Avaliação dos resultados dos cursos de capacitação em bem-estar animal na pendura e na qualidade de carcaça de frangos

Este trabalho teve como objetivo realizar um estudo comparativo em 15 estabelecimentos de abate de aves com serviço de inspeção federal, nos estados de Santa Catarina e Paraná, antes e após receberem o curso de capacitação do Programa Nacional de Abate Humanitário - Steps da Sociedade Mundial de Proteção Animal (WSPA) em parceria com o Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA). Foram avaliados os pontos críticos de bem-estar das aves na etapa de pendura, além de seus efeitos na qualidade da carne. Para análise dos dados colhidos, foi aplicado o teste de Wilcoxon, a fim de verificar diferenças significativas (p < 0,05) entre as avaliações. Foram verificados diversos pontos em não conformidade, como condições das aves na área de pendura e índice de lesões de carcaça. Após ser administrado o curso de capacitação, melhorias foram observadas, principalmente no manejo e no índice de hematomas. Desse modo, pode-se inferir que o curso permitiu grandes avanços nas plantas avaliadas, contudo, há necessidade de se fiscalizar e dar continuidade aos treinamentos por meio da atuação dos multiplicadores formados em cada estabelecimento, em conjunto com um programa de bem-estar animal implantado com metas para alcançar os parâmetros ideais.

This work aimed to conduct a comparative study in 15 slaughterhouses with federal inspection service in Santa Catarina and Paraná states, before and after receiving the training course of the National Humane Slaughter Program - Steps from the World Society for the Protection of Animals (WSPA) in partnership with the Ministry of Agriculture (MAPA). The critical points of poultry welfare were evaluated at the shackling stage and their effects on meat quality. For data analysis, Wilcoxon test was applied in order to identify significant differences (p < 0.05) between assessments. Several points in noncompliance were verified, such as conditions of birds during shackling and carcass downgrading rate. After being given the training course, improvements were observed mainly in handling and bruises rates. This way, one can infer that the course has enabled great advances in evaluated plants, however, there is need to inspect and to get on with the training by means of the action of multipliers trained in each plant along with an animal welfare program implemented to achieve the ideal standards.

Avaliação dos resultados dos cursos de capacitação em bem-estar animal na pendura e na qualidade de carcaça de frangos

Este trabalho teve como objetivo realizar um estudo comparativo em 15 estabelecimentos de abate de aves com serviço de inspeção federal, nos estados de Santa Catarina e Paraná, antes e após receberem o curso de capacitação do Programa Nacional de Abate Humanitário - Steps da Sociedade Mundial de Proteção Animal (WSPA) em parceria com o Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA). Foram avaliados os pontos críticos de bem-estar das aves na etapa de pendura, além de seus efeitos na qualidade da carne. Para análise dos dados colhidos, foi aplicado o teste de Wilcoxon, a fim de verificar diferenças significativas (p < 0,05) entre as avaliações. Foram verificados diversos pontos em não conformidade, como condições das aves na área de pendura e índice de lesões de carcaça. Após ser administrado o curso de capacitação, melhorias foram observadas, principalmente no manejo e no índice de hematomas. Desse modo, pode-se inferir que o curso permitiu grandes avanços nas plantas avaliadas, contudo, há necessidade de se fiscalizar e dar continuidade aos treinamentos por meio da atuação dos multiplicadores formados em cada estabelecimento, em conjunto com um programa de bem-estar animal implantado com metas para alcançar os parâmetros ideais.(AU)

This work aimed to conduct a comparative study in 15 slaughterhouses with federal inspection service in Santa Catarina and Paraná states, before and after receiving the training course of the National Humane Slaughter Program - Steps from the World Society for the Protection of Animals (WSPA) in partnership with the Ministry of Agriculture (MAPA). The critical points of poultry welfare were evaluated at the shackling stage and their effects on meat quality. For data analysis, Wilcoxon test was applied in order to identify significant differences (p < 0.05) between assessments. Several points in noncompliance were verified, such as conditions of birds during shackling and carcass downgrading rate. After being given the training course, improvements were observed mainly in handling and bruises rates. This way, one can infer that the course has enabled great advances in evaluated plants, however, there is need to inspect and to get on with the training by means of the action of multipliers trained in each plant along with an animal welfare program implemented to achieve the ideal standards.(AU)

