Toxoplasma gondii antibodies in wild rodents and marsupials from the Atlantic Forest, state of São Paulo, Brazil

Toxoplasma gondii is a protozoan parasite that infects a large spectrum of warm-blooded animals, including humans. Small rodents and marsupials play an important role in the epidemiology of T. gondii because they are sources of infection for domestic and feral cats. Serum samples from 151 rodents and 48 marsupials, captured in the Atlantic Forest, São Paulo State, southeastern Brazil, were analyzed for the presence of T. gondii antibodies. Antibodies detected by the modified agglutination test (MAT 25) were found in 8.6% (13/151) of the rodents and 10.4% (5/48) of the marsupials, with titers ranging from 25 to 6400 and from 25 to 3200, respectively for the rodents and marsupials. Three of the eight species of rodents (Akodon spp., Oligoryzomys nigripesand Rattus norvegicus), and one from the four marsupial species (Didelphis aurita) presented positive animals. T. gondii was described for the first time in the rodent Oligoryzomys nigripes.

Toxoplasma gondii é um protozoário parasita que infecta animais de sangue quente, incluindo seres humanos. Pequenos roedores e marsupiais têm papel importante na epidemiologia do T. gondii, pois são fontes de infecção para os felídeos domésticos e selvagens. Amostras de soro de 151 roedores e 48 marsupiais, capturados na Mata Atlântica, Estado de São Paulo, Sudeste do Brasil, foram analisadas para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondii. Os anticorpos foram detectados pelo Teste de Aglutinação Modificada (MAT 25), com 8,6% (13/151) dos roedores e 10,4% (5/48) dos marsupiais soropositivos, com títulos variando de 25 a 6.400 e de 25 a 3.200, respectivamente, para os roedores e os marsupiais. Três das oito espécies de roedores (Akodon spp., Oligoryzomys nigripes e Rattus norvegicus) e uma das quatro espécies de marsupiais (Didelphis aurita) apresentaram animais positivos. A presença de anticorpos anti-T. gondii foi descrita pela primeira vez no roedor Oligoryzomys nigripes.

Toxoplasma gondii antibodies in wild rodents and marsupials from the Atlantic Forest, state of São Paulo, Brazil

Toxoplasma gondii is a protozoan parasite that infects a large spectrum of warm-blooded animals, including humans. Small rodents and marsupials play an important role in the epidemiology of T. gondii because they are sources of infection for domestic and feral cats. Serum samples from 151 rodents and 48 marsupials, captured in the Atlantic Forest, São Paulo State, southeastern Brazil, were analyzed for the presence of T. gondii antibodies. Antibodies detected by the modified agglutination test (MAT 25) were found in 8.6% (13/151) of the rodents and 10.4% (5/48) of the marsupials, with titers ranging from 25 to 6400 and from 25 to 3200, respectively for the rodents and marsupials. Three of the eight species of rodents (Akodon spp., Oligoryzomys nigripesand Rattus norvegicus), and one from the four marsupial species (Didelphis aurita) presented positive animals. T. gondii was described for the first time in the rodent Oligoryzomys nigripes.

Toxoplasma gondii é um protozoário parasita que infecta animais de sangue quente, incluindo seres humanos. Pequenos roedores e marsupiais têm papel importante na epidemiologia do T. gondii, pois são fontes de infecção para os felídeos domésticos e selvagens. Amostras de soro de 151 roedores e 48 marsupiais, capturados na Mata Atlântica, Estado de São Paulo, Sudeste do Brasil, foram analisadas para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondii. Os anticorpos foram detectados pelo Teste de Aglutinação Modificada (MAT 25), com 8,6% (13/151) dos roedores e 10,4% (5/48) dos marsupiais soropositivos, com títulos variando de 25 a 6.400 e de 25 a 3.200, respectivamente, para os roedores e os marsupiais. Três das oito espécies de roedores (Akodon spp., Oligoryzomys nigripes e Rattus norvegicus) e uma das quatro espécies de marsupiais (Didelphis aurita) apresentaram animais positivos. A presença de anticorpos anti-T. gondii foi descrita pela primeira vez no roedor Oligoryzomys nigripes.

Environmentally associated ticks (Acari: Ixodidae) in Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil

Herein, we report tick species found on wild and domestic animals and in the environment during a one-year sampling period at the Brazilian Farming Research Company beef cattle unit (Embrapa Beef Cattle), which is located within the urban area of Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil. From 55 wild hosts including six different species (Nasua nasua, Cebus spp., Cerdocyon thous,Myrmecophaga tridactyla, Tamandua tetradactyla and Dasyprocta aguti), 323 ticks were collected. Amblyomma ovale ticks were found solely on coatis, and Amblyomma nodosum was identified solely on anteaters. No ticks were found on capuchin monkeys. However, Amblyomma cajennense was found on all parasitized host species with the exception of capuchin monkeys. Giant anteaters displayed the highest infestation abundance, with a mean of 53 ticksanimal. Environmental sampling yielded 166 adult A. cajennense ticks. The tick species found on domestic animals (Rhipicephalus(Boophilus) microplus,R. sanguineus, Dermacentor nitens andA. cajennense) were those typically found on these hosts in Brazil. The most prevalent tick species, A. cajennense, was found on both wild and domestic animals and was also prevalent in the environment. Thus, this tick species is the primary vector that allows pathogens to bridge wild and domestic animals in the Cerrado.

