Variabilidade genética em populações de Anopheles darlingi (Diptera: Culicidae) e relação ao comportamento da atividade de picar, analisada por RAPD

Two natural populations of Anopheles darlingi, collected in the intra, peri and extra domicile of two townships in the State of Amazonas, Coari and Manaus, were assayed as to their hematophagic behaviour-related genetic variability patterns. Findings revealed a large number of polymorphic fragments as well as high genetic variability in these populations. Polymorphic loci rate (P) and heterozygosity (He) in the Coari population varied between 77.63% - 84.86% and 0.2851 0.3069, respectively, with the highest and lowest genetic variability being detected in the intra- and peri-domicile sub-populations, respectively. The Manaus population showed genetic variability and heterozygosity similar to those in Coari (P= 75% - 78.94% and He= 0.2732 0.2741), where higher genetic variability was detected in the intra-domicile as well. Chi-square data (x²= 695.89; GL= 304; P 0.001) and F ST (F ST= 0.0775 ± 0.0072) were significant, indicating micro-geographic structuring resulting from some decreased gene flow. These findings point out the selective pressure response to the residual insecticide remaining on household walls after the entire neighbourhood had been sprayed with it during malaria control programs.

Duas populações naturais de Anopheles darlingi foram analisadas quanto aos padrões de variabilidade genética relacionados ao comportamento hematofágico, cujas coletas foram realizadas no intra, peri e extradomicíio, em dois municípios do Estado do Amazonas: Coari e Manaus. Os resultados evidenciaram amplo número de fragmentos polimórficos, bem como elevada variabilidade genética nessas populações. Na população de Coari, a porcentagem de locos polimórficos (P) e heterozigosidade (He) variou de 77,63% - 84,86% e 0,2851 0,3069, respectivamente, sendo a maior variabilidade genética detectada nas subpopulações do intradomicílio, e a menor nas do peridomicílio. A população de Manaus mostrou variabilidade genética similar a de Coari (P= 75% - 78,94% e He= 0,2732 0,2741), onde também foi detectada maior variabilidade genética no intradomicílio. Os dados de qui-quadrado (x²= 695,89; GL= 304; P 0,001) e de F ST (F ST= 0,0775 ± 0,0072) foram significativos, indicando uma estruturação micro geográfica, decorrente de alguma redução no fluxo gênico. Esses resultados podem ser interpretados como sendo em resposta à pressão de seleção face aos inseticidas, que permanecem residuais nas paredes dos domicílios.

Gram-scale isolation of isobrucein B and neosergeolide from Picrolemma sprucei Hook. f.

Quassinoids neosergeolide and isobrucein B, obtained from Picrolemma sprucei, have proven in vitro antitumor, antimalarial, anthelminthic, cytotoxic, insecticide and leishmanicidal activities. There is interest in the in vivo pharmacological study of these natural compounds and their semi-synthetic derivatives, however, the quantities obtained in previous extraction processes have been shown to be a limiting factor for continuation of these studies. Herein, we describe a method for obtaining grams of these quassinoids whose purification relies only on recrystallization.

Os quassinóides neosergeolida e isobruceína B, obtidos de Picrolemma sprucei, possuem atividades antitumoral, antimalárica, anti-helmíntica, citotóxica, inseticida e anti-leishmania comprovadas em estudos in vitro. Há interesse no estudo farmacológico in vivo dessas substâncias naturais e de seus derivados semi-sintéticos, porém a quantidade obtida nos processos de extração tem se mostrado um fator limitante à continuação desses estudos. No presente trabalho, descrevemos um método para obtenção de gramas desses quassinóides cuja purificação depende apenas de cristalização fracionada.

Analysis of toxicity on Bacillus sphaericus from amazonian soils to Anopheles darlingi and Culex quinquefasciatus larvae

Bioassays under laboratory conditions aiming to determine the larvicidal activity of Bacillus sphaericus were carried out on Anopheles darlingi and Culex quinquefasciatus. In order to estimate the toxicity through median lethal concentration (LC50) and the relative potency of the strains to B. sphaericus standard strain 2362, probit analysis was performed utilizing the POLO-PC program. The findings of LC50 pointed out high effectiveness on strains IB15 (0.040 ppm), IB19 and S1116 (0.048 ppm), IB16 (0.052 ppm) and S265 (0.057 ppm). Strain IB15 presented nearly 50% more potency than strain 2362 in bioassays conducted on A. darlingi. It was observed that IB16 and S1116 strains were the most powerful against C. quinquefasciatus, showing to be about 300-400% stronger than 2362 strain. The results show that laboratory conditioned evaluation can be an important way to select promising bacteria with entomopathogenic action on biolarvicides production for use on mosquitoes breeding sites.

Bioensaios sob condições de laboratório foram realizados em larvas de Anopheles darlingi e Culex quinquefasciatus, visando determinar a atividade larvicida de Bacillus sphaericus. Para estimar a toxicidade através da concentração letal mediana (CL50) e a potência das estirpes em relação à estirpe padrão 2362, foi realizada a análise de probit utilizando o programa POLO-PC. Os resultados da CL50 apontaram alta efetividade para as estirpes IB15 (0,040 ppm), IB19 e S1116 (0,048 ppm), IB16 (0,052 ppm) e S265 (0,057 ppm). A estirpe IB15 apresentou potência cerca de 50% maior que a estirpe 2362 nos bioensaios realizados com A. darlingi. Foi observado que as estirpes IB16 e S1116 foram as mais tóxicas para controle de C. quinquefasciatus, mostrando-se cerca de 300-400% mais potente. Os resultados mostram que a avaliação em laboratório é uma importante etapa para selecionar bactérias com ação entomopatogênica a serem usadas na para a produção de biolarvicidas para uso nos criadouros das larvas de mosquitos.