Bem-estar animal no manejo pré-abate e a influência na qualidade da carne suína e nos parâmetros fisilógicos do estresse

The effects of the loading/unloading systems have been evaluated (S1: vehicle 1, with mobile floor and using management board for conducting pigs, S2: vehicle 2, with fixed floor and using electric goads to conduct pigs) and genetic (A, B and C) on the physiochemical characteristics of the meat, skin damage and physiological parameters of stress. 120 castrated pigs have been used (average weight 115kg) from three farms, divided into six groups (n = 20) and subjected to two types of transport vehicles. For statistical analysis the effects of blocks (assessment days) have been considered in the variance analysis model), loading/unloading systems, genetics and the engagement among the genetic lineages and vehicle models arranged in a factorial scheme (2 vehicle models x 3 genetic lineages). The average values obtained for the pH24h (5.60±0.046 and 5.57±0.046), colour*24h (41.52±1.256 and 41.21±1.486), drip loss (4.76±0.391 and 4.86±0.391), water holding capacity (0.038±0.03 and 0.039±0.003), have not shown differences between the loading and unloading systems (S1 and S2) in the genetic lineages A, B and C. The skin damage incidence on the leg, middle and shoulder haven't differed between the loading and unloading systems in the genetic lineages A, B and C. Both S1 and S2 systems have shown low stress levels and provided easiness at handling among the assessed lineages.

Avaliaram-se os efeitos do sistema de embarque/desembarque (S1: veículo 1, carroceria com piso móvel e uso de prancha de manejo para condução dos suínos; S2: veículo 2, carroceria com piso fixo e uso de bastão elétrico para condução dos suínos) e da genética (A, B e C) sobre as características físico-químicas da carne, lesões na pele e parâmetros fisiológicos do estresse. Foram utilizados 120 suínos machos castrados (peso médio de 115kg) provenientes de três granjas divididos em seis grupos (n=20) e submetidos a dois tipos de veículos para o transporte. Para a análise estatística, consideram-se, no modelo de análise da variância, os efeitos de blocos (dias de avaliação), sistema de embarque/desembarque, genética e interação entre as linhagens genéticas e modelos dos veículos dispostos no esquema fatorial (2 modelos de veículos x 3 linhagens genéticas). Os valores médios obtidos para o pH24h (5,60±0,046 e 5,57±0,046), cor*24h(41,52±1,256 e 41,21±1,486), perda por exsudação (4,76±0,391 e 4,86±0,391), capacidade de retenção de água (0,038±0,03 e 0,039±0,003) não demonstraram diferença entre os sistemas de embarque e desembarque (S1 e S2) nas genéticas A, B e C. A incidência de escoriações de pele no pernil, corpo e paleta não diferiram entre os métodos de embarque e desembarque nas genéticas A, B e C. Ambos os sistemas S1 e S2 geraram baixos níveis de estresse e proporcionaram facilidade de manejo nas genéticas avaliadas.

Bem-estar animal no manejo pré-abate e a influência na qualidade da carne suína e nos parâmetros fisilógicos do estresse

The effects of the loading/unloading systems have been evaluated (S1: vehicle 1, with mobile floor and using management board for conducting pigs, S2: vehicle 2, with fixed floor and using electric goads to conduct pigs) and genetic (A, B and C) on the physiochemical characteristics of the meat, skin damage and physiological parameters of stress. 120 castrated pigs have been used (average weight 115kg) from three farms, divided into six groups (n = 20) and subjected to two types of transport vehicles. For statistical analysis the effects of blocks (assessment days) have been considered in the variance analysis model), loading/unloading systems, genetics and the engagement among the genetic lineages and vehicle models arranged in a factorial scheme (2 vehicle models x 3 genetic lineages). The average values obtained for the pH24h (5.60±0.046 and 5.57±0.046), colour*24h (41.52±1.256 and 41.21±1.486), drip loss (4.76±0.391 and 4.86±0.391), water holding capacity (0.038±0.03 and 0.039±0.003), have not shown differences between the loading and unloading systems (S1 and S2) in the genetic lineages A, B and C. The skin damage incidence on the leg, middle and shoulder haven't differed between the loading and unloading systems in the genetic lineages A, B and C. Both S1 and S2 systems have shown low stress levels and provided easiness at handling among the assessed lineages.

