Cytochemical study of Rhodnius neglectus and Rhodnius prolixus salivary gland cells (Hemiptera, Triatominae) / Estudo citoquímico de células da glândula salivar de Rhodnius neglectus e Rhodnius prolixus (Hemiptera, Triatominae)

Triatomines are hematophagous bugs of medical interest in South and Central America, where they may act as invertebrate hosts of the hemoflagellate protozoa Trypanosoma cruzi (the causative of Chagas disease) and Trypanosoma rangeli (Tejera, 1920). Triatomines of Rhodnius genus have salivary gland formed by two close and independent units: the principal and the accessory. This gland secretes saliva that abounds in substances that facilitate and permit feeding. Despite this importance, there are few reports on its cytochemistry. In purpose of amplifying this understanding, in this work it was investigated the nuclear structures (chromatin and nucleolar corpuscles) of salivary gland cells of Rhodnius neglectus (Lent, 1954) and Rhodnius prolixus (Stål, 1859). The salivary glands were removed from adult insects, fixed and submitted to different cytochemical methods: lacto-acetic orcein, silver ion impregnation, Feulgen reaction, Toluidine Blue, Variant method of critical electrolyte concentration and C-banding. The results evidenced predominance of binucleated cells, with bulky and polyploid nucleus, decondensed chromatin and a large nucleolar area. In addition, cytoplasmic metachromasy and a clear association between nucleolar and heterochromatic corpuscles were observed. Such characteristics were associated with intense synthesis activity to produce saliva. Besides, the heterochromatic corpuscles observed with C Banding permitted the differentiation of sexes and species.(AU)

Os triatomíneos são insetos hematófagos que apresentam interesse médico nas América do Sul e Central por serem hospedeiros invertebrados dos protozoários hemoflagelados Trypanosoma cruzi (agente etiológico da doença de Chagas) e Trypanosoma rangeli (Tejera, 1920). Os triatomíneos do gênero Rhodnius possuem glândula salivar formada por duas unidades próximas e independentes: a principal e a acessória. Esta glândula secreta uma saliva que contém substâncias que facilitam e permitem a hematofagia. Entretanto, apesar da sua importância, poucos estudos realizaram sua análise citoquímica. No propósito de ampliar esse entendimento, neste trabalho foram investigadas as estruturas nucleares (cromatina e corpúsculos nucleolares) das células da glândula salivar de Rhodnius neglectus (Lent, 1954) e Rhodnius prolixus (Stål, 1859). As glândulas foram removidas de insetos adultos, fixadas e submetidas a diferentes métodos citoquímicos: Orceína Lacto-Acética, Impregnação por Íons de Prata, Reação de Feulgen, Azul de Toluidina, Variante da Concentração Eletrolítica Crítica e Bandamento C. Os resultados evidenciaram predomínio de células binucleadas, com núcleos volumosos e poliplóides, cromatina descondensada e uma grande área nucleolar. Além disso, foi observada metacromasia citoplasmática e uma clara associação entre os corpúsculos nucleolares e heterocromáticos. Tais características foram associadas às atividades de intensa síntese proteica para a produção de saliva. Além disso, os corpúsculos heterocromáticos observados no Bandamento C permitiram a diferenciação dos sexos e das espécies.(AU)

Cytochemical study of Rhodnius neglectus and Rhodnius prolixus salivary gland cells (Hemiptera, Triatominae) / Estudo citoquímico de células da glândula salivar de Rhodnius neglectus e Rhodnius prolixus (Hemiptera, Triatominae)

Triatomines are hematophagous bugs of medical interest in South and Central America, where they may act as invertebrate hosts of the hemoflagellate protozoa Trypanosoma cruzi (the causative of Chagas’ disease) and Trypanosoma rangeli (Tejera, 1920). Triatomines of Rhodnius genus have salivary gland formed by two close and independent units: the principal and the accessory. This gland secretes saliva that abounds in substances that facilitate and permit feeding. Despite this importance, there are few reports on its cytochemistry. In purpose of amplifying this understanding, in this work it was investigated the nuclear structures (chromatin and nucleolar corpuscles) of salivary gland cells of Rhodnius neglectus (Lent, 1954) and Rhodnius prolixus (Stål, 1859). The salivary glands were removed from adult insects, fixed and submitted to different cytochemical methods: lacto-acetic orcein, silver ion impregnation, Feulgen reaction, Toluidine Blue, Variant method of critical electrolyte concentration and C-banding. The results evidenced predominance of binucleated cells, with bulky and polyploid nucleus, decondensed chromatin and a large nucleolar area. In addition, cytoplasmic metachromasy and a clear association between nucleolar and heterochromatic corpuscles were observed. Such characteristics were associated with intense synthesis activity to produce saliva. Besides, the heterochromatic corpuscles observed with C Banding permitted the differentiation of sexes and species.