Diferenças cromossômicas entre espécies e populações de Anopheles ()

Summary This is a discussion of data related to the chromosome constitution of species and populations of Anopheles and also of some aspects related to morphological, ecological and behavioral characters. Special attention was given to the chromosome differences both among species and populations resulting from rearrangements by paracentric inversions, detected by the analysis of band pattern of polytene chromosomes. Data related to species of the complexes Anopheles maculipennis and Anopheles gambiae, and three species of the subgenus Nyssorhynchus Anopheles darlingi, Anopheles nuneztovari and Anopheles albitarsis were briefly reviewed.

Resumo São discutidos dados relativos à constituição cromossômica de espécies e populações de Anopheles e também alguns aspectos relacionados a caracteres morfológicos, ecológicos e comportamentais. Especial atenção foi dada às diferenças cromossômicas entre espécies e entre populações, resultantes de rearranjos por inversões paracêntricas, detectadas pela análise do padrão de bandas dos cromossomos politênicos. Foram brevemente revisados dados relativos a espécies do complexo Anopheles maculipennis, complexo Anopheles gambiae e três espécies do subgênero Nyssorhynchus Anopheles darlingi, Anopheles nuneztovari e Anopheles albitarsis.

Biologia de anofelinos Amazônicos. XI. Estudos em populações de Anopheles e controle da malária em Ariquemes (Rondônia)

Data on an entomological survey of species of Anopheles in the district of Ariquemes are presented and the occurrence of malaria in this district and in the State of Rondonia is discussed. The results of the. entomological Survey in the urban area of Ariquemes showed the diversity of the species in the different Sections, and it was possible to verify the degree of penetration by anophelines into the town.Autochthonous cases of malaria and the presence of the principal vector of human malaria in the Amazon, Anopheles darlingi, are correlated. The dynamics of malaria transmission in the urban area are examined and the risks of transmission in each Section are discussed. Vector control strategies, based on the manipulation of the habitat, are presented.In the rural area, population parameters are being studied, related to (1) biting activity, natural resting sites, site of reproduction and movement to blood sources; and (2) behaviour of the populations with regard to biting activity and host preferences. The results, though preliminary, show variation in the population density and in the species diversity, that appear to be related to seasonal changes.Variations in the host preferences of the species were also observed, and high antropophily of A. darlingi was detected. Two important parameters in the hematophagous activity of A. darlingi were recorded: it was observed that the anophelines are entering the house near ground level and are not resting on walls sprayed with DDT. In the surrounding vegetation there is a preferences as to the place of resting which may be either high or low.

São apresentados dados sobre inquérito entomológico para espécies de Anopheles rea lizado no Município de Ariquemes e discutida a incidência da malária neste Município e no Estado de Rondônia. Os resultados do inquérito entomológico na zona urbana de Ariquemes evidenciaram a diversidade de espécies nos diferentes Setores, possibilitando verificar o grau de penetração dos anofelinos na cidade. São correlacionados casos autóctones de malária e a presença do principal vetor da malária humana na Amazônia, o Anopheles darlingi. A dinâmica da transmissão da malária na zona urbana é enfocada, discutindo-se os riscos verificados para cada Setor e são apresentadas estratégias de controle, ao nível do vetor, fundamentadas no manuseio do habitat. zona rural estão sendo estudados parâmetros populacionais relacionados (1) à atividade de picar, abrigo natural, sí-tios de reprodução e deslocamento para hematofagia; e (2) comportamento das populações para atividade hematófaga e preferências alimentares. Os resultados, embora preliminares, evidenciam variações na densidade populacional e na diversidade de espécies, as quais devem estar relacionadas à mudanças estacionais. Variações nas preferências alimentares das espécies também foram verificadas, sendo constatada elevada antropofilia de A. darlingi. Dois parâmetros relevantes na atividade hematófaga de A. darlingi foram detectados, observando se que os anofelinos estão penetrando nas habitações petas partes inferiores e que não estão pousando nas paredes com DD. Na vegetação circundante às habitações, está havendo preferência para locais de pouso, que podem ser alternativamente alto e baixo.

Diferenças cromossômicas entre espécies e populações de Anopheles ()

Summary This is a discussion of data related to the chromosome constitution of species and populations of Anopheles and also of some aspects related to morphological, ecological and behavioral characters. Special attention was given to the chromosome differences both among species and populations resulting from rearrangements by paracentric inversions, detected by the analysis of band pattern of polytene chromosomes. Data related to species of the complexes Anopheles maculipennis and Anopheles gambiae, and three species of the subgenus Nyssorhynchus Anopheles darlingi, Anopheles nuneztovari and Anopheles albitarsis were briefly reviewed.

Resumo São discutidos dados relativos à constituição cromossômica de espécies e populações de Anopheles e também alguns aspectos relacionados a caracteres morfológicos, ecológicos e comportamentais. Especial atenção foi dada às diferenças cromossômicas entre espécies e entre populações, resultantes de rearranjos por inversões paracêntricas, detectadas pela análise do padrão de bandas dos cromossomos politênicos. Foram brevemente revisados dados relativos a espécies do complexo Anopheles maculipennis, complexo Anopheles gambiae e três espécies do subgênero Nyssorhynchus Anopheles darlingi, Anopheles nuneztovari e Anopheles albitarsis.

Biologia de anofelinos Amazônicos. XI. Estudos em populações de Anopheles e controle da malária em Ariquemes (Rondônia)

Data on an entomological survey of species of Anopheles in the district of Ariquemes are presented and the occurrence of malaria in this district and in the State of Rondonia is discussed. The results of the. entomological Survey in the urban area of Ariquemes showed the diversity of the species in the different Sections, and it was possible to verify the degree of penetration by anophelines into the town.Autochthonous cases of malaria and the presence of the principal vector of human malaria in the Amazon, Anopheles darlingi, are correlated. The dynamics of malaria transmission in the urban area are examined and the risks of transmission in each Section are discussed. Vector control strategies, based on the manipulation of the habitat, are presented.In the rural area, population parameters are being studied, related to (1) biting activity, natural resting sites, site of reproduction and movement to blood sources; and (2) behaviour of the populations with regard to biting activity and host preferences. The results, though preliminary, show variation in the population density and in the species diversity, that appear to be related to seasonal changes.Variations in the host preferences of the species were also observed, and high antropophily of A. darlingi was detected. Two important parameters in the hematophagous activity of A. darlingi were recorded: it was observed that the anophelines are entering the house near ground level and are not resting on walls sprayed with DDT. In the surrounding vegetation there is a preferences as to the place of resting which may be either high or low.

