Isolamento microbiológico, contagem de células somáticas e contagem bacteriana total em amostras de leite / Microbiological isolation, somatic cell count and total bacterial count in samples milk

Foram coletadas amostras de leite não pasteurizado de três rebanhos da raça Jersey na região de Curitiba, Estado do Paraná, no período de janeiro a dezembro de 2009. As amostras foram subdivididas em três alíquotas para a realização das seguintes análises: isolamento bacteriano, determinação da CBT (contagem bacteriana total), da CCS (contagem de células somáticas) e dos principais constituintes do leite (gordura e proteína). Foram realizadas duas coletas mensais de todas as vacas do rebanho, totalizando 1132 amostras. Nos 966 isolamentos realizados, os microrganismos isolados foram Staphylococcus spp (32,7%), Staphylococcus aureus (19.5%), Streptococcus agalactiae (14%), Eschericha coli (13,6%) e Bacillus spp (4,55%) principalmente. As médias de CBT, CCS, da concentração de gordura, proteína e produção mensal de leite foram respectivamente: 4,21 log10UFC x mL¨¹; 5,84 log10UFC x mL; 3,96 g/100g: 3,45 g/100g e 11,61 kg.

Samples were collected of raw milk from three herds of Jersey cows, in different stages of lactation in the region of Curitiba, Paraná State, from January to December 2009. The milk samples were subdivided into three parcels, to perform the following tests: bacterial isolation, determination of CBT (total bacterial count), SCC (somatic cell count) and the main milk components (fat and protein). There were two monthly sampling of all cows of the herd, totaling 1132 samples. In the 966 isolates, the isolated microorganisms were Staphylococcus spp (32.7%), Staphylococcus aureus (19.5%) and Streptococcus agalactiae (14%), Eschericha coli (13.6%) e Bacillus spp (4.55%) mainly. The mean CBT, SCC, the concentration of fat, protein and milk production were respectively 4.21 log10UFC x mL; 5.84 log10UFC x mL¹; 3.96 g/100g, 3.45 g/100g and 11.61 kg.

Propolis obtained by means of alkaline hydrolysis and action on Staphylococcus aureus / Própolis obtida por hidrolise alcalina e ação sobre Staphylococcus aureus

The Brazilian propolis is investigated for its antibacterial properties. The aim of this work was to establish the extraction and purification method to display the antibacterial activity. Propolis of Apis mellifera was obtained from bee hives cultivated in Parana State, Brazil. In this study, we used ATCC 25923 Staphylococcus aureus strains and 158 Staphylococcus aureus strains isolated from cows with clinical mastitis. Extraction and partial purification: Several fractions were obtained during the partial purification: a crude ethanolic extract of propolis, a resinous material in ethanolic solution and an alkaline hydrolysis water-soluble compounds solution. The results show that the alkaline hydrolysis water-soluble compounds solution had a minimal inhibitory concentration of approximately 155.46 µg/mL for Staphylococcus aureus. In this work, we obtained an aqueous solution of organic compounds extracted from Apis mellifera propolis that bears physical-chemical and biological characteristics capable to inhibit the proliferation of Gram-positive bacteria.

A própolis brasileira é investigada por suas propriedades antibacterianas. O objetivo deste trabalho foi estabelecer o método de extração e purificação para demonstrar a atividade antibacteriana. A própolis de Apis mellifera foi obtida de colméias de abelhas oriundas do Estado do Paraná, Brasil. Neste estudo, foram usados cepas de Staphylococcus aureus ATCC 25923 e 158 cepas de Staphylococcus aureus isolados de vacas com mastite clínica. Várias frações foram obtidas durante a purificação parcial: um extrato etanólico bruto de própolis, um material resinoso em solução alcoólica e uma solução de compostos solúveis por hidrólise alcalina em água. Os resultados mostram que a solução de compostos solúveis por hidrólise alcalina em água apresentou uma concentração inibitória mínima de cerca de 155,46 mg/mL para Staphylococcus aureus. Neste trabalho foi obtida uma solução aquosa de compostos orgânicos extraídos da própolis de Apis mellifera que possui características físico-químicas e biológicas capazes de inibir a proliferação de bactérias Gram positivas.

Qualidade microbiológica do leite cru produzido na região oeste do Paraná e ocorrência de Listeria monocytogenes / Microbiologic quality of raw milk produced in the west region of Paraná and occurrence of Listeria monocytogenes

Foram estudadas 34 propriedades rurais, no período de outubro a dezembro de 2006, com 68 amostras de leite coletadas em triplicata diretamente dos tanques resfriadores ou vasilhames equivalentes. Foi pesquisada a presença de Listeria spp., comparando-se com o nível de contagem bacteriana total no leite de tanques. Foi utilizado agar-Aloa para isolamento de Listeria spp e de Listeria monocytogenes, com confirmação por PCR. Das amostras de leite cru submetidas a pesquisa de Listeria spp. observou-se que 19 (27,9%) estavam contaminadas, e duas (2,9%) apresentaram resultado positivo para L. monocytogenes. A contagem bacteriana total apresentou média de 5,41 log UFC/mL (±0,57), e 29,3% das amostras estavam acima do limite de 7,5 x 103 UFC/mL. Os resultados permitem afirmar que este patógeno deve ser pesquisado em amostras de leite cru por constituir um importante indicador de segurança alimentar e que os produtores rurais não têm conhecimento adequado sobre os riscos a que estão sujeitos ao manipularem e consumirem este produto.