Avaliaram-se os efeitos do sistema de embarque/desembarque (S1: veículo 1, carroceria com piso móvel e uso de prancha de manejo para condução dos suínos; S2: veículo 2, carroceria com piso fixo e uso de bastão elétrico para condução dos suínos) e da genética (A, B e C) sobre as características físico-químicas da carne, lesões na pele e parâmetros fisiológicos do estresse. Foram utilizados 120 suínos machos castrados (peso médio de 115kg) provenientes de três granjas divididos em seis grupos (n=20) e submetidos a dois tipos de veículos para o transporte. Para a análise estatística, consideram-se, no modelo de análise da variância, os efeitos de blocos (dias de avaliação), sistema de embarque/desembarque, genética e interação entre as linhagens genéticas e modelos dos veículos dispostos no esquema fatorial (2 modelos de veículos x 3 linhagens genéticas). Os valores médios obtidos para o pH24h (5,60±0,046 e 5,57±0,046), cor*24h(41,52±1,256 e 41,21±1,486), perda por exsudação (4,76±0,391 e 4,86±0,391), capacidade de retenção de água (0,038±0,03 e 0,039±0,003) não demonstraram diferença entre os sistemas de embarque e desembarque (S1 e S2) nas genéticas A, B e C. A incidência de escoriações de pele no pernil, corpo e paleta não diferiram entre os métodos de embarque e desembarque nas genéticas A, B e C. Ambos os sistemas S1 e S2 geraram baixos níveis de estresse e proporcionaram facilidade de manejo nas genéticas avaliadas.

Estratégias para avaliar bem-estar animal - auditorias em frigorífico

É crescente a preocupação dos consumidores com a forma como os animais são criados, transportados e abatidos, pressionando a indústria ao desafio de um novo paradigma: trate com cuidado, por respeitar a capacidade de sentir dos animais (senciência), melhorando não só a qualidade intrínseca dos produtos de origem animal, mas também a qualidade ética.

Welfare and meat quality of pigs submitted to differentt pre-slaughter handling techniques / Bem-estar e qualidade de carne de suínos submetidos a diferentes técnicas de manejo pré-abate

A total of 120 pigs (86 to 95Kg/140 days) was divided in two groups of 60 animals and transported in the night period (0,4m2/100kg) for a distance of 120Km. In the first group, the animals were handled using aluminum panel, during loading and unloading of the pigs, and in the second group the animals were handled with electric stick (40v). All the pigs were submited to the manual electric stunning in the slaughterhouse (340v/1,3A). The pig group handled with the aluminum panel presented smaller blood cortisol concentrations (10,76 5,76) and lactate(16,32 5,50) in comparison with the group handled with the electric stick (80,26 41,38) and (189,214 72,06), demonstrating that the stick was more stressful, however the welfare provided by the use of panel was not enough to alter the color values significantly (L*, a*, b*), as well as the drip loss. Significant variations in the pH (4, 6 and 8h post-mortem) were also obtained when the treatments was compered, however none significant value was obtained in the period of 24h post-mortem. Significant visual blood splashed score in the central area of the loin was obtained when the pigs was handled with the electric stick. We concluded that the pigs handled with panel suffered less stress.