São apresentados dados sobre inquérito entomológico para espécies de Anopheles rea lizado no Município de Ariquemes e discutida a incidência da malária neste Município e no Estado de Rondônia. Os resultados do inquérito entomológico na zona urbana de Ariquemes evidenciaram a diversidade de espécies nos diferentes Setores, possibilitando verificar o grau de penetração dos anofelinos na cidade. São correlacionados casos autóctones de malária e a presença do principal vetor da malária humana na Amazônia, o Anopheles darlingi. A dinâmica da transmissão da malária na zona urbana é enfocada, discutindo-se os riscos verificados para cada Setor e são apresentadas estratégias de controle, ao nível do vetor, fundamentadas no manuseio do habitat. zona rural estão sendo estudados parâmetros populacionais relacionados (1) à atividade de picar, abrigo natural, sí-tios de reprodução e deslocamento para hematofagia; e (2) comportamento das populações para atividade hematófaga e preferências alimentares. Os resultados, embora preliminares, evidenciam variações na densidade populacional e na diversidade de espécies, as quais devem estar relacionadas à mudanças estacionais. Variações nas preferências alimentares das espécies também foram verificadas, sendo constatada elevada antropofilia de A. darlingi. Dois parâmetros relevantes na atividade hematófaga de A. darlingi foram detectados, observando se que os anofelinos estão penetrando nas habitações petas partes inferiores e que não estão pousando nas paredes com DD. Na vegetação circundante às habitações, está havendo preferência para locais de pouso, que podem ser alternativamente alto e baixo.

Biologia de anofelinos amazônicos. IV. Observações sobre a atividade de picar de Anopheles nuneztovari Gabaldon (Diptera, Culicidae)

Summary Observations on the biting activity of the Anopheles nuneztovari collected between 18:00 and 22:00 in different places along BR-174 Highway (Manaus/Boa Vista) which presented the exophilic habit are here related. Variations at the beginning and at the end of the biting activity were noted, but it is concentrated approximately between 18:30 and 19:10.

Resumo São relatadas observações sobre a atividade de picar de populações de Anopheles nuneztovari que apresentam hábito exofílico e cujas coletas foram feitas no período entre 18:00 e 22:00 horas, em diferentes pontos da Rodovia BR-174 (Manaus/Boa Vista). Foi verificado que ocorrem variações no início e término da atividade de picar, contudo a mesma está concentrada no horário entre 18:30 e 19:10 horas aproximadamente.

Biologia de Anofelinos Amazônicos. XIII. Estudo do ciclo biológico de Anopheles nuñez-tovari Gabaldon, 1940 (Diptera, Culicidae)

In a study of the developmental cycle of Anopheles nuñez-tovari, 108 egg hatches with a total of 13.999 eggs were analyzed. The mean number of eggs per hatch was 128, 83 4,85 and there was a high eclosing rate of 84,06%. 89% out of the total number of eggs that ecloded within 240 hours, did so within the first 48 hours with a mean time of 1,86 + 0,004 days. The mean number of eclosions per hatch was 109,39 + 5,26. The proportion of eggs ecloding is positively correlated with the number of eggs per hatch. However, when eggs hatches are grouped in class intervals of 40 eggs there is no correlation for some of them. The developmental time of larval stages varied, the longest being the fourth (pre-pupal) stage with a mean of 3,15 + 0,03 days. The shortest mean interval was from the second to third instar (mean 1,46 + 0,02 days). Itermediate values were observed for the stages 1st + 2nd instar, 3rd - 4th instar and pupal-adult instar (2,34 + 0,02; 1,67 + 0,02 and 1,54 + 0,01 days, respectively). The mean developmental time from oviposition to adult emergencewas 12,02 + 0,004 days. The highest mortality was observed in the fourth larval (19,6%) and pupal (6,0%) stages. 71,4% of first instar larvae reached the adult stage, which is a high survival compared to previoous reports. The developmental time of A. nuñez-tovari appears to be closer to that of A. darlingi than A. triannulatus.

No estudo do ciclo biológico de Anopheles nuñez-tovari foram analisadas 108 posturas, totalizando 13.999 ovos. A média de ovos postos por postura foi de 128,83 + 4,85 e uma taxa de eclosão elevada de 84,06%. Foi constatado qe 89% dos ovos eclodem com 48 horas após a oviposição, mostrando, no total, um período médio de eclosão de 1,86 + 0,004 dias. A média de ovos eclodidos por postura foi de 109,39 + 5,26. Os dados de correlação entre ovos postos e ovos eclodidos evidenciaram que à medida que aumenta o número de ovos por postura há também um aumento correspondente na taxa de eclosão . Contudo, quando as posturas são reunidas em intervalos de classe de 40 ovos, constatou-se que não há correlação para algumas delas. Para as fases imaturas, verificou-se que existem diferenças no tempo de desenvolvimento, sendo o estádio 4o - pupa - o mais longo, apresentando uma média de 3,15 + 0,03 dias. A menor média foi observada para os estádios 2o - 3o com 1,46 + 0,02 dias. Valores intermediários foram constatados para os estádios 1o - 2o, 3o - 4oe estágio de pupa - adulto (2,34 + 0,02; 1,67 + 0,02 e 1,54 + 0,01 dias, respetivamente). Para o ciclo completo ovo-adulto observou-se um tempo médio de desenvolvimento de 12,02 + 0,04 dias. As maiores taxas de mortalidade foram verificadas para o 4o. estádio (19,6%0) e para o estádio até a emergência do imago, foi de 71,40%, sendo um valor elevado segundo os dados da literatura. A comparação dos períodos do desenvolvimento entre A. nuñez-tovari com A. darlingi e A. trannulatuspossibilitou considerar A. nuñez-tovari como mais próxima da primeira espécie.

