Resumo
Here, it is presented a rapid and efficient method to obtain good quality DNA from small samples of arthropod tissues generating low quantities of hazardous wastes. This new method was compared with another homemade protocol using phenol and other two commercial kits. The quality of DNA obtained was checked by spectrophotometer and evaluated by an AFLP assay. Low shearing DNA was obtained from all samples and the best readings were observed to DNA recollected with the new method. The AFLP assay indicated that DNA obtained with all methods were suitable for use in molecular biology techniques sensitive to contaminants. However, homemade protocols were more efficient in recollect DNA than commercial kits, without lose any quality of samples. Also, they were less time and fund consuming, with costs ten times cheaper than commercial kits. The quicker, less pollutant and cheaper protocol was the one described here (USD 0.52 per sample).
Aqui, é apresentado um método rápido e eficiente para obtenção de DNA de boa qualidade a partir de pequenas amostras de tecidos de artrópodos, gerando pequenas quantidades de resíduos perigosos. Comparamos a eficiência do método com outro protocolo caseiro utilizando fenol e com dois kits comerciais. A qualidade do DNA obtido foi verificada em espectrofotômetro e avaliada por um ensaio de AFLP. Foi obtido DNA pouco fragmentado a partir de todas as amostras, mas as melhores leituras foram obtidas para o DNA extraído com o novo método. O ensaio de AFLP indicou que os DNAs obtidos estavam adequados para uso em técnicas de biologia molecular sensíveis a contaminantes. Porém, os protocolos caseiros foram mais eficientes em extrair DNA do que kits comerciais, sem perder nenhuma qualidade na pureza das amostras. Além disso, eles foram mais rápidos e baratos, chegando a custar dez vezes menos que os kits comerciais. O protocolo mais rápido, menos poluente e mais barato foi o descrito aqui (USD 0,52 por amostra).
Resumo
Here, it is presented a rapid and efficient method to obtain good quality DNA from small samples of arthropod tissues generating low quantities of hazardous wastes. This new method was compared with another homemade protocol using phenol and other two commercial kits. The quality of DNA obtained was checked by spectrophotometer and evaluated by an AFLP assay. Low shearing DNA was obtained from all samples and the best readings were observed to DNA recollected with the new method. The AFLP assay indicated that DNA obtained with all methods were suitable for use in molecular biology techniques sensitive to contaminants. However, homemade protocols were more efficient in recollect DNA than commercial kits, without lose any quality of samples. Also, they were less time and fund consuming, with costs ten times cheaper than commercial kits. The quicker, less pollutant and cheaper protocol was the one described here (USD 0.52 per sample).
Aqui, é apresentado um método rápido e eficiente para obtenção de DNA de boa qualidade a partir de pequenas amostras de tecidos de artrópodos, gerando pequenas quantidades de resíduos perigosos. Comparamos a eficiência do método com outro protocolo caseiro utilizando fenol e com dois kits comerciais. A qualidade do DNA obtido foi verificada em espectrofotômetro e avaliada por um ensaio de AFLP. Foi obtido DNA pouco fragmentado a partir de todas as amostras, mas as melhores leituras foram obtidas para o DNA extraído com o novo método. O ensaio de AFLP indicou que os DNAs obtidos estavam adequados para uso em técnicas de biologia molecular sensíveis a contaminantes. Porém, os protocolos caseiros foram mais eficientes em extrair DNA do que kits comerciais, sem perder nenhuma qualidade na pureza das amostras. Além disso, eles foram mais rápidos e baratos, chegando a custar dez vezes menos que os kits comerciais. O protocolo mais rápido, menos poluente e mais barato foi o descrito aqui (USD 0,52 por amostra).
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Here, it is presented a rapid and efficient method to obtain good quality DNA from small samples of arthropod tissues generating low quantities of hazardous wastes. This new method was compared with another homemade protocol using phenol and other two commercial kits. The quality of DNA obtained was checked by spectrophotometer and evaluated by an AFLP assay. Low shearing DNA was obtained from all samples and the best readings were observed to DNA recollected with the new method. The AFLP assay indicated that DNA obtained with all methods were suitable for use in molecular biology techniques sensitive to contaminants. However, homemade protocols were more efficient in recollect DNA than commercial kits, without lose any quality of samples. Also, they were less time and fund consuming, with costs ten times cheaper than commercial kits. The quicker, less pollutant and cheaper protocol was the one described here (USD 0.52 per sample).
Aqui, é apresentado um método rápido e eficiente para obtenção de DNA de boa qualidade a partir de pequenas amostras de tecidos de artrópodos, gerando pequenas quantidades de resíduos perigosos. Comparamos a eficiência do método com outro protocolo caseiro utilizando fenol e com dois kits comerciais. A qualidade do DNA obtido foi verificada em espectrofotômetro e avaliada por um ensaio de AFLP. Foi obtido DNA pouco fragmentado a partir de todas as amostras, mas as melhores leituras foram obtidas para o DNA extraído com o novo método. O ensaio de AFLP indicou que os DNAs obtidos estavam adequados para uso em técnicas de biologia molecular sensíveis a contaminantes. Porém, os protocolos caseiros foram mais eficientes em extrair DNA do que kits comerciais, sem perder nenhuma qualidade na pureza das amostras. Além disso, eles foram mais rápidos e baratos, chegando a custar dez vezes menos que os kits comerciais. O protocolo mais rápido, menos poluente e mais barato foi o descrito aqui (USD 0,52 por amostra).