segunda, usada em outros dois lotes, compreendendo 52 semanas. Cada lote foi constituído por cinco animais criados dos 60 aos 145 dias de idade, em uma baia de 7m². Os seguintes parâmetros ambientais foram medidos semanalmente: temperatura ambiente, umidade relativa e temperatura no centro da baia, na superfície (TSF) e na metade da profundidade da cama (TMP), apenas em T1 e T2. O consumo de ração e o peso dos animais foram aferidos a cada quatro semanas. A temperatura ambiente e a umidade relativa não foram influenciadas pelos tratamentos (P>0,05). A TSF média foi de 22,8±3,6°C, sendo menor no T3 (P 0,05), mas sem diferir entre T1 e T2 (P>0,05). A TSF foi mais alta nas camas novas do que nas usadas (P 0,001) e nas primeiras camas em comparação com as segundas (P=0,03), aparentemente sendo mais alta nos lotes criados durante as fases termofílicas. A TMP média foi de 33,8 ± 10,8°C, sendo mais alta no T1 do que no T2 (P 0,05). A TMP também foi mais alta nas camas novas do que nas usadas (P 0,001) e nas primeiras camas em comparação com as segundas (P 0,05). Nenhum dos parâmetros de crescimento diferiu entre os tratamentos (P 0,05). Ainda que possam ocorrer condições de conforto térmico desfavoráveis aos animais, principalmente sob temperaturas mais elevadas, o sistema de criação sobre cama pode ser usado nos setores de crescimento e terminação sem prejuízo para o desempenho de crescimento.