Neste trabalho são descritas as espécies de carrapatos de animais selvagens e domésticos e do ambiente coletados por um ano na EMBRAPA Gado de Corte localizado na área urbana de Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil. Dos 55 hospedeiros selvagens de seis espécies diferentes (Nasua nasua, Cebus spp.,Cerdocyon thous, Myrmecophaga tridactyla,Tamandua tetradactyla e Dasyprocta aguti) foram coletados 323 carrapatos. Amblyomma ovale foi encontrado apenas em quatis e Amblyomma nodosum apenas sobre tamanduás. Nenhum carrapato foi encontrado sobre macacos-prego. Por outro lado, Amblyomma cajennense foi encontrado em todos os hospedeiros com exceção dos macacos-pregos. A maior abundancia de infestação foi aquela em tamanduás-bandeira com média de 53 carrapatosanimal. No ambiente foram capturados 166 carrapatos, todos da espécie A. cajennense. As espécies de carrapatos em animais domésticos (Rhipicephalus(Boophilus) microplus,Rhipicephalus sanguineus, Dermacentor nitens e A. cajennense) foram aquelas características nestes hospedeiros no Brasil. De forma geral a espécie de carrapato A. cajennense foi a mais prevalente sendo encontrada em animais domésticos e selvagens bem como no ambiente. Portanto, esta é a principal espécie de vetor a estabelecer uma ponte para bioagentes patogênicos entre animais domésticos e selvagens.

Ticks on birds in a savanna (Cerrado) reserve on the outskirts of Uberlândia, Minas Gerais, Brazil

We report tick infestations on birds, in the environment and on domestic animals in a non-forested phytophysiognomy, the savanna-like Cerradosensu stricto, in a natural reserve on the outskirts of the urban area of Uberlândia, Minas Gerais, Brazil. Overall, 238 birds within 50 species, 15 families and six orders were caught. Passeriformes were the most numerous, with 216 birds (90.75%), among which 22 had ticks (n = 31). Within this order, the prevalence of tick infestation was 10.2%, and the abundance and mean intensity were 0.14 and 1.41, respectively. Only immature ticks of the species Amblyomma nodosum were found on the birds. The tick species found both on animals (Rhipicephalus sanguineus,Rhipicephalus (Boophilus)microplus, Amblyomma cajennense andDermacentor nitens) and in the environment (Amblyomma dubitatum, Rhipicephalus(B.) microplus andAmblyomma cajennense) were as expected. This difference in tick species between the environment and birds possibly occurred because the sampling of the environment was limited to the ground. This study also highlights the importance of the diverse microenvironments used by ticks and hosts in the same area and the complex ecology of bird-tick relationships. Ecological and epidemiological aspects of the findings are discussed.

Nesse trabalho relatam-se infestações de carrapatos em aves, meio ambiente e em animais domésticos em uma fitofisionomia não florestal, o Cerrado stricto sensu, de uma reserva natural na periferia da área urbana de Uberlândia, Minas Gerais, Brasil. Para tal, 238 aves de 50 espécies foram capturadas, pertencentes a 15 famílias e seis ordens. Passeriforme foi a mais numerosa, com 216 indivíduos (90,75%), dos quais 22 estavam parasitados com 31 carrapatos. Nos Passeriformes a prevalência de infestação de carrapatos foi de 10,2%, a abundância e intensidade média foi de 0,14 e 1,41, respectivamente. Apenas carrapatos imaturos da espécie Amblyomma nodosum foram encontrados em aves. As espécies de carrapatos encontradas tanto em animais (Rhipicephalus sanguineus,Rhipicephalus (Boophilus)microplus, Amblyomma cajennense,Dermacentor nitens) como no ambiente (Amblyomma dubitatum, Rhipicephalus(B.) microplus,Amblyomma cajennense) foram aquelas já esperadas. Esta diferença de espécies de carrapatos entre ambiente e de aves possivelmente ocorreu porque a amostragem do ambiente se restringiu ao solo. Esse estudo também destaca a importância dos diversos microambientes usados por carrapatos e hospedeiros em uma mesma área e a complexa ecologia das relações ave-carrapato. Aspectos ecológicos e epidemiológicos dos achados são discutidos.

Ticks on birds from Cerrado forest patches along the Uberabinha river in the Triângulo Mineiro region of Minas Gerais, Brazil

We herein describe ticks parasitizing birds in forest fragments along the Uberabinha River, a major watercourse that cuts through patches of remnants of Brazilian savannah in Uberlândia, Minas Gerais, Brazil. Overall 352 birds from 62 species, overwhelmingly, Passeriformes, were captured with mist-nets. The most abundant bird species was Basileuterus hypoleucus (n=36), followed by Lanio penicillata (n=24) and Thalurania furcata (n=23). Thirty one birds, all Passeriformes, were found infested with 56 ticks from which 12 were larvae and 44 nymphs, all from the Amblyomma genus. Highest infestation prevalence was found on Taraba major (66.6%), Thamnophilus pelzeni (60%) and Saltator maximus (50%). The mean intensity of tick infestation was low (1.8 tick per infested bird) with most of the parasites located on the neck (60%) of birds, followed by the head (20%). All larvae were attached to the skin around the eyes of birds. Amblyomma nodosum was the most numerous tick species found attached to birds (n=23 nymphs, 52.3% of nymphs) followed by Amblyomma longirostre (n=5, 11.4% of nymphs). Ecological relationships are discussed.

