Quimioembolização transarterial hepática: modelo experimental de tumor em ratos

PURPOSE: An animal model to study the behaviour of liver tumor in rat and its response after use of transarterial chemoembolization. METHODS: We use 88 Wistar rats, all of them were females, adult, weight 175-284 g. Abdominal incison of three cm and implanted the Walker carcinossarcoma 256 at left lobule of the liver. The animals were divided into three grups, that received 100x10³ , 200x10³, and 300x10³ cells. Followed up the animas to avaliate life standing and tumoral development. In another experiment was used 39 animals which already had Walker 256 tumor and we study the survival of the animals after treatment with 5-FU IP or 5-FU IA. RESULTS: The orevall tumor development rate were 100%. Tumor growth was fast, and devolopment metastases on old fase. The animals dead between 7º and 15º day. Its possible to do chemoembolization experimentaly, after the use of 5-FU the rate survival increased. CONCLUSION: The model with Walker 256 tumor developed here is easy to repoduce, efficient, with high tumor development rate observed, the life standing is about 9,96 ± 0,3 days. The chemoembolization experiment allows to assess several drugs.

OBJETIVO: Estabelecer um modelo de tumor no fígado de ratos para estudo do comportamento tumoral e avaliar o uso da quimiembolização transarterial. MÉTODOS: Utilizou-se oitenta e oito ratos Wistar, fêmeas, adultos, pesando entre 175- 284 g . Realizado incisão abdominal de 3 cm e implantou-se o carcinossarcoma de Walker 256 no lóbulo esquerdo do fígado. Dividiu-se em três grupos que receberam respectivamente 100x 10³ , 200x 10³ e 300x 10³ células tumorais, avaliado a pega do tumor e a sobrevida. Em outro grupo de experimento com 39 animais inoculados com tumor de Walker foi avaliado a sobrevida dos animais após infusão do 5-Flourouracil (5-FU) por via intra-peritoneal e intra-arterial. RESULTADOS: O implante do carcinossarcoma de Walker no fígado de ratos apresentou desenvolvimento de 100 %, teve um crescimento rápido e desenvolvimento de metástases tardiamente, levando os animais ao óbito entre o sétimo e décimo quinto dia. A quimiembolização transarterial é possível de ser realizada experimentalmente. O uso do 5-FU aumentou a sobrevida em comparação ao grupo controle. CONCLUSÃO: O modelo de implante do tumor de Walker no fígado de ratos é eficiente, de fácil reprodutibilidade, e sobrevida média de 9,96±0.3 dias. A quimioterapia transarterial hepática pode ser realizada experimentalmente para avaliar diversas drogas.

Modelo de tumor de pulmão em rato com o carcinossarcoma de Walker

OBJECTIVE: To develop a lung tumor model in rats using Walkers carcinosarcoma and to verify the presence in vivo of tumors using computerized tomography (CT). METHODS: Female Wistar rats (n=47) were anesthetized with pentobarbital, intubated through tracheostomy and submitted to thoracotomy; subsequently a 50-70 mu L volume containing Walkers tumor cells, or the suspension of these same cells, was injected into the lung parenchyma. The study consisted of two phases: in the first a tumor implantation technique was developed and the number of cells required to attain a satisfactory tumor development rate was established. In the second phase, the tumor volume in cm³ (Dxd²/2) was determined through CT scan and necropsis, and the survival rates were analyzed. RESULTS: The overall tumor development rate was 93.3%, or rather, 81.1% in the first phase and 100% in the second. The surgical mortality rate was 17.0%. The average tumor volume was similar (0.099 vs. 0.111 cm³) at CT scan and at necropsis, respectively (r=0.993; p 0.0001). The survival average was about 10 days. CONCLUSION: The high tumor development rate observed and the close correlation between the figures obtained through CT scan and necropsis allow for tomographical tumor growth monitoring and thereby for evaluation of the action of anti-tumor drugs in vivo as well as for analysis of survival rates without the need for sacrificing animals.

OBJETIVO: Desenvolver um modelo de tumor pulmonar em ratos com o carcinossarcoma de Walker e verificar in vivo a presença de tumor por meio de tomografia computadorizada (TC). MÉTODOS: Ratos Wistar fêmeas (n=47) foram anestesiados com pentobarbital, intubados por traqueostomia e submetidos a toracotomia para injeção no parênquima pulmonar de células do tumor de Walker ou do veículo das mesmas. O estudo consistiu de duas etapas: na primeira desenvolveu-se a técnica de implante do tumor e estabeleceu-se o número de células necessário para um bom índice de pega tumoral. Na segunda etapa, determinou-se o volume do tumor em cm³ (Dxd²/2) através de TC e necropsia (6° dia do implante), e analizou-se a sobrevida dos animais. RESULTADOS: O índice de pega do tumor foi 93,3%, sendo 81,8% na primeira etapa e 100% na segunda. A mortalidade cirúrgica foi 17,0%. As medidas dos tumores foram semelhantes (0,099 vs. 0,111 cm³) na tomografia e na necropsia, respectivamente (r=0,993; p 0,0001) e a sobrevida mediana foi 10 dias. CONCLUSÃO: O alto índice de pega e a boa correlação dos dados de tomografia com os de necropsia permitem, por meio deste modelo, o monitoramento tomográfico do crescimento tumoral e, portanto, a avaliação da ação in vivo de drogas anti-tumorais, além da análise de sobrevida sem a necessidade do sacrifício dos animais.

