Resumo
Os equinos são animais muito utilizados em eventos esportivos, sendo, desta forma, propensos a sofrer acidentes que podem levar a lesões articulares e ósseas. Na rotina clínica, artifícios como o uso de raio X e ultrassonografia são de grande importância para que o correto diagnóstico seja feito e a conduta clínica possa ser melhor planejada. Além disso, alguns biomateriais, como o plasma rico em plaquetas (PRP) e células-tronco mesenquimais (CTMs), têm se inserido nos protocolos terapêuticos, demonstrando grande efetividade no tratamento desse tipo de lesão, devido à grande quantidade de fatores de crescimento presentes em ambos os biomateriais. O PRP é um derivado sanguíneo, caracterizado pela alta concentração plaquetária. Foi produzido a partir de duas centrifugações, a primeira para separar o plasma das hemácias e a segunda para concentrar as plaquetas. As CTMs foram isoladas de tecido adiposo, cultivadas, transportadas e aplicadas de forma autóloga, assim como o PRP. No presente relato, um equino, fêmea, Brasileiro de Hipismo com 8 anos, foi diagnosticado com desmopatia nos ligamentos colaterais da articulação interfalângica distal e foi tratado com PRP e CTMs, de forma associada e sequencial. Foi encontrada uma melhora do quadro clínico, significativa, em comparação aos dados encontrados na literatura, demonstrando grande potencialidade do uso associado de PRP e CTMs no tratamento de lesões ligamentares.
Horses are animals widely used in sporting events and are therefore prone to accidents that can lead to joint and bone injuries. In the clinical routine, devices such as the use of X-ray and ultrasound are of great importance for the correct diagnosis to be made and the clinical conduct can be better planned. In addition, some biomaterials such as platelet-rich plasma (PRP) and mesenchymal stem cells (MSCs) have been included in the therapeutic protocols, demonstrating great effectiveness in the treatment of this type of injury due to the large amount of growth factors present in both biomaterials. PRP is a blood derivative, characterized by high platelet concentration. It is produced from two centrifugations, the first to separate plasma from red blood cells and the second to concentrate platelets. MSCs were isolated from adipose tissue, cultured, transported and applied autologously, as well as PRP. In the present report, an 8-year-old female Brazilian equestrian horse was diagnosed with desmopathy in the collateral ligaments of the distal interphalangeal joint and was treated with PRP and MSCs in an associated and sequential manner. A significant improvement in the clinical picture was found in comparison to the data found in the literature, demonstrating great potential of the associated use of PRP and MSCs in the treatment of ligament injuries.
Assuntos
Animais , Plasma Rico em Plaquetas , Células-Tronco Mesenquimais , Cavalos , Ligamentos Articulares/lesões , Articulação do Dedo do Pé/lesõesResumo
Os primeiros estudos demonstrando o potencial de trandiferenciação neural das células-tronco mesenquimais (CTMs) provenientes da medula óssea (MO) foram conduzidos em camundogos e humanos no início da década de 2000. Após esse período, o número de pesquisas e publicações com o mesmo propósito tem aumentado, mas com raros ou escassos estudos na espécie equina. Nesse sentindo, o objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial in vitro da transdiferenciação neural das CTMs provenientes da MO de equinos utilizando-se dois protocolos: P1 (forksolin e ácido retinóico) e P2 (2-βmecarptoetanol). Após a confirmação das linhagens mesenquimais, pela positividade para o marcador CD90 (X=97,94%), negatividade para o marcador CD34 e resposta positiva a diferenciação osteogênica, as CTMs foram submetidas a transdiferenciação neural (P1 e P2) para avaliação morfológica e expressão dos marcadores neurais GFAP e β3 tubulina por citometria de fluxo. Os resultados revelaram mudanças morfológicas em graus variados entre os protocolos testados. No protocolo 1, vinte quatro horas após a incubação com o meio de diferenciação neural, grande proporção de células (>80%) apresentaram morfologia semelhante a células neurais, caracterizadas por retração do corpo celular e grande número de projeções protoplasmáticas (filopodia). Por outro lado, de forma comparativa, já nos primeiros 30 minutos após a exposição ao antioxidante β-mercaptoetanol (P2) as CTMs apresentaram rápida mudança morfológica caracterizada principalmente por retração do corpo celular e menor número de projeções protoplasmáticas. Também ficou evidenciado com o uso deste protocolo, menor aderência das células após tempo de exposição ao meio de diferenciação, quando comparado ao P1.(AU)