Descrevemos aqui carrapatos que parasitam aves em fragmentos florestais ao longo do rio Uberabinha, o principal curso de água que corta manchas de remanescentes de Cerrado em Uberlândia, Minas Gerais, Brasil. Ao todo, foram capturadas, com redes de neblina, 352 aves, de 62 espécies, em sua maioria, Passeriformes. As espécies de aves mais abundantes foram Basileuterus hypoleucus com 36 indivíduos, seguido de Lanio penicillata (n=24) e Thalurania furcata (n=23). Trinta e uma aves, todas Passeriformes, estavam infestadas com 56 carrapatos, sendo 12 larvas e 44 ninfas, todos do gênero Amblyomma. A prevalência de infestação mais elevada foi encontrada em Taraba major (66,6%), Thamnophilus pelzeni (60%) e Saltator maximus (50%). A intensidade média de infestação por carrapatos foi baixa (1,8 carrapato por ave infestada) e a maior parte dos parasitas recolhidos estava localizada no pescoço (60%) das aves, seguido pela cabeça (20%). Todas as larvas estavam fixadas à pele ao redor dos olhos das aves. Amblyomma nodosum foi a espécie de carrapato mais numerosa encontrada nas aves (n=23 ninfas, 52,3% das ninfas), seguido de Amblyomma longirostre (n=5, 11,4% das ninfas). Relações ecológicas são discutidas.

Ticks on birds from Cerrado forest patches along the Uberabinha river in the Triângulo Mineiro region of Minas Gerais, Brazil

We herein describe ticks parasitizing birds in forest fragments along the Uberabinha River, a major watercourse that cuts through patches of remnants of Brazilian savannah in Uberlândia, Minas Gerais, Brazil. Overall 352 birds from 62 species, overwhelmingly, Passeriformes, were captured with mist-nets. The most abundant bird species was Basileuterus hypoleucus (n=36), followed by Lanio penicillata (n=24) and Thalurania furcata (n=23). Thirty one birds, all Passeriformes, were found infested with 56 ticks from which 12 were larvae and 44 nymphs, all from the Amblyomma genus. Highest infestation prevalence was found on Taraba major (66.6%), Thamnophilus pelzeni (60%) and Saltator maximus (50%). The mean intensity of tick infestation was low (1.8 tick per infested bird) with most of the parasites located on the neck (60%) of birds, followed by the head (20%). All larvae were attached to the skin around the eyes of birds. Amblyomma nodosum was the most numerous tick species found attached to birds (n=23 nymphs, 52.3% of nymphs) followed by Amblyomma longirostre (n=5, 11.4% of nymphs). Ecological relationships are discussed.

Descrevemos aqui carrapatos que parasitam aves em fragmentos florestais ao longo do rio Uberabinha, o principal curso de água que corta manchas de remanescentes de Cerrado em Uberlândia, Minas Gerais, Brasil. Ao todo, foram capturadas, com redes de neblina, 352 aves, de 62 espécies, em sua maioria, Passeriformes. As espécies de aves mais abundantes foram Basileuterus hypoleucus com 36 indivíduos, seguido de Lanio penicillata (n=24) e Thalurania furcata (n=23). Trinta e uma aves, todas Passeriformes, estavam infestadas com 56 carrapatos, sendo 12 larvas e 44 ninfas, todos do gênero Amblyomma. A prevalência de infestação mais elevada foi encontrada em Taraba major (66,6%), Thamnophilus pelzeni (60%) e Saltator maximus (50%). A intensidade média de infestação por carrapatos foi baixa (1,8 carrapato por ave infestada) e a maior parte dos parasitas recolhidos estava localizada no pescoço (60%) das aves, seguido pela cabeça (20%). Todas as larvas estavam fixadas à pele ao redor dos olhos das aves. Amblyomma nodosum foi a espécie de carrapato mais numerosa encontrada nas aves (n=23 ninfas, 52,3% das ninfas), seguido de Amblyomma longirostre (n=5, 11,4% das ninfas). Relações ecológicas são discutidas.

Ticks on birds from Cerrado forest patches along the Uberabinha river in the Triângulo Mineiro region of Minas Gerais, Brazil

We herein describe ticks parasitizing birds in forest fragments along the Uberabinha River, a major watercourse that cuts through patches of remnants of Brazilian savannah in Uberlândia, Minas Gerais, Brazil. Overall 352 birds from 62 species, overwhelmingly, Passeriformes, were captured with mist-nets. The most abundant bird species was Basileuterus hypoleucus (n=36), followed by Lanio penicillata (n=24) and Thalurania furcata (n=23). Thirty one birds, all Passeriformes, were found infested with 56 ticks from which 12 were larvae and 44 nymphs, all from the Amblyomma genus. Highest infestation prevalence was found on Taraba major (66.6%), Thamnophilus pelzeni (60%) and Saltator maximus (50%). The mean intensity of tick infestation was low (1.8 tick per infested bird) with most of the parasites located on the neck (60%) of birds, followed by the head (20%). All larvae were attached to the skin around the eyes of birds. Amblyomma nodosum was the most numerous tick species found attached to birds (n=23 nymphs, 52.3% of nymphs) followed by Amblyomma longirostre (n=5, 11.4% of nymphs). Ecological relationships are discussed.