Um total de 120 suínos, com pesos entre 86 e 95kg aos 140 dias, foi dividido em dois grupos de 60 animais e transportado no período noturno a uma densidade de 0,4m2/100kg por uma distância de 120Km. No primeiro grupo os animais foram movimentados por meio de painel de alumínio, durante o carregamento e descarregamento enquanto que, no segundo, os animais foram manejados com bastão elétrico (40v). No abatedouro, os animais foram submetidos ao sistema de insensibilização elétrico manual (340v/1,3A). O grupo manejado com o painel de alumínio apresentou menores concentrações plasmáticas de cortisol (10,76 5,76g/dL) e lactato (16,32 5,50mg/dL), em comparação ao grupo manejado com o bastão elétrico (80,26 41,38g/dL) e (189,21 72,06mg/dL), respectivamente, o que demonstrou que o bastão foi mais estressante, porém o bem-estar proporcionado pela utilização do painel não foi suficiente para alterar significativamente os valores de cor (L*, a*, b*), assim como os valores de perda por gotejamento. Variações significativas nos valores de pH ocorreram apenas às 4, 6 e 8h post-mortem entre os tratamentos. Maior concentração de salpicamento na região central do lombo foi obtida em suínos submetidos ao bastão elétrico. Conclui-se que os suínos manejados com painel sofreram menos estresse.

Production and caracterization of monoclonal antibodies for the detection of Salmonella enterica in chicken meat

A panel of 13 monoclonal antibodies (MAbs) that react against outer membrane proteins of Salmonella Enteritidis was obtained. Two MAbs were classified as IgM, six were IgG2a, three were IgG3 and one was of the IgG2b isotype. The reactivity of the MAbs against different serovars of Salmonella enterica and other bacteria was investigated using an indirect ELISA. Five MAbs reacted only against Salmonella Enteritidis. Two MAbs presented crossed reactions with thermo-extracted antigens of Klebsiella pneumoniae, Citrobacter freundii and Enterobacter aerogenes. MAb 424H presented wide spectrum of reactivity, detecting antigens of Salmonella belonging to serogroups B, C, D, E and G. The detection limit of different serovars of Salmonella in a indirect ELISA with MAb 424H varied from 1.0 x 10(4) CFU/mL for Salmonella London to 1.4 x 10(6) CFU/mL for Salmonella Gallinarum and Salmonella Typhimurium. Evaluation of the performance of the ELISA with MAb 424H in the detection of Salmonella in samples of chicken meat artificially contaminated revealed that the ELISA was able to detect all serovars after sample enrichment using two levels of contamination. Samples of chicken meat not artificially contaminated analysed in parallel were negative for Salmonella in both the conventional and the ELISA methods.

Foi obtido um painel de 13 anticorpos monoclonais que reagem com proteínas de membrana externa de Salmonella Enteritidis. Dois MAbs foram classificados como IgM, 6 foram do isotipo IgG2a, três foram do isotipo IgG3 e um do isotipo IgG2b. A reatividade dos anticorpos monoclonais (MAbs) com diferentes sorovares de Salmonella e outras bactérias foi investigada através de um ELISA indireto. Cinco MAbs reagiram apenas com Salmonella Enteritidis. Dois MAbs apresentaram reação cruzada com antígenos termoextraídos de Klebsiella pneumoniae, Citrobacter freundii e Enterobacter aerogenes. O MAb 424H apresentou amplo espectro de reatividade, detectando antígenos de Salmonella pertencentes aos sorogrupos B, C, D, E, e G. O limite de detecção de diferentes sorovares de Salmonella em um ELISA indireto com o MAb 424H variou de 1,0 x 10(4) UFC/mL para Salmonella London a 1,4 x 10(6) UFC/mL para Salmonella Gallinarum e Salmonella Typhimurium. A avaliação do desempenho do ELISA indireto com o MAb 424H na detecção de diferentes sorovares de Salmonella em amostras de carne de frango, mostrou ser possível detectar todos os sorovares após o enriquecimento das amostras, nos três níveis de contaminação utilizados. A análise de alíquotas de amostras de carne de frango não contaminadas artificialmente, feita em paralelo, foi negativa para Salmonella tanto no método convencional quanto no ELISA.

Bem estar animal no transporte e a influência na qualidade da carne suína

O efeito do método de embarque e desembarque nas características da qualidade da carne e nos níveis sanguíneos de estresse foi avaliado em suínos provenientes de três linhagens genéticas (A, B, C) comercializadas no Brasil. Um total de 120 suínos machos, pesando em média 115Kg provenientes de três granjas apresentando distância do frigorífico variando de 100 a 120Km foram divididos em seis grupos (n= 20 suínos) e submetidos a dois tipos de veículos para o transporte. O veículo 1 possui um sistema de embarque e desembarque, com carroceria com piso móvel (E1) e o veículo 2 apresenta o embarque e desembarque convencional, com carroceria com piso fixo (E2). Para a avaliação da qualidade da carne utilizou-se as características físico-químicas (pH, cor, perda por exsudação e capacidade de retenção de água) e para os níveis de estresse no sangue, foram determinadas as concentrações de cortisol, lactato e creatina fosfoquinase. Os valores médios obtidos para o pH24h (5,60±0,046 e 5,57±0.046), cor L*24h(41,52±1,256 e 41,21±1,486), perda por exsudação (4,76±0,391 e 4,86±0.391) e capacidade de retenção de água (0,038±0,03 e 0,039±0,003) não demonstraram diferença significativa entre os métodos de embarque e desembarque (E1 e E2) nas genéticas A, B e C. Os dados da incidência de escoriações de pele no pernil (0,59±0,090; 0,531± 0,090), corpo (0,896±0,076; 0,757±0,076) e paleta (0,612±0,050; 0,531±0,050) também não diferiram entre os métodos de embarque e desembarque nas genéticas A, B e C. Constatou-se diferença (p<0,05) na concentração de cortisol entre os métodos de embarque e desembarque (E1 e E2), no entanto, os níveis de lactato e creatina fosfoquinase não diferiram significativamente. Níveis menores de cortisol plasmático (p<0,05) foram encontrados na linhagem genética A, quando comparada a B e C. Conclui-se

The effect of loading and unloading methods on meat quality and on blood stress levels were evaluated in pigs from three genetic lineage (A, B, C) marketed in Brazil. 120 male pigs, weighing 115Kg on average, from three different farms whose distance from the slaughterhouse ranged from 110Km to 120Km, were divided in 6 groups (n=20 pigs) and subjected to two kinds of vehicle for transport. Vehicle 1 has loading and unloading system, with mobile floor body (E1) and vehicle 2 has conventional loading and unloading system, with fixed floor body (E2). For the evaluation of meat quality, physiochemical characteristics have been used (pH, color, drip loss, water holding capacity) and for blood stress levels, concentrations of cortisol, lactate and creatine phosphoquinase. The obtained results for pH24h (5,60±0,046 and 5,57±0.046), color L*24h(41,52±1,256 and 41,21±1,486), drip loss (4,76±0,391 and 4,86±0.391) and water holding capacity (0,038±0,03 and 0,039±0,003) haven?t shown meaningful difference between the kinds of loading and unloading methods (E1 and E2) on the genetics A, B and C. The data about incidence of skin damage on the ham (0,59±0,090; 0,531± 0,090), body (0,896±0,076; 0,757±0,076) and shoulder blade (0,612±0,050; 0,531±0,050) , have not differed between loading and unloading methods in genetics A, B and C, either. Difference in cortisol concentration (p<0,05) has been found out between loading and unloading methods (E1 and E2). However, lactate and creatine phosphoquinase levels haven?t differed meaningfully. Lower plasmic cortisol levels (p<0,05) were found in genetic lineage A, when compared to B and C. It has been concluded that the loading and unloading methods had effects on stress levels but they were not enough to cause alterations in meat quality

Estratégias para avaliar bem-estar animal - auditorias em frigorífico

É crescente a preocupação dos consumidores com a forma como os animais são criados, transportados e abatidos, pressionando a indústria ao desafio de um novo paradigma: trate com cuidado, por respeitar a capacidade de sentir dos animais (senciência), melhorando não só a qualidade intrínseca dos produtos de origem animal, mas também a qualidade ética.

Welfare and meat quality of pigs submitted to differentt pre-slaughter handling techniques / Bem-estar e qualidade de carne de suínos submetidos a diferentes técnicas de manejo pré-abate

A total of 120 pigs (86 to 95Kg/140 days) was divided in two groups of 60 animals and transported in the night period (0,4m2/100kg) for a distance of 120Km. In the first group, the animals were handled using aluminum panel, during loading and unloading of the pigs, and in the second group the animals were handled with electric stick (40v). All the pigs were submited to the manual electric stunning in the slaughterhouse (340v/1,3A). The pig group handled with the aluminum panel presented smaller blood cortisol concentrations (10,76 5,76) and lactate(16,32 5,50) in comparison with the group handled with the electric stick (80,26 41,38) and (189,214 72,06), demonstrating that the stick was more stressful, however the welfare provided by the use of panel was not enough to alter the color values significantly (L*, a*, b*), as well as the drip loss. Significant variations in the pH (4, 6 and 8h post-mortem) were also obtained when the treatments was compered, however none significant value was obtained in the period of 24h post-mortem. Significant visual blood splashed score in the central area of the loin was obtained when the pigs was handled with the electric stick. We concluded that the pigs handled with panel suffered less stress.

Um total de 120 suínos, com pesos entre 86 e 95kg aos 140 dias, foi dividido em dois grupos de 60 animais e transportado no período noturno a uma densidade de 0,4m2/100kg por uma distância de 120Km. No primeiro grupo os animais foram movimentados por meio de painel de alumínio, durante o carregamento e descarregamento enquanto que, no segundo, os animais foram manejados com bastão elétrico (40v). No abatedouro, os animais foram submetidos ao sistema de insensibilização elétrico manual (340v/1,3A). O grupo manejado com o painel de alumínio apresentou menores concentrações plasmáticas de cortisol (10,76 5,76g/dL) e lactato (16,32 5,50mg/dL), em comparação ao grupo manejado com o bastão elétrico (80,26 41,38g/dL) e (189,21 72,06mg/dL), respectivamente, o que demonstrou que o bastão foi mais estressante, porém o bem-estar proporcionado pela utilização do painel não foi suficiente para alterar significativamente os valores de cor (L*, a*, b*), assim como os valores de perda por gotejamento. Variações significativas nos valores de pH ocorreram apenas às 4, 6 e 8h post-mortem entre os tratamentos. Maior concentração de salpicamento na região central do lombo foi obtida em suínos submetidos ao bastão elétrico. Conclui-se que os suínos manejados com painel sofreram menos estresse.

Monoclonal antibodies against an outer membrane protein from pathogenic Leptospira

Two hybridomas secreting monoclonal antibodies (MAbs) that react with a lipoprotein (LipL32) of the outer membrane of pathogenic Leptospira were obtained. For hybridoma production, spleen cells from BALB/c mice imunized with recombinant LipL32 (rLipL32) were fused to SP2/O-Ag14 cells, selected in HAT medium and screened in an indirect ELISA. One MAb produced was of the IgG2b isotype and the other was an IgM. MAbs specificity was confirmed by indirect ELISA and immunoblotting using purified rLipL32 and whole-cell antigen preparations from Escherichia coli (E. coli) expressing LipL32 and from pathogenic and non-pathogenic serovars. Both Mabs reacted with most of the pathogenic serovars tested and none reacted with non-pathogenic Leptospira. The MAbs described have potential for use in diagnostic tests for leptospirosis.

Foram obtidos dois hibridomas secretores de anticorpos monoclonais (MAbs) que reagem com uma lipoproteína (LipL32) da membrana externa de leptospiras patogênicas. Para a produção dos hibridomas, células do baço de camundongos BALB/c, imunizados com LipL32 recombinante (rLipL32), foram fusionadas com células SP2/O-Ag14, selecionadas em meio HAT e testadas em ELISA indireto. Um dos MAbs secretados pelos hibridomas é do isotipo IgG2b e o outro do isotipo IgM. A especificidade dos MAbs foi confirmada em ELISA indireto e immunoblotting usando rLipL32 purificada, Escherichia coli (E. coli) expressando LipL32 e sorovares patogênicos e saprófitas. Os dois MAbs reagiram com a maioria dos sorovares patogênicos e não reagiram com sorovares saprófitas. Os MAbs possuem potencial para uso em testes de diagnóstico de leptospirose.

Monoclonal antibodies against an outer membrane protein from pathogenic Leptospira

Two hybridomas secreting monoclonal antibodies (MAbs) that react with a lipoprotein (LipL32) of the outer membrane of pathogenic Leptospira were obtained. For hybridoma production, spleen cells from BALB/c mice imunized with recombinant LipL32 (rLipL32) were fused to SP2/O-Ag14 cells, selected in HAT medium and screened in an indirect ELISA. One MAb produced was of the IgG2b isotype and the other was an IgM. MAbs specificity was confirmed by indirect ELISA and immunoblotting using purified rLipL32 and whole-cell antigen preparations from Escherichia coli (E. coli) expressing LipL32 and from pathogenic and non-pathogenic serovars. Both Mabs reacted with most of the pathogenic serovars tested and none reacted with non-pathogenic Leptospira. The MAbs described have potential for use in diagnostic tests for leptospirosis.

Foram obtidos dois hibridomas secretores de anticorpos monoclonais (MAbs) que reagem com uma lipoproteína (LipL32) da membrana externa de leptospiras patogênicas. Para a produção dos hibridomas, células do baço de camundongos BALB/c, imunizados com LipL32 recombinante (rLipL32), foram fusionadas com células SP2/O-Ag14, selecionadas em meio HAT e testadas em ELISA indireto. Um dos MAbs secretados pelos hibridomas é do isotipo IgG2b e o outro do isotipo IgM. A especificidade dos MAbs foi confirmada em ELISA indireto e immunoblotting usando rLipL32 purificada, Escherichia coli (E. coli) expressando LipL32 e sorovares patogênicos e saprófitas. Os dois MAbs reagiram com a maioria dos sorovares patogênicos e não reagiram com sorovares saprófitas. Os MAbs possuem potencial para uso em testes de diagnóstico de leptospirose.

Monoclonal antibodies against an outer membrane protein from pathogenic Leptospira

Two hybridomas secreting monoclonal antibodies (MAbs) that react with a lipoprotein (LipL32) of the outer membrane of pathogenic Leptospira were obtained. For hybridoma production, spleen cells from BALB/c mice imunized with recombinant LipL32 (rLipL32) were fused to SP2/O-Ag14 cells, selected in HAT medium and screened in an indirect ELISA. One MAb produced was of the IgG2b isotype and the other was an IgM. MAbs specificity was confirmed by indirect ELISA and immunoblotting using purified rLipL32 and whole-cell antigen preparations from Escherichia coli (E. coli) expressing LipL32 and from pathogenic and non-pathogenic serovars. Both Mabs reacted with most of the pathogenic serovars tested and none reacted with non-pathogenic Leptospira. The MAbs described have potential for use in diagnostic tests for leptospirosis.

Foram obtidos dois hibridomas secretores de anticorpos monoclonais (MAbs) que reagem com uma lipoproteína (LipL32) da membrana externa de leptospiras patogênicas. Para a produção dos hibridomas, células do baço de camundongos BALB/c, imunizados com LipL32 recombinante (rLipL32), foram fusionadas com células SP2/O-Ag14, selecionadas em meio HAT e testadas em ELISA indireto. Um dos MAbs secretados pelos hibridomas é do isotipo IgG2b e o outro do isotipo IgM. A especificidade dos MAbs foi confirmada em ELISA indireto e immunoblotting usando rLipL32 purificada, Escherichia coli (E. coli) expressando LipL32 e sorovares patogênicos e saprófitas. Os dois MAbs reagiram com a maioria dos sorovares patogênicos e não reagiram com sorovares saprófitas. Os MAbs possuem potencial para uso em testes de diagnóstico de leptospirose.