Resumo
Objetivou-se o aperfeiçoamento do protocolo de congelamento de sêmen para piracanjuba, utilizando diferentes curvas de congelamento e soluções contendo melatonina. Este estudo foi dividido em duas etapas. A primeira consistiu na avaliação da criopreservação do sêmen, em diferentes tempos de permanência, em botijão de vapor de nitrogênio, utilizando diferentes concentrações de melatonina no meio de criocongelamento e na segunda avaliou-se o sêmen diluído nas mesmas concentrações de melatonina das soluções da primeira etapa, porém, criocongeladas em duas curvas, utilizando-se dry shipper e máquina de congelamento. As coletas foram realizadas nas Estações de Piscicultura da Cemig, em Volta Grande e em Itutinga, nos períodos de piracema, em 2016, 2017 e 2018. O sêmen foi caracterizado por meio da observação de volume, aspecto, coloração, vigor e concentração espermática. Os parâmetros utilizados para a avaliação da qualidade das células foram a taxa e a duração da motilidade, a integridade de membrana plasmática, a morfologia da célula espermática, o perfil oxidativo e as taxas de fertilização e eclosão. Na primeira etapa, as características do sêmen in natura encontravam-se de acordo com o encontrado por outros autores. Somente para a taxa de fertilização foi observada diferença estatística significativa na interação entre as soluções e os tempos no dry shipper. A solução M2 apresentou os melhores resultados em relação à solução controle, para os parâmetros de vitalidade, taxa de motilidade, tempos de motilidade e motilidade progressiva (85,2±2,8%, 64,63±8,3%, 84,22±11,4 seg, 17,01±1,2%). Na segunda etapa, observou-se diferença (p<0,05) entre as soluções nos parâmetros de vitalidade, morfologia, motilidade e taxa de fertilização. As soluções com melatonina apresentaram os melhores valores. No estresse oxidativo, apenas a peroxidação lipídica e a atividade de SOD apresentaram diferença (p<0,05) na interação curva e solução, mostrando as soluções com melatonina com os menores valores. Conclui-se que a adição de melatonina na concentração de 2 mM, associada ao crioprotetor metilglicol na solução de criocongelamento, melhorou a qualidade espermática, independentemente das curvas utilizadas.
The objective of this study was to improve the protocol for the freezing of semen for Piracanjuba, using different freezing curves and solutions containing melatonin. This study was divided into two stages. The first consisted of the evaluation of the cryopreservation of semen in different times of stay in a nitrogen vapor canister, using different concentrations of melatonin in the cryoclock and the second evaluated the diluted semen in the same concentrations of melatonin of the solutions of the first stage, in two different curves using the dry shipper and freezing machine. The collections were carried out at the Cemig Fisheries Stations in Volta Grande and Itutinga, during the periods of piracema in 2016, 2017 and 2018. Semen was characterized by the observation of volume, appearance, color, vigor and sperm concentration. The parameters used to evaluate cell quality were the rate and duration of motility, plasma membrane integrity, sperm cell morphology, oxidative profile and rates of fertilization and hatching. In the first stage, the characteristics of the semen in natura are in agreement with the one found by other authors. Only for the fertilization rate was observed a statistically significant difference in the interaction between solutions and times in the dry shipper. The M2 solution presented the best results in relation to the control solution for the parameters of vitality, motility rate, motility times and progressive motility (85.2 ± 2.8%, 64.63 ± 8.3%, 84, 22 ± 11.4 sec, 17.01 ± 1.2%). In the second stage, there was a difference (p <0.05) between the solutions in the parameters of vitality, morphology, motility and fertilization rate. The melatonin solutions presented the best values. In oxidative stress, only lipid peroxidation and SOD activity presented a difference (p <0.05) in the curve and solution interaction, showing the melatonin solutions with the lowest values. It is concluded that the addition of 2mM melatonin, combined with the cryoprotective methylglycol in the cryoclock solution, improved sperm quality, regardless of the curves used.