Descrevemos aqui carrapatos que parasitam aves em fragmentos florestais ao longo do rio Uberabinha, o principal curso de água que corta manchas de remanescentes de Cerrado em Uberlândia, Minas Gerais, Brasil. Ao todo, foram capturadas, com redes de neblina, 352 aves, de 62 espécies, em sua maioria, Passeriformes. As espécies de aves mais abundantes foram Basileuterus hypoleucus com 36 indivíduos, seguido de Lanio penicillata (n=24) e Thalurania furcata (n=23). Trinta e uma aves, todas Passeriformes, estavam infestadas com 56 carrapatos, sendo 12 larvas e 44 ninfas, todos do gênero Amblyomma. A prevalência de infestação mais elevada foi encontrada em Taraba major (66,6%), Thamnophilus pelzeni (60%) e Saltator maximus (50%). A intensidade média de infestação por carrapatos foi baixa (1,8 carrapato por ave infestada) e a maior parte dos parasitas recolhidos estava localizada no pescoço (60%) das aves, seguido pela cabeça (20%). Todas as larvas estavam fixadas à pele ao redor dos olhos das aves. Amblyomma nodosum foi a espécie de carrapato mais numerosa encontrada nas aves (n=23 ninfas, 52,3% das ninfas), seguido de Amblyomma longirostre (n=5, 11,4% das ninfas). Relações ecológicas são discutidas.

Ticks on birds in a forest fragment of Brazilian cerrado (savanna) in the municipality of Uberlândia, State of Minas Gerais, Brazil

This is a report of ticks species, parasite prevalence and infestation intensity of birds in a forest fragment (18º 56' 57" S and 48º 12' 14" W) within the Brazilian cerrado (savanna), in the municipality of Uberlândia, State of Minas Gerais, Brazil. A total of 162 birds from 26 species were captured. One adult tick, 296 larvae and 67 nymphs were found on passerine birds. Of these, it was identified 31 larvae and 27 nymphs of Amblyomma longirostre, 17 nymphs of A. nodosum, one A. cajennense larvae and one male of Rhipicephalus sanguineus. All other ticks were identified as Amblyomma sp. larvae (n = 264) or nymphs (n = 26). Overall tick infestation intensity and prevalence were 4.32 ticks/infested bird and 52%, respectively. Sampling of host-seeking ticks on the ground within the forest during a two-year period showed only five Amblyomma sp. nymphs and one adult male of A. nodosum whereas a search for ticks on domestic animals (cattle, horses and dogs) found Rhipicephalus (Boophilus) microplus ticks. Although identification was possible in only 27% of bird ticks there seemed to be no correlation between environmental and domestic animal and bird infestation. It can be assumed that bird infestation may occur above the ground or at specific sites not sampled.

Neste trabalho, são apresentadas as espécies de carrapatos em aves silvestres, sua prevalência e a intensidade de infestação em um fragmento florestal (18º 56' 57" S e 48º 12' 14" W) do Cerrado, no município de Uberlândia, Estado de Minas Gerais. Foram capturadas 162 aves de 26 espécies, mas apenas as aves Passeriformes estavam infestadas. Nestas, foram encontrados um carrapato adulto, 67 ninfas e 296 larvas. Dentre os carrapatos foi possível a identificação de 31 larvas e 27 ninfas de Amblyomma longirostre, 17 ninfas de A. nodosum, uma larva de A. cajennense e um Rhipicephalus sanguineus macho. Todos os outros carrapatos foram classificados como larvas (n = 264) ou ninfas (n = 26) de Amblyomma sp. A intensidade de infestação e a prevalência de carrapatos foram de 4,32 carrapatos/ave infestada e 52%, respectivamente. Na pesquisa de carrapatos em vida livre sobre a vegetação do fragmento florestal, foram capturados apenas cinco ninfas de Amblyomma sp. e um macho adulto de A. nodosum, por um período de dois anos. Carrapatos da espécie Rhipicephalus (Boophilus) microplus foram encontrados parasitando bovinos, cavalos e cães domésticos da região. Mesmo considerando a identificação de apenas 27% dos carrapatos das aves, parece não haver correlação entre infestação ambiental, nos animais domésticos, com a infestação das aves. Pode-se supor que a infestação das aves ocorra acima do solo ou em locais específicos não pesquisados neste trabalho.

Efeito acaricida da mistura oxigênio - ozônio sobre o carrapato rhipicephalus sanguineus

O Rhipicephalus sanguineus (LATREILLE, 1806), um carrapato cosmopolita, é, provavelmente, o ixodídeo de mais ampla distribuição do mundo (PEGRAM et al., 1987). Dadas a ampla disseminação desse carrapato pelo mundo, sua capacidade em desenvolver infestações intensas em pouco tempo no cão e possibilidade de veiculação de agentes infecciosos para o cão e o homem, seu controle têm apresentado uma demanda crescente. Em três meses o R. sanguineus consegue completar seu ciclo de vida em condições laboratoriais (BECHARA et al., 1995). Cada estádio ativo pode persistir por meses sem se alimentar (GUGLIELMONE et al., 2004), a infestação ambiental permanece por meses após a retirada do hospedeiro (cão) do local. Os dados sobre a infestação de cães no Brasil indicam níveis elevados de infestação de cães pelo carrapato R. sanguineus. O controle de carrapatos, incluindo o R. sanguineus, é feito quase que exclusivamente com o uso de acaricidas, porém resistência de carrapatos aos principais princípios ativos tem sido observada (GEORGE et al., 2004). Portanto torna-se necessário o desenvolvimento de formas alternativas de controle desses carrapatos. É objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro? o efeito da mistura oxigênio - ozônio sobre todos os estádios de vida do carrapato Rhipicephalus sangiíneus e assim sua eficácia no controle desse parasito. Os carrapatos e

In silico analysis for identification of tick phagotopes selected by phage-displayed libraries

Phage display techniques have been widely employed to map epitope structures which have served as the basis for developing molecular vaccines. We have applied this technique to map specific epitopes of Rhipicephalus (Boophilus) microplus. In the present study, we have identified the potential immunogens using a process in which the selected phage clones were analyzed through bioinformatics, prior to final field tests. The present study demonstrates the feasibility of identifying important R. (B.) microplus phagotopes for vaccine development through screening of phage-displayed random peptide libraries and bioinformatics tools.