Os triatomíneos são insetos hematófagos que apresentam interesse médico nas América do Sul e Central por serem hospedeiros invertebrados dos protozoários hemoflagelados Trypanosoma cruzi (agente etiológico da doença de Chagas) e Trypanosoma rangeli (Tejera, 1920). Os triatomíneos do gênero Rhodnius possuem glândula salivar formada por duas unidades próximas e independentes: a principal e a acessória. Esta glândula secreta uma saliva que contém substâncias que facilitam e permitem a hematofagia. Entretanto, apesar da sua importância, poucos estudos realizaram sua análise citoquímica. No propósito de ampliar esse entendimento, neste trabalho foram investigadas as estruturas nucleares (cromatina e corpúsculos nucleolares) das células da glândula salivar de Rhodnius neglectus (Lent, 1954) e Rhodnius prolixus (Stål, 1859). As glândulas foram removidas de insetos adultos, fixadas e submetidas a diferentes métodos citoquímicos: Orceína Lacto-Acética, Impregnação por Íons de Prata, Reação de Feulgen, Azul de Toluidina, Variante da Concentração Eletrolítica Crítica e Bandamento C. Os resultados evidenciaram predomínio de células binucleadas, com núcleos volumosos e poliplóides, cromatina descondensada e uma grande área nucleolar. Além disso, foi observada metacromasia citoplasmática e uma clara associação entre os corpúsculos nucleolares e heterocromáticos. Tais características foram associadas às atividades de intensa síntese proteica para a produção de saliva. Além disso, os corpúsculos heterocromáticos observados no Bandamento C permitiram a diferenciação dos sexos e das espécies.

Field evaluation of safety during gestation and horizontal spread of a recombinant differential bovine Herpesvirus 1 (BoHV-1) vaccine / Avaliação a campo da segurança para vacas prenhes e capacidade de disseminação horizontal de uma vacina diferencial recombinante contra o Herpes-vírus Bovino tipo 1 (BoHV-1)

Infecções pelo herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) são importantes causas de doença respiratória, reprodutiva e abortos em bovinos. A vacinação é freqüentemente empregada para minimizar as perdas produzidas pela infecção. Todavia, a imunização de vacas durante a prenhez com algumas vacinas contendo vírus vivo modificado (MLV) pode ocasionalmente causar abortos. Em trabalho prévio, nosso grupo desenvolveu uma vacina recombinante de BoHV-1 construída a partir de um isolado brasileiro de BoHV-1 (Franco et al., 2002a) do qual o gene que codifica para a glicoproteína E (gE) foi artificialmente deletado. Tal recombinante (gE-) vem sendo avaliado como vacina diferencial, isto é, capaz de permitir a diferenciação entre animais vacinados e infectados. No presente estudo, o potencial de disseminação do vírus recombinante foi avaliado em um rebanho de gado de corte, em condições de campo. Para tanto, a segurança da vacina gE- quando aplicada durante a prenhez foi avaliada pela inoculação intramuscular de 107,4 doses infectantes para 50% dos cultivos celulares (DICC50) do vírus em 22 fêmeas prenhes (14 previamente soronegativas e 8 previamente soropositivas para BoHV-1) em diferentes fases da gestação. Outras 15 vacas prenhes foram mantidas como controles não-vacinados. Não ocorreram abortos, natimortos ou anormalidades fetais em nenhum dos grupos. Soroconversão foi observada nas fêmeas vacinadas previamente soronegativas. Em um segundo experimento, 4 novilhas foram inoculadas pela via intranasal com 107,6 DICC50 do vírus recombinante, sendo mantidos em contato com 16 novilhas em uma área de campo, a uma densidade de 1 animal por hectare. Os animais foram monitorados quanto à presença de sinais clínicos; amostras de soro foram coletadas nos dias 0, 30, 60 e 180 após a vacinação. Soroconversão foi observada apenas nos animais vacinados e não nos contatos...(AU)

Bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) is recognized as a major cause of respiratory, reproductive disease and abortion in cattle. Vaccination is widely applied to minimize losses induced by BoHV-1 infections; however, vaccination of dams during pregnancy with modified live virus (MLV) vaccines has been occasionally associated to abortions. We have previously reported the development of a BoHV-1 recombinant virus, constructed with basis on a Brazilian BoHV-1 (Franco et al. 2002a) from which the gene coding for glycoprotein E (gE) was deleted (gE-) by genetic manipulation. Such recombinant has been previously evaluated in its potential as a differential vaccine (gE- vaccine) that allows differentiation between vaccinated and infected animals. Here, in the first part of the present study, the safety of the gE- vaccine during pregnancy was evaluated by the intramuscular inoculation of 107.4 tissue culture 50 % infective doses (TCID50) of the virus into 22 pregnant dams (14 BoHV-1 seronegative; 8 seropositive), at different stages of gestation. Other 15 pregnant dams were kept as non-vaccinated controls. No abortions, stillbirths or fetal abnormalities were seen after vaccination. Seroconversion was observed in both groups of previously seronegative vaccinated animals. In the second part of the study, the potential of the gE- vaccine virus to spread among beef cattle under field conditions was examined. Four heifers were inoculated intranasally with a larger amount (107,6 TCID50) of the gE- vaccine (to increase chances of transmission) and mixed with other sixteen animals at the same age and body condition, in the same grazing area, at a population density equal to the average cattle farming density within the region (one cattle head per 10,000 m2), for 180 days. All animals were monitored daily for clinical signs. Serum samples were collected on days 0, 30, 60 and 180 post-vaccination. Seroconversion was observed only in vaccinated heifers... (AU)