Método para o estudo in vivo da angiogênese: indução de neovascularização na córnea de coelho

Angiogenesis is a multi-step process that leads to the formation of new blood vessels from preexisting capillaries and is a key event in several physiological and pathophysiological processes including the tumor growth and development of metastases. Several in vitro and in vivo techniques have been developed for studying angiogenesis. The Rabbit Cornea Assay was one of the first, created by Gimbrone and coworkers. The main objective of this work was to describe the method of inducing angiogenesis in the rabbit cornea, by means of surgical polymethylmetacrylate pellet implantation containing a basic fibroblast growth factor (bFGF). Pellets with bFGF 0.1 mug were implanted in one cornea, while in the contralateral cornea pellets without bFGF was implanted as controls. The angiogenic activity was expressed as an angiogenic index resulted from the counting of the vessel number and the measurement of their length in millimeters. The results showed that bFGF induced a significant vascular growth into the corneal stroma at the sixth day after the pellet implantation reaching the maximal activity in the fifteenth day. The pellets with PMMA alone, did not stimulate a significant vascularization. This method can be readily implemented for the study of the pathophysiology in the angiogenic process and for the screening of new anti-angiogenic drugs.

A angiogênese é um processo de múltiplos degraus que conduz a formação de novos vasos sangüíneos a partir de capilares preexistentes e que participa em diversos processos fisiológicos e patológicos incluindo o crescimento tumoral e de metástases. Vários métodos têm sido desenvolvidos para estudar a angiogênese. A técnica de indução de vascularização na córnea do coelho foi uma das primeiras a serem desenvolvidas pelo grupo de Gimbrone e colaboradores. O principal objetivo deste trabalho foi descrever a técnica de indução de angiogênese na córnea do coelho, através do implante cirúrgico de "pellets" de polimetilmetacrilato (PMMA) contendo fator básico de crescimento fibroblástico (FCFb). Um "pellet" contendo 0.1 mig de FCFb foi implantado em uma das córneas e outro, sem FCFb, na córnea contralateral, como controle. A atividade angiogênica foi expressa por um índice, resultado da contagem do número de vasos e da medição de seu comprimento em milímetros. Os resultados mostraram que o FCFb induz crescimento vascular significativo a partir do sexto dia após o implante do "pellet" com atividade máxima no 15º dia. O PMMA sem FCFb não estimulou significativamente a vascularização. Esta técnica fornece uma nova opção de modelo para o estudo da biologia da angiogênese e para avaliação de drogas antiangiogênicas, usando "pellets" de polimetilmetacrilato (PMMA).

ESTABELECIMENTO DE UM MODELO DE TUMOR EXPERIMENTAL PELA INOCULAÇÃO DO TUMOR DE WALKER EM ESTÔMAGO DE RATO

The spontaneous incidence of gastric cancer in rat is extremely low. Furthermore, the development of this type of cancer induced by chemical carcinogens, fundic resection, vagotomy or reflux is very low, erratic and takes several months. The present work developed a relatively easy and reliable method for topical implantation of a fast growth tumor in the rat gastric mucosa. Cells from Walker tumor were injected through a canula in the rat stomach previously injured by clamping the mucosa in three different gastric regions. The tumors were found 100% in the large curvature, 80% in the small curvature and 20% in the esophagogastric juction. The surviving time of the inoculated animals was 13,2±1,92 days. The neoplastic tissue showed a rapid and constant growth pattern and it has allowed to inoculate a large series of rats.

A incidência de câncer gástrico espontâneo em ratos é extremamente rara. Por outro lado, embora o câncer experimental de estômago possa ser induzido por carcinógenos químicos, através da ressecção da região fúndica do estômago, pela vagotomia ou pelo refluxo, esses métodos apresentam um percentual de desenvolvimento tumoral baixo e errático. Além disso, geralmente decorre um longo período de tempo até o pleno crescimento do tumor. O presente trabalho procurou estabelecer um modelo de tumor experimental de crescimento rápido, uniforme e com elevado índice de pega, que permitisse a avaliação de novas terapêuticas para o tratamento do câncer gástrico. Para tanto, utilizou-se uma suspensão de células do carcinossarcoma 256 de Walker que foi inoculada no estômago através de uma cânula orogástrica. A implantação ocorreu na mucosa previamente lesionada por clampeadura da parede, nas regiões da junção esôfago-gástrica, pequena curvatura e grande curvatura. O crescimento tumoral ocorreu em todos os animais e, embora na junção esôfago-gástrica a incidência de pega tenha sido de apenas 20%, possivelmente em função do epitélio queratinizado, na pequena curvatura a incidência foi de 80% e na grande curvatura todos os animais apresentaram tumor. Esses dados demonstraram que é possível implantar o tumor em 100% dos animais inoculados, o que comprova a exequibilidade da técnica. A vantagem dessa metodologia sobre as outras já descritas na literatura, também usando o carcinossarcoma 256 de Walker, é que o tumor cresce a partir da mucosa, reproduzindo as condições de desenvolvimento do tumor gástrico espontâneo. A média de sobrevida dos animais inoculados é de 13,2±1,98 dias. Além disso, como o tumor se desenvolve em todos os animais inoculados, pode-se dispensar métodos radiológicos e ultra-sonográficos para evidenciar a sua presença. Trata-se, portanto, de um método simples e eficaz e que possibilita a implantação do tumor em um grande número de animais, facilitando, inclusive, o estudo do tumor em diversas fases do seu desenvolvimento, testes de novos fármacos e esquemas terapêuticos.