Cisteína como antioxidante para a criopreservação de sêmen de garanhões considerado de baixa congelabilidade / Cysteine as an antioxidant to frozen semen of “bad freezer” stallions

Objetivou-se avaliar o efeito da adição de cisteína (CIS), como agente antioxidante, no diluenteutilizado para criopreservação de espermatozoides equinos com histórico de sêmen com baixa congelabilidade.Três amostras seminais de sete garanhões foram obtidas por meio de vagina artificial, diluídas em meiocomercial (Botusêmen) e distribuídas em dois tratamentos: controle e CIS (2,5 mM de cisteína) ecriopreservadas. Após o descongelamento, as avaliações in vitro foram: cinética espermática computadorizada eavaliação da integridade das membranas plasmática e acrossomal por meio de sondas fluorescentes. Verificou-seque no grupo CIS o percentual de motilidade total e progressiva (23,95 ± 3,33; 4,66 ± 0,84), respectivamente, foisuperior em relação às amostras do grupo controle (11,38 ± 2,35; 2,04 ± 0,36), (P < 0,01). Não houve diferençacom relação à integridade das membranas plasmática (12,5 ± 2,6 x 15,1 ± 2,6) e acrossomal (24,2 ± 3,6 x 25,4 ±3,85), (P > 0,05), quando se comparou grupo controle e cisteína, respectivamente. Levando-se em consideraçãoque a motilidade apresenta alta correlação com a fertilidade, os resultados sugerem que a adição de cisteína naconcentração de 2,5 mM ao meio diluente antes do congelamento de sêmen incrementa a qualidade dosespermatozoides criopreservados de animais considerados de baixa congelabilidade.(AU)

The aim of this experiment was to evaluate the effect of in vitro addition of cysteine (CIS) as antioxidantused for frozen semen of "bad freezer" stallions. Three semen samples from seven stallions were obtained byartificial vagina, diluted in commercial extender (Botusêmen) and splited in two treatments: control and CIS(2.5 mM of cysteine) and cryopreserved. After post-thaw, the analyzed parameters were: computerized analysisof sperm movement characteristics and acrosmal and plasma membrane integrity by fluorescent probes. Totaland progressive motility were higher (P < 0.01) in CIS group (23.95 ± 3.33; 4.66 ± 0.84) when compared withcontrol group (11.38 ± 2.35; 2.04 ± 0.36), respectively. Regarding plasma and acrosomal membrane integritythere was no difference (P > 0.05) (12.5 ± 2.6 x 15.1 ± 2.6 and 24.2 ± 3.6 x 25.4 ± 3.85, respectively) betweenthe control and cysteine group. It is known that the motility is highly correlated with fertility so these resultssuggest that the addition of 2.5 mM of cysteine in the frozen extender medium before cryopreservation increasesthe seminal quality of "bad freezer" stallions.(AU)

Cisteína como antioxidante para a criopreservação de sêmen de garanhões considerado de baixa congelabilidade / Cysteine as an antioxidant to frozen semen of “bad freezer” stallions

Objetivou-se avaliar o efeito da adição de cisteína (CIS), como agente antioxidante, no diluenteutilizado para criopreservação de espermatozoides equinos com histórico de sêmen com baixa congelabilidade.Três amostras seminais de sete garanhões foram obtidas por meio de vagina artificial, diluídas em meiocomercial (Botusêmen) e distribuídas em dois tratamentos: controle e CIS (2,5 mM de cisteína) ecriopreservadas. Após o descongelamento, as avaliações in vitro foram: cinética espermática computadorizada eavaliação da integridade das membranas plasmática e acrossomal por meio de sondas fluorescentes. Verificou-seque no grupo CIS o percentual de motilidade total e progressiva (23,95 ± 3,33; 4,66 ± 0,84), respectivamente, foisuperior em relação às amostras do grupo controle (11,38 ± 2,35; 2,04 ± 0,36), (P 0,05), quando se comparou grupo controle e cisteína, respectivamente. Levando-se em consideraçãoque a motilidade apresenta alta correlação com a fertilidade, os resultados sugerem que a adição de cisteína naconcentração de 2,5 mM ao meio diluente antes do congelamento de sêmen incrementa a qualidade dosespermatozoides criopreservados de animais considerados de baixa congelabilidade.

The aim of this experiment was to evaluate the effect of in vitro addition of cysteine (CIS) as antioxidantused for frozen semen of "bad freezer" stallions. Three semen samples from seven stallions were obtained byartificial vagina, diluted in commercial extender (Botusêmen) and splited in two treatments: control and CIS(2.5 mM of cysteine) and cryopreserved. After post-thaw, the analyzed parameters were: computerized analysisof sperm movement characteristics and acrosmal and plasma membrane integrity by fluorescent probes. Totaland progressive motility were higher (P 0.05) (12.5 ± 2.6 x 15.1 ± 2.6 and 24.2 ± 3.6 x 25.4 ± 3.85, respectively) betweenthe control and cysteine group. It is known that the motility is highly correlated with fertility so these resultssuggest that the addition of 2.5 mM of cysteine in the frozen extender medium before cryopreservation increasesthe seminal quality of "bad freezer" stallions.