Biologia de Anofelinos Amazônicos. XIII. Estudo do ciclo biológico de Anopheles nuñez-tovari Gabaldon, 1940 (Diptera, Culicidae)

In a study of the developmental cycle of Anopheles nuñez-tovari, 108 egg hatches with a total of 13.999 eggs were analyzed. The mean number of eggs per hatch was 128, 83 4,85 and there was a high eclosing rate of 84,06%. 89% out of the total number of eggs that ecloded within 240 hours, did so within the first 48 hours with a mean time of 1,86 + 0,004 days. The mean number of eclosions per hatch was 109,39 + 5,26. The proportion of eggs ecloding is positively correlated with the number of eggs per hatch. However, when eggs hatches are grouped in class intervals of 40 eggs there is no correlation for some of them. The developmental time of larval stages varied, the longest being the fourth (pre-pupal) stage with a mean of 3,15 + 0,03 days. The shortest mean interval was from the second to third instar (mean 1,46 + 0,02 days). Itermediate values were observed for the stages 1st + 2nd instar, 3rd - 4th instar and pupal-adult instar (2,34 + 0,02; 1,67 + 0,02 and 1,54 + 0,01 days, respectively). The mean developmental time from oviposition to adult emergencewas 12,02 + 0,004 days. The highest mortality was observed in the fourth larval (19,6%) and pupal (6,0%) stages. 71,4% of first instar larvae reached the adult stage, which is a high survival compared to previoous reports. The developmental time of A. nuñez-tovari appears to be closer to that of A. darlingi than A. triannulatus.

No estudo do ciclo biológico de Anopheles nuñez-tovari foram analisadas 108 posturas, totalizando 13.999 ovos. A média de ovos postos por postura foi de 128,83 + 4,85 e uma taxa de eclosão elevada de 84,06%. Foi constatado qe 89% dos ovos eclodem com 48 horas após a oviposição, mostrando, no total, um período médio de eclosão de 1,86 + 0,004 dias. A média de ovos eclodidos por postura foi de 109,39 + 5,26. Os dados de correlação entre ovos postos e ovos eclodidos evidenciaram que à medida que aumenta o número de ovos por postura há também um aumento correspondente na taxa de eclosão . Contudo, quando as posturas são reunidas em intervalos de classe de 40 ovos, constatou-se que não há correlação para algumas delas. Para as fases imaturas, verificou-se que existem diferenças no tempo de desenvolvimento, sendo o estádio 4o - pupa - o mais longo, apresentando uma média de 3,15 + 0,03 dias. A menor média foi observada para os estádios 2o - 3o com 1,46 + 0,02 dias. Valores intermediários foram constatados para os estádios 1o - 2o, 3o - 4oe estágio de pupa - adulto (2,34 + 0,02; 1,67 + 0,02 e 1,54 + 0,01 dias, respetivamente). Para o ciclo completo ovo-adulto observou-se um tempo médio de desenvolvimento de 12,02 + 0,04 dias. As maiores taxas de mortalidade foram verificadas para o 4o. estádio (19,6%0) e para o estádio até a emergência do imago, foi de 71,40%, sendo um valor elevado segundo os dados da literatura. A comparação dos períodos do desenvolvimento entre A. nuñez-tovari com A. darlingi e A. trannulatuspossibilitou considerar A. nuñez-tovari como mais próxima da primeira espécie.

Biologia de anofelinos amazônicos. IV. Observações sobre a atividade de picar de Anopheles nuneztovari Gabaldon (Diptera, Culicidae)

Summary Observations on the biting activity of the Anopheles nuneztovari collected between 18:00 and 22:00 in different places along BR-174 Highway (Manaus/Boa Vista) which presented the exophilic habit are here related. Variations at the beginning and at the end of the biting activity were noted, but it is concentrated approximately between 18:30 and 19:10.

Resumo São relatadas observações sobre a atividade de picar de populações de Anopheles nuneztovari que apresentam hábito exofílico e cujas coletas foram feitas no período entre 18:00 e 22:00 horas, em diferentes pontos da Rodovia BR-174 (Manaus/Boa Vista). Foi verificado que ocorrem variações no início e término da atividade de picar, contudo a mesma está concentrada no horário entre 18:30 e 19:10 horas aproximadamente.

Biologia de anofelinós amazônicos. VII. Estudo da variação de freqüências das inversões cromossômicas de Anopheles darlingi Root (Diptera, Culicidae) ()

Summary Three samples of natural populations of Anopheles darlingi from Km 175 of BR-174 Highway (Manaus/Boa Vista) are here analysed concerning the frequency of the inversions. Two samples were collected during the rainy period and a third one in the dry season. The results showed a highly polymorphic character of the Anopheles darlingi Amazonia populations and also modifications of the genetic variants, during the samplings. There were changes, in different levels, in the frequencies of the inversions of the three pairs of chromosomes and also as to the frequencies of the three asynapsed regions, one being in chromosome X and two in chromosome 2. Tests of intra and interchromo-somic inversion association were male and the checking of the results of each test, in the three samples simultaneously, showed that the same association is not present in two or three samplings at the same time These changes in different periods were seen as result of a rearrangement in the structure of the genetic composition of the populations because of environmental modifications. High frequencies of heterozygotes (near or above 50%) were observed in most of the inversions, but In different levels depending on the inversion and the period of sampling. The mean number of inversions, per individual, in the heterozygote state, also changed during the periods, the highest rate being observed in the rainy season. The results were discussed in relation to the heterogeneity of the Amazonia forests and the species adaptation strategy. The hypothesis the cariotipic constitution of the species could interfere in the parameter of the vector capacity of the species is also discussed.