Técnicas de phage display têm sido amplamente empregadas para o mapeamento de epítopos os quais tem servido como base para o desenvolvimento de vacinas moleculares. Esta técnica foi aplicada no mapeamento de epítopos do Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Neste estudo, potenciais imunógenos foram identificados pela adoção de um processo em que os clones de fagos foram analisados por bioinformática, previamente à realização dos testes. Os resultados demonstraram a possibilidade da identificação de importantes mimetopos do R. (B.) microplus para o desenvolvimento de vacinas através da seleção de bibliotecas de phage display associada à análise de bioinformática.

In silico analysis for identification of tick phagotopes selected by phage-displayed libraries

Phage display techniques have been widely employed to map epitope structures which have served as the basis for developing molecular vaccines. We have applied this technique to map specific epitopes of Rhipicephalus (Boophilus) microplus. In the present study, we have identified the potential immunogens using a process in which the selected phage clones were analyzed through bioinformatics, prior to final field tests. The present study demonstrates the feasibility of identifying important R. (B.) microplus phagotopes for vaccine development through screening of phage-displayed random peptide libraries and bioinformatics tools.

Técnicas de phage display têm sido amplamente empregadas para o mapeamento de epítopos os quais tem servido como base para o desenvolvimento de vacinas moleculares. Esta técnica foi aplicada no mapeamento de epítopos do Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Neste estudo, potenciais imunógenos foram identificados pela adoção de um processo em que os clones de fagos foram analisados por bioinformática, previamente à realização dos testes. Os resultados demonstraram a possibilidade da identificação de importantes mimetopos do R. (B.) microplus para o desenvolvimento de vacinas através da seleção de bibliotecas de phage display associada à análise de bioinformática.

Colonização e lesão em fêmeas ingurgitadas do carrapato Rhipicephalus sanguineus causadas pelo fungo Metarhizium anisopliae

The objective of this work was to verify the penetration of the fungus Metarhizium anisopliae [METSCH. (SOROKIN, 1883)], in to the Rhipicephalus sanguineus ticks (LATREILLE, 1806), as well as the lesions caused in the tissues of the acarus. The form of adherence and penetration of the fungus in the deep tissue was studied through scanning microscopy and the fungus action on the internal tissues was evaluated in conventional hystological sections. In order to evaluate these events, experimental infestations were conducted in 11 engorged females groups of the tick R. sanguineus, containing 12 engorged females in each. Aiming this goal the engorged females were submited to a bath in a conidial suspension in a concentration of 108 conidia/mL during three minutes under manual agitation. In case of control groups the bath was done only in the suspension vehicle. Ticks were processed for histological and scanning microscopy surveys at different intervals after the infection: 1 and 18h and one, two, three, four, five, six, seven, eight, nine and eleven days. It has been observed that the major part of the conidians have germinated within 18h after the inoculation and that the fungus the penetrated the acarus body, trough it´s tegument 48h after the infection. After the penetration the fungus colonized the ticks body in a diffuse manner, without any preference for a specific tissue. Among the lesions caused by the fungus, rupture of the ticks intestinal wall and the dispersion of the fluid into the hemocel were the most outstanding features. Death of the host occurred 96h pos-infection and the sporulation of the pathogen over the dead acarus began 120 to 144h pos-infection. This work aims to contribute to the establishement of techniques for biological control of the ticks by fungus as an ecological alternative for acaricides.

O presente trabalho teve como objetivo verificar a forma de penetração do fungo Metarhizium anisopliae [METSCH. (SOROKIN, 1883)] em carrapatos da espécie Rhipicephalus sanguineus (LATREILLE, 1806), assim como as lesões infringidas nos tecidos internos do ácaro. A forma de aderência e penetração do fungo foi estudada através da microscopia eletrônica de varredura e a ação do fungo nos tecidos internos avaliada em secções histológicas convencionais. Para observação destes eventos, realizaram-se infecções experimentais em 11 grupos de fêmeas ingurgitadas do carrapato R. sanguineus contendo 12 fêmeas ingurgitadas cada. Para tal, as fêmeas ingurgitadas foram banhadas durante 3 minutos, sob agitação manual, em suspensão com concentração 108 conídios/mL. No caso dos grupos controle o banho foi realizado apenas no veículo da suspensão. Os carrapatos foram processados para histopatologia e microscopia eletrônica em diversos tempos após a infecção, a saber: 1 e 18h, e um, dois, três, quatro, cinco, seis, sete, nove e onze dias. Observou-se que a maior parte dos conídios germinou em até 18h após a inoculação e que o fungo penetrou no ácaro através do tegumento 48h após a infecção. Após a penetração, o fungo invadiu o corpo do hospedeiro promovendo uma colonização difusa, sem preferência aparente por tecidos específicos. Dentre as lesões nos tecidos internos do ácaro, ressalta-se o rompimento da parede intestinal e vazamento do conteúdo para a hemocele. A morte do hospedeiro ocorreu entre 96 e 120h pós-infecção, e a esporulação do patógeno sobre o cadáver do ácaro iniciou-se em torno de 120 a 144h pós-infecção. Espera-se, com este trabalho, contribuir para o desenvolvimento e viabilização de técnicas de controle biológico dos carrapatos por fungos como alternativa ao uso de acaricidas.