The first studies showing the potential of neural transdifferentiation of mesenchymal stem cells (MSCs) from bone marrow (BM) were conducted in camundogos and humans in the early 2000s. After this period, the number of research and publications with the same purpose increased, but with rare or scarce studies in horses. The aim of this study was to evaluate in vitro neuronal transdifferentiation potential of MSCs from equine BM using two protocols: P1 (forksolin and retinoic acid) and P2 (2-βmecarptoetanol). After confirming the mesenchymal lineages, by positivity for the marker CD90 (X=97.94%), negative for the marker CD34 and positive response for osteogenic differentiation, MSCs were subjected to neural transdifferentiation (P1 and P2) for morphological analysis and expression of neural markers GFAP and β3 tubulin by flow cytometry. The results revealed morphological changes in varying degrees between the tested protocols. In protocol 1, twenty four hours after incubation with the media of neural differentiation, a large proportion of cells (>80%) had similar morphology to neural cells, characterized by retraction of cellular body and a large number of cytoplasmic extension (filopodia). However, comparatively, within the first 30 minutes after exposure to the antioxidant β-mercaptoethanol (P2) MSCs showed rapid morphological changes characterized mainly by retraction of cellular body and less cytoplasmic extension.(AU)
Assuntos
Animais , Cavalos/genética , Células-Tronco Mesenquimais/citologia , Medula Óssea/fisiologia , Osteogênese/genética , Linhagem da Célula , Transdiferenciação Celular/genética , Técnicas de Cultura de Células/veterinária , Meios de Cultura/isolamento & purificação , Glucose/genética , Citometria de Fluxo/veterináriaResumo
O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da precipitação pluvial e da disponibilidade hídrica nos desembarques de peixes da Lagoa Mirim. Para a pesquisa foram utilizados dados históricos da região da Lagoa, localizada no sul do Rio Grande do Sul, com parte de seu limite fazendo fronteira com o Uruguai. Os dados dos desembarques anuais (t) de peixes da lagoa foram extraídos das estatísticas geradas pelo IBAMA. Os dados de precipitação foram coletados pela Estação Meteorológica de Santa Vitória do Palmar. Esses dados correspondem a totais anuais. Os dados de nível da Lagoa Mirim foram coletados pela Agência da Lagoa Mirim, em dois pontos: Santa Izabel e Santa Vitória do Palmar. Foram calculadas as médias mensais. O período estudado foi de 2002 a 2010. Não foi possível realizar o estudo com um período maior, pois não havia dados históricos disponíveis. Foram aplicadas aos dados, análises de agrupamento, análises de quantis, análises de variabilidade temporal e análises de regressão linear. As espécies mais abundantes observadas nos desembarques foram: traíra, jundiá, peixe-rei-de-água-doce, pintado, cará, viola de água doce e biru, respectivamente. Houve maior similaridade nos desembarques do jundiá e do pintado, seguido pela similaridade entre desembarques de peixe-rei e biru. A pesca da viola e da traíra se 6 assemelha à do jundiá e do pintado. Não houve similaridade entre os desembarques do cará com as demais espécies. Os anos com acumulados de chuva inferiores a 1012,7 mm foram classificados como muito secos; entre 1012,7 e 1202,2 mm como secos; entre 1202,2 e 1290,8 mm como normais; entre 1290,8 e 1543,1 mm como chuvosos e acima de 1543,1 mm foram classificados como muito chuvosos. As espécies: cará, jundiá, traíra e viola, tiveram uma correlação significativa com a precipitação do ano anterior aos desembarques. As análises de regressão linear se mostraram eficientes e significativas entre o nível mensal da lagoa com as espécies: biru, pintado, traíra e viola. Não houve correlação com jundiá, cará e peixe-rei. A disponibilidade hídrica da Lagoa Mirim está relacionada com os índices pluviométricos da região e com o uso deste recurso para abastecimento e irrigação. As capturas anuais de peixes na Lagoa Mirim são determinadas pela disponibilidade do estoque, pelos incrementos e esforços pesqueiros e pela precipitação pluvial.