Resumo Três amostras de populações naturais de Anopheles darlingi foram analisadas quanto às freqüências das inversões, cujas coletas foram obtidas no Km 175 da Rodovia BR-174 (Manaus/Boa Vista). Duas amostras foram coletadas durante o período da estação chuvosa e a terceira no período da estação seca. Os resultados evidenciaram o caráter altamente polimórfico das populações de A. darlingi da Amazônia e também modificações das variantes genéticas, no decorrer das amostragens. Ocorreram variações, em diferentes níveis, nas freqüências das inversões dos três pares de cromossomos e quanto às freqüências de três regiões de despareamento, sendo uma no cromossomo X e duas no cromossomo 2. Foram realizados testes de associação de inversões intra e intercromossômicas e a comparação dos resultados de cada teste, nas três amostras simultaneamente, evidenciou que uma mesma associação não está presente em duas ou três amostragens ao mesmo tempo. Essas modificações, ocorridas nos diferentes períodos, foram interpretadas como decorrentes da reestruturação da composição genética das populações, face às alterações ambientais. Altas freqüências de heterozigotos, com valores próximos ou acima de 50%, foram observadas para a maioria das inversões, porém em níveis diferentes conforme a inversão e o período de amostragem considerados. O número médio de inversões, por individuo, no estado heterozigoto, também se modificou no decorrer dos períodos, sendo os maiores valores registrados durante a estação chuvosa. Esses resultados foram discutidos considerando-se a heterogeneidade das florestas amazônicas e a estratégia adaptativa da espécie. Também é discutida a hipótese de que a constituição cariotípica dos espécimes poderia interferir nos parâmetros da capacidade vetorial da espécie.

BIOLOGIA DE ANOFELINOS AMAZÔNICOS. VIII. Conhecimentos sobre a distribuição de espécies de Anopheles na região de Tucuruí-Marabá (Pará)

SUMMARY The frequency and distribution of darlingi species of epidemiological interest in the reservoir of the Tucuruí Hydrelectric dam (State of Para) were detected. Collections were made during the periods of July to September of 1980 and during two periods in 1981, February/March and October/November. The collecting sites were localized along the Transamazon Highway (BR-230) between Marabá and Villa Repartimento, the Highways, BR-422, PA-263, the Tocantins river; Caraipé river basin, the city of Tucurui and the construction site of the. Tucuruí dam. A total of 9,918 anophelines were identified for a total of 12 species of the subgenera Nyssorhynchus, Arribalzagia and Anopheles, of which the former was most abundant. Anopheles darlingi, the principal vector of human malaria, was detected in various parts of the study area, both as adults and as larva. It is questioned whether the species A. nuñez-tovari, A; triannulatus and A. oswaldoi are secondary vectores of malaria in this region, as A. darlingi was recorded in all the sites where autochtonous cases of malaria occurred. As these three species, as well as A. noroestensis and A. albitarsis, are amply distributed with high populations in the area, they should be included in any control program. The hypothesis that focuses of A. darlingi as well as A. nuñez-tovari, A. triannulatus, A. oswaldoi and A. albltarsis will probably become established at various points within the reservoir when completed. As it is shown that A. darlingi is found near the permanent and temporary residencial nuclei it is suggested that the forest around such setlements be gradually reduced to form a belt of less dense vegetation of sufficient dimensions such that the residential nuclei be isolated from the forest-dwelling populations of A. darlingi.

Resumo Foram obtidos dados sobre grau de incidência e distribuição de espécies de Anopheles, de interesse epidemiológico, da área de influência do reservatório da Hidrelétrica de Tucuruí (Pará). As coletas foram desenvolvidas no período de julho a setembro de 1980 e em dois períodos de 1981 fevereiro/março e outubro/novembro. Os pontos de coleta localizaram-se ao longo das rodovias Transamazônica (BR-230) trecho Marabá-Vila Repartimento, BR-422, PA-263, rio Tocantins, Vale do Caraipé, cidade de Tucuruí, área do Canteiro de Obras e núcleos residenciais Permanente e Temporário. Foi analisado um total de 9.918 anofelinos e constatada a ocorrência de doze espécies, distribuídas nos subgêneros Nyssorhynchus, Arribalzagia e Anopheles, predominando as espécies do primeiro. Anopheles darlingi, principal vector da malária humana, foi detectado em diferentes pontos da área, tanto na forma alada como na forma larvária. Foi questionada a possibilidade de que A. nuñez-tovari, A. triannulatus e A. oswaldoi sejam vectores secundários da malária na região, pois A. darlingi foi registrada nos pontos em que ocorreram casos autóctones de malária. Contudo, como as três espécies foram registradas em altas densidades populacionais e também como A. noroestensis e A. albitarsis apresentaram distribuição ampla, sugere-se que essas espécies sejam controladas na área. É discutida a hipótese de que focos de A. darlingi, provavelmente, venham a se instalar em diferentes pontos do reservatório, assim como focos de A. nuñez-tovari, A. triannulatus, A. oswaldoi e A. albitarsis. Considerando-se que foram constatados focos de A. darlingi nas proximidades dos núcleos residenciais Permanente e Temporário, sugere-se a transformação gradativa da mata circundante em um cinturão de vegetação não densa, objetivando-se a formação de uma área de dimensão suficientemente grande para isolar os núcleos residenciais e as populações de A. darlingi localizadas nas imediações.

Biologia de anofelinos amazônicos. xxl ocorrrência de espécies de anopheles e outros culicídeos na área de influência da hidrelétrica de balbina - cinco anos após o enchimento do reservatório

The Biology of Amazonian Anophelines an Evaluation of the Occurrence of Species of Anopheles,and Other Culicids at the Balbina Hydroletric Dam - Five Years After the Filling of the Reservoir. An entolomogical study was conducted in the area of influence of the Balbina Hydroelectric Dam (UHB), situated about 146 km from Manaus, Amazonas, in order to evaluate the effect it might have on populations of Anophelesand other culicids. Five years after the lake was formed, An. darlingi, An. nuneztovariand An. triannulatuswere the most frequently encountered species. Collection areas were: 1 - Road BR-174, 2 - Access to UHB and 3 - Uatumã-Morena Area. The mosquito/man/hour for each specie in the three areas were respectively: Area 1 - 0,57; 12,85; 0,43. Area 2 - 0; 3,75; 0,18 and Area 3 - 0; 26,38; 0,34. Representatives of the first two of these species were found to be positive for Plasmodiumby using an immunoenzymatic test. The prevalence of positive mosquitos was 1:35 for An. darlingiand only 1:548 for An* mmezjovciri.The density of the other culicids was low even though the diversity was comparable ( 32 different species) to that found in the areas of other hydroelectric dams built on clear or white water rivers in Amazonia. In the black waters of Balbina, an initial proliferation of macrophytes was followed by a reduction in these plants possibly caused by lack of nutrients in the water. The fall off in macro-phyte production relates to a scarcity of Mansoniasp. in the area.