Colonização e lesão em fêmeas ingurgitadas do carrapato Rhipicephalus sanguineus causadas pelo fungo Metarhizium anisopliae

The objective of this work was to verify the penetration of the fungus Metarhizium anisopliae [METSCH. (SOROKIN, 1883)], in to the Rhipicephalus sanguineus ticks (LATREILLE, 1806), as well as the lesions caused in the tissues of the acarus. The form of adherence and penetration of the fungus in the deep tissue was studied through scanning microscopy and the fungus action on the internal tissues was evaluated in conventional hystological sections. In order to evaluate these events, experimental infestations were conducted in 11 engorged females groups of the tick R. sanguineus, containing 12 engorged females in each. Aiming this goal the engorged females were submited to a bath in a conidial suspension in a concentration of 108 conidia/mL during three minutes under manual agitation. In case of control groups the bath was done only in the suspension vehicle. Ticks were processed for histological and scanning microscopy surveys at different intervals after the infection: 1 and 18h and one, two, three, four, five, six, seven, eight, nine and eleven days. It has been observed that the major part of the conidians have germinated within 18h after the inoculation and that the fungus the penetrated the acarus body, trough it´s tegument 48h after the infection. After the penetration the fungus colonized the tick’s body in a diffuse manner, without any preference for a specific tissue. Among the lesions caused by the fungus, rupture of the tick’s intestinal wall and the dispersion of the fluid into the hemocel were the most outstanding features. Death of the host occurred 96h pos-infection and the sporulation of the pathogen over the dead acarus began 120 to 144h pos-infection. This work aims to contribute to the establishement of techniques for biological control of the ticks by fungus as an ecological alternative for acaricides.

O presente trabalho teve como objetivo verificar a forma de penetração do fungo Metarhizium anisopliae [METSCH. (SOROKIN, 1883)] em carrapatos da espécie Rhipicephalus sanguineus (LATREILLE, 1806), assim como as lesões infringidas nos tecidos internos do ácaro. A forma de aderência e penetração do fungo foi estudada através da microscopia eletrônica de varredura e a ação do fungo nos tecidos internos avaliada em secções histológicas convencionais. Para observação destes eventos, realizaram-se infecções experimentais em 11 grupos de fêmeas ingurgitadas do carrapato R. sanguineus contendo 12 fêmeas ingurgitadas cada. Para tal, as fêmeas ingurgitadas foram banhadas durante 3 minutos, sob agitação manual, em suspensão com concentração 108 conídios/mL. No caso dos grupos controle o banho foi realizado apenas no veículo da suspensão. Os carrapatos foram processados para histopatologia e microscopia eletrônica em diversos tempos após a infecção, a saber: 1 e 18h, e um, dois, três, quatro, cinco, seis, sete, nove e onze dias. Observou-se que a maior parte dos conídios germinou em até 18h após a inoculação e que o fungo penetrou no ácaro através do tegumento 48h após a infecção. Após a penetração, o fungo invadiu o corpo do hospedeiro promovendo uma colonização difusa, sem preferência aparente por tecidos específicos. Dentre as lesões nos tecidos internos do ácaro, ressalta-se o rompimento da parede intestinal e vazamento do conteúdo para a hemocele. A morte do hospedeiro ocorreu entre 96 e 120h pós-infecção, e a esporulação do patógeno sobre o cadáver do ácaro iniciou-se em torno de 120 a 144h pós-infecção. Espera-se, com este trabalho, contribuir para o desenvolvimento e viabilização de técnicas de controle biológico dos carrapatos por fungos como alternativa ao uso de acaricidas.

An insight into the histopathology caused by the tick Rhipicephalus sanguineus (Acarina: Ixodidae) in the skin of previously infested, vaccinated or tick-bite naive dogs, guinea pigs and hamsters / Momento histopatológico na pele de cães, hamsters e cobaias sofrendo infestação experimental pelo carrapato Rhipicephalus sanguineus pela primeira vez ou após vacinações ou infestações prévias

Dogs", guinea pigs" and hamsters local skin reaction to the attachment and feeding of the tick Rhipicephalus sanguineus were analysed under light microscopy. The hosts were either tick-bite naive, previously infested or vaccinated with crude unfed adult tick extract. Biopsies were taken at the end of each infestation. Changes common to every host, regardless of experimental group, included presence of tick or its mouthparts embedded in a cone of cementum at the surface of the skin, epidermal hyperplasia, hyperkeratosis and acanthosis, edema and copious inflammatory cell infiltration in the dermis, underneath the tick attachment site. Dogs in all experimental groups reacted with an almost exclusive PMN neutrophil accumulation, while guinea pigs showed a predominantly mononuclear cell infiltration in every experimental group. Hamsters suffering first infestations had a mainly neutrophilic infiltration, showed a predominantly mononuclear cell infiltration in response to multiple infestations, and when previously vaccinated this host had a predominantly eosinophilic infiltration. The persistence of PMN neutrophils in dogs suggest a control of the local immune inflammatory response by the tick. The predominantly eosinophilic infiltration in previously vaccinated hamsters might indicate that different immune mechanisms were triggered by infestation and vaccination.