The objective of this study was to evaluate the effect of rainfall and water availability in fish landings of the Mirim Lagoon. For the research we used historical data of the lagoon area, located in southern Rio Grande do Sul, with part of its boundary bordering Uruguay. The data from the annual landings (t) of pond fish have been derived from statistics generated by IBAMA. The rainfall data were collected by the meteorological station of Santa Vitória do Palmar. These figures are annual totals. The Mirim lagoon level data were collected by the Agency of the Mirim Lagoon, on two points: Santa Isabel and Santa Vitória do Palmar. Monthly averages were calculated. The study period was from 2002 to 2010. It was not possible to conduct the study with a longer period, because there was no historical data available. They were applied to the data, cluster analysis, quantile analysis, temporal variability analysis and linear regression analysis. The most abundant species observed in the landings were traíra, jundiá, peixe-rei-de-água-doce, pintado, cará, viola de água doce and biru, respectively. There was a greater similarity in landings of jundiá and pintado, followed by the similarity between peixe-rei and biru landings. Fishing for viola and traíra resembles the jundiá and pintado. There was no similarity between the cará of the landings with the other species. The years with rainfall accumulated less than 1012.7 mm were classified as very dry; between 1012.7 and 1202.2 mm as dry; between 1202.2 and 1290.8 mm as normal; between 1290.8 and 1543.1 mm as rainy and above 1543.1 mm were classified as very rainy. Species: 8 cará, jundiá, traíra and viola, had a significant correlation with rainfall the previous year landings. The linear regression analyzes were efficient and significant between the monthly level of the pond with the species: biru pintado, traíra and viola. There was no correlation with jundiá, cará and peixe-rei. The water availability in the Mirim Lagoon is related to rainfall in the region and with the use of this resource for supply and irrigation. The annual fish catch in Mirim Lagoon are determined by the availability of stock, increments and fishing efforts and rainfall.
Resumo
A utilização de células-tronco adultas autólogas surgiu como uma alternativa terapêutica no tratamento de equinos, com resultados bastante promissores. Adicionalmente, a terapia com células alogênicas viabiliza a manutenção de um banco de células, proporcionando assim seu uso imediato. O objetivo deste trabalho foi avaliar, morfologicamente, a resposta inflamatória e detectar as células-tronco mesenquimais (CTMs) marcadas, autólogas e alogênicas, após a inoculação no músculo gluteus medius de equinos. Para tal, foram utilizados 15 equinos, divididos igualmente em três grupos de cinco animais, sendo o grupo 1 (controle), grupo 2 (células autólogas), grupo 3 (células alogênicas). Os animais foram submetidos à punção de medula óssea e após o cultivo, essas células foram caracterizadas fenotipicamente por citometria de fluxo e submetidas à diferenciação osteogênica, adipogênica e condrogênica, para caracterização da linhagem mesenquimal. Em seguida, as células autólogas e alogênicas foram marcadas com o nanocristal Qtracker 655® e inoculadas no músculo gluteus medius dos grupos 2 e 3, respectivamente. No grupo 1 foi inoculado PBS (solução salina tamponada com fosfato). Em cada grupo foi realizada uma biópsia 30 dias antes e outra 24h após o transplante das células e à inoculação do PBS. A análise dos resultados das biópsias demonstrou, por meio de colorações como Hematoxilina-Eosina, Gomori Modificado e NADH-tr, que a morfologia e o metabolismo das fibras foram mantidos tanto no grupo controle como nos grupos tratados. Além disso, foi possível detectar as CTMs marcadas no tecido muscular por meio de imunofluorescência. Portanto, concluiu-se que as CTMs autólogas e alogênicas transplantadas foram detectadas no tecido muscular de equinos e morfologicamente, não provocaram reação inflamatória 24h após o transplante
The use of autologous adult stem cells appeared as therapeutic alternative in treatment of horses with promising results. Allogeneic cell therapy enables maintenance a bank of cells, thereby providing immediate use. The aim of this study was to evaluate the inflammatory response and tracker autologous and allogeneic, mesenchymal stem cell (MSCs) after gluteus medius muscle horse injection. In this research, we used fifteen horses that were divided equally into three groups of five animals each, with Group 1 (control), Group 2 (autologous cells) and Group 3 (allogeneic cells). The animals undergo bone marrow aspiration for culture and isolation of mesenchymal cells. These cells, after culture were phenotypically characterized by flow cytometry and differentiation for characterization of the mesenchymal lineage. Upon such identification, autologous and allogeneic cells were marked with Qtracker 655® and inoculated in the gluteus medius muscle of groups 2 and 3, respectively. In group 1 was inoculated an equal volume of PBS (phosphate buffered saline). In each group a biopsy was done thirty days before and 24h after inoculation of the cells and PBS. Biopsies results showed through stains such as hematoxylin-eosin, modified Gomori and NADH-tr, that the tissue integrity and fiber metabolism was maintained in both, control and treated groups. Additionally, was possible to detect MSCs tracked in muscle tissue through immunofluorescence. Therefore, we conclude that autologous and allogeneic BM-MSCs could be detected in muscle tissue and through morphology analysis, caused no inflammatory reaction, 24 hours after transplantation