Um inquérito entomològico foi realizado na área de influência da Hidrelétrica de Balbina, situada a 146 km de Manaus, Amazonas, para avaliar os possíveis efeitos sobre as populações de Anophelese de outros culicídeos. Cinco anos após a formação do lago, An. darlingi, An. nuneztovarie An. triannulatusforam as espécies encontradas com maior freqüência nas coletas realizadas em 1. Rodovia BR-174, 2. Acceso á Usina Hidrelétrica de Balbina e 3. Área Uatumã-Morena. Para cada espécie os índices mosquito/homem/hora foram respectivamente: Area 1 - 0,57; 12,85; 0,43. Área 2 - 0; 3,75; 0,18 e Área 3 - 0; 26,38; 0,34. Representantes das duas primeiras espécies se mostraram positivas para Plasmodiumcom testes imunoenzimáticos. A prevalência de mosquitos positivos foi 1:35 para An. darlingie apenas 1:548 para An. nuneztovari.A densidade dos outros culicídeos foi baixa (Área 1 - 3,23 m/h/h; Área 2 - 4,5 m/h/h; Área 3 - 7,40 m/h/h) embora a diversidade foi comparável ( 32 espécies diferentes) com as encontradas em outras hidrelétricas construídas em rios de águas brancas ou claras da Amazônia. Nas águas pretas da Balbina, uma proliferação inicial de macrófitas foi seguida pela redução destas possivelmente pela falta de nutrientes na água. A diminuição no crescimento de macrófitas deve estar relacionada com a escassez de Mansoniasp. na área.

BIOLOGIA DE ANOFELINOS AMAZÔNICOS. XXL OCORRRÊNCIA DE ESPÉCIES DE ANOPHELES E OUTROS CULICÍDEOS NA ÁREA DE INFLUÊNCIA DA HIDRELÉTRICA DE BALBINA - CINCO ANOS APÓS O ENCHIMENTO DO RESERVATÓRIO

The Biology of Amazonian Anophelines an Evaluation of the Occurrence of Species of Anopheles,and Other Culicids at the Balbina Hydroletric Dam - Five Years After the Filling of the Reservoir. An entolomogical study was conducted in the area of influence of the Balbina Hydroelectric Dam (UHB), situated about 146 km from Manaus, Amazonas, in order to evaluate the effect it might have on populations of Anophelesand other culicids. Five years after the lake was formed, An. darlingi, An. nuneztovariand An. triannulatuswere the most frequently encountered species. Collection areas were: 1 - Road BR-174, 2 - Access to UHB and 3 - Uatumã-Morena Area. The mosquito/man/hour for each specie in the three areas were respectively: Area 1 - 0,57; 12,85; 0,43. Area 2 - 0; 3,75; 0,18 and Area 3 - 0; 26,38; 0,34. Representatives of the first two of these species were found to be positive for Plasmodiumby using an immunoenzymatic test. The prevalence of positive mosquitos was 1:35 for An. darlingiand only 1:548 for An* mmezjovciri.The density of the other culicids was low even though the diversity was comparable ( 32 different species) to that found in the areas of other hydroelectric dams built on clear or white water rivers in Amazonia. In the black waters of Balbina, an initial proliferation of macrophytes was followed by a reduction in these plants possibly caused by lack of nutrients in the water. The fall off in macro-phyte production relates to a scarcity of Mansoniasp. in the area.

Um inquérito entomològico foi realizado na área de influência da Hidrelétrica de Balbina, situada a 146 km de Manaus, Amazonas, para avaliar os possíveis efeitos sobre as populações de Anophelese de outros culicídeos. Cinco anos após a formação do lago, An. darlingi, An. nuneztovarie An. triannulatusforam as espécies encontradas com maior freqüência nas coletas realizadas em 1. Rodovia BR-174, 2. Acceso á Usina Hidrelétrica de Balbina e 3. Área Uatumã-Morena. Para cada espécie os índices mosquito/homem/hora foram respectivamente: Area 1 - 0,57; 12,85; 0,43. Área 2 - 0; 3,75; 0,18 e Área 3 - 0; 26,38; 0,34. Representantes das duas primeiras espécies se mostraram positivas para Plasmodiumcom testes imunoenzimáticos. A prevalência de mosquitos positivos foi 1:35 para An. darlingie apenas 1:548 para An. nuneztovari.A densidade dos outros culicídeos foi baixa (Área 1 - 3,23 m/h/h; Área 2 - 4,5 m/h/h; Área 3 - 7,40 m/h/h) embora a diversidade foi comparável ( 32 espécies diferentes) com as encontradas em outras hidrelétricas construídas em rios de águas brancas ou claras da Amazônia. Nas águas pretas da Balbina, uma proliferação inicial de macrófitas foi seguida pela redução destas possivelmente pela falta de nutrientes na água. A diminuição no crescimento de macrófitas deve estar relacionada com a escassez de Mansoniasp. na área.