Analisou-se, sob microscopia óptica, reação cutânea de cães, hamsters e cobaia à fixação e alimentação do carrapato Rhipicephalus sanguineus. Os hospedeiros empregados foram previamente infestados ou vacinados com extrato total de carrapato adulto não alimentado ou eram livres de contato anterior com o carrapato. Biópsias foram obtidas ao final de cada infestação. As alterações comuns a todos os hospedeiros, independente do grupo experimental, incluíram a presença de carrapato ou de suas peças bucais embutidos em um cone de cemento na superfície da pele, hiperplasia da epiderme, hiperqueratose e acantose, edema e infiltração celular inflamatória intensa na derme abaixo do ponto de fixação do carrapato. Os cães, em todos os grupos experimentais, reagiram com um acúmulo praticamente exclusivo de neutrófilos polimorfonucleares enquanto cobaias exibiram uma infiltração celular predominantemente mononuclear nas diversas condições experimentais. Hamsters sofrendo primeira infestação apresentaram uma infiltração predominantemente neutrofílica, infiltração predominantemente mononuclear em resposta a múltiplas infestações e, quando vacinados, uma infiltração preponderantemente eosinofílica. A persistência de neutrófilos nos cães sugere um controle local da resposta inflamatória imune pelo carrapato. A infiltração predominantemente eosinofílica em hamsters vacinados poderia indicar que m

Differences in the acquired resistance of dogs, hamsters, and guinea pigs to repeated infestations with adult ticks Rhipicephalus sanguineus (Acari: Ixodidae) / Diferenças na resistência adquirida de cães, hamsters e cobaias a infestações repetidas por carrapatos Rhipicephalus sanguineus (Acari:Ixodidae) adultos

Tick-bite naive experimental groups of dogs, hamsters and guinea pigs were infested three times with adult ticks Rhipicephalus sanguineus and the acquired resistance, based on the variation of some biological parameters of the female tick was compared. The results showed that hamsters and mainly guinea pigs develop a very efficient immunity to this tick species as demonstrated by a very significant drop in the efficiency rate of female ticks in converting their food reservoir to eggs and larvae from the first to the second and third infestations. At the same time, dogs were unable to display such a resistance. Female tick performance was similar throughout the infestations in this host; there was even a tendency of improvement of the performance with the succession of infestations. These results underline the need of comparative studies on the acquired resistance to ticks involving natural and unnatural hosts as a way of putting in evidence defence mechanisms which might be altered or hidden in natural host - parasite relationships.

Grupos experimentais de cães, hamsters e cobaias sem contato anterior com carrapatos, sofreram três infestações consecutivas por carrapatos Rhipicephalus sanguineus adultos e a resistência adquirida comparada com base na variação de alguns dos parâmetros biológicos da fêmea do carrapato. Os resultados mostraram que hamsters e cobaias principalmente, desenvolvem uma reação imune muito eficiente a esta espécie de carrapato como demonstrado por uma queda altamente significativa na taxa de eficiência da fêmea em converter sua reserva alimentar em ovos e larvas da primeira para as segunda e terceira infestações. Já cães foram incapazes de desenvolver tal resistência. Neste hospedeiro a performance das fêmeas dos carrapatos foi similar durante todas as infestações, havendo até uma tendência de melhora com a sucessão das infestações. Estes resultados reforçam a necessidade de estudos comparativos sobre a resistência adquirida a carrapatos, envolvendo hospedeiros naturais e não naturais, como forma de colocar em evidência mecanismos de defesa que possam estar alterados ou ocultos em relações parasita-hospedeiro naturais.

Hematological values and morpho-cytochemical blood cells identification of tick parasited capybaras (Hydrochoerus hydrochoeris) and capybaras free of parasitism - DOI: 10.4025/actascianimsci.v25i1.2116 / Valores hematológicos e identificação morfo-citoquímica de células sangüíneas de capivaras (Hydrochoerus hydrochoeris) parasitadas por carrapatos e capivaras livres de infestação - DOI: 10.4025/actascianimsci.v25i1.2116

Blood samples were collected from thirty seven adult parasited capybaras and twenty one free of parasitism aiming the characterization of different circulating cell types and complete hemogram. After a morphological analysis, the blood cells were identified as heterophils, eosinophils, basophils, lymphocytes, monocytes and platelets. The PAS reaction revealed glycogen in heterophils and platelets cytoplasm. A positive reaction was found only in heterophils round granules and in all cytoplasmic granules of eosinophils for the demonstration of myeloperoxidase activity and lipids. The bromofenol blue method revealed strong positivity in heterophils, eosinophils, basophils granules and red blood cells. A positive reaction for alkaline phosphatase was observed in eosinophils and heterophils. The blood parameters studied showed statistic differences (p 0,05) between non- parasited capybaras and parasited capybaras in the red blood cell count (3,13±0.31 x 106/µL and 2,81±0,62 x 106/µL) , haematocrit (48.14±4.75% and 41,22±6.21%) and heterophils (39,38±11,02% and 16,14±7,13%) /eosinophils (8,57±3,78% and 21,92±10,24%) in differential count. In this case the ticks involved in the parasitism of these capybaras were identified as Amblyomma cajenense and Amblyomma cooperi. These data showed that the highly infested capybaras presented some anemia and a remarkable eosinophilia.