The presence of Listeria spp., correlated at the level of total bacterial count in bulk tank milk was investigated, about 34 farms in the period of October to December 2006, with 68 triplicate samples of milk collected directly from the bulk tanks or equivalent containers. Aloa-agar was used for isolation of Listeria spp. and Listeria monocytogenes, with confirmation by PCR (polymerase chain reaction). In the samples of raw milk subjected to search of Listeria spp., it was observed that 19 (27.9%) were contaminated, and two (2.9%) were positive for L. monocytogenes. The total bacterial count showed an average of 5.41 log CFU/mL (± 0.57), and 29.3% of samples were above the limit of 7.5 x 10 CFU/mL. The results indicate that this pathogen should be studied in samples of raw milk cause it's an important indicator of food security and farmers don't have adequate knowledge about the risks they are subject to manipulate and consume this product.

ISOLAMENTO MICROBIOLOGICO, CONTAGEM DE CÉLULAS SOMÁTICAS E CONTAGEM BACTERIANA TOTAL EM AMOSTRAS DE LEITE.

Foram coletadas amostras de leite não pasteurizado de três rebanhos da raça Jersey na região de Curitiba, Estado do Paraná, no período de janeiro a dezembro de 2009. As amostras foram subdivididas em três alíquotas para a realização das seguintes análises: isolamento bacteriano, determinação da CBT (contagem bacteriana total), da CCS (contagem de células somáticas) e dos principais constituintes do leite (gordura e proteína). Foram realizadas duas coletas mensais de todas as vacas do rebanho, totalizando 1132 amostras. Nos 966 isolamentos realizados, os microrganismos isolados foram Staphylococcus spp (32,7%), Staphylococcus aureus (19,5%), Streptococcus agalactiae (14%), Eschericha coli (13,6%) e Bacillus spp (4,55%) principalmente. As médias de CBT, CCS, da concentração de gordura, proteína e produção mensal de leite foram respectivamente: 4,21 log10UFC x mL-1; 5,84 log10UFC x mL-1; 3,96 g/100g; 3,45 g/100g e 11,61 kg. PALAVRAS-CHAVE: CCS. Gordura. Leite. Staphylococcus aureus.

UTILIZAÇÃO DE PRÉ-RESFRIADOR DE PLACAS EM NIVEL DE FAZENDA: UM CAMINHO PARA A MELHORIA DA QUALIDADE DO LEITE NO BRASIL.

This study aimed at evaluating the raw milk quality on farm level in Brazil as influenced by a plates’ pre-cooling carried out before refrigerated storage in bulk tank. Milk temperature, pH and total bacterial count were quantified. Monitoring was carried out until a constant temperature was reached. Control samples were not pre-cooled. The milk treated with plates’ pre-cooler presented in average, temperature of 8.91o C, pH of 6.82 and bacterial count of 4.02 log CFU/mL, while control samples presented in average, temperature of 14.85° C, pH of 6.75 and bacterial count of 4.29 log CFU/mL. Results showed statistically significant differences between quality of pre-cooled and control milk as expressed by the studied parameters, suggesting that pre-cooling is an important way to enhance preservation of raw milk quality.   KEY-WORDS: Bacterial count. Farm. pH. Raw milk.

Este estudo teve como objetivo avaliar como a qualidade do leite cru a nível de fazenda no Brasil pode ser melhorada através da utilização do pré-resfriador de placas antes do seu armazenamento no tanque resfriador. A temperatura do leite, pH e a contagem bacteriana total foram monitorados. O acompanhamento foi realizado desde o início da ordenha até que o leite tenha atingido temperatura constante de resfriamento. As amostras do grupo controle não foram pré-resfriadas. O leite tratado com o pré-resfriador de placas apresentou temperatura média de 8,91o C, pH 6,82 e contagem bacteriana de 4,02 log UFC/mL, enquanto as amostras controle apresentaram em média, temperatura de 14,85o C, pH 6,75 e contagem bacteriana 4,29 log UFC/mL. Os resultados demonstraram estatísticamente diferenças significativas entre a qualidade do leite pré-resfriado e do grupo controle, através dos parâmetros estudados, sugerindo que o pré-resfriamento constitui um importante método para melhorar a preservação da qualidade do leite cru. PALAVRAS-CHAVE: Contagem bacteriana. Fazenda. Leite cru. pH

QUALIDADE MICROBIOLÓGICA DO LEITE CRU PRODUZIDO NA REGIÃO OESTE DO PARANÁ E OCORRÊNCIA DE Listeria monocytogenes

Foram estudadas 34 propriedades rurais, no período de outubro a dezembro de 2006, com 68 amostras de leite coletadas em triplicata diretamente dos tanques resfriadores ou vasilhames equivalentes. Foi pesquisada a presença de Listeria spp., comparando-se com o nível de contagem bacteriana total no leite de tanques. Foi utilizado agar-Aloa para isolamento de Listeria spp e de Listeria monocytogenes, com confirmação por PCR. Das amostras de leite cru submetidas a pesquisa de Listeria spp. observou-se que 19 (27,9%) estavam contaminadas, e duas (2,9%) apresentaram resultado positivo para L. monocytogenes. A contagem bacteriana total apresentou média de 5,41 log UFC/mL (± 0,57), e 29,3% das amostras estavam acima do limite de 7,5 x 105 UFC/mL. Os resultados permitem afirmar que este patógeno deve ser pesquisado em amostras de leite cru por constituir um importante indicador de segurança alimentar e que os produtores rurais não têm conhecimento adequado sobre os riscos a que estão sujeitos ao manipularem e consumirem este produto.PALAVRAS-CHAVE: Boas práticas. Leite cru. Segurança alimentar