BIOLOGIA DE ANOFELINOS AMAZÔNICOS. VIII. Conhecimentos sobre a distribuição de espécies de Anopheles na região de Tucuruí-Marabá (Pará)

SUMMARY The frequency and distribution of darlingi species of epidemiological interest in the reservoir of the Tucuruí Hydrelectric dam (State of Para) were detected. Collections were made during the periods of July to September of 1980 and during two periods in 1981, February/March and October/November. The collecting sites were localized along the Transamazon Highway (BR-230) between Marabá and Villa Repartimento, the Highways, BR-422, PA-263, the Tocantins river; Caraipé river basin, the city of Tucurui and the construction site of the. Tucuruí dam. A total of 9,918 anophelines were identified for a total of 12 species of the subgenera Nyssorhynchus, Arribalzagia and Anopheles, of which the former was most abundant. Anopheles darlingi, the principal vector of human malaria, was detected in various parts of the study area, both as adults and as larva. It is questioned whether the species A. nuñez-tovari, A; triannulatus and A. oswaldoi are secondary vectores of malaria in this region, as A. darlingi was recorded in all the sites where autochtonous cases of malaria occurred. As these three species, as well as A. noroestensis and A. albitarsis, are amply distributed with high populations in the area, they should be included in any control program. The hypothesis that focuses of A. darlingi as well as A. nuñez-tovari, A. triannulatus, A. oswaldoi and A. albltarsis will probably become established at various points within the reservoir when completed. As it is shown that A. darlingi is found near the permanent and temporary residencial nuclei it is suggested that the forest around such setlements be gradually reduced to form a belt of less dense vegetation of sufficient dimensions such that the residential nuclei be isolated from the forest-dwelling populations of A. darlingi.

Resumo Foram obtidos dados sobre grau de incidência e distribuição de espécies de Anopheles, de interesse epidemiológico, da área de influência do reservatório da Hidrelétrica de Tucuruí (Pará). As coletas foram desenvolvidas no período de julho a setembro de 1980 e em dois períodos de 1981 fevereiro/março e outubro/novembro. Os pontos de coleta localizaram-se ao longo das rodovias Transamazônica (BR-230) trecho Marabá-Vila Repartimento, BR-422, PA-263, rio Tocantins, Vale do Caraipé, cidade de Tucuruí, área do Canteiro de Obras e núcleos residenciais Permanente e Temporário. Foi analisado um total de 9.918 anofelinos e constatada a ocorrência de doze espécies, distribuídas nos subgêneros Nyssorhynchus, Arribalzagia e Anopheles, predominando as espécies do primeiro. Anopheles darlingi, principal vector da malária humana, foi detectado em diferentes pontos da área, tanto na forma alada como na forma larvária. Foi questionada a possibilidade de que A. nuñez-tovari, A. triannulatus e A. oswaldoi sejam vectores secundários da malária na região, pois A. darlingi foi registrada nos pontos em que ocorreram casos autóctones de malária. Contudo, como as três espécies foram registradas em altas densidades populacionais e também como A. noroestensis e A. albitarsis apresentaram distribuição ampla, sugere-se que essas espécies sejam controladas na área. É discutida a hipótese de que focos de A. darlingi, provavelmente, venham a se instalar em diferentes pontos do reservatório, assim como focos de A. nuñez-tovari, A. triannulatus, A. oswaldoi e A. albitarsis. Considerando-se que foram constatados focos de A. darlingi nas proximidades dos núcleos residenciais Permanente e Temporário, sugere-se a transformação gradativa da mata circundante em um cinturão de vegetação não densa, objetivando-se a formação de uma área de dimensão suficientemente grande para isolar os núcleos residenciais e as populações de A. darlingi localizadas nas imediações.

Biologia de anofelinós amazônicos. VII. Estudo da variação de freqüências das inversões cromossômicas de Anopheles darlingi Root (Diptera, Culicidae) ()

Summary Three samples of natural populations of Anopheles darlingi from Km 175 of BR-174 Highway (Manaus/Boa Vista) are here analysed concerning the frequency of the inversions. Two samples were collected during the rainy period and a third one in the dry season. The results showed a highly polymorphic character of the Anopheles darlingi Amazonia populations and also modifications of the genetic variants, during the samplings. There were changes, in different levels, in the frequencies of the inversions of the three pairs of chromosomes and also as to the frequencies of the three asynapsed regions, one being in chromosome X and two in chromosome 2. Tests of intra and interchromo-somic inversion association were male and the checking of the results of each test, in the three samples simultaneously, showed that the same association is not present in two or three samplings at the same time These changes in different periods were seen as result of a rearrangement in the structure of the genetic composition of the populations because of environmental modifications. High frequencies of heterozygotes (near or above 50%) were observed in most of the inversions, but In different levels depending on the inversion and the period of sampling. The mean number of inversions, per individual, in the heterozygote state, also changed during the periods, the highest rate being observed in the rainy season. The results were discussed in relation to the heterogeneity of the Amazonia forests and the species adaptation strategy. The hypothesis the cariotipic constitution of the species could interfere in the parameter of the vector capacity of the species is also discussed.

Resumo Três amostras de populações naturais de Anopheles darlingi foram analisadas quanto às freqüências das inversões, cujas coletas foram obtidas no Km 175 da Rodovia BR-174 (Manaus/Boa Vista). Duas amostras foram coletadas durante o período da estação chuvosa e a terceira no período da estação seca. Os resultados evidenciaram o caráter altamente polimórfico das populações de A. darlingi da Amazônia e também modificações das variantes genéticas, no decorrer das amostragens. Ocorreram variações, em diferentes níveis, nas freqüências das inversões dos três pares de cromossomos e quanto às freqüências de três regiões de despareamento, sendo uma no cromossomo X e duas no cromossomo 2. Foram realizados testes de associação de inversões intra e intercromossômicas e a comparação dos resultados de cada teste, nas três amostras simultaneamente, evidenciou que uma mesma associação não está presente em duas ou três amostragens ao mesmo tempo. Essas modificações, ocorridas nos diferentes períodos, foram interpretadas como decorrentes da reestruturação da composição genética das populações, face às alterações ambientais. Altas freqüências de heterozigotos, com valores próximos ou acima de 50%, foram observadas para a maioria das inversões, porém em níveis diferentes conforme a inversão e o período de amostragem considerados. O número médio de inversões, por individuo, no estado heterozigoto, também se modificou no decorrer dos períodos, sendo os maiores valores registrados durante a estação chuvosa. Esses resultados foram discutidos considerando-se a heterogeneidade das florestas amazônicas e a estratégia adaptativa da espécie. Também é discutida a hipótese de que a constituição cariotípica dos espécimes poderia interferir nos parâmetros da capacidade vetorial da espécie.