Amostras de sangue foram colhidas de 37 capivaras parasitadas por carrapatos e de 21 capivaras livres de infestação para a identificação dos diferentes tipos celulares circulantes e para realização de hemograma. Após análise morfológica, as células sangüíneas foram identificadas como heterófilos, eosinófilos, basófilos, linfócitos, monócitos e plaquetas. A reação de PAS demonstrou glicogênio no citoplasma dos heterófilos e plaquetas. Reação positiva para mieloperoxidase e lipídeos foi demonstrada apenas nos grânulos citoplasmáticos esféricos dos heterófilos e em todos os grânulos citoplasmáticos dos eosinófilos. O método do azul de bromofenol revelou reação fortemente positiva nos grânulos de heterófilos, eosinófilos, basófilos e nas hemácias. Reação positiva para fosfatase alcalina foi observada nos heterófilos e eosinófilos. Os valores hematimétricos que mostraram diferenças estatisticamente significantes (p 0,05), quando comparados aos animais parasitados com aqueles livres de infestação, foram: contagem total de hemácias (3,13±0.31 x 106/µL e 2,81±0,62 x 106/µL), hematócrito (48.14±4.75% e 41,22±6.21%), e, na contagem diferencial, os heterófilos (39,38±11,02% e 16,14±7,13%) e, eosinófilos (8,57±3,78% and 21,92±10,24%). Os carrapatos foram identificados como Amblyomma cajenense and Amblyomma cooperi. As capivaras altamente infestadas por esses carrapatos apresentaram ane

Hematological values and morpho-cytochemical blood cells identification of tick parasited capybaras (Hydrochoerus hydrochoeris) and capybaras free of parasitism - DOI: 10.4025/actascianimsci.v25i1.2116 / Valores hematológicos e identificação morfo-citoquímica de células sangüíneas de capivaras (Hydrochoerus hydrochoeris) parasitadas por carrapatos e capivaras livres de infestação - DOI: 10.4025/actascianimsci.v25i1.2116

Blood samples were collected from thirty seven adult parasited capybaras and twenty one free of parasitism aiming the characterization of different circulating cell types and complete hemogram. After a morphological analysis, the blood cells were identified as heterophils, eosinophils, basophils, lymphocytes, monocytes and platelets. The PAS reaction revealed glycogen in heterophils and platelets cytoplasm. A positive reaction was found only in heterophils round granules and in all cytoplasmic granules of eosinophils for the demonstration of myeloperoxidase activity and lipids. The bromofenol blue method revealed strong positivity in heterophils, eosinophils, basophils granules and red blood cells. A positive reaction for alkaline phosphatase was observed in eosinophils and heterophils. The blood parameters studied showed statistic differences (p 0,05) between non- parasited capybaras and parasited capybaras in the red blood cell count (3,13±0.31 x 106/µL and 2,81±0,62 x 106/µL) , haematocrit (48.14±4.75% and 41,22±6.21%) and heterophils (39,38±11,02% and 16,14±7,13%) /eosinophils (8,57±3,78% and 21,92±10,24%) in differential count. In this case the ticks involved in the parasitism of these capybaras were identified as Amblyomma cajenense and Amblyomma cooperi. These data showed that the highly infested capybaras presented some anemia and a remarkable eosinophilia.

Amostras de sangue foram colhidas de 37 capivaras parasitadas por carrapatos e de 21 capivaras livres de infestação para a identificação dos diferentes tipos celulares circulantes e para realização de hemograma. Após análise morfológica, as células sangüíneas foram identificadas como heterófilos, eosinófilos, basófilos, linfócitos, monócitos e plaquetas. A reação de PAS demonstrou glicogênio no citoplasma dos heterófilos e plaquetas. Reação positiva para mieloperoxidase e lipídeos foi demonstrada apenas nos grânulos citoplasmáticos esféricos dos heterófilos e em todos os grânulos citoplasmáticos dos eosinófilos. O método do azul de bromofenol revelou reação fortemente positiva nos grânulos de heterófilos, eosinófilos, basófilos e nas hemácias. Reação positiva para fosfatase alcalina foi observada nos heterófilos e eosinófilos. Os valores hematimétricos que mostraram diferenças estatisticamente significantes (p 0,05), quando comparados aos animais parasitados com aqueles livres de infestação, foram: contagem total de hemácias (3,13±0.31 x 106/µL e 2,81±0,62 x 106/µL), hematócrito (48.14±4.75% e 41,22±6.21%), e, na contagem diferencial, os heterófilos (39,38±11,02% e 16,14±7,13%) e, eosinófilos (8,57±3,78% and 21,92±10,24%). Os carrapatos foram identificados como Amblyomma cajenense and Amblyomma cooperi. As capivaras altamente infestadas por esses carrapatos apresentaram ane

EFEITO ACARICIDA DA MISTURA OXIGÊNIO - OZÔNIO SOBRE O CARRAPATO RHIPICEPHALUS SANGUINEUS.

O Rhipicephalus sanguineus (LATREILLE, 1806), um carrapato cosmopolita, é, provavelmente, o ixodídeo de mais ampla distribuição do mundo (PEGRAM et al., 1987). Dadas a ampla disseminação desse carrapato pelo mundo, sua capacidade em desenvolver infestações intensas em pouco tempo no cão e possibilidade de veiculação de agentes infecciosos para o cão e o homem, seu controle têm apresentado uma demanda crescente. Em três meses o R. sanguineus consegue completar seu ciclo de vida em condições laboratoriais (BECHARA et al., 1995). Cada estádio ativo pode persistir por meses sem se alimentar (GUGLIELMONE et al., 2004), a infestação ambiental permanece por meses após a retirada do hospedeiro (cão) do local. Os dados sobre a infestação de cães no Brasil indicam níveis elevados de infestação de cães pelo carrapato R. sanguineus. O controle de carrapatos, incluindo o R. sanguineus, é feito quase que exclusivamente com o uso de acaricidas, porém resistência de carrapatos aos principais princípios ativos tem sido observada (GEORGE et al., 2004). Portanto torna-se necessário o desenvolvimento de formas alternativas de controle desses carrapatos. É objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro? o efeito da mistura oxigênio - ozônio sobre todos os estádios de vida do carrapato Rhipicephalus sangiíneus e assim sua eficácia no controle desse parasito. Os carrapatos e