Biologia de Anofelinos amazônicos. V. Polimorfismo cromossômico de Anopheles darlingi Root (Diptera, Culicidae)

Summary Jhe chromosomic polymorphism of Anopheles darlingi, whose sample was obtained in Highway BR-174 (Manaus/Boa Vista), was here analyzed. Two new independent inversions were described, and the number of rearrangements was raised to twelve. Three asynapsed regions were also described, being one in chromosome X and two in chromosome 2. There was a high occurence of inversions at the heterozygote state and the medium number per individual was high (4,13 ± 0,13). The higher and meaningful frequencies of heterozygote indicated their larger adaptability to the enviromental heterogeneity. The tests for the association of inversions showed the occurrence of an intrachromosomic association (arms 3R and 3D and four interchromosomic ones (chromosomes X-3 and 2-3). The data of the Anopheles darlingi chromosomic polymorphism support the hypothesis that the central populations of a geographic area are more polymorphic than the marginal populations. The A. darlingi populations of Amazônia are highly polymorphic as compared to the southern ones, where certain arrangements with reduce polymorphism were determined.

Resumo Foi analisado o polimorfismo cromossômico de Anopheles darlingi, cuja amostra foi obtida na Rodovia BR-174 (Manaus/Boa Vista). Foram descritas duas novas inversões independentes, estendendo-se para doze o número de rearranjos de A. darlingi. Três regiões de despareamento também foram descritas, sendo uma no cromossomo X e duas no cromossomo 2. Ocorreu uma alta incidência de inversões no estado heterozigoto e o número médio por indivíduo foi elevado (4,13 ± 0.13). As freqüências elevadas e significativas de heterozigotos para a maioria das inversões foram interpretadas como indicativas de uma adaptabilidade maior dos mesmos em relação à heterogeneidade ambiental. Os testes para associação de inversões evidenciaram a ocorrência de uma associação intracromossômica (braços 3R e 3L) e quatro intercromossômicas (cromossomos X - 3 e 2 - 3). Os dados de polimorfismo cromossômico de Anopheles darlingi corroboram a hipótese de que populações centrais da área de distribuição geográfica de uma espécie são mais polimórficas que as populações marginais. As populações de A. darlingi da Amazônia são altamente polimórficas quando comparadas com as populações do sul nas quais foram fixados determinados arranjos com reduzido polimorfismo.

Biologia de Anofelinos Amazônicos. VI. Variabilidade Enzimática em ANOPHELES DARLINGI Root. (DIPTERA, CULICIDAE)

We have, related preliminary results on protein polymorphism in two natural populations of Anopheles darlingi from the Amazon region (Ariquemes, state of Rondonia, and the Highway PA-422, in the state of Para). Fr the esterases there were observed variations in the locus Est-2in the Ariquemes population, while while locus was onomorphic in the Highway PA-422 population. In the later population we found individuals showing the genotype. Est2*F/Est2*F. The allele frequency Est2*Fhas been estimated at 0,80 in the population of, Ariquemes, this value being much higher than the one related to our previous study on the Highway BR-174 (Manaus/Boa Vista) which was 0,48. The results concerning leucine-aminopeptidases (LAP) suggest that this enzyme is controlled by three apparently monomorphic loci in the both populations.

São relatados resultados preliminares sobre o polimorfismo protético de populuções naturais de Anopheles darlingi, procedentes de duas localidades da região amazônica-Ariquemes (Rondônia) e Rodovia PA-422 (Pará). Pata as esterases, foi detectada variação para o locus Est-2na população de Ariquemes, enquanto foi monomórfico na população da PA-422, sendo verificados nesta última, apenas indivíduos com o genótipo Est2*F/Est2*F. A freqüência do alelo Est2*F foi estimada em 0,80 na população de Ariquemes, valor este muito maior do que o observado na população da BR-174 (Manaus/Boa Vista), em estudos anteriores, que foi de 0,48. Os resultados para o sistema da leucina aminopeptidase (LAP) sugerem que a enzima é controlada por três loci, aparentemente monomórficos em ambas as populações.

BIOLOGIA DE ANOFELINOS AMAZÔNICOS. XIV. ISOENZIMAS DE ESTERASE EM ANOPHELES TRIANNULATUS (NEIVA & PINTO, 1922)

The esterase system of populations of Anopheles triannulatus from the Balbina hydroeletric project were studied by polycrilamide gel electrophoresis, using -naphtyl proprionate as enzyme substrate. The analysis revealed six zones of activity, and the mechanism of inheritance was studied for five polymorphic loci. Two aieles were detected for esterases 1, 2 and 4, and three for esterases 3 and 5, all being co-dominant. Genetic frequency data were different for the aleles at each locus, chisquared values for genotypic frequencies indicated that the population is not in equilibrium for all the loci, as homozygote frequencies were higher than expected. This was interpreted as being the result of environmental changes occuring in the study area.

Foram estudadas populações de Anopheles triannulatusprocedentes da hidrelétrica de Balbina (AM), quanto ao sistema das esterases, usando-se gel de poliacrilamida e como substrato -naftil propionato A análise eletroforética possibilitou identificar seis zonas de atividade e o mecanismo de herança foi estudado para cinco locique foram polimórficos. Foram detectados dois alelos para as esterases 1, 2 e 4 e três para as esterases 3 e 5, sendo todos de ação codominante. Os dados de frequências gênicas mostraram-se diferentes para os alelos em cada locus.Os valores de qui-quadrados para as frequências genotípicas evidenciaram que a população não está em equilíbrio para todos os loci,sendo as frequências observadas dos homozigotos superiores as esperadas. Esses resultados foram interpretados como decorrentes de alterações ambientais que estão ocorrendo